專利名稱：控制性超排卵方法及該方法使用的藥物試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于雌性哺乳動(dòng)物的控制性超排卵(controlled ovarianhyperstimulation，COH)方法。具體地說(shuō)，本發(fā)明涉及一種治療哺乳動(dòng)物不孕癥的控制性超排卵方法，所述方法包括把下列物質(zhì)給予雌性動(dòng)物有效量的刺激多卵泡發(fā)育的具有卵泡刺激素活性的物質(zhì)(FSH物質(zhì))和有效量的防止出現(xiàn)未成熟LH峰的促性腺激素釋放激素(GnRH)拮抗劑，然后給予有效量的有效刺激減數(shù)分裂和黃體化恢復(fù)的誘導(dǎo)減數(shù)分裂和黃體化的物質(zhì)(ML物質(zhì))。
本發(fā)明另一個(gè)方面涉及一種用在本發(fā)明的控制性超排卵方法中的藥物試劑盒。
背景技術(shù)：
雌性哺乳動(dòng)物的卵巢功能由垂體激素(稱為促性腺激素)調(diào)節(jié)。最為人熟悉的促性腺激素是導(dǎo)致卵泡成熟的卵泡刺激素(FSH)和引發(fā)排卵的黃體生成激素(LH)。
每次月經(jīng)結(jié)束后，垂體釋放的FSH刺激卵巢，產(chǎn)生一組卵泡。這些卵泡各含有一個(gè)卵母細(xì)胞(卵細(xì)胞)，它被粒細(xì)胞構(gòu)成的球體包圍。在卵泡發(fā)育期間形成多層粒細(xì)胞。其中一個(gè)卵泡逐漸變成優(yōu)勢(shì)卵泡，其他卵泡則通過(guò)細(xì)胞凋亡逐漸閉鎖和退化。正常月經(jīng)周期卵泡成熟的時(shí)間為12至14天。隨著粒細(xì)胞數(shù)目增多，這些細(xì)胞分泌的雌激素越多。
一旦優(yōu)勢(shì)卵泡達(dá)到成熟，該卵泡將會(huì)在LH峰作用下破裂(排卵)，LH是由于垂體應(yīng)答血清雌激素水平上升(正反饋)而釋放出來(lái)的。卵泡排出的卵母細(xì)胞進(jìn)入輸卵管壺腹，在壺腹內(nèi)進(jìn)行受精。在5至7天內(nèi)卵母細(xì)胞或胚胎被送到子宮，黃體中期時(shí)在子宮內(nèi)著床。
排出卵母細(xì)胞的卵泡會(huì)轉(zhuǎn)變?yōu)橐粋€(gè)產(chǎn)生新激素的器官黃體。黃體產(chǎn)生孕酮和雌激素。黃體的壽命很短，約12至14天。過(guò)了這一時(shí)間，它會(huì)停止運(yùn)作，因此，雌激素和孕酮的血液水平下降。孕酮減少導(dǎo)致子宮內(nèi)膜面壞死，月經(jīng)來(lái)臨。
具體地說(shuō)，過(guò)去數(shù)十年在排卵誘導(dǎo)領(lǐng)域上研制和商業(yè)引入了許多輔助不孕夫婦生育計(jì)劃的藥物。其中包括抗雌激素(如枸櫞酸氯米芬和枸櫞酸他莫昔芬)、脈沖式GnRH、純化和重組促性腺激素、以及GnRH激動(dòng)劑和拮抗劑。使用的具體藥物和選擇的給藥方案主要取決于治療目的，例如，誘導(dǎo)不排卵婦女排單個(gè)卵，或者控制性超排卵(COH)以誘導(dǎo)多卵泡發(fā)育作為輔助生殖技術(shù)(ART)的一個(gè)要素。普遍用來(lái)治療女性和/或男性因素不孕癥的ART方法的例子包括宮腔內(nèi)人工受精(IUI)和體外受精(IVF)。IVF可結(jié)合或不結(jié)合卵子胞漿內(nèi)單精子注射(ICSI)進(jìn)行，包括一個(gè)后續(xù)胚胎轉(zhuǎn)移步驟。
目前，COH普遍應(yīng)用在ART中。因?yàn)橛写蠹s30％病例出現(xiàn)未成熟LH峰，所以COH的最初結(jié)果并不理想。這樣一個(gè)未成熟LH峰引發(fā)仍未成熟的卵母細(xì)胞排卵和/或它可能阻止收獲卵母細(xì)胞作體外受精(IVF)。業(yè)已發(fā)現(xiàn)，引入GnRH激動(dòng)劑可防止未成熟LH峰和計(jì)劃治療周期。迄今為止，大部分周期使用GnRH激動(dòng)劑。然而，GnRH激動(dòng)劑使用不方便(治療期長(zhǎng))，能誘導(dǎo)卵巢腫瘤，成本昂貴，有不良影響(副作用、卵巢過(guò)度刺激綜合征(OHSS)的發(fā)病率高等)。
最近，引入GnRH拮抗劑以防止未成熟LH峰以及避免因?yàn)槭褂肎nRH激動(dòng)劑而產(chǎn)生的相關(guān)問(wèn)題。WO 98/58657(AKZO NOBEL)提出，日劑量為0.125mg至1mg的ganirelix可防止未成熟LH峰發(fā)生，同時(shí)可維持足夠的LH支持卵泡成熟和雌激素生物合成。類似地，CN 1 199 642(ASTA Medica)描述了每日皮下給予0.1-0.5mg西曲瑞克(cetrorelix)可選擇性地抑制LH分泌。
然而，使用GnRH拮抗劑的方案在妊娠率方面仍存在一定問(wèn)題。有不少研究提示，GnRH拮抗劑的妊娠率較用GnRH激動(dòng)劑獲得的妊娠率低。最近公開(kāi)的WO 01/00227(AKZO NOBEL)報(bào)導(dǎo)，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)著床率和LH水平無(wú)關(guān)，但GnRH拮抗劑水平與著床率有關(guān)聯(lián)。所述申請(qǐng)主張視乎體重決定給予GnRH拮抗劑的量。該主張水平為每日128至264μg。
由以上可知，明顯地，GnRH拮抗劑的成功使用取決于準(zhǔn)確確定足夠劑量以有效地防止出現(xiàn)LH峰而不會(huì)使內(nèi)源LH水平大幅降低。因?yàn)樽銐騽┝繕O大程度地取決于各個(gè)生理屬性例如體重，所以全部雌性動(dòng)物使用同一固定劑量會(huì)導(dǎo)致她們其中一部分人出現(xiàn)未成熟LH峰，而另一部分人的著床率和妊娠率很差。這意味著為了提高治療成功率，有必要視各個(gè)體的情況調(diào)整劑量。然而，WO 01/00227提出的針對(duì)各個(gè)體進(jìn)行調(diào)整劑量水平存在以下不足不能自助給藥，或者需要對(duì)含有不同量的GnRH拮抗劑的劑量單位分類。
因此，有必要提供一種使用GnRH拮抗劑的可靠方法，其在防止LH峰以及著床率和妊娠率方面至少與使用GnRH激動(dòng)劑的方法類似。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，上述目的可通過(guò)一個(gè)COH方案實(shí)現(xiàn)，該方案包括共給予刺激多卵泡發(fā)育的FSH物質(zhì)，相對(duì)高劑量的防止出現(xiàn)未成熟LH峰的GnRH拮抗劑(相當(dāng)于皮下給予至少0.5mg ganirelix)，以及LH物質(zhì)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，共給予LH物質(zhì)允許給予較高劑量水平的GnRH拮抗劑而對(duì)例如著床率或妊娠率無(wú)不良影響。另外，給予較高劑量的GnRH拮抗劑能更好地預(yù)防未成熟LH峰。
共給予相對(duì)高劑量的GnRH拮抗劑和LH物質(zhì)的另一個(gè)重要優(yōu)點(diǎn)在于可以配制一種對(duì)不同生理狀況的雌性動(dòng)物都可產(chǎn)生良好結(jié)果的藥物。因此，有可能研制一種適用于有效治療不孕癥的單個(gè)藥物試劑盒，而與雌性動(dòng)物的不同生理特征無(wú)關(guān)。相對(duì)于采用GnRH拮抗劑的公知COH方案，其因?yàn)榭蓪?dǎo)致某些雌性動(dòng)物(例如體重增加)出現(xiàn)未成熟LH峰或者在另外一些雌性動(dòng)物體內(nèi)過(guò)度抑制內(nèi)源性LH而有一定局限性，本發(fā)明的方法則可靠得多。因此，本發(fā)明方法獲得的妊娠率比現(xiàn)有使用GnRH拮抗劑的COH方案高。
具體實(shí)施例方式
所以，本發(fā)明一個(gè)方面涉及一種用于雌性哺乳動(dòng)物的控制性超排卵方法，所述方法包括把下列物質(zhì)共給予所述雌性動(dòng)物·具有卵泡刺激素活性的物質(zhì)(FSH物質(zhì))，給予能有效刺激多卵泡發(fā)育的量；·促性腺激素釋放激素(GnRH)拮抗劑，給予相當(dāng)于皮下日劑量至少0.5mg加尼瑞克(ganirelix)的量，防止出現(xiàn)未成熟LH峰；·LH物質(zhì)，給予能有效防止或抑制因?yàn)榻o予GnRH而引起的黃體生成激素(LH)缺乏癥狀的量；
然后給予誘導(dǎo)減數(shù)分裂和黃體化的物質(zhì)(ML物質(zhì))，給予能有效刺激減數(shù)分裂和黃體化的恢復(fù)的量，其中LH物質(zhì)不是從婦女的尿液中獲得。
婦女尿液尤其是絕經(jīng)后婦女的尿液含有較高水平的FSH和LH。已經(jīng)從婦女尿液中分離出FSH用于COH方法。原則上，LH也可自婦女尿液分離而獲得。但尿LH因?yàn)槠浯x極其迅速而不適合用在本發(fā)明的方法中。所以，本發(fā)明方法使用的LH物質(zhì)并非從婦女尿液中分離得到。
本文使用的術(shù)語(yǔ)“FSH物質(zhì)”涵蓋功能性與FSH相似的物質(zhì)以及能夠引發(fā)垂體釋放FSH的物質(zhì)。同樣地，術(shù)語(yǔ)“ML物質(zhì)”涵蓋功能性與LH相似的物質(zhì)以及能夠引發(fā)垂體釋放LH的物質(zhì)。術(shù)語(yǔ)“LH物質(zhì)”指的是功能性與LH相似的物質(zhì)。因此，LH物質(zhì)組不包括功能性不同于LH但能夠引發(fā)垂體釋放LH的物質(zhì)。
術(shù)語(yǔ)“雌性動(dòng)物”在本文指的是雌性哺乳動(dòng)物。優(yōu)選的雌性哺乳動(dòng)物是智人。對(duì)智人而言，雌性動(dòng)物通常包括12至55歲在生物學(xué)上能夠懷孕的女性。
本發(fā)明的COH方法優(yōu)選作為IVF方案的一部分。因此，本發(fā)明一優(yōu)選實(shí)施例的方法還包括以下次序的步驟·從成熟卵泡收獲一或多個(gè)卵子；·使一或多個(gè)卵子在體外受精；·將得到的胚胎轉(zhuǎn)移到雌性哺乳動(dòng)物的子宮內(nèi)。
將胚胎轉(zhuǎn)移到雌性哺乳動(dòng)物的子宮內(nèi)是在應(yīng)用COH方案和收獲一或多個(gè)卵子的同一周期中進(jìn)行，但也可在下一個(gè)周期轉(zhuǎn)移胚胎。但是，當(dāng)COH方案和胚胎轉(zhuǎn)移發(fā)生于同一個(gè)周期時(shí)，由于給予LH物質(zhì)，本發(fā)明的方法可實(shí)現(xiàn)高著床率。所以，在一特別優(yōu)選實(shí)施例中，控制性超排卵和胚胎轉(zhuǎn)移在同一個(gè)周期內(nèi)進(jìn)行。
根據(jù)本發(fā)明，共給予LH物質(zhì)的目的在于防止接受治療的雌性動(dòng)物缺乏LH(每升血清含有少于1I.U.LH)。所以，當(dāng)給予FSH物質(zhì)和GnRH拮抗劑而不給予LH物質(zhì)時(shí)，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)特別為人們所完全理解，可將雌性動(dòng)物的血清LH水平減至1I.U./升以下，優(yōu)選0.5I.U./升以下。
在本發(fā)明一優(yōu)選實(shí)施例中，LH物質(zhì)的給予量有效地維持雌性動(dòng)物體內(nèi)LH物質(zhì)(內(nèi)源性或外源性)的血清濃度等于或大于1I.U./升，優(yōu)選大于1.2I.U./升。適合本發(fā)明方法使用的LH物質(zhì)包括重組LH(recLH)、具有LH活性的嵌合或其他方式修飾的促性腺激素、具有LH活性的低分子量化合物及其混合物。
為了防止發(fā)生LH缺乏征狀，LH物質(zhì)的日劑量宜相當(dāng)于皮下劑量至少1I.U.，優(yōu)選至少1.4IU，更好為至少1.7IU，最好為至少2I.U重組LH/kg體重。通常，給予的LH物質(zhì)最高日劑量不超過(guò)皮下劑量40I.U./kg體重當(dāng)量。較好地，所述最高日劑量不超過(guò)皮下劑量25I.U./kg體重當(dāng)量，更好的是它不超過(guò)皮下劑量15I.U./kg體重當(dāng)量。
FSH物質(zhì)的量最好相當(dāng)于皮下日劑量1至15I.U.FSH/kg體重。
如果本發(fā)明的方法中給予的GnRH拮抗劑的劑量足夠高以致可防止接受治療的雌性動(dòng)物體內(nèi)實(shí)質(zhì)產(chǎn)生未成熟LH峰，此時(shí)獲得的結(jié)果為最佳。因此，在一優(yōu)選實(shí)施例中，GnRH拮抗劑的給予量相當(dāng)于至少皮下日劑量0.6mgganirelix，更好為至少0.8mg ganirelix，最好為至少1.0mg ganirelix。一般而言，GnRH拮抗劑的給予量不超過(guò)皮下劑量4.0mg當(dāng)量。較好地，所述劑量不超過(guò)皮下劑量3.0mg/kg體重當(dāng)量，更好的是它不超過(guò)皮下劑量2.5mg/kg體重當(dāng)量。
極為關(guān)鍵的是，GnRH拮抗劑的給藥時(shí)間要足夠早以使出現(xiàn)未成熟LH峰的機(jī)率減至最少。可能出現(xiàn)未成熟LH峰的一個(gè)可靠指數(shù)是發(fā)育卵泡的尺寸，特別是最大的那些發(fā)育卵泡的尺寸。較好地，GnRH拮抗劑的給予至少始于最大發(fā)育卵泡的平均直徑到達(dá)14mm，優(yōu)選12mm，最好為10mm時(shí)的期間內(nèi)，而止于給予有效量的刺激減數(shù)分裂和黃體化恢復(fù)的ML物質(zhì)前一天。
為了使子宮內(nèi)膜組織達(dá)到所希望的效果，GnRH拮抗劑的給予至少始于開(kāi)始給予FSH物質(zhì)之后6天，或者給予有效量的刺激減數(shù)分裂和黃體化的ML物質(zhì)之前至少4天的期間內(nèi)，視乎那一個(gè)時(shí)間最早，而止于所述給予ML物質(zhì)前一天。
為了有效地補(bǔ)償GnRH拮抗劑造成LH降低的影響，應(yīng)當(dāng)在開(kāi)始給予GnRH拮抗劑后立即或盡快啟動(dòng)LH物質(zhì)的給予，并且只要給予GnRH拮抗劑，就應(yīng)該持續(xù)給予LH物質(zhì)。較好地，LH物質(zhì)的給予至少始于開(kāi)始給予GnRH拮抗劑后2天的期間內(nèi)，而止于停止給予GnRH拮抗劑。更好的是，在整個(gè)治療期間共給予LH物質(zhì)和GnRH拮抗劑。
FSH物質(zhì)的給予適宜至少始于女性自然月經(jīng)后8天的期間內(nèi)，直至給予ML物質(zhì)前一天。更好的是，F(xiàn)SH物質(zhì)的給予始于女性自然月經(jīng)后6天以內(nèi)，最好是始于月經(jīng)后第2天。
原則上，本技術(shù)領(lǐng)域公知的任何GnRH拮抗劑適合用在本發(fā)明的方法中。合適的GnRH拮抗劑的例子包括ganirelix、cetrorelix、ganirelix前體、cetrorelix前體、LH釋放激素的拮抗性線型肽類似物(如美國(guó)專利5,140,835和5,171,835中描述)、環(huán)狀六肽衍生物(如日本專利JP-A 61 191698中描述)以及二環(huán)肽衍生物(如文獻(xiàn)J.of Medic.Chem.(1993)，36，3265-73中描述)，或其混合物。較好地，本發(fā)明方法所用的GnRH拮抗劑選自由ganirelix、cetrorelix及其混合物組成的組。
本發(fā)明的COH方法使用LH物質(zhì)防止出現(xiàn)LH缺乏征狀，然后在優(yōu)勢(shì)卵泡成熟后加入高劑量(單劑)ML物質(zhì)刺激減數(shù)分裂和黃體化，停止給予FSH和GnRH拮抗劑。在周期的該階段給予ML物質(zhì)的目的在于模擬正常月經(jīng)周期期間發(fā)生的LH峰并誘導(dǎo)減數(shù)分裂、黃體化和排卵的恢復(fù)。出現(xiàn)LH后可使用其他許多藥物物質(zhì)以觸發(fā)此類反應(yīng)。較佳地，本發(fā)明方法使用的ML物質(zhì)選自由重組LH、尿絨毛膜促性腺激素(uCG)、重組CG、促性腺激素釋放激素(GnRH)、GnRH激動(dòng)劑和其他能夠刺激垂體釋放LH的物質(zhì)、具有LH活性的嵌合或以其他方式修飾的促性腺激素、具有LH活性的低分子量化合物及其混合物組成的組。更好的是，ML物質(zhì)選自重組LH、尿絨毛膜促性腺激素(uCG)、重組CG、促性腺激素釋放激素(GnRH)及其混合物。最好的是，用來(lái)刺激減數(shù)分裂和黃體化恢復(fù)的ML物質(zhì)選自recLH或uCG。
根據(jù)本發(fā)明方法給予ML物質(zhì)的量最好超過(guò)皮下劑量至少2,000I.U.尿絨毛膜人促性腺激素(uhCG)，更好的是，所述的量相當(dāng)于皮下劑量至少5,000-10,000I.U.uhCG。ML物質(zhì)宜以單劑口服或腸胃外給予。ML物質(zhì)最好以皮下或口服途徑給予。
整份文件中使用的術(shù)語(yǔ)“腸胃外給予”涵蓋需要注射、植入或局部給予的給藥途徑，但不包括口服/胃內(nèi)途徑。腸胃外給予的適當(dāng)例子包括肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、皮下、陰道內(nèi)、經(jīng)皮和鼻內(nèi)給予。
如上所述，F(xiàn)SH和LH都可從婦女尿液中分離得到已為人所公知。從尿液分離得到的LH不太適合用在本發(fā)明的方法中，因?yàn)樗隗w內(nèi)的半衰期很短(t1/210-20分鐘)，而且代謝速度很快。從重組細(xì)胞系得到的LH(recLH)則穩(wěn)定得多(t1/212-13小時(shí))。因此，在一特別優(yōu)選實(shí)施例中，用來(lái)防止或抑制LH缺乏征狀的LH物質(zhì)從重組細(xì)胞系獲得。
本發(fā)明方法所用的FSH物質(zhì)適宜選自由重組FSH(recFSH)、尿FSH(uFSH)、激動(dòng)性FSH突變蛋白和/或具有FSH激動(dòng)活性的雜環(huán)低分子量化合物(少于600道爾頓)組成的組。較佳地，F(xiàn)SH物質(zhì)是recFSH或uFSH。雖然來(lái)源自尿液的FSH的作用與recFSH差不多，但應(yīng)注意，從體液分離得到的活性成分純度較低，產(chǎn)物的濃度也較低，而且還有轉(zhuǎn)移疾病的風(fēng)險(xiǎn)。所以，在一更優(yōu)選實(shí)施例中，F(xiàn)SH物質(zhì)是從重組細(xì)胞系獲得的FSH。
本發(fā)明方法中共給予LH物質(zhì)的主要目的是防止LH缺乏，尤其是希望實(shí)現(xiàn)高著床率，即著床率至少與用GnRH激動(dòng)劑方法獲得的著床率一樣高。所以，在一優(yōu)選實(shí)施例中，本發(fā)明的方法用來(lái)治療不利地影響胚胎著床的女性LH缺乏。
如果本發(fā)明的COH方法每日至少給予一次FSH物質(zhì)和LH物質(zhì)，此時(shí)獲得的結(jié)果為最佳。較佳地，也每日至少給予一次GnRH拮抗劑。較佳的給藥模式是腸胃外給藥，更好的是皮下給藥。
本發(fā)明另一方面涉及一種用在控制性超排卵方法中的藥物試劑盒，該試劑盒包括·至少一個(gè)腸胃外或口服劑量單位，其含有一或多種FSH物質(zhì)，給予量相當(dāng)于皮下劑量50-1,500I.U.FSH；·至少一個(gè)腸胃外劑量單位，其含有一或多種GnRH拮抗劑，給予量相當(dāng)于皮下劑量0.5-25mg ganirelix；·至少一個(gè)腸胃外劑量單位，其含有一或多種LH物質(zhì)，給予量相當(dāng)于皮下劑量50-3,000I.U.重組LH；其中LH物質(zhì)不是從婦女尿液中獲得。
含有FSH物質(zhì)、GnRH拮抗劑或LH物質(zhì)的上述劑量單位可以組裝成獨(dú)立劑量單位，或者可將它們組合成2個(gè)或者甚至一個(gè)劑量單位。
在一優(yōu)選實(shí)施例中，將本發(fā)明試劑盒內(nèi)的劑量單位設(shè)計(jì)成至少每日給予一次，含有的一或多種FSH物質(zhì)的量相當(dāng)于皮下劑量100-1,200 I.U.FSH，含有的一或多種GnRH拮抗劑的量相當(dāng)于皮下劑量0.5-4mg ganirelix，含有的一或多種LH物質(zhì)的量相當(dāng)于皮下劑量100-1,000I.U.。更佳地，試劑盒包括一個(gè)劑量單位，該劑量單位含有的一或多種GnRH拮抗劑的量相當(dāng)于日劑量至少0.6mg ganirelix，較好是相當(dāng)于至少0.8mg ganirelix，更好是相當(dāng)于至少1.0mg ganirelix，最好是相當(dāng)于至少1.1mg ganirelix。后一個(gè)劑量單位含有的一或多種GnRH拮抗劑的量不超過(guò)皮下劑量3mg ganirelix當(dāng)量，更好是不超過(guò)皮下劑量2.5mg ganirelix當(dāng)量。
本發(fā)明的試劑盒還可含有單個(gè)腸胃外或口服型劑量單位，其含有的一或多種ML物質(zhì)的量相當(dāng)于皮下劑量至少2,000I.U.uhCG，每日一次自助皮下給藥的一個(gè)注射藥筒(cartridge)由含有一或多種FSH物質(zhì)的劑量單位、含有一或多種GnRH拮抗劑的劑量單位以及含有一或多種LH物質(zhì)的劑量單位組合而成。
較佳地，本發(fā)明試劑盒內(nèi)的全部劑量單位均為腸胃外劑量單位。此外，試劑盒內(nèi)的腸胃外劑量單位適宜肌內(nèi)或皮下給予。
本發(fā)明將以下列非限制性的實(shí)施例作進(jìn)一步描述。上文、以下實(shí)施例和權(quán)利要求中公開(kāi)的特征可單獨(dú)地或組合在一起用來(lái)以各種形式實(shí)施本發(fā)明。
實(shí)施例實(shí)施例1進(jìn)行一項(xiàng)開(kāi)放標(biāo)記、對(duì)照臨床試驗(yàn)，從第6日開(kāi)始每日皮下給予以下物質(zhì)重組FSH治療直至給予尿hCG治療那日(包括給予尿hCG當(dāng)日)、0.25mgcetrorelix(30名受試者)、2.0mg cetrorelix(30名受試者)或者2.0mg cetrorelix與400I.U.recLH聯(lián)用(30名受試者)，以研究90名接受COH再進(jìn)行IVF和胚胎移植(ET)的女性受試者中防止未成熟內(nèi)源性LH峰的療效性、安全性和耐受性。
雖然該種治療適合各種類型IVF病人(例如年齡在18至45歲，有或無(wú)多囊卵巢綜合癥以及月經(jīng)正常或異常)，但研究設(shè)定以下選擇標(biāo)準(zhǔn)不孕夫婦中的健康女性；篩選年齡為20至39歲之間；月經(jīng)正常，并且愿意簽署書(shū)面同意書(shū)。然而，本研究沒(méi)有就體重或質(zhì)量指數(shù)作特別處理。
在第一次給予重組FSH之前，抽取一個(gè)血樣作激素分析(雌二醇和LH)，并進(jìn)行一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)尿hCG試驗(yàn)以排除妊娠受試者。在月經(jīng)第2日或第3日開(kāi)始每日皮下注射重組FSH直至給予hCG當(dāng)日。在重組FSH治療的最初5日，日劑量固定為150IU。從第6日開(kāi)始，在給藥前每?jī)扇粘橐淮窝獦幼骷に胤治觯?duì)卵泡生長(zhǎng)作超聲波影像監(jiān)測(cè)，有需要的時(shí)候，調(diào)整重組FSH的注射劑量。
當(dāng)超聲波掃瞄測(cè)得至少有3個(gè)卵泡的直徑超過(guò)17mm時(shí)，給予皮下注射尿hCG(10,000IU)，通常在30至36小時(shí)后收集卵母細(xì)胞。
結(jié)果發(fā)現(xiàn)，皮下日劑量2.0mg cetrorelix(單獨(dú)或加上400IU recLH)比皮下劑量0.25mg更有效地防止未成熟LH的產(chǎn)生。這種療效在接受COH的體重超過(guò)75kg的IVF病人身上更為明顯。另外，每日皮下給予日劑量2.0mgcetrorelix(單獨(dú)或加上400IU recLH)在接受COH再進(jìn)行IVF和ET的婦女體內(nèi)的耐受性更好，而且無(wú)明顯的不良作用。
實(shí)施例2如實(shí)施例1所述那樣，從接受COH的婦女采集卵母細(xì)胞。這些卵母細(xì)胞再在體外受精，兩天后將最多兩個(gè)胚胎轉(zhuǎn)移到病人子宮內(nèi)。以數(shù)量級(jí)計(jì)，給予2.0mg cetrorelix加上400IU recLH的日劑量防止未成熟LH峰產(chǎn)生的IVF病人獲得的著床率和妊娠率最高。給予0.25mg cetrorelix的日劑量防止未成熟LH峰產(chǎn)生的IVF病人獲得的著床率和妊娠率較低。最后，給予2.0mgcetrorelix(無(wú)共給予recLH)的日劑量防止未成熟LH峰產(chǎn)生的IVF病人獲得的著床率和妊娠率最低。
實(shí)施例3以2.0mg ganirelix代替2.0mg cetrorelix重復(fù)實(shí)施例1和2。得到的結(jié)果與實(shí)施例1和2所述的結(jié)果相似。
權(quán)利要求
1.具有黃體生成激素活性的物質(zhì)(LH物質(zhì))在制備雌性哺乳動(dòng)物的控制性超排卵方法中所用的藥物組合物中的應(yīng)用，所述方法包括把下列物質(zhì)共給予所述雌性動(dòng)物·具有卵泡刺激素活性的物質(zhì)(FSH物質(zhì))，給予能有效刺激多卵泡發(fā)育的量；·促性腺激素釋放激素(GnRH)拮抗劑，給予相當(dāng)于皮下日劑量至少0.5mg ganirelix的量，防止出現(xiàn)未成熟LH峰；·LH物質(zhì)，給予能有效防止或抑制因?yàn)榻o予GnRH而引起的黃體生成激素(LH)缺乏癥狀的量；然后給予誘導(dǎo)減數(shù)分裂和黃體化的物質(zhì)(ML物質(zhì))，給予能有效刺激減數(shù)分裂和黃體化的恢復(fù)的量，其中LH物質(zhì)不是從婦女尿液中獲得。
2.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述方法還包括以下次序的步驟·從成熟卵泡收獲一或多個(gè)卵子；·使一或多個(gè)卵子在體外受精；·將得到的胚胎轉(zhuǎn)移到雌性哺乳動(dòng)物的子宮內(nèi)。
3.如權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于LH物質(zhì)的給予量能有效地維持雌性動(dòng)物體內(nèi)LH物質(zhì)的血清濃度等于或大于1I.U.LH/升，優(yōu)選大于1.2I.U.LH/升。
4.如權(quán)利要求1至3中任何一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其特征在于LH物質(zhì)給予的日劑量相當(dāng)于皮下劑量1至40I.U.，更好是2至15I.U.重組LH/kg體重。
5.如權(quán)利要求1至4中任何一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其特征在于GnRH拮抗劑的給予至少始于最大發(fā)育卵泡的平均直徑達(dá)到14mm，優(yōu)選12mm，最好為10mm時(shí)的期間內(nèi)，而止于給予有效量的刺激減數(shù)分裂和黃體化恢復(fù)的ML物質(zhì)前一天。
6.如權(quán)利要求1至5中任何一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其特征在于GnRH拮抗劑的給予至少始于開(kāi)始給予FSH物質(zhì)之后6天，或者給予有效量的刺激減數(shù)分裂和黃體化恢復(fù)的ML物質(zhì)之前至少4天的期間內(nèi)，視乎那一個(gè)時(shí)間最早，而止于所述給予ML物質(zhì)前一天。
7.如權(quán)利要求1至6中任何一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其特征在于FSH物質(zhì)的給予至少始于開(kāi)始給予GnRH拮抗劑后2天的期間內(nèi)，而止于停止給予GnRH拮抗劑。
8.如權(quán)利要求1至7中任何一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其特征在于FSH物質(zhì)的給予至少始于女性自然月經(jīng)后8天，優(yōu)選6天的期間內(nèi)，直至給予有效量的刺激減數(shù)分裂和黃體化恢復(fù)的ML物質(zhì)前一天。
9.如權(quán)利要求1至8中任何一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其特征在于GnRH拮抗劑選自由ganirelix、cetrorelix、ganirelix前體、cetrorelix前體或其混合物組成的組。
10.如權(quán)利要求1至9中任何一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其特征在于GnRH拮抗劑的給予量相當(dāng)于皮下日劑量0.8至4.0mg ganirelix。
11.如權(quán)利要求1至10中任何一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其特征在于LH物質(zhì)選自由重組LH、具有LH活性的嵌合或以其他方式修飾的促性腺激素、具有LH活性的低分子量化合物及其混合物組成的組。
12.如權(quán)利要求1至11中任何一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其特征在于從重組細(xì)胞系獲得用來(lái)防止或抑制LH缺乏征狀的LH物質(zhì)。
13.如權(quán)利要求1至12中任何一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其特征在于FSH物質(zhì)、GnRH拮抗劑和LH物質(zhì)每日至少給予一次，給藥途徑優(yōu)選為腸胃外。
14.一種藥物試劑盒，其特征在于所述試劑盒包括·至少一個(gè)腸胃外或口服劑量單位，其含有一或多種FSH物質(zhì)，給予量相當(dāng)于皮下劑量50-1,500I.U.FSH；·至少一個(gè)腸胃外劑量單位，其含有一或多種GnRH拮抗劑，給予量相當(dāng)于皮下劑量0.5-25mg ganirelix；·至少一個(gè)腸胃外劑量單位，其含有一或多種LH物質(zhì)，給予量相當(dāng)于皮下劑量50-3,000I.U.重組LH；其中LH物質(zhì)不是從婦女尿液中獲得。
15.如權(quán)利要求14所述的藥物試劑盒，其特征在于每日一次自助皮下給藥的一個(gè)注射藥筒由含有一或多種FSH物質(zhì)的劑量單位、含有一或多種GnRH拮抗劑的劑量單位以及含有一或多種LH物質(zhì)的劑量單位組合而成。
全文摘要
本發(fā)明一個(gè)方面涉及一種用于雌性哺乳動(dòng)物的控制性超排卵方法，所述方法包括把下列物質(zhì)共給予所述雌性動(dòng)物具有卵泡刺激素活性的物質(zhì)(FSH物質(zhì))，給予能有效刺激多卵泡發(fā)育的量；促性腺激素釋放激素(GnRH)拮抗劑，給予相當(dāng)于皮下日劑量至少0.5mg加尼瑞克(ganirelix)的量，防止出現(xiàn)未成熟LH峰；LH物質(zhì)，給予能有效防止或抑制因?yàn)榻o予GnRH拮抗劑而引起的黃體生成激素(LH)缺乏癥狀的量；然后給予誘導(dǎo)減數(shù)分裂和黃體化的物質(zhì)(ML物質(zhì))，給予能有效刺激減數(shù)分裂和黃體化的恢復(fù)的量，其中LH物質(zhì)不是從婦女尿液中獲得。本發(fā)明另一個(gè)方面涉及一種用在控制性超排卵方法中的藥物試劑盒，該試劑盒包括－至少一個(gè)腸胃外或口服劑量單位，其含有一或多種FSH物質(zhì)，給予量相當(dāng)于皮下劑量50－1500 I.U.FSH；至少一個(gè)腸胃外劑量單位，其含有一或多種GnRH物質(zhì)，給予量相當(dāng)于皮下劑量0.5－25mgganirelix；至少一個(gè)腸胃外劑量單位，其含有一或多種LH物質(zhì)，給予量相當(dāng)于皮下劑量50－3,000 I.U.重組LH；其中LH物質(zhì)不是從婦女尿液中獲得。
文檔編號(hào)A61K38/04GK1684737SQ03818390
公開(kāi)日2005年10月19日 申請(qǐng)日期2003年6月6日 優(yōu)先權(quán)日2002年6月7日
發(fā)明者E·J·布思庫(kù)頓, H·J·科林班尼克 申請(qǐng)人:阿雷斯貿(mào)易股份有限公司