專利名稱：含硒姜黃素聚合物及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域為藥物合成與應(yīng)用，涉及姜黃素衍生物與環(huán)戊烷四甲酸二酐、聚氧乙烯以及甲基硒代半胱胺酸結(jié)合形成的水溶性含硒姜黃素高分子聚合物及其制備方法和作為抗肝纖維化、抗脂肪肝、抗肝硬化藥物方面的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
姜黃素是從姜科姜黃屬植物如姜黃、郁金、莪術(shù)等根莖中提取的一種具有消炎、抗氧化、抗誘變、抗衰老、抗腫瘤、降血脂等多種藥理活性的多酚化合物。姜黃素來源廣泛、價格低廉、療效多樣，是東南亞國家廣泛使用的一種食品添加劑(麥鎮(zhèn)江.姜黃素的藥理作用研究進展.中藥材，2004，(9) 698) 0姜黃素具有抗氧化應(yīng)激的作用，能抑制四氯化碳、 過氧化物、D-半乳糖胺以及金屬離子如狗2+、Cu2+對大鼠肝細(xì)胞的損傷作用，降低血清中谷草、谷丙轉(zhuǎn)氨酶水平，清除肝組織自由基，保護肝細(xì)胞(Kiso Y，Suzuki Y, Watanabe N， et al. Anti-hepatotoxic principles of Curcuma longa rhizomes. Planta. Med. 1983, 49(3) :185C7;萬小華，羅小平.銅對大鼠肝細(xì)胞凋亡的影響以及姜黃素的保護作用.中國當(dāng)代兒科雜志2007，9 (6) :567)。眾多研究表明姜黃素能使肝內(nèi)環(huán)氧化物水解酶、谷胱甘肽過氧化物酶、谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶、超氧化物歧化化酶的活性增加，抗脂質(zhì)過氧化作用顯著，能明顯減少血漿與肝臟中過氧化物含量(Nanji A A, Jokelainen K, Tipoe G L， et al. Curcumin prevents alcohol-induced liver disease in rats by inhibiting the expression of NF-kappa B-dependent genes. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 2003，284 :G321)。姜黃素具有抗炎和抗纖維化的作用，姜黃素能夠抑制炎癥因子如TNF-α、IL-6的表達(dá)和肝星狀細(xì)胞的活化從而發(fā)揮抗肝纖維化作用(中國專利 CN101019841 ；CN101002911)。眾多動物實驗姜黃素?zé)o毒或毒副作用很弱。臨床實驗表明患者口服12g/天對身體無毒苜 1J 作用(Cheng A L,Hsu C H, Lin J K, et al. Phase I clinical trial of cur cumin, a chemopreventive agent, in patients with high-riskorpre—malignantlesions. Anticancer Res. 2001, 21 (4B) :2895C90)。在另一臨床二期試驗中，姜黃素在任何攝入量下都沒有表現(xiàn)出系統(tǒng)毒性(Nam S H, Nam H Y, Joo, J R, Baek S, Park J S Bull. Korean Chem. Soc. 2007,28,397)。但姜黃素分子極性很弱，幾乎不溶于水，口服生物利用度很低，例如在每天口服3. 6g姜黃素的病人血清中只能檢測到納克數(shù)量級的姜黃素(Garcea G5Jones D J，Singh R et al. Detection of curcumin and its metabolites in hepatic tissue and portal blood of patients following oral administration. Br. J. Cancer 2004, 90 :1011) 0姜黃素對光敏感，在中性及堿性條件下不穩(wěn)定，如在pH7. 2的PBS溶液中，姜黃素在 10 分鐘中內(nèi)降解 50% (Wang Y J, Pan M H, Cheng A L et al. Stability of curcumin in buffer solutions and characterization of its degradation products J. Pharm. Biomed. Anal. 1997,15 :1867)。由于不溶于水，姜黃素難以直接進行注射給藥，且在血液循環(huán)中消除很快，如姜黃素的甘油縮甲醛溶液注射到小鼠體內(nèi)半小時后血液中已難檢測到姜胃素存在(Ireson C, Orr S, Jones D J L et al. Characterization of metabolites of the chemopreventive agent curcumin in human and rat hepatocytes and in the rat inVivo, and evaluation of their ability to inhibit phorbol ester-induced prostaglandin E2 production. Cancer Res. 2001,61 :1058)。極低的生物利用度導(dǎo)致了姜黃素在治療過程中重現(xiàn)性差，療效不明顯，無法在臨床中實際應(yīng)用。姜黃素由于上述原因在實際應(yīng)用中受到很大的限制，故近年來科研工作者已采用將姜黃素包裹在各種納米顆粒、脂質(zhì)體、囊泡、微球以及將姜黃素做成固體分散物、聚合物混合物、高分子復(fù)合物等方式來改進姜黃素缺陷促進它的臨床應(yīng)用。但這些方法有諸多缺點如姜黃素負(fù)載率低、藥物存儲穩(wěn)定性差、乳化劑，助溶劑使用量大、靜脈注射存在安全性問題、制備工藝復(fù)雜，成本高昂等。雖然文獻中已經(jīng)有了通過氨基甲酸酯鍵或者肽鍵將姜黃素與聚乙二醇連接起來形成水溶性姜黃素衍生物并用于抗腫瘤的報道，但這些衍生物穩(wěn)定性不高，在血液循環(huán)中不穩(wěn)定，清除快。如姜黃素與聚乙二醇2000通過氨基甲酸酯鍵形成的衍生物在中性環(huán)境中(PBS，pH= 7.4)分解半衰期僅60分鐘(Safavy A,Raisch K P， Mantena S, et al. Design and development of water-soluble curcumin conjugates as potential anticancer agents. J. Med. Chem. 2007,50 :6284)。近年來許多研究表明，硒是維持生命活動必需的微量元素之一，它是構(gòu)成有機體抗氧化劑谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的重要成分，硒的缺乏和GSH-I^x活力的下降能導(dǎo)致肝炎、肝纖維化、肝硬化等病癥加重，各型肝病患者均不同程度缺硒或血硒水平低下(王志新.病毒性肝炎患者血硒、過氧化脂質(zhì)和谷胱甘肽過氧化物酶活力測定的臨床意義.中華傳染病雜志，1990，8 (4) :209)。硒通過含硒酶類如GSH-I3x等清除自由基，保護肝星形細(xì)胞、內(nèi)細(xì)胞、肝細(xì)胞等免受自由基的損傷產(chǎn)生抗纖維化的效應(yīng)，具有抗自由基及其引發(fā)的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，適量補硒可起到預(yù)防肝炎、肝纖維化、肝硬化的作用(符寒，水祥.硒防治肝病的研究進展.微量元素與健康研究，2005，22 (3) :64)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的首要技術(shù)問題是提供一種含硒姜黃素聚合物，該聚合物穩(wěn)定性好、水溶性高、易于注射給藥、生物利用度高，同時保留了姜黃素自身生物相容性好、毒副作用低以及能抗肝纖維化、脂肪肝、肝硬化的優(yōu)點，臨床應(yīng)用價值突出。本發(fā)明的研究思路為首先將姜黃素與環(huán)戊烷四甲酸二酐通過縮聚反應(yīng)連接起來生成每個重復(fù)單元帶兩個羧基的姜黃素高分子聚合物，該聚合物鏈的每個單元一個羧基再接枝一個親水性單甲氧基PEO鏈而使該聚合物能溶于水，最后再使主鏈上少量單元中引入甲基硒代半胱胺酸，得到含硒的姜黃素水溶性聚合物。該聚合物中疏水性的姜黃素位于主鏈上，溶于水后親水性的聚氧乙烯鏈伸展開來包裹在姜黃素主鏈外層，形成梳妝高分子保護姜黃素分子，使其在中性條件下和血液循環(huán)中穩(wěn)定，而在肝臟中高濃度酯酶的作用下快速分解釋放出姜黃素，累積在肝臟組織中迅速達(dá)到治療效應(yīng)濃度，起到抗炎、抗過氧化物、 抗纖維化、降血酯、保護肝臟的作用，而％在體內(nèi)被吸收后也能提高GSH-I^x活性，起到輔助抗氧化、抗纖維化、抗肝硬化的作用。本發(fā)明所述的含硒姜黃素聚合物，其結(jié)構(gòu)如式(I)所示
權(quán)利要求
1.含硒姜黃素聚合物，其結(jié)構(gòu)如式(I)所示
2.如權(quán)利要求1所述的含硒姜黃素聚合物，其特征在于所述直鏈或支鏈烷基的碳原子個數(shù)為1 12個，所述直鏈或支鏈烷氧基的碳原子個數(shù)為1 12個，所述烷基胺基的碳原子個數(shù)為1 12個，所述鹵代烷基的碳原子個數(shù)為1 12個。
3.如權(quán)利要求1所述的含硒姜黃素聚合物，其特征在于=R1A5彼此獨立選自直鏈或支鏈烷氧基出2、民、禮、1 6、1 7、1 8、1 9彼此獨立選自下列之一氫，直鏈或支鏈烷基。
4.如權(quán)利要求1所述的含硒姜黃素聚合物，其特征在于禮、R5均為甲氧基出2、R3、R4、 R6 λ R7、R8 Λ R9 均為氫。
5.如權(quán)利要求1 4之一所述的含硒姜黃素聚合物，其特征在于χ取值在30 100， y取值在1 5。
6.如權(quán)利要求1 取值在1 2。
7.如權(quán)利要求1 的數(shù)均分子量為500 ‘4之一所述的含硒姜黃素聚合物，其特征在于x取值在40 80，y^ 4之一所述的含硒姜黃素聚合物，其特征在于單甲氧基聚氧乙烯 2000Dao
8. —種如權(quán)利要求1所述的含硒姜黃素聚合物的制備方法，其特征在于所述的制備方法為式(III)所示的梳妝高分子聚合物的高分子鏈上的部分羧基與式(VII)所示的甲基硒代半胱胺酸發(fā)生縮合反應(yīng)得到式(I)所示的含硒姜黃素聚合物；
9.如權(quán)利要求8所述的含硒姜黃素聚合物的制備方法，其特征在于所述制備方法具體按照如下實施將式(III)所示的梳妝高分子聚合物溶解在干燥的溶劑中，按照梳妝高分子聚合物中含有的姜黃素或姜黃素衍生物基團N，N-二環(huán)己基碳二亞胺= 1 0.005 0.05的摩爾比加入N，N-二環(huán)己基碳二亞胺，攪拌后再按照梳妝高分子聚合物含有的姜黃素或姜黃素衍生物基團甲基硒代半胱胺酸三乙胺4-二甲基氨基吡啶 =1 0.005 0.05 0.005 0.05 0. 01的摩爾比加入甲基硒代半胱胺酸、三乙胺和 4-二甲基氨基吡唆，室溫下攪拌過夜，加入乙醚，離心得到的沉淀溶解在四氫呋喃中，用乙醚再沉淀分級，最后得到式(I)所示的含硒姜黃素聚合物。
10.如權(quán)利要求1所述的含硒姜黃素聚合物在制備抗肝纖維化、抗脂肪肝或抗肝硬化藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種含硒姜黃素聚合物及其制備方法和應(yīng)用，所述的含硒姜黃素聚合物的結(jié)構(gòu)如式(I)所示，該聚合物穩(wěn)定性、水溶性、生物相容性好，毒副作用低，生物利用度高，易于注射給藥，具有明顯抗肝纖維化、抗脂肪肝、抗肝硬化療效，臨床應(yīng)用價值突出。
文檔編號A61P1/16GK102558530SQ20111029586
公開日2012年7月11日 申請日期2011年9月30日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月30日
發(fā)明者唐華東, 李小年 申請人:浙江工業(yè)大學(xué)