專利名稱：一種新的抗菌藥物組合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及藥物制劑領域，具體涉及一種抗菌藥物的復方制劑。
背景技術：
頭孢類抗菌素為廣泛用于臨床的抗菌藥物，由于臨床上長期、大量使用，致使細菌對頭孢類抗生素產生耐藥性，極大地影響了該類藥物的療效。細菌對頭孢類抗生素耐藥的主要機制為產生特異性的β-內酰胺酶，該酶能分解藥物，使藥物療效降低。為了克服耐藥性的缺陷，近幾年不斷有頭孢類抗生素聯(lián)合使用β-內酰胺酶抑制劑的報道，即通過抑制β-內酰胺酶以使藥物保持最大的療效。較常用的β-內酰胺酶抑制劑有舒巴坦(sulbactam，SBT)、他佐巴坦(tazobactam，TAZ)和克拉維酸(clavulanic acid)等。
頭孢曲松為半合成的第三代頭孢菌素類抗生素，具有長效、廣譜、抗菌作用強的特點。其上市后就受到臨床醫(yī)生的歡迎，并且廣泛用于治療疾病。但長期使用也面臨耐藥性問題，影響了藥物療效。他佐巴坦為常用的β-內酰胺酶抑制劑，由于其半衰期為1小時，而頭孢曲松為8小時，所以一般認為由于兩藥半衰期相差大，聯(lián)合使用很難有協(xié)同療效(US6090801)，因此現(xiàn)在較多研究的是頭孢曲松與舒巴坦的復合制劑(CN1404834A)。

發(fā)明內容
本發(fā)明人在對這類復合抗菌藥物研究中發(fā)現(xiàn)，頭孢曲松與他佐巴坦聯(lián)合使用抗菌作用明顯優(yōu)于其他的藥物聯(lián)用，這種作用在特定的比例下療效更優(yōu)，并且由于加入了他佐巴坦，不僅使頭孢曲松的療效增加，而且還使頭孢曲松的療效延長，產生了療效的后效應。
發(fā)明人在研究中發(fā)現(xiàn)，兩藥聯(lián)用，隨著他佐巴坦比例的增加，抗菌活性也增加，但由于他佐巴坦價格非常昂貴，因此，當頭孢曲松與他佐巴坦重量比為3～5∶1時不僅療效好(對臨床分離產酶的金黃色葡萄球菌、埃埃氏大腸菌和綠膿桿菌的抗菌活性是單用頭孢曲松鈉的2.6、11.6和4.3倍；是新菌必治(頭孢曲松鈉聯(lián)合舒巴坦鈉)的1.7、2.1和2.0倍；對G-桿菌的抗菌活性強于哌拉西林他唑巴坦，對臨床分離的腸桿菌科細菌的抗菌活性均在較敏感的范圍內)，而且藥物成本低，適合于臨床使用。本發(fā)明優(yōu)選的比例為頭孢曲松∶他佐巴坦＝3∶1或5∶1。從有效治療量考慮，本發(fā)明的組合物每單位劑型含頭孢曲松210～900毫克，他佐巴坦70～300毫克。最優(yōu)選的單位劑型所用的量為頭孢曲松750毫克、他佐巴坦250毫克(3∶1的劑量)，或頭孢曲松750毫克或他佐巴坦150毫克(5∶1的劑量)。
考慮到該類產品注射給藥療效較好，而制備成注射劑對水溶性要求比較高，本發(fā)明人經過多次試驗發(fā)現(xiàn)，將兩者制備成鈉鹽后不僅解決了水溶性問題，而且制備方法比較簡單，適合工業(yè)化大生產，因此，頭孢曲松優(yōu)選用其鈉鹽即頭孢曲松鈉，他佐巴坦也優(yōu)選其鈉鹽即他佐巴坦鈉，至于兩個鈉鹽在配制時所用量應該將其折算成游離體后再按前面的配比和劑量計算。
本發(fā)明優(yōu)選的劑型為無菌粉針劑，也可加入賦形劑用常規(guī)方法制備成凍干劑。
盡管現(xiàn)有技術公知頭孢類抗生素和β-內酰胺酶抑制劑聯(lián)用可增加抗菌藥效，但發(fā)明人在研究中發(fā)現(xiàn)頭孢曲松和他佐巴坦聯(lián)用時藥效比頭孢曲松和舒巴坦聯(lián)用時要好很多，下面是其試驗和試驗數據一、不同配比的頭孢曲松鈉他佐巴坦鈉等β-內酰胺抗生素對β-內酰胺酶穩(wěn)定性及抑酶作用試驗研究1、材料1.1藥物(1)注射用頭孢曲松鈉他佐巴坦鈉(1∶1、3∶1、5∶1、8∶1)規(guī)格分別為0.5、0.6、0.6、0.9(g/瓶)，分別含頭孢曲松鈉0.25、0.45、0.5、0.8g，他佐巴坦鈉0.25、0.15、0.1、0.1g。
(2)新菌必治，規(guī)格1.5g/瓶(含頭孢曲松鈉1.0g，舒巴坦鈉0.5g)。
(3)注射用頭孢唑啉鈉(CZ)規(guī)格0.5g/瓶1.2菌株國際標準產β-內酰胺酶的菌株7株，購自四川抗生素研究所，其中有質粒編碼的β-內酰胺酶TEM-5、SHV-1、PSE-1、OXA-1、OXA-2，染色體編碼的β-內酰胺酶K1、D31；TEM-5、SHV-1、OXA-1、D31為大腸埃希菌，K1為肺炎克雷伯菌，PSE-1為銅綠假單胞菌，OXA-2為鼠傷寒沙門氏菌。
1.3試劑Nitrocefin紙片，Becton Dickinson公司產品，規(guī)格50片/瓶2、試驗方法2.2β-內酰胺酶的提取與鑒定采用超聲波破碎細菌法提取β-內酰胺酶粗酶。具體過程如下將上述菌株分純，挑取單個菌落接種于5ml新鮮的M-H肉湯中，37℃旋轉震蕩培養(yǎng)5-6小時，低溫離心(4℃，7000rpm，10min)，收集菌體，用冷磷酸鹽緩沖液(50mM，pH7.0)，洗滌2次，重復離心，依細菌量，以同種冷緩沖液約10ml制成菌懸液，冰浴下進行超聲破碎(輸出功率7-，超聲1min，停1min)，直至菌液看似清亮止，低溫下超速離心收集上清液(即β-內酰胺酶粗提物)，分裝后-80℃保存?zhèn)溆谩?br> 2.3用Nitrocefin紙片鑒定β-內酰胺酶粗酶將提取粗酶液滴加到Nitrocefin紙片上，10min內，紙片由淺黃色變成紅色者即為β-內酰胺酶陽性。
2.3 7種β-內酰胺類抗生素對β-內酰胺酶的穩(wěn)定性試驗(1)采用常規(guī)紫外分光光度法檢測。以各藥液中CRO(頭孢曲松鈉)的含量為依據，用磷酸緩沖液(50mM，pH7.0)配制7種抗生素藥液，濃度為10-4M，分別進行底物光譜掃描，選擇最適波長CRO、CRO/TAZ(他佐巴坦)、CRO/SBT(舒巴坦鈉)均為241nM、CZ為272nM。
(2)分別取各藥物溶液6ml，加粗酶液100μl。另取各藥液6ml加入100μl磷酸鹽緩沖液作陰性對照，混勻后在37℃恒溫水浴中反應2小時，分別以緩沖液加酶液和緩沖液作空白對照調零，在相應波長處測定溫浴前后底物的OD值，并按下式計算酶對底物的水解率，酶水解率＝{[(OD酶前-OD酶后)-(OD陰對前-OD陰對后)]/OD酶前}*100％，并以CZ的水解率為100％分別按下式計算其它β-內酰胺抗生素的相對水解率(RR，RelativeRates of Hydrolysis)。此實驗重復兩次。
RR＝(酶對某待測藥物的水解率/酶對CZ的水解率)*100％(3)實驗結果3.1頭孢曲松鈉等β-內酰胺類抗生素對酶的穩(wěn)定性7種β-內酰胺酶對頭孢曲松鈉等7種不同配比的β-內酰胺類抗生素的絕對水解率及以頭孢唑啉鈉的水解率為100％，其它6種抗生素的相對水解率分別見表1和表2表1 7種β-內酰胺酶對7種不同配比的β-內酰胺類抗生素的絕對水解率

表2 7種β-內酰胺酶對7種不同配比的β-內酰胺類抗生素的相對水解率

由表1和表2看出，β-內酰胺酶對頭孢唑啉的水解率達到67.31％-85.55％，對單組分的頭孢曲松鈉的水解率達到20.56-32.47％，而對不同配比的頭孢曲松鈉他佐巴坦鈉(1∶1、3∶1、5∶1)的水解率只有0.84％-21.76％，說明這幾個配比的頭孢曲松鈉他佐巴坦鈉的酶穩(wěn)定性明顯優(yōu)于單組分頭孢曲松鈉，對所試菌株產生的β-內酰胺酶的穩(wěn)定性優(yōu)于頭孢曲松鈉配舒巴坦(2∶1)。
由表1和表2也可以看出，當CRO/TAZ為3∶1和5∶1時的水解率與1∶1時相差不太大，而由于他佐巴坦價格昂貴，因此，選用3∶1～5∶1時既達到了療效，又節(jié)約了成本。
二、最低抑菌濃度(MIC)的比較發(fā)明人將CRO/TAZ(8∶1、5∶1、3∶1、1∶1)與頭孢哌酮鈉/舒巴坦(CFP/SUB)(1∶1)及哌拉西林/他佐巴坦(PIPC/TAZ)(8∶1)也進行了抗菌作用的比較，發(fā)現(xiàn)，頭孢曲松和他佐巴坦聯(lián)合使用明顯比別的頭孢或青霉烯類抗菌素與β-內酰胺酶抑制劑聯(lián)合使用效果要好。下面的部分試驗及數據實驗方法MIC(最低抑菌濃度)的測定真空冷凍干燥法保存菌種，用前復蘇，用Nitrocefin紙片(Cefinase，美國BBL公司生產)確定β-內酰胺酶產生情況，30株產ESBLs酶臨床分離菌(排除AmpC酶)按NCCLS(2001年版)推薦的方法進行篩選和確認。選用非產β-內酰胺酶標準株、產β-內酰胺酶標準株(非產ESBLs)及產ESBLs標準株平行檢測進行質控。每次實驗前用菌落比濁儀測定所試菌液濃度。
MIC的測定采用瓊脂平皿二倍稀釋法進行。配制不同配比的實驗用藥及對照藥物，使其終濃度梯度為256、128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125mg/l，用多點定量接種儀接種細菌在含不同配比不同濃度各藥的瓊脂平皿表面，菌液終濃度為104CFU/點。置35℃培養(yǎng)18小時，觀察結果，未見細菌生長的最低藥物濃度即為該藥對細菌的最低抑菌濃度(MIC)。結果見表3和表4表3幾中組合物對分離的腸桿菌科細菌的MIC(mg/L)


PIPC/TAZ-哌拉西林鈉他佐巴坦鈉、CFP/TAZ-頭孢哌酮他佐巴坦鈉、CRO/TAZ頭孢曲松鈉他佐巴坦鈉(括號內表示不同配比)表4幾中組合物對分離的腸桿菌科細菌的MIC(mg/L)

由以上試驗可知，頭孢曲松和他佐巴坦組合后的抗菌效果優(yōu)于其他的同類產品的組合，重量比為3～5∶1時抗菌效果更佳。
具體實施例方式
實施例1頭孢曲松鈉和他佐巴坦鈉粉針劑(3∶1)及其制備方法在無菌潔凈和空氣相對濕度不大于55％的環(huán)境下，將頭孢曲松鈉894g(相當與頭孢曲松750g)和他佐巴坦鈉294g(相當于250g他佐巴坦)無菌粉混勻、研磨，過6號篩，分裝成1000瓶。
實施例2頭孢曲松鈉和他佐巴坦鈉粉針劑(5∶1)及其制備方法在無菌潔凈和空氣相對濕度不大于55％的環(huán)境下，將頭孢曲松鈉893.9g(相當與頭孢曲松750g)和他佐巴坦鈉176.5g(相當于150g他佐巴坦)無菌粉混勻、研磨，過6號篩，分裝成1000瓶。
實施例3凍干制劑及其制備方法將孢曲松鈉894g、他佐巴坦鈉294g、甘露醇70g溶于注射用水1000ml中，使溶，加針用活性炭，攪拌8分鐘，加注射用水至2000ml，趁熱經鈦砂芯除炭抽濾至潔凈的容器中，濾液再經0.22um微孔濾膜除菌過濾，灌裝(每單位2ml)，凍干。
權利要求
1.一種抗菌藥物組合物，由頭孢曲松和他佐巴坦組成，其特征是兩者的重量比為3～5∶1。
2.權利要求1的藥物組合物，其特征是兩者的重量比為3∶1。
3.權利要求1的藥物組合物，其特征是兩者的重量比為5∶1。
4.權利要求1的藥物組合物，其特征是每單位劑型含頭孢曲松210～900毫克，他佐巴坦70～300毫克。
5.權利要求4的藥物組合物，其特征是每單位劑型含頭孢曲松750毫克，他佐巴坦250毫克。
6.權利要求4的藥物組合物，其特征是每單位劑型含頭孢曲松750毫克，他唑巴坦150毫克。
7.權利要求1至6中任一項的藥物組合物，其特征是頭孢曲松和他佐巴坦均為鈉鹽，其重量比折算成頭孢曲松和他佐巴坦計算。
8.權利要求1的藥物組合物，其特征是還含有賦形劑。
9.權利要求1的藥物組合物，其特征是劑型為粉針劑或凍干劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及藥物制劑領域，具體涉及一種抗菌藥物的復方制劑。本發(fā)明抗菌藥物復方由頭孢曲松與他佐巴坦組成，可以是兩者的鈉鹽，兩個藥物的重量比為3～5∶1，由于兩藥聯(lián)用，不僅使頭孢曲松的療效增加，而且還使頭孢曲松的療效延長，產生了療效的后效應。
文檔編號A61P31/00GK1679585SQ200510037640
公開日2005年10月12日 申請日期2005年1月7日 優(yōu)先權日2005年1月7日
發(fā)明者韓克勝 申請人:海口奇力制藥有限公司