專利名稱：氨基-咪唑酮及其作為治療認(rèn)知缺損、阿爾茲海默病、神經(jīng)變性和癡呆的藥物的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及如上所定義的式I化合物及其鹽的用途。用于藥物組合物的鹽可為可藥用鹽，但其它鹽也可用于制備式I化合物。
應(yīng)該理解本發(fā)明還涉及式I化合物的任何以及所有互變異構(gòu)形式。
本發(fā)明的化合物可用作藥物。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供式I化合物或其可藥用鹽、互變異構(gòu)體或體內(nèi)可水解的前體，其用作藥物。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供本申請所描述的化合物，其用作用于治療或預(yù)防Aβ相關(guān)病理的藥物。在其它一些實(shí)施方案中，Aβ相關(guān)病理為唐氏綜合征、β-淀粉樣血管病、腦淀粉樣血管病、遺傳性腦出血、與認(rèn)知缺損相關(guān)的障礙、MCI(“輕度認(rèn)知缺損”)、阿爾茨海默病、記憶喪失、與阿爾茨海默病相關(guān)的注意力缺陷癥狀、與阿爾茨海默病相關(guān)的神經(jīng)變性、混合型血管起源的癡呆、變性起源的癡呆、早老性癡呆、老年性癡呆、與帕金森病相關(guān)的癡呆、進(jìn)行性核上麻痹或皮質(zhì)基質(zhì)變性。
在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供式I化合物或其可藥用鹽、互變異構(gòu)體或體內(nèi)可水解的前體，在制備用于治療或預(yù)防Aβ相關(guān)病理的藥物中的用途。在其它一些實(shí)施方案中，Aβ相關(guān)病理包括例如唐氏綜合征和β-淀粉樣血管病，例如但不限于腦淀粉樣血管病、遺傳性腦出血、與認(rèn)知缺損相關(guān)的障礙例如但不限于MCI(“輕度認(rèn)知缺損”)、阿爾茨海默病、記憶喪失、與阿爾茨海默病相關(guān)的注意力缺陷癥狀、與例如阿爾茨海默病那樣的疾病相關(guān)的神經(jīng)變性或包括混合型血管起源和變性起源的癡呆、早老性癡呆、老年性癡呆和與帕金森病相關(guān)的癡呆在內(nèi)的癡呆、進(jìn)行性核上麻痹或皮質(zhì)基質(zhì)變性。
在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供抑制BACE活性的方法，其包括使BACE與本發(fā)明的化合物接觸。BACE被認(rèn)為代表主要的β-分泌酶活性，并且被認(rèn)為是產(chǎn)生淀粉樣-β-蛋白(Aβ)的限速步驟。因而，用抑制劑(例如本申請所提供的化合物)抑制BACE，這可用于抑制Aβ及其部分的沉積。由于Aβ及其部分的沉積與例如阿爾茨海默病那樣的疾病關(guān)聯(lián)，所以BACE就開發(fā)用于治療和/或預(yù)防以下疾病的藥物而言是重要的候選靶標(biāo)Aβ相關(guān)病理，例如唐氏綜合征和β-淀粉樣血管病，例如但不限于腦淀粉樣血管病、遺傳性腦出血、與認(rèn)知缺損相關(guān)的障礙例如但不限于MCI(“輕度認(rèn)知缺損”)、阿爾茨海默病、記憶喪失、與阿爾茨海默病相關(guān)的注意力缺陷癥狀、與例如阿爾茨海默病那樣的疾病相關(guān)的神經(jīng)變性或包括混合型血管起源和變性起源的癡呆、早老性癡呆、老年性癡呆和與帕金森病相關(guān)的癡呆在內(nèi)的癡呆、進(jìn)行性核上麻痹或皮質(zhì)基質(zhì)變性。
在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供用于治療以下疾病的方法Aβ相關(guān)病理，例如唐氏綜合征和β-淀粉樣血管病，例如但不限于腦淀粉樣血管病、遺傳性腦出血、與認(rèn)知缺損相關(guān)的障礙例如但不限于MCI(“輕度認(rèn)知缺損”)、阿爾茨海默病、記憶喪失、與阿爾茨海默病相關(guān)的注意力缺陷癥狀、與例如阿爾茨海默病那樣的疾病相關(guān)的神經(jīng)變性或包括混合型血管起源和變性起源的癡呆、早老性癡呆、老年性癡呆和與帕金森病相關(guān)的癡呆在內(nèi)的癡呆、進(jìn)行性核上麻痹或皮質(zhì)基質(zhì)變性，所述方法包括將治療有效量的式I化合物或其可藥用鹽、互變異構(gòu)體或體內(nèi)可水解的前體給予哺乳動物(包括人)。
在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供用于預(yù)防以下疾病的方法Aβ相關(guān)病理，例如唐氏綜合征和β-淀粉樣血管病，例如但不限于腦淀粉樣血管病、遺傳性腦出血、與認(rèn)知缺損相關(guān)的障礙例如但不限于MCI(“輕度認(rèn)知缺損”)、阿爾茨海默病、記憶喪失、與阿爾茨海默病相關(guān)的注意力缺陷癥狀、與例如阿爾茨海默病那樣的疾病相關(guān)的神經(jīng)變性或包括混合型血管起源和變性起源的癡呆、早老性癡呆、老年性癡呆和與帕金森病相關(guān)的癡呆在內(nèi)的癡呆、進(jìn)行性核上麻痹或皮質(zhì)基質(zhì)變性，所述方法包括將治療有效量的式I化合物或其可藥用鹽、互變異構(gòu)體或體內(nèi)可水解的前體給予哺乳動物(包括人)。
在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供通過將式I化合物或其可藥用鹽、互變異構(gòu)體或體內(nèi)可水解的前體及認(rèn)知和/或記憶增強(qiáng)藥物給予哺乳動物(包括人)來治療或預(yù)防以下疾病的方法Aβ相關(guān)病理，例如唐氏綜合征和β-淀粉樣血管病，例如但不限于腦淀粉樣血管病、遺傳性腦出血、與認(rèn)知缺損相關(guān)的障礙例如但不限于MCI(“輕度認(rèn)知缺損”)、阿爾茨海默病、記憶喪失、與阿爾茨海默病相關(guān)的注意力缺陷癥狀、與例如阿爾茨海默病那樣的疾病相關(guān)的神經(jīng)變性或包括混合型血管起源和變性起源的癡呆、早老性癡呆、老年性癡呆和與帕金森病相關(guān)的癡呆在內(nèi)的癡呆、進(jìn)行性核上麻痹或皮質(zhì)基質(zhì)變性。認(rèn)知增強(qiáng)藥物、記憶增強(qiáng)藥物和膽堿酯酶抑制劑包括但不限于多奈哌齊(Aricept)、加蘭他敏(Reminyl或Razadyne)、利凡斯的明(Exelon)、他克林(Cognex)和美金剛(Namenda，Axura或Ebixa)。
在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供通過將式I化合物或其可藥用鹽、互變異構(gòu)體或體內(nèi)可水解的前體(其中各物質(zhì)都由本申請所提供)及膽堿酯酶抑制劑或抗炎藥物給予哺乳動物(包括人)來治療或預(yù)防以下疾病的方法Aβ相關(guān)病理，例如唐氏綜合征和β-淀粉樣血管病，例如但不限于腦淀粉樣血管病、遺傳性腦出血、與認(rèn)知缺損相關(guān)的障礙例如但不限于MCI(“輕度認(rèn)知缺損”)、阿爾茨海默病、記憶喪失、與阿爾茨海默病相關(guān)的注意力缺陷癥狀、與例如阿爾茨海默病那樣的疾病相關(guān)的神經(jīng)變性或包括混合型血管起源和變性起源的癡呆、早老性癡呆、老年性癡呆和與帕金森病相關(guān)的癡呆在內(nèi)的癡呆、進(jìn)行性核上麻痹或皮質(zhì)基質(zhì)變性。
在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供通過將本發(fā)明的化合物及非典型抗精神病藥物給予哺乳動物(包括人)來治療或預(yù)防以下疾病的方法Aβ相關(guān)病理，例如唐氏綜合征和β-淀粉樣血管病，例如但不限于腦淀粉樣血管病、遺傳性腦出血、與認(rèn)知缺損相關(guān)的障礙例如但不限于MCI(“輕度認(rèn)知缺損”)、阿爾茨海默病、記憶喪失、與阿爾茨海默病相關(guān)的注意力缺陷癥狀、與例如阿爾茨海默病那樣的疾病相關(guān)的神經(jīng)變性或包括混合型血管起源和變性起源的癡呆、早老性癡呆、老年性癡呆和與帕金森病相關(guān)的癡呆在內(nèi)的癡呆、進(jìn)行性核上麻痹或皮質(zhì)基質(zhì)變性或本申請所描述的任意其它疾病、障礙或病癥。非典型抗精神病藥物包括但不限于奧氮平(Olanzapine)(市售為Zyprexa)、阿立哌唑(Aripiprazole)(市售為Abilify)、利培酮(Risperidone)(市售為Risperdal)、喹硫平(Quetiapine)(市售為Seroquel)、氯氮平(Clozapine)(市售為Clozaril)、齊拉西酮(Ziprasidone)(市售為Geodon)和奧氮平/氟西汀(Olanzapine/Fluoxetine)(市售為Symbyax)。
在一些實(shí)施方案中，用本發(fā)明化合物治療的哺乳動物或人類已經(jīng)被診斷患有具體的疾病或障礙，例如本申請所描述的那些。在這些情況下，所治療的哺乳動物或人類需要這種治療。然而，診斷無需先前就進(jìn)行。
本發(fā)明還包括藥物組合物，所述藥物組合物包含作為活性成分的一種或多種本發(fā)明化合物及至少一種可藥用載體、稀釋劑或賦形劑。
本申請所給出的定義意在闡明在本申請各處所使用的術(shù)語。術(shù)語“本申請”指整個(gè)申請。
本發(fā)明的多種化合物可按特定的幾何異構(gòu)形式或立體異構(gòu)形式存在。本發(fā)明包括所有這些化合物，包括順式和反式異構(gòu)體、R和S對映異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體、(D)-異構(gòu)體、(L)-異構(gòu)體、它們的外消旋混合物和它們的其它混合物，這些都涵蓋在本發(fā)明的范圍內(nèi)。額外的不對稱碳原子可存在于取代基(例如烷基)中。所有這些異構(gòu)體及它們的混合物都意圖包括在本發(fā)明中。本申請所描述的化合物可具有不對稱的中心。可將包含不對稱取代原子的本發(fā)明化合物分離成光學(xué)活性形式或外消旋形式。如何制備光學(xué)活性形式是本領(lǐng)域眾所周知的，例如通過拆分外消旋形式、通過從具有光學(xué)活性的起始原料合成，或使用光學(xué)活性試劑合成。如果需要，外消旋物質(zhì)的分離可通過本領(lǐng)域所已知的方法來實(shí)現(xiàn)。烯烴、C＝N雙鍵等的多種幾何異構(gòu)體也可存在于本申請所描述的化合物中，并且所有這些穩(wěn)定的異構(gòu)體都被預(yù)期在本發(fā)明中。對本發(fā)明化合物的順式和反式幾何異構(gòu)體進(jìn)行了描述，并且可將它們分離成異構(gòu)體的混合物，或分離成分開的異構(gòu)形式。結(jié)構(gòu)的所有手性形式、非對映異構(gòu)形式、外消旋形式和所有幾何異構(gòu)形式都意圖包括在本發(fā)明中，除非具體指明了特定的立體化學(xué)或異構(gòu)形式。
當(dāng)將連接取代基的鍵顯示成與連接環(huán)中兩個(gè)原子的鍵交叉時(shí)，所述取代基可與環(huán)上任意原子連接。當(dāng)列出取代基而沒有指明所述取代基通過哪個(gè)原子來與給定結(jié)構(gòu)式的化合物的其余部分連接時(shí)，所述取代基可通過所述取代基中的任意原子來連接。只要取代基、取代基的位置和/或變量的組合能得到穩(wěn)定的化合物，那么這種組合就是允許的。
本申請所使用的術(shù)語“任選取代”指取代是任選的，因此就所指定的原子或基團(tuán)而言可以是未取代的。在期望取代的情況下，這種取代指所指定原子或基團(tuán)上的任意數(shù)目的氫被選自指定組的基團(tuán)代替，條件為不能超過所指定原子或基團(tuán)的正?；蟽r(jià)，并且取代的結(jié)果是得到穩(wěn)定的化合物。例如，如果取代基是甲基(即CH3)，那么碳原子上的3個(gè)氫可被代替。所述取代基的實(shí)例包括但不限于鹵素、CN、NH2、OH、SO、SO2、COOH、OC1-6烷基、CH2OH、SO2H、C1-6烷基、OC1-6烷基、C(＝O)C1-6烷基、C(＝O)OC1-6烷基、C(＝O)NH2、C(＝O)NHC1-6烷基、C(＝O)N(C1-6烷基)2、SO2C1-6烷基、SO2NHC1-6烷基、SO2N(C1-6烷基)2、NH(C1-6烷基)、N(C1-6烷基)2、NHC(＝O)C1-6烷基、NC(＝O)(C1-6烷基)2、C5-6芳基、OC5-6芳基、C(＝O)C5-6芳基、C(＝O)OC5-6芳基、C(＝O)NHC5-6芳基、C(＝O)N(C5-6芳基)2、SO2C5-6芳基、SO2NHC5-6芳基、SO2N(C5-6芳基)2、NH(C5-6芳基)、N(C5-6芳基)2、NC(＝O)C5-6芳基、NC(＝O)(C5-6芳基)2、C5-6雜環(huán)基、OC5-6雜環(huán)基、C(＝O)C5-6雜環(huán)基、C(＝O)OC5-6雜環(huán)基、C(＝O)NHC5-6雜環(huán)基、C(＝O)N(C5-6雜環(huán)基)2、SO2C5-6雜環(huán)基、SO2NHC5-6雜環(huán)基、SO2N(C5-6雜環(huán)基)2、NH(C5-6雜環(huán)基)、N(C5-6雜環(huán)基)2、NC(＝O)C5-6雜環(huán)基、NC(＝O)(C5-6雜環(huán)基)2。
本申請單獨(dú)使用或用作后綴或前綴的“烷基”意在包括具有1至12個(gè)碳原子(或如果提供了碳原子的具體數(shù)目，那么指所述具體數(shù)目)的支鏈和直鏈飽和脂肪族烴基。例如，“C0-6烷基”表示具有0、1、2、3、4、5或6個(gè)碳原子的烷基。烷基的實(shí)例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基和己基。在下標(biāo)是整數(shù)0(0)的情況中，下標(biāo)指示的基團(tuán)指明所述基團(tuán)可以不存在，即在基團(tuán)之間有直接的鍵相連。
本申請單獨(dú)使用或用作后綴或前綴的“烯基”意在包括具有2至12個(gè)碳原子(或如果提供了碳原子的具體數(shù)目，那么指所述具體數(shù)目)的含有鏈烯烴(alkene)或烯烴(olefin)的支鏈和直鏈脂肪族烴基。例如，“C2-6烯基”表示具有2、3、4、5或6個(gè)碳原子的烯基。烯基的實(shí)例包括但不限于乙烯基、烯丙基、1-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、2-甲基丁-2-烯基、3-甲基丁-1-烯基、1-戊烯基、3-戊烯基和4-己烯基等。
本申請單獨(dú)使用或用作后綴或前綴的“炔基”意在包括具有2至12個(gè)碳原子(或如果提供了碳原子的具體數(shù)目，那么指所述具體數(shù)目)的含有炔烴的支鏈和直鏈脂肪族烴基。例如，“C2-6炔基”表示具有2、3、4、5或6個(gè)碳原子的炔基。炔基的實(shí)例包括但不限于乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、3-丁炔基、-戊炔基、己炔基和1-甲基戊-2-炔基。
本申請所使用的“芳族”指具有一個(gè)或多個(gè)帶有芳族特征(例如4n+2個(gè)離域電子)的不飽和碳環(huán)并且包括至多約14個(gè)碳原子的烴基。此外，“雜芳族”指具有一個(gè)或多個(gè)帶有芳族特征(例如4n+2個(gè)離域電子)、含有碳和一個(gè)或多個(gè)雜原子(如氮、氧和硫)的不飽和環(huán)。
本申請所使用的術(shù)語“芳基”指5至14個(gè)碳原子所組成的芳族環(huán)結(jié)構(gòu)。含有5、6、7和8個(gè)碳原子的環(huán)結(jié)構(gòu)可以是單環(huán)芳族基團(tuán)，例如苯基。含有8、9、10、11、12、13或14個(gè)碳原子的環(huán)結(jié)構(gòu)可以是多環(huán)基團(tuán)，例如萘基。芳族環(huán)可在一個(gè)或多個(gè)環(huán)位置取代有以上所描述的取代基。術(shù)語“芳基”也包括具有兩個(gè)或多個(gè)環(huán)的多環(huán)環(huán)系，其中兩個(gè)或多個(gè)碳為兩個(gè)相鄰環(huán)所共有(環(huán)為“稠環(huán)”)，其中至少一個(gè)環(huán)是芳族的，其它環(huán)例如可以是環(huán)烷基、環(huán)烯基、環(huán)炔基、芳基和/或雜環(huán)基。術(shù)語“鄰”、“間”和“對”分別應(yīng)用于1，2-、1，3-和1，4-二取代的苯。例如，名稱“1，2-二甲基苯”和“鄰-二甲基苯”具有相同的意義。
本申請所使用的“環(huán)烷基”指具有特定數(shù)目碳原子的飽和環(huán)基。這些可包括稠合的環(huán)或橋接的多環(huán)系統(tǒng)。優(yōu)選的環(huán)烷基在其環(huán)結(jié)構(gòu)中具有3至10個(gè)碳原子，更優(yōu)選在其環(huán)結(jié)構(gòu)中具有3、4、5和6個(gè)碳。例如“C3-6環(huán)烷基”表示例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己基那樣的基團(tuán)。
本申請所使用的“環(huán)烯基”指環(huán)中具有至少一個(gè)碳-碳雙鍵并且具有4至12個(gè)碳原子的含環(huán)烴基。
本申請所使用的“環(huán)炔基”指環(huán)中具有至少一個(gè)碳-碳三鍵并且具有7至12個(gè)碳原子的含環(huán)烴基。
本申請所使用的“鹵代”或“鹵素”指氟、氯、溴和碘?！翱购怆x子”用于表示小的帶負(fù)電或帶正電的物質(zhì)，例如氯離子、溴離子、氫氧根離子、乙酸根離子、硫酸根離子、甲苯磺酸根離子、苯磺酸根離子等。
本申請所使用的術(shù)語“雜環(huán)基”或“雜環(huán)的”或“雜環(huán)”指含有3至20個(gè)原子的飽和的、不飽和的或部分飽和的單環(huán)、二環(huán)或三環(huán)(除非另有說明)，其中1、2、3、4或5個(gè)環(huán)原子選自氮、硫或氧，除非另有說明，其可以通過碳或氮相連，其中-CH2-基任選被-C(O)-代替；以及除非有相反的說明，環(huán)氮或硫原子任選氧化形成N-氧化物或S-氧化物或環(huán)氮任選季銨化；其中環(huán)-NH任選被乙?；⒓柞；⒓谆蚣谆酋；〈?；以及環(huán)任選被一個(gè)或多個(gè)鹵素取代。應(yīng)該理解的是，當(dāng)雜環(huán)基中S原子和O原子的總數(shù)超過1時(shí)，這些雜原子不能彼此相鄰。若所述雜環(huán)基為二環(huán)或三環(huán)，則至少一個(gè)環(huán)任選為雜芳族環(huán)或芳族環(huán)，條件是至少一個(gè)環(huán)是非雜芳族的。若所述雜環(huán)基為單環(huán)，則其一定不是芳族的。雜環(huán)基的實(shí)例包括但不限于哌啶基、N-乙?；哙せ-甲基哌啶基、N-甲?；哙夯-甲磺?；哙夯?、高哌嗪基、哌嗪基、氮雜環(huán)丁烷基(azetidinyl)、氧雜環(huán)丁烷基(oxetanyl)、嗎啉基、四氫異喹啉基、四氫喹啉基、二氫吲哚基、四氫吡喃基、二氫-2H-吡喃基、四氫呋喃基和2，5-二氧代咪唑烷基。
本申請所使用的“雜芳基”或“雜芳族”指具有至少一個(gè)環(huán)雜原子(例如硫、氧或氮)的芳族雜環(huán)。雜芳基包括單環(huán)系統(tǒng)和多環(huán)(例如具有2、3或4個(gè)稠合的環(huán))系統(tǒng)。雜芳基的實(shí)例包括但不限于吡啶基(即pyridinyl)、嘧啶基、吡嗪基、噠嗪基、三嗪基、呋喃基、喹啉基、異喹啉基、噻吩基、咪唑基、噻唑基、吲哚基、吡咯基、噁唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、異噁唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、吲唑基、1，2，4-噻二唑基、異噻唑基、噻唑基、苯并噻吩基、嘌呤基、咔唑基、芴?；?fluorenonyl)、苯并咪唑基、二氫吲哚基等。在一些實(shí)施方案中，雜芳基具有1至約20個(gè)碳原子，在其它實(shí)施方案中為約3至約20個(gè)碳原子。在一些實(shí)施方案中，雜芳基包含3至約14個(gè)、4至約14個(gè)、3至約7個(gè)或5至6個(gè)成環(huán)原子。在一些實(shí)施方案中，雜芳基或雜芳族基團(tuán)具有1至約4個(gè)、1至約3個(gè)或1至2個(gè)雜原子。在一些實(shí)施方案中，雜芳基或雜芳族基團(tuán)具有1個(gè)雜原子。
本申請所使用的短語“保護(hù)基”指臨時(shí)的取代基，其保護(hù)具有潛在反應(yīng)性的官能團(tuán)，使之不會發(fā)生不期望的化學(xué)轉(zhuǎn)化。所述保護(hù)基的實(shí)例包括羧酸的酯、醇的甲硅烷基醚及醛和酮的相應(yīng)縮醛和縮酮。已經(jīng)對保護(hù)基化學(xué)領(lǐng)域進(jìn)行了綜述(Greene，T.W.；Wuts，P.G.M.Protective Groups in OrganicSynthesis，3rd ed.；WileyNew York，1999)。
本申請所使用的“可藥用”指這樣的化合物、物質(zhì)、組合物和/或劑型，它們在合理的醫(yī)藥判斷范圍內(nèi)適用于與人類組織和動物組織接觸，而沒有過度的毒性、刺激性、變態(tài)反應(yīng)或其它問題或并發(fā)癥，這與合理的利益/風(fēng)險(xiǎn)比相稱。
本申請所使用的“可藥用鹽”指所披露的化合物的衍生物，其中母體化合物通過制備其酸鹽或堿鹽來修飾?？伤幱名}的實(shí)例包括但不限于堿性殘基(例如胺)的無機(jī)酸鹽或有機(jī)酸鹽、酸性殘基(例如羧酸)的無機(jī)堿鹽或有機(jī)堿鹽等?？伤幱名}包括母體化合物的常規(guī)無毒性鹽或季銨鹽，其例如從無毒性無機(jī)酸或有機(jī)酸來制備。例如，所述常規(guī)無毒性鹽包括從無機(jī)酸(例如鹽酸)衍生的那些鹽。
本發(fā)明的可藥用鹽可通過常規(guī)的化學(xué)方法從包含堿性或酸性部分的母體化合物來合成。通常，這些鹽可通過以下方法來制備使游離酸形式或游離堿形式的這些化合物與化學(xué)計(jì)量的合適的堿或酸在水或有機(jī)溶劑或二者的混合物中反應(yīng)；通常使用非水介質(zhì)，如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈。
本申請所使用的“互變異構(gòu)體”指由于氫原子遷移而平衡存在的其它結(jié)構(gòu)異構(gòu)體，例如酮-烯醇互變，其中所得到的化合物具有酮和不飽和醇的性質(zhì)。
本申請所使用的“穩(wěn)定的化合物”和“穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)”指化合物足夠穩(wěn)定，從而經(jīng)受得住從反應(yīng)混合物分離至有用的純度和配制成有效的治療劑。
本發(fā)明的化合物還包括水合物和溶劑化物。
本發(fā)明還包括同位素標(biāo)記的本發(fā)明化合物?！巴凰貥?biāo)記”或“放射性標(biāo)記”的化合物是具有以下特征的本發(fā)明化合物其中一個(gè)或多個(gè)原子被原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)不同于自然界中常見原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)的(即天然存在的)原子代替或取代。可結(jié)合在本發(fā)明化合物中的合適放射性核素包括但不限于2H(也寫作D，表示氘)、3H(也寫作T，表示氚)、11C、13C、14C、13N、15N、15O、17O、18O、18F、35S、36Cl、82Br、75Br、76Br、77Br、123I、124I、125I和131I。結(jié)合在這些放射性標(biāo)記的化合物中的放射性核素取決于所述放射性標(biāo)記的化合物的具體應(yīng)用。例如，就體外受體標(biāo)記和競爭測定而言，結(jié)合有3H、14C、82Br、125I、131I或35S的化合物通常是最有用的。就放射性成像應(yīng)用而言，11C、18F、125I、123I、124I、131I、75Br、76Br或77Br通常是最有用的。
應(yīng)該理解的是，“放射性標(biāo)記的化合物”是結(jié)合有至少一個(gè)放射性核素的化合物。在一些實(shí)施方案中，放射性核素選自3H、14C、125I、35S和82Br。
本申請所定義的抗癡呆治療可應(yīng)用為單獨(dú)的療法，或者應(yīng)用為包括本發(fā)明化合物在內(nèi)的常規(guī)化學(xué)療法。這些化學(xué)療法包括一種或多種以下種類的藥劑乙酰膽堿酯酶抑制劑、抗炎劑、認(rèn)知和/或記憶增強(qiáng)劑或非典型抗精神病藥(atypical antipsychotic agent)。
這種聯(lián)合治療可通過各個(gè)治療成分的同時(shí)、依次或分開給予來進(jìn)行。這些組合產(chǎn)品使用本發(fā)明的化合物。
本發(fā)明的化合物可按以下方式來給予口服、腸胃外、口腔、陰道、直腸、吸入、吹入、舌下、肌內(nèi)、皮下、局部、鼻內(nèi)、腹膜內(nèi)、胸內(nèi)、靜脈內(nèi)、硬膜外、鞘內(nèi)、腦室內(nèi)和注射到關(guān)節(jié)中。
當(dāng)針對具體患者確定最合適的個(gè)體給藥方案和劑量水平時(shí)，劑量取決于給藥途徑、疾病的嚴(yán)重度、患者的年齡和體重及主治醫(yī)師所通常考慮的其它因素。
本發(fā)明化合物用于治療癡呆的有效量為足以對癥緩解溫血?jiǎng)游?特別是人)癡呆癥狀、減緩癡呆進(jìn)展或降低癡呆癥狀患者惡化危險(xiǎn)的量。
為了從本發(fā)明的化合物制備藥物組合物，惰性可藥用載體可以是固體或液體。固態(tài)制劑包括粉劑、片劑、可分散顆粒劑、膠囊劑、扁囊劑和栓劑。
固體載體可以是一種或多種物質(zhì)，其也可作為稀釋劑、矯味劑、增溶劑、潤滑劑、助懸劑、粘合劑或片劑崩解劑，其也可以是成囊材料。
在粉劑中，載體為微細(xì)粉碎的固體，其與微細(xì)粉碎的活性成分混合。在片劑中，活性成分與具有必要粘合性質(zhì)的載體按合適的比例混合，然后壓制成所期望的形狀和大小。
為了制備栓劑組合物，首先將低熔點(diǎn)蠟(例如脂肪酸甘油酯和可可脂的混合物)熔化，然后例如通過攪拌，將活性成分分散于其中。然后，將熔化的均質(zhì)混合物傾倒入合適尺寸的模具中，然后使其冷卻和固化。
合適的載體包括碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石、乳糖、蔗糖、果膠、糊精、淀粉、黃蓍膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、低熔點(diǎn)蠟、可可脂等。
在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供式I化合物或其可藥用鹽，其用于對哺乳動物(包括人)進(jìn)行治療性處置(包括預(yù)防性處置)，其通常按照標(biāo)準(zhǔn)的藥學(xué)實(shí)踐來配制成藥物組合物。
除本發(fā)明的化合物之外，本發(fā)明的藥物組合物也可包含一種或多種對一種或多種本申請所述病癥有治療價(jià)值的藥理成分，或與一種或多種對一種或多種本申請所述病癥有治療價(jià)值的藥理成分聯(lián)用(同時(shí)或依次給予)。
術(shù)語“組合物”意在包括活性成分或其可藥用鹽與可藥用載體的制劑。例如，本發(fā)明可通過本領(lǐng)域已知的方法來配制成以下形式例如片劑、膠囊劑、水性溶液劑或油性溶液劑、混懸劑、乳劑、膏劑、軟膏劑、凝膠劑、鼻噴霧劑、栓劑、用于吸入的微細(xì)粉碎的粉劑或氣霧劑或霧化劑及用于腸胃外使用(包括靜脈內(nèi)、肌內(nèi)或輸注)的無菌水性溶液劑或油性溶液劑或混懸劑或無菌乳劑。
液態(tài)組合物包括溶液劑、混懸劑和乳劑。作為適于腸胃外給藥的液體制劑的實(shí)例，可提及活性化合物的無菌水溶液或無菌水-丙二醇溶液。也可將液體組合物配制成水性聚乙二醇溶液?？诜o藥用的水性溶液劑可通過以下方法來制備將活性成分溶解在水中，并且根據(jù)需要來添加合適的著色劑、矯味劑、穩(wěn)定劑和增稠劑?？诜玫乃曰鞈覄┛赏ㄟ^以下方法來制備將微細(xì)粉碎的活性成分與粘性物質(zhì)(例如天然/合成樹膠、樹脂、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和制藥領(lǐng)域已知的其它助懸劑)一起分散在水中。
藥物組合物可以是單位劑型。就這種形式而言，將組合物分成含有適量活性成分的單位劑量。單位劑型可以是包裝制劑，所述包裝包含分開量的制劑，例如包裝在小瓶或安瓿中的片劑、膠囊劑和粉劑。單位劑型也可以是膠囊劑、扁囊劑或片劑本身，或可以是合適數(shù)目的任意這些包裝形式。
可將組合物配制，用于任何適當(dāng)?shù)慕o藥途徑和方法。可藥用載體或稀釋劑包括在適于以下給藥的制劑中所使用的那些物質(zhì)口服給藥、直腸給藥、鼻給藥、局部(包括口腔和舌下)給藥、陰道給藥或腸胃外(包括皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、皮內(nèi)、鞘內(nèi)和硬膜外)給藥。出于方便的原因，制劑可以是單位劑型，并且可通過藥學(xué)領(lǐng)域公知的任意方法來制備。
就固體組合物而言，可使用常規(guī)無毒性固體載體包括例如藥物級的甘露醇、乳糖、纖維素、纖維素衍生物、淀粉、硬脂酸鎂、糖精鈉、滑石、葡萄糖、蔗糖、碳酸鎂等?？捎糜诮o藥的液體組合物可例如通過以下方法來制備將以上所定義的活性化合物及任選的藥物輔料在載體(例如水、鹽水、葡萄糖水溶液、甘油、乙醇等)中溶解、分散等，由此形成溶液或混懸液。如果需要，待給藥的藥物組合物也可包含少量無毒性輔助物質(zhì)，例如潤濕劑或乳化劑、pH緩沖劑等，例如乙酸鈉、脫水山梨醇單月桂酸酯、三乙醇胺乙酸鈉、脫水山梨醇單月桂酸酯、油酸三乙醇胺等。制備這些劑型的實(shí)際方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，或?qū)τ诒绢I(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見的；例如參見Remington’s Pharmaceutical Sciences，Mack Publishing Company，Easton，Pennsylvania，15 th Edition，1975。
可按各種方法來對本發(fā)明的化合物進(jìn)行衍生。本申請所使用的化合物的“衍生物”包括鹽(例如可藥用鹽)、任意復(fù)合物(例如與環(huán)糊精等化合物形成的包合物(inclusion complex)或螯合物，或與例如Mn2+和Zn2+等金屬離子形成的配合物)、游離酸或游離堿、化合物的多晶型、溶劑化物(例如水合物)、前藥或脂質(zhì)體、偶聯(lián)伴侶(coupling partner)和保護(hù)基。例如，“前藥”指可在體內(nèi)轉(zhuǎn)化成生物活性化合物的任意化合物。
本發(fā)明化合物的鹽優(yōu)選為生理上充分耐受和無毒性的鹽。鹽的許多實(shí)例是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。所有這些鹽都在本發(fā)明的范圍內(nèi)，并且所涉及的化合物包括化合物的鹽形式。
在化合物包含胺官能團(tuán)的情況下，這些化合物可例如通過以下方法來形成季銨鹽按照技術(shù)人員公知的方法，使所述化合物與烷化劑反應(yīng)。這些季銨化合物在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
含有胺官能團(tuán)的化合物也可形成N-氧化物。本申請所涉及的含有胺官能團(tuán)的化合物也包括N-氧化物。
在化合物包含若干胺官能團(tuán)的情況下，可將一個(gè)或多個(gè)氮原子氧化形成N-氧化物。N-氧化物的具體實(shí)例為叔胺的N-氧化物或含氮雜環(huán)的氮原子的N-氧化物。
N-氧化物可通過以下方法來制備用氧化劑(例如過氧化氫或過酸(例如過氧羧酸))處理相應(yīng)的胺，參見例如Advanced Organic Chemistry，by JerryMarch，4th Edition，Wiley Interscience，pages。更具體地，可通過L.W.Deady(Syn.Comm.1977，7，509-514)的方法來制備N-氧化物，在所述方法中，使胺化合物與間氯過氧苯甲酸(MCPBA)例如在惰性溶劑(例如二氯甲烷)中反應(yīng)。
在化合物含有手性中心的情況下，化合物的各種光學(xué)形式(例如對映異構(gòu)體、差向異構(gòu)體和非對映異構(gòu)體及外消旋混合物)都在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
化合物可按多種不同的幾何異構(gòu)形式和互變異構(gòu)形式存在，并且所涉及的化合物包括所有這些形式。為了避免疑問，在化合物可按幾種幾何異構(gòu)形式或互變異構(gòu)形式之一存在并且只具體描述或顯示了一種形式的情況下，所有其它形式都仍然包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
化合物的給藥量隨所治療的患者而變化，并且化合物的給藥量為每天約100ng/kg體重至100mg/kg體重，優(yōu)選為每天10pg/kg至10mg/kg。例如，劑量可由本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本申請所公開的內(nèi)容和本領(lǐng)域的知識來容易地確定。因而，技術(shù)人員能夠容易地確定組合物中化合物和任選添加劑、媒介物和/或載體的量，也可容易地確定在本發(fā)明的方法中所給藥的量。
本發(fā)明的化合物已經(jīng)顯示出體外抑制β分泌酶(包括BACE)活性。已經(jīng)顯示的是，β分泌酶的抑制劑可用于阻斷Aβ肽的形成或積聚，因此在治療阿爾茨海默病和與Aβ肽水平提高和/或Aβ肽沉積相關(guān)的其它神經(jīng)變性疾病中具有有益的作用。因此，相信本發(fā)明的化合物可用于治療阿爾茨海默病和與癡呆相關(guān)的疾病。因此，預(yù)期本發(fā)明的化合物及其鹽具有對抗年齡相關(guān)疾病(例如阿爾茨海默病及其它Aβ相關(guān)病理，例如唐氏綜合征和β-淀粉樣血管病)的活性。預(yù)期本發(fā)明的化合物最有可能作為單一的藥物來使用，但也可與很多種認(rèn)知缺陷增強(qiáng)藥物聯(lián)用。
制備方法 本發(fā)明還涉及游離堿形式的式(I)化合物或其可藥用鹽的制備方法。在下面對這些方法的描述中，應(yīng)當(dāng)理解，適當(dāng)?shù)臅r(shí)候，可按照有機(jī)合成領(lǐng)域的普通技術(shù)人員容易理解的方式加入合適的保護(hù)基，并隨后從各反應(yīng)物和中間體中除去保護(hù)基。使用這些保護(hù)基的常規(guī)操作以及合適的保護(hù)基的實(shí)例描述在，例如“Protective Groups in Organic Synthesis”，T.W.Greene，P.G.M.Wutz，3rd Edition，Wiley-Interscience，New York，(1999)中。應(yīng)當(dāng)理解，微波可用于對反應(yīng)混合物進(jìn)行加熱。
中間體的制備 所述方法(其中除非另有說明，A、B、C、D、R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7如上文所定義)包括 (i)使式II的化合物重氮化以獲得式III的化合物，其中鹵素(halo)表示溴或氯。

反應(yīng)可通過以下方式進(jìn)行用亞硝酸處理適當(dāng)?shù)陌罚又纬傻闹氐f鹽用適當(dāng)?shù)柠u化亞銅(如溴化亞銅(I)或氯化亞銅(I))，或用銅和氫溴酸或鹽酸處理。反應(yīng)可在合適的溶劑(如水)中，在-20℃至回流之間的溫度進(jìn)行。
(ii)對式III的化合物(其中鹵素表示鹵素如溴或氯)進(jìn)行硼基化(borylation)，以獲得式IV的化合物，其中R8表示氫、烷基或芳基，或兩個(gè)R8可形成環(huán)狀硼酸酯。

反應(yīng)可通過以下方式進(jìn)行 a)反應(yīng)通過使用烷基鋰(如丁基鋰)或鎂，和合適的硼化合物(如硼酸三甲酯或硼酸三異丙酯)來進(jìn)行。反應(yīng)可在合適的溶劑(如四氫呋喃、己烷或二氯甲烷)中，在-78℃至+20℃之間的溫度進(jìn)行；或者 b)可以在含有或不含有合適配體(如三環(huán)己基膦或2-(二環(huán)己基膦基)聯(lián)苯)的合適鈀催化劑(如三(二亞芐基丙酮)二鈀(0)、[1，1’-二(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(II)、四(三苯基膦)鈀(0)、二苯基膦二茂鐵二氯化鈀或醋酸鈀)以及合適的堿(如叔胺(如三乙胺或二異丙基乙胺)或乙酸鉀)的存在下，使用合適的硼物質(zhì)(如4，4，4’，4’，5，5，5’，5’-八甲基-2，2’-聯(lián)-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷、二兒茶酚二硼烷(biscatecholatodiboron)或頻哪醇硼烷(pinacolborane))進(jìn)行反應(yīng)。反應(yīng)可在合適的溶劑(如二氧雜環(huán)己烷、甲苯、乙腈、水、乙醇或1，2-二甲氧基乙烷)或它們的混合物中，在20℃至+160℃之間的溫度進(jìn)行。
(iii)使式V的化合物(其中鹵素表示鹵素例如溴，R12為芳基或雜芳基)與式VI的化合物(其中R10為芳基或雜芳基)進(jìn)行反應(yīng)，以獲得式VII的化合物
反應(yīng)可通過以下方式進(jìn)行用烷基鋰(如丁基鋰)或鎂處理式V的化合物，接著加入式VI的化合物。反應(yīng)可在合適的溶劑(如乙醚或四氫呋喃)中，在-78℃至回流之間的溫度進(jìn)行。
(iv)使式VII的化合物反應(yīng)以獲得式VIII的化合物。

反應(yīng)可通過以下方式進(jìn)行使用適當(dāng)?shù)倪€原劑(如硼氫化鈉、氰基硼氫化鈉或氫化鋁鋰)進(jìn)行還原。反應(yīng)可在合適的溶劑(如甲醇、乙醇、乙醚或四氫呋喃)中，在-78℃至回流之間的溫度進(jìn)行。
(v)使式VIII的化合物反應(yīng)以獲得式IX的化合物。

反應(yīng)可通過以下方式進(jìn)行在存在或不存在合適的堿(如碳酸氫鈉)的情況下，用合適的硫代羰基轉(zhuǎn)移劑(thiocarbonyl transfer agent)(如硫代碳酸O，O-二(吡啶-2-基酯)或硫光氣)處理式VIII的化合物。反應(yīng)可在合適的溶劑(如二氯甲烷或氯仿)中，在-78℃至回流之間的溫度進(jìn)行。
(vi)使式IX的化合物反應(yīng)以獲得式X的化合物。

反應(yīng)可通過以下方式進(jìn)行用合適的堿(如叔丁醇鉀)在合適的溶劑(如四氫呋喃或乙醚)中，在-78℃至回流之間的溫度處理適當(dāng)?shù)漠惲蚯杷狨ズ投蚧肌?br> (vii)使式X的化合物反應(yīng)以獲得式XI的化合物。

反應(yīng)可通過以下方式進(jìn)行用適當(dāng)?shù)亩?如1，3-二氨基丙烷、乙二胺或如Tetrahedron 1994，50(29)，8617和1995，51(10)，2875中描述的二胺)處理式X的化合物。反應(yīng)可在合適的溶劑(如乙醇或甲醇)中，在0℃至回流之間的溫度進(jìn)行。
(viii)使式XI的化合物反應(yīng)以獲得式XII的化合物。

反應(yīng)可通過以下方式進(jìn)行用適當(dāng)?shù)难趸瘎?如叔丁基氫過氧化物)和氨水處理適當(dāng)?shù)牧蛲?如式XI的化合物)。反應(yīng)可在合適的溶劑(如甲醇)中，在0℃至回流之間的溫度進(jìn)行。
(ix)使式XIII的化合物(其中E為式I中的環(huán)B、C或苯基)反應(yīng)，以獲得式XIV的化合物。

反應(yīng)可通過以下方式進(jìn)行用合適的路易斯酸(Lewis acid)(如三溴化硼)在合適的溶劑(如二氯甲烷)中，在-78℃至回流之間的溫度處理所述甲醚。
(x)使式XIV的化合物(其中E為式I中的環(huán)B、C或苯基)反應(yīng)，以獲得式XV的化合物，其中R11為烷基。

反應(yīng)可通過以下方式進(jìn)行用合適的磺酰氯或酸酐(如甲磺酰氯、1-丙磺酰氯、環(huán)丙基磺酰氯或甲磺酸酐)在合適的堿(如三乙胺)的存在下處理適當(dāng)?shù)拇?。反?yīng)可在合適的溶劑(如二氯甲烷)中，在0℃至回流之間的溫度進(jìn)行。反應(yīng)可在合適的溶劑(如二氯甲烷)中，在0℃至回流之間的溫度進(jìn)行。
終產(chǎn)物的制備方法 本發(fā)明的另一目的是制備通式(I)的化合物及其鹽的方法，其中除非另有說明，A、B、C、D、R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7如上文中所定義。當(dāng)期望獲得酸加成鹽時(shí)，可用酸(如鹵化氫，如鹽酸)在合適的溶劑(如四氫呋喃、乙醚、甲醇、乙醇、氯仿或二氯甲烷或它們的混合物)中處理游離堿，反應(yīng)可在-30℃至+50℃之間發(fā)生。
(a)使式XIV的化合物(其中鹵素表示鹵素如溴)反應(yīng)獲得式I的化合物。

方法(a)的反應(yīng)可通過以下方式進(jìn)行使合適的化合物如式XVI的化合物與適當(dāng)?shù)氖絀V芳基硼酸或芳基硼酸酯(其中R8表示氫、烷基或芳基，或兩個(gè)R8可形成環(huán)狀硼酸酯)偶聯(lián)?？墒褂煤谢虿缓线m配體(如三苯基膦、三叔丁基膦或2-(二環(huán)己基膦基)聯(lián)苯)的合適鈀催化劑(如[1，1’-二(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(II)、四(三苯基膦)鈀(0)、二苯基膦二茂鐵二氯化鈀、醋酸鈀(II)或二(二亞芐基丙酮)鈀(0))進(jìn)行反應(yīng)，或使用鎳催化劑(如鎳/碳或1，2-二(二苯基膦基)乙烷二氯化鎳)以及鋅和三苯基膦三(間磺酸鈉)進(jìn)行反應(yīng)。在反應(yīng)中可使用合適的堿，如氟化銫、烷基胺(如三乙胺)，或堿金屬碳酸鹽或氫氧化物或堿土金屬碳酸鹽或氫氧化物(如碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸銫或氫氧化鈉)，反應(yīng)可在+20℃至+160℃之間的溫度，在合適的溶劑(如甲苯、四氫呋喃、二氧雜環(huán)己烷、二甲氧基乙烷、水、乙醇或N，N-二甲基甲酰胺或它們的混合物)中進(jìn)行。
一般方法 所用的原料是從商業(yè)來源得到的，或根據(jù)文獻(xiàn)操作制備的。
使用配備帶有Z梯度的4核探頭的Bruker DPX400NMR光譜儀，或配備帶有Z梯度的3mm流動注射SEI1H/D-13C探頭的Bruker av400 NMR光譜儀(使用BEST 215液體處理器用來注射試樣)在指定的氘代溶劑中記錄400MHz(質(zhì)子)的1H NMR光譜?；瘜W(xué)位移以ppm的形式給出。單峰、雙重峰、三重峰、四重峰、多重峰和寬峰的共振多樣性(Resonance multiplicities)分別表示為s、d、t、q、m和br。
在由Waters Alliance 2795 HPLC、Waters PDA 2996二極管陣列檢測器、Sedex 75 ELS檢測器和ZMD單四極質(zhì)譜儀組成的LC-MS系統(tǒng)上進(jìn)行LC-MS分析。質(zhì)譜儀配備有以正離子模式或負(fù)離子模式操作的電噴霧離子源(ES)。毛細(xì)管電壓和錐電壓分別設(shè)定為3.2kV和30V。質(zhì)譜儀在m/z100-600之間掃描，掃描時(shí)間為0.7s。二極管陣列檢測器在200-400nm之間掃描。將ELS檢測器的溫度調(diào)節(jié)到40℃，以及將壓力設(shè)為1.9巴。對于分離，應(yīng)用線性梯度，起始于100％A(A10mM乙酸銨/5％乙腈)，終止于100％B(B乙腈)。所使用的柱是X-Terra MS C8，3.0×50mm，3.5μm(Waters)，以1.0mL/min的流速運(yùn)行。柱溫箱(oven)溫度設(shè)定為40℃，或 在由Waters Alliance 2795HPLC、Waters PDA 2996二極管陣列檢測器、Sedex75ELS檢測器和ZQ單四極質(zhì)譜儀組成的LC-MS系統(tǒng)上進(jìn)行LC-MS分析。質(zhì)譜儀配備有以正離子模式或負(fù)離子模式操作的電噴霧離子源(ES)。毛細(xì)管電壓和錐電壓分別設(shè)定為3.2kV和30V。質(zhì)譜儀在m/z100-700之間掃描，掃描時(shí)間為0.3s。二極管陣列檢測器在200-400nm之間掃描。將ELS檢測器的溫度調(diào)節(jié)到40℃，以及將壓力設(shè)為1.9巴。在X-Terra MS C8，3.0×50mm，3.5μm(Waters)上，以1mL/min的流速進(jìn)行分離。應(yīng)用線性梯度，起始于100％A(A10mM乙酸銨/5％乙腈，或8mM甲酸/5％乙腈)，終止于100％B(B乙腈)。柱溫箱溫度設(shè)定為40℃，或 在由Waters Alliance 2795 HPLC、Waters PDA 2996二極管陣列檢測器、Sedex 85 ELS檢測器和ZQ單四極質(zhì)譜儀組成的LC-MS系統(tǒng)上進(jìn)行LC-MS分析。質(zhì)譜儀配備有以正離子模式或負(fù)離子模式操作的電噴霧離子源(ES)。毛細(xì)管電壓和錐電壓分別設(shè)定為3.2kV和30V。質(zhì)譜儀在m/z 100-700之間掃描，掃描時(shí)間為0.3s。二極管陣列檢測器在200-400nm之間掃描。將ELS檢測器的溫度調(diào)節(jié)到40℃，以及將壓力設(shè)為1.9巴。在X-Terra MS C8，3.0×50mm，3.5μm(Waters)上，以1mL/min的流速進(jìn)行分離。應(yīng)用線性梯度，起始于100％A(A10mM乙酸銨/5％乙腈，或8mM甲酸/5％乙腈)，終止于100％B(B乙腈)。柱溫箱溫度設(shè)定為40℃，或 在配備有PDA(Waters2996)和Waters ZQ質(zhì)譜儀的Water Acquity系統(tǒng)上進(jìn)行LC-MS分析。柱Acquity UPLCTM BEH C8 1.7μm 2.1 x 50mm。柱溫設(shè)定為65℃。對于LC分離，應(yīng)用線性2分鐘梯度，從100％A(A95％(0.01M乙酸銨/MilliQ Water)和5％乙腈)至100％B(5％(0.01M乙酸銨/MilliQWater)和95％乙腈)，以1.2mL/min的流速運(yùn)行。PDA在210-350nm之間掃描，并提取254nm處的試樣用于純度測定。ZQ質(zhì)譜儀用正/負(fù)切換模式的ES運(yùn)行。毛細(xì)管電壓為3kV，錐電壓為30V，或 在由Waters試樣處理器2777C、Waters 1525μ二元泵、Waters 1500柱溫箱、Waters ZQ單四極質(zhì)譜儀、Waters PDA2996二極管陣列檢測器和Sedex85ELS檢測器組成的LC-MS上進(jìn)行LC-MS分析。質(zhì)譜儀配備有以正離子模式或負(fù)離子模式操作的電噴霧離子源(ES)。質(zhì)譜儀在m/z 100-700之間掃描，掃描時(shí)間為0.3s。毛細(xì)管電壓和錐電壓分別設(shè)定為3.4kV和30V。二極管陣列檢測器在200-400nm之間掃描。將ELS檢測器的溫度調(diào)節(jié)到40℃，以及將壓力設(shè)為1.9巴。對于分離，應(yīng)用線性梯度進(jìn)行分離，起始于100％A(A10mM乙酸銨/5％乙腈，或8mM甲酸/5％乙腈)，終止于100％B(B乙腈)。所使用的柱為Gemini C18，3.0mm x 50mm，3μm，(Phenomenex)，以1ml/min的流速運(yùn)行。柱溫箱溫度設(shè)定為40℃，或 在由Waters試樣處理器2777C、Waters 1525μ二元泵、Waters 1500柱溫箱、Waters ZQ單四極質(zhì)譜儀、Waters PDA2996二極管陣列檢測器和Sedex85ELS檢測器組成的LC-MS上進(jìn)行LC-MS分析。質(zhì)譜儀配備有大氣壓化學(xué)電離(APCI)離子源，所述離子源還配備有大氣壓光電離(APPI)裝置。質(zhì)譜儀以正離子模式(在APCI和APPI之間切換)掃描。質(zhì)量范圍設(shè)定為m/z120-800，使用0.3s的掃描時(shí)間。APPI反射器(repeller)和APCI電暈(corona)分別設(shè)定為0.86kV和0.80μA。此外，去溶劑化溫度(300℃)、去溶劑化氣體(400L/Hr)和錐氣體(5L/Hr)對于APCI和APPI模式都是一致的。使用Gemini柱C18，3.0mm x 50mm，3μm，(Phenomenex)進(jìn)行分離，并以1ml/min的流速運(yùn)行。使用線性梯度，起始于100％A(A10mM乙酸銨/5％甲醇)，終止于100％B(甲醇)。柱溫箱溫度設(shè)定為40℃，或 在由Alliance 2690 Separations Module、Waters 2487 Dual 1吸收檢測器(220和254nm)和Waters ZQ單四極質(zhì)譜儀組成的Waters LC-MS上進(jìn)行LC-MS分析。質(zhì)譜儀配備有以正離子模式或負(fù)離子模式操作的電噴霧離子源(ESI)。毛細(xì)管電壓為3kV，錐電壓為30V。質(zhì)譜儀在m/z97-800之間掃描，掃描時(shí)間為0.3s或0.8s。在Chromolith Performance RP-18e(100 x 4.6mm)上進(jìn)行分離。應(yīng)用線性梯度，起始于95％A(A0.1％甲酸(水溶液))，并且5分鐘后終止于100％B(乙腈)。流速2.0mL/min。
GC-MS在由Agilent Technologies提供的GC-MS系統(tǒng)(GC 6890，5973NMSD)上進(jìn)行化合物鑒定。所使用的柱是VF-5MS，ID 0.25mm×30m，0.25μm(Varian Inc.)。應(yīng)用線性溫度梯度，起始于40℃(保持1分鐘)并且終止于300℃(保持1分鐘)，25℃/分鐘。質(zhì)譜儀配備有化學(xué)電離(CI)離子源，以及反應(yīng)物氣體是甲烷。質(zhì)譜儀配備有電子轟擊(EI)離子源，并且電子電壓設(shè)為70eV。質(zhì)譜儀在m/z50-500之間掃描，并且掃描速度設(shè)為3.25掃描/秒，或 在由Agilent Technologies提供的GC-MS系統(tǒng)(GC 6890，5973N MSD)上進(jìn)行化合物鑒定。質(zhì)譜儀配備有SIM GmbH制造的直接進(jìn)樣探頭(DirectInlet Probe，DIP)接口。質(zhì)譜儀配備有化學(xué)電離(CI)離子源，以及反應(yīng)物氣體是甲烷。質(zhì)譜儀配備有電子轟擊(EI)離子源，并且電子電壓設(shè)為70eV。質(zhì)譜儀在m/z50-500之間掃描，并且掃描速度設(shè)為3.25掃描/秒。應(yīng)用線性溫度梯度，起始于40℃(保持1分鐘)并且終止于300℃(保持1分鐘)，25℃/分鐘。所使用的柱是VF-5MS，ID 0.25mm x 30m，0.25μm(Varian Inc.)。
制備性HPLC在具有二極管陣列檢測器的Waters自動純化HPLC上進(jìn)行制備性色譜。柱XTerra MS C8，19 x 300mm，10μm。使用乙腈/在MilliQWater中的0.1M乙酸銨的5％乙腈溶液的梯度。流速20mL/min?？晒┻x擇地，在半制備性Shimadzu LC-8A HPLC上進(jìn)行純化，其具有配備有Waters

柱(C18，5μm，100mm×19mm)的Shimadzu SPD-10A UV-可見光檢測器。使用乙腈/在MilliQ Water中的0.1％三氟乙酸的梯度。流速10ml/min?？晒┻x擇地，使用另一種柱即Atlantis C18 19 x 100mm，5μm色譜柱。使用乙腈/在MilliQ Water中的0.1M乙酸銨的5％乙腈溶液的梯度。流速15mL/min，或 在配有自動進(jìn)樣器以及自動化餾分收集器(Waters 2767)、梯度泵(Waters2525)、再生泵(Waters 600)、補(bǔ)充泵(Waters 515)、Waters Active Splitter、柱切換(Waters CFO)、PDA(Waters 2996)和Waters ZQ質(zhì)譜儀的WatersFractionLynx系統(tǒng)上進(jìn)行制備性HPLC。柱XBridgeTM Prep C8 5μm OBDTM19 x 100mm，具有保護(hù)柱

Prep MS C8 10μm 19 x 10mm柱體。對于LC分離，應(yīng)用從100％A(含有95％(0.1M乙酸銨的MilliQ Water)和5％乙腈)至100％B(100％乙腈)的梯度，流速為25mL/min。PDA在210-350nm之間掃描。ZQ質(zhì)譜儀使用正離子模式的ES運(yùn)行。毛細(xì)管電壓為3kV，以及錐電壓為30V。由混合觸發(fā)即UV和MS信號確定餾分收集。
在Creator或Initiaror或Smith合成儀單模式微波腔中進(jìn)行微波加熱，在2450MHz產(chǎn)生連續(xù)輻射。
在Merch TLC-板(硅膠60F254)上進(jìn)行薄層色譜(TLC)，斑點(diǎn)由UV顯現(xiàn)。在Combi

CompanionTM上進(jìn)行柱色譜，使用RediSepTM正相快速柱或使用Merck硅膠60(0.040-0.063mm)。
使用軟件ACD/Name，8.0或9.0版本(Advanced Chemistry Development，Inc.(ACD/Labs)，Toronto ON，Canada，www.acdlabs.com，2004)對化合物進(jìn)行命名。
實(shí)施例 接下來為本發(fā)明化合物的多個(gè)非限制性實(shí)施例。
實(shí)施例1 4-溴-1-氟-2-甲氧基苯
將氫溴酸水溶液(48％，2.41mL)加到4-氟-3-甲氧基苯胺(1.0g，7.1mmol)于水(10mL)中的溶液中，然后將得到的混合物在冰浴中冷卻至0℃。歷時(shí)15分鐘滴加亞硝酸鈉(538mg，7.8mmol)于水(5mL)中的溶液，同時(shí)維持溫度在0至5℃之間。將得到的重氮鎓鹽溶液加到預(yù)加熱至75℃的溴化亞銅(I)(1.12g，7.8mmol)于水(5mL)中的混懸液中。充分搖動混合物，加入氫溴酸水溶液(48％，12.07mL)，然后將溶液在環(huán)境溫度攪拌16h。加入過量的水，產(chǎn)物用乙醚萃取，合并的有機(jī)萃取液用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，然后真空蒸發(fā)溶劑，得到1.02g(70％收率)標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ 7.36(dd，J＝7.78，2.26Hz，1H)，7.23-7.17(m，1H)，7.14-7.09(m，1H)，3.86(s，H)；MS(EI)m/z 204，206[M+1]。
實(shí)施例2 2-(4-氟-3-甲氧基苯基)-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷
將無水1，2-二甲氧基乙烷(12mL)加到4-溴-1-氟-2-甲氧基苯(1.02g，5.0mmol)、三(二亞芐基丙酮)二鈀(0)(228mg，0.25mmol)、三環(huán)己基膦(209mg，0.75mmol)、乙酸鉀(732mg，7.5mmol)和4，4，4’，4’，5，5，5’，5’-八甲基-2，2’-聯(lián)-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷(1.14g，4.5mmol)中，然后將得到的混合物在微波中在150℃照射1h。當(dāng)冷卻至環(huán)境溫度時(shí)，將混合物過濾，然后真空蒸發(fā)溶劑，得到粗產(chǎn)物MS(EI)m/z 252[M+1]。
實(shí)施例3 3-甲氧基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)苯酚
標(biāo)題化合物是如實(shí)施例2中所述，從3-氯-5-甲氧基苯酚開始合成的，48％的收率。經(jīng)柱色譜(使用二氯甲烷/乙腈(100/0至90/10)的梯度作為洗脫劑)進(jìn)行純化1H-NMR(DMSO-d6)δ 9.36(s，1H)，6.69(d，J＝2.3Hz，1H)，6.61(d，J＝2.0Hz，1H)，6.41(t，J＝2.4Hz，1H)，3.69(s，3H)，1.27(s，12H)；MS(ES)m/z251[M+1]+。
實(shí)施例4 甲磺酸3-甲氧基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)苯酯
在0℃在氬氣氣氛下向攪拌的3-甲氧基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)苯酚(0.12g，0.48mmol)于二氯甲烷(3mL)中的溶液中加入三乙胺(0.058g，0.58mmol)，接著加入甲磺酰氯(0.071g，0.62mmol)。使反應(yīng)混合物達(dá)到環(huán)境溫度并攪拌18h，然后將得到的混合物真空濃縮至干。經(jīng)柱色譜(使用二氯甲烷/乙腈(100/0至90/10)的梯度作為洗脫劑)進(jìn)行純化，得到0.050g(32％收率)標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ 7.30(d，J＝2.3Hz，1H)，7.28(d，J＝2.0Hz，1H)，6.96(t，J＝2.4Hz，1H)，3.86(s，3H)，3.16(s，3H)，1.35(s，12H)；MS(ES)m/z 329[M+1]+。
實(shí)施例5 3-氯-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)苯酚
3-溴-5-氯苯酚(5g，19.9mmol，描述于Maleczka R.E.et.al.J.Am.Chem.Soc.2003，125，7792-7793中)、4，4，4’，4’，5，5，5’，5’-八甲基-2，2’-聯(lián)-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷(6.06g，23.9mmol)、[1，1’-二(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(II)二氯甲烷加合物(487mg，0.6mmol)、乙酸鉀(5.86g，59.7mmol)、1，2-二甲氧基乙烷(60mL)和水(4mL)分裝入四個(gè)微波小瓶中，然后各自在微波中在150℃照射15分鐘。當(dāng)冷卻至環(huán)境溫度時(shí)，合并混合物，用鹽水稀釋，然后用乙醚萃取。合并的有機(jī)相經(jīng)硫酸鈉干燥，然后真空濃縮。經(jīng)柱色譜(使用0-5％乙腈/二氯甲烷的梯度作為洗脫劑)進(jìn)行純化，得到1.43g(28％收率)標(biāo)題化合物1H NMR(DMSO-d6)δ 9.89(s，1H)，7.02(s，2H)，6.91(s，1H)，1.28(s，12H)；MS(ES)m/z 253[M-H]-。
實(shí)施例6 甲磺酸3-氯-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)苯酯
在0℃將甲磺酰氯(122μL，0.79mmol)滴加到3-氯-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)苯酚(200mg，0.79mmol)和三乙胺(0.4mL，3.14mmol)于無水二氯甲烷(1.5mL)中的混合物中。反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度攪拌1h，用二氯甲烷(10mL)稀釋，用水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥然后真空濃縮得到0.200g(86％收率)粗制的標(biāo)題化合物1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.75(d，J＝1.52Hz，2H)，7.57(d，J＝1.77Hz，2H)，7.41(t，J＝2.15Hz，1H)，3.18(s，3H)，1.35(s，12H)；MS(EI)m/z 332[M+1]。
實(shí)施例7 2-(3-氯-5-甲氧基苯基)-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷
將3-氯-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)苯酚(200mg，0.79mmol)于四氫呋喃(無水，1.5mL)中的溶液滴加到氫化鈉于四氫呋喃(無水，0.5mL)中的漿液中。將混合物攪拌10分鐘，然后加入碘甲烷(147μL，2.36mmol)。將獲得的混合物攪拌過夜。加入飽和氯化銨水溶液(1mL)，產(chǎn)物用二氯甲烷(20mL)萃取。有機(jī)層用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥然后真空濃縮得到0.170g(90％收率)粗制的標(biāo)題化合物1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.38(d，J＝1.26Hz，1H)，7.20(d，J＝2.02Hz，1H)，7.02-6.98(m，1H)，3.83(s，3H)，1.35(s，12H)；MS(EI)m/z 268[M+1]。
實(shí)施例8 1-(3-溴苯基)-1-吡啶-4-基甲胺
在氬氣氣氛下將丁基鋰(2.5M的己烷溶液，10.20mL，25.40mmol)加到冷卻的(-78℃)1，3-二溴苯(6g，25.40mmol)于無水乙醚(60mL)中的溶液中。將獲得的混合物在-78℃攪拌1h。加入4-氰基吡啶(2.64g，25.40mmol)于無水乙醚(45mL)中的溶液，然后在-78℃繼續(xù)攪拌20分鐘。使反應(yīng)混合物達(dá)到環(huán)境溫度，加入無水甲醇(30mL)，然后將得到的混合物再攪拌45分鐘。將溶液冷卻至0℃，加入硼氫化鈉(1.3g，34.0mmol)，然后將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度攪拌過夜。小心加入飽和氯化銨水溶液(40mL)，然后將混合物濃縮。水相用二氯甲烷(40mL)萃取兩次，有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉干燥并真空濃縮，產(chǎn)物經(jīng)柱色譜(使用氯仿甲醇0-10％的梯度作為洗脫劑)進(jìn)行純化，得到4.22g(63％收率)標(biāo)題化合物1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.56(dd，J＝4.55，1.52Hz，2H)，7.54(t，J＝1.77Hz，1H)，7.40(dt，J＝7.83，1.52Hz，1H)，7.33-7.24(m，3H)，7.20(t，J＝7.83Hz，1H)，5.15(s，1H)，1.78(br s，2H)；MS(ES)m/z 264，266[M+1]+。
實(shí)施例9 4-[(3-溴苯基)(異硫氰基)甲基]吡啶
將硫代碳酸O，O-二(吡啶-2-基酯)(183mg，0.79mmol；描述于Kim S.et al.Tetrahedron Lett.1985，26(13)，1661-1664中)一次性加到1-(3-溴苯基)-1-吡啶-4-基甲胺(100mg，0.38mmol)于二氯甲烷(2mL)中的溶液中。將混合物攪拌30分鐘，然后用二氯甲烷(15mL)稀釋，用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并真空濃縮得到0.100g(86％收率)粗產(chǎn)物MS(ES)m/z 305，307[M+1]+。
實(shí)施例10 4-(3-溴-苯基)-4-吡啶-4-基-噻唑烷-2，5-二硫酮
在-78℃將4-[(3-溴苯基)(異硫氰基)甲基]吡啶(4.63g，15.19mmol)和二硫化碳(1.82mL，30.38mmol)于無水四氫呋喃(30mL)中的溶液滴加到攪拌的叔丁醇鉀(2.56g，22.79mmol)于無水四氫呋喃(60mL)中的溶液中。使混合物達(dá)到環(huán)境溫度，同時(shí)攪拌過夜。蒸發(fā)溶劑，然后將殘余物溶于乙酸乙酯(100mL)中，用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并真空濃縮。經(jīng)柱色譜(使用氯仿甲醇0-10％的梯度作為洗脫劑)進(jìn)行純化，得到4.95g(85％收率)標(biāo)題化合物MS(ES)m/z382，383[M+1]+。
實(shí)施例11 8-(3-溴苯基)-8-(吡啶-4-基)-3，4，7，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6(2H)-硫酮
將4-(3-溴-苯基)-4-吡啶-4-基-噻唑烷-2，5-二硫酮(1.99g，5.22mmol)和1，3-二氨基丙烷(1.31mL，15.66mmol)于乙醇(40mL)中的混合物在70℃加熱過夜。將混合物冷卻至環(huán)境溫度并真空濃縮。將殘余物溶于二氯甲烷(40mL)中，用水和鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并真空濃縮。經(jīng)柱色譜(使用氯仿甲醇0-10％的梯度作為洗脫劑)進(jìn)行純化，得到1.59g(79％收率)標(biāo)題化合物1HNMR(400MHz，CDCl3)δ 8.89(s，1H)，8.64(dd，J＝4.55，1.77Hz，2H)，7.58-7.50(m，2H)，7.38-7.31(m，3H)，7.29-7.25(m，1H)，3.92(t，J＝6.06Hz，2H)，3.65(q，J＝5.64Hz，2H)，2.01-1.90(m，2H)；MS(ES)m/z 387，389[M+1]+。
實(shí)施例12 8-(3-溴-苯基)-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫-咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺
將8-(3-溴苯基)-8-(吡啶-4-基)-3，4，7，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6(2H)-硫酮(2.60g，6.7mmol)溶于甲醇(90mL)中。加入叔丁基氫過氧化物水溶液(70％，15mL，100.50mmol)和氨水(30％，30mL)，然后將得到的混合物在環(huán)境溫度攪拌過夜。濃縮混合物，將殘余物溶于二氯甲烷(90mL)，用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并真空濃縮。經(jīng)柱色譜(使用氯仿(0.5％7M氨的甲醇溶液)甲醇0-10％的梯度作為洗脫劑)進(jìn)行純化，得到1.97g(80％收率)標(biāo)題化合物1HNMR(400MHz，CDCl3)δ 8.52(d，J＝6.06Hz，2H)，7.66(t，J＝1.77Hz，1H)，7.46-7.36(m，4H)，7.16(t，J＝7.96Hz，1H)，3.72(t，J＝5.94Hz，2H)，3.61(ddd，J＝5.43，2.65，2.53Hz，2H)，1.92-1.82(m，2H)；MS(ES)m/z 370，372[M+1]+。
實(shí)施例13 3’-(6-氨基-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-8-基)-聯(lián)苯-3-甲腈鹽酸鹽
將8-(3-溴-苯基)-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫-咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺(50mg，135μmol)、(3-氰基苯基)硼酸(26mg，176μmol)、[1，1’-二(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(II)二氯甲烷加合物(11mg，14μmol)和碳酸銫(132mg，370μmol)于1，2-二甲氧基乙烷:水:乙醇(6:3:1，3mL)中的混合物在微波中在130℃照射15分鐘。當(dāng)冷卻至環(huán)境溫度時(shí)，混合物用水稀釋(3mL)，然后用二氯甲烷(20mL)萃取。有機(jī)萃取液經(jīng)硫酸鈉干燥，真空濃縮，然后經(jīng)制備性HPLC純化，得到乙酸鹽形式的標(biāo)題化合物，將其溶于無水甲醇中，然后用鹽酸(1mL，1M的乙醚溶液)處理。真空蒸發(fā)溶劑得到25.6mg(45％收率)標(biāo)題化合物1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.51(dd，J＝4.55，1.52Hz，2H)，7.87-7.67(m，1H)，7.61-7.55(m，2H)，7.51-7.40(m，7H)，3.65-3.57(m，4H)，1.92-1.83(m，2H)；MS(ES)m/z 393[M+1]+。
方法A 將8-(3-溴-苯基)-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫-咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺(50mg，135μmol)、相應(yīng)的硼酸或硼酸酯(176μmol)、[1，1’-二(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(II)二氯甲烷加合物(11mg，14μmol)和碳酸銫(132mg，370μmol)于1，2-二甲氧基乙烷:水:乙醇(6:3:1，3mL)中的混合物在微波中在130℃照射15分鐘。當(dāng)冷卻至環(huán)境溫度時(shí)，將混合物過濾，然后真空除去溶劑。將殘余物溶于二甲基亞砜(800μL)中，產(chǎn)物使用制備性HPLC進(jìn)行純化。
方法B 將8-(3-溴-苯基)-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫-咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺(100mg，280μmol)、相應(yīng)的硼酸酯(352μmol)、[1，1’-二(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(II)二氯甲烷加合物(22mg，28μmol)和碳酸鉀(224mg，1.62mmol)于四氫呋喃(無水，6mL)中的混合物在微波中在130℃照射2h。當(dāng)冷卻至環(huán)境溫度時(shí)，加入二甲基亞砜(1mL)。將溶液真空濃縮，除去四氫呋喃，產(chǎn)物使用制備性HPLC進(jìn)行純化。
實(shí)施例14-37 如下表所示，實(shí)施例14-37是如方法A或方法B中所述合成的，收率是類似的。






實(shí)施例38 1-(3-溴苯基)-1-(呋喃-3-基)甲胺
將1，3-二溴苯(1.314mL，10.86mmol)溶于無水乙醚(25mL)中，然后冷卻至-78℃。滴加正丁基鋰(4.53mL，10.86mmol，2.5M的己烷溶液)，然后將混合物攪拌30分鐘。加入呋喃-3-甲腈(3-furonitrile)(1.0g，10.86mmol)于無水乙醚(10mL)中的溶液，然后歷時(shí)2h將混合物緩慢溫?zé)嶂?℃。加入無水甲醇(30mL)，在0℃保持30分鐘后加入硼氫化鈉(0.83g，21.7mmol)。將混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。加入飽和氯化銨水溶液，然后將混合物用二氯甲烷萃取。合并有機(jī)相，經(jīng)硫酸鎂干燥并濃縮。柱色譜(使用從二氯甲烷至二氯甲烷甲醇99∶1的梯度洗脫)得到0.55g(20％收率)標(biāo)題化合物1H NMR(DMSO-d6)δ7.59(t，J＝1.76Hz，1H)，7.53(t，J＝1.76Hz，1H)，7.48-7.46(m，1H)，7.40-7.36(m，2H)，7.26(t，J＝7.78Hz，1H)，6.37-6.36(m，1H)，4.95(s，1H)，2.24(br s，2H)。
實(shí)施例39 3-[(3-溴苯基)(異硫氰基)甲基]呋喃
在0℃將硫光氣(0.20mL，2.6mmol)分批加到攪拌的1-(3-溴苯基)-1-(呋喃-3-基)甲胺(0.55g，2.18mmol)和飽和碳酸氫鈉水溶液(20mL)于二氯甲烷(20mL)中的溶液中。將混合物在0℃攪拌1h，然后在室溫?cái)嚢?0分鐘并收集有機(jī)相。水相用二氯甲烷萃取，合并有機(jī)相，用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并濃縮得到0.65g(定量收率)標(biāo)題化合物1H NMR(DMSO-d6)δ7.74-7.72(m，1H)，7.69(t，J＝1.76Hz，1H)，7.61-7.56(m，2H)，7.45-7.40(m，2H)，6.53-6.52(m，1H)，6.45(s，1H)。
實(shí)施例40 4-(3-溴苯基)-4-(呋喃-3-基)-1，3-噻唑烷-2，5-二硫酮
在-78℃將3-[(3-溴苯基)(異硫氰基)甲基]呋喃(0.64g，2.18mmol)和二硫化碳(0.26mL，4.36mmol)于無水四氫呋喃(15mL)中的溶液滴加到攪拌的叔丁醇鉀(0.42g，3.7mmol)于無水四氫呋喃(8mL)中的混合物中。加入后，使混合物達(dá)到室溫并過夜。加入水、鹽水和乙酸乙酯，然后收集有機(jī)相。水相用乙酸乙酯萃取，合并有機(jī)萃取液，用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并蒸發(fā)，得到0.74g(91％)標(biāo)題化合物1H NMR(DMSO-d6)δ 7.75-7.71(m，1H)，7.69-7.64(m，1H)，7.59-7.54(m，1H)，7.40-7.30(m，3H)，6.50-6.47(m，1H)。
實(shí)施例41 8-(3-溴苯基)-8-(呋喃-3-基)-3，4，7，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6(2H)-硫酮
將4-(3-溴苯基)-4-(呋喃-3-基)-1，3-噻唑烷-2，5-二硫酮(0.81g，2.18mmol)和1，3-二氨基丙烷(0.50g，6.54mmol)在乙醇(20mL)中加熱至70℃，持續(xù)1.5h。將混合物冷卻至室溫并濃縮，殘余物用乙酸乙酯稀釋，然后用飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌。合并有機(jī)萃取液，經(jīng)硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。經(jīng)柱色譜(使用0-35％的乙酸乙酯/正庚烷洗脫)得到0.50g(61％收率)標(biāo)題化合物1HNMR(DMSO-d6)δ 10.75(s，1H)，7.67(t，J＝1.76Hz，1H)，7.63-7.61(m，1H)，7.55-7.52(m，2H)，7.44-7.41(m，1H)，7.38-7.34(m，1H)，6.45-6.43(m，1H)，3.74-3.66(m，2H)，3.50-3.37(m，2H)，1.82-1.69(m，2H)；MS(ES)m/z 376，378[M+1]+。
實(shí)施例42 8-(3-溴苯基)-8-(呋喃-3-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺
將8-(3-溴苯基)-8-(呋喃-3-基)-3，4，7，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6(2H)-硫酮(0.50g，1.33mmol)溶于甲醇(12mL)和氨水(25％，4mL)中。加入叔丁基氫過氧化物(2.7mL，70％的水溶液，20mmol)，然后將混合物在30℃加熱過夜。蒸發(fā)大部分甲醇，加入水，然后將混合物用乙酸乙酯萃取。合并有機(jī)萃取液，用水、鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。經(jīng)柱色譜(使用0-6％[氨的甲醇溶液(7N)]/二氯甲烷洗脫)對粗產(chǎn)物進(jìn)行純化，得到0.38g(79％)標(biāo)題產(chǎn)物1H NMR(DMSO-d6)δ 7.68(t，J＝1.88Hz，1H)，7.57-7.54(m，1H)，7.51(t，J＝1.76Hz，1H)，7.46-7.44(m，1H)，7.39-7.36(m，1H)，7.25-7.21(m，1H)，6.34-6.33(m，1H)，6.26(br s，2H)，3.53-3.48(m，2H)，3.38-3.35(m，2H)，1.71-1.61(m，2H)；MS(ES)m/z 359，361[M+1]+。
實(shí)施例43 8-(3’，5’-二氯聯(lián)苯-3-基)-8-(呋喃-3-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺乙酸鹽
將8-(3-溴苯基)-8-(呋喃-3-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺(70mg，0.19mmol)、[1，1’-二(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(II)二氯甲烷加合物(8mg，0.01mmol)、碳酸銫(186mg，0.57mmol)和(3，5-二氯苯基)硼酸(42mg，0.22mmol)溶于二甲氧基乙烷:乙醇:水(6:3:1)(4mL)中，然后在微波中在130℃加熱20分鐘。當(dāng)冷卻至環(huán)境溫度時(shí)，將混合物過濾，然后經(jīng)制備性HPLC純化，得到28mg(30％收率)標(biāo)題化合物1H NMR(DMSO-d6)δ 7.82(t，J＝1.76Hz，1H)，7.68-7.65(m，1H)，7.61-7.59(m，1H)，7.58-7.54(m，3H)，7.52-7.50(m，1H)，7.49-7.48(m，1H)，7.41-7.37(m，1H)，6.40-6.38(m，1H)，3.55-3.50(m，4H)，1.89(s，3H)，1.71-1.62(m，2H)；MS(ES)m/z 423，425[M-1]-。
實(shí)施例44 8-[3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-8-(呋喃-3-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺乙酸鹽
標(biāo)題化合物是如實(shí)施例43所述，從8-(3-溴苯基)-8-(呋喃-3-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺和(2-氟吡啶-3-基)硼酸開始合成的，71％的收率1H NMR(DMSO-d6)δ 8.25-8.22(m，1H)，8.04-7.98(m，1H)，7.79-7.76(m，1H)，7.66-7.61(m，1H)，7.52(t，J＝1.76Hz，1H)，7.49-7.39(m，4H)，6.42-6.39(m，1H)，3.54-3.52(m，4H)，1.89(s，3H)，1.72-1.63(m，2H)；MS(ESI)m/z 374[M-1]-。
實(shí)施例45 1-(3-溴苯基)-1-(呋喃-2-基)甲胺
標(biāo)題化合物是如實(shí)施例38所述，從呋喃-2-甲腈開始合成的，47％的收率1H NMR(DMSO-d6)δ 7.57(t，J＝1.76Hz，1H)，7.52-7.50(m，1H)，7.44-7.40(m，1H)，7.37-7.33(m，1H)，7.29-7.25(m，1H)，6.38-6.35(m，1H)，6.23-6.21(m，1H)，5.04(s，1H)，2.34(br s，2H)。
實(shí)施例46 2-[(3-溴苯基)(異硫氰基)甲基]呋喃
標(biāo)題化合物是如實(shí)施例39中所述，從1-(3-溴苯基)-1-(呋喃-2-基)甲胺開始合成的，收率是定量1H NMR(DMSO-d6)δ 7.89(t，J＝1.63Hz，1H)，7.75-7.74(m，1H)，7.46-7.44(m，2H)，7.30-7.26(m，2H)，6.63(s，1H)，6.50-6.48(m，1H)。
實(shí)施例47 4-(3-溴苯基)-4-(呋喃-2-基)-1，3-噻唑烷-2，5-二硫酮
標(biāo)題化合物是如實(shí)施例40中所述，從2-[(3-溴苯基)(異硫氰基)甲基]呋喃開始合成的，收率是定量1H NMR(DMSO-d6)δ 7.76-7.70(m，1H)，7.62-7.57(m，1H)，7.51-7.49(m，1H)，7.43-7.35(m，2H)，6.51-6.46(m，1H)，6.37-6.29(m，1H)。
實(shí)施例48 8-(3-溴苯基)-8-(呋喃-2-基)-3，4，7，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6(2H)-硫酮
標(biāo)題化合物是如實(shí)施例41中所述，從4-(3-溴苯基)-4-(呋喃-2-基)-1，3-噻唑烷-2，5-二硫酮開始合成的，68％的收率。經(jīng)柱色譜(使用0-45％乙酸乙酯/正庚烷洗脫)對粗產(chǎn)物進(jìn)行純化1H NMR(DMSO-d6)δ 10.84(s，1H)，7.71-7.69(m，1H)，7.67(t，J＝1.76Hz，1H)，7.61-7.58(m，1H)，7.56-7.53(m，1H)，7.42-7.38(m，1H)，6.44(dd，J＝3.39，1.88Hz，1H)，6.19-6.17(m，1H)，3.79-3.64(m，2H)，3.49-3.37(m，2H)，1.80-1.72(m，2H)；MS(ESI)m/z 376，378[M+1]+。
實(shí)施例49 8-(3-溴苯基)-8-(呋喃-2-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺
標(biāo)題化合物是如實(shí)施例42所述，從8-(3-溴苯基)-8-(呋喃-2-基)-3，4，7，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6(2H)-硫酮開始合成的，78％的收率。經(jīng)硅膠柱色譜(使用0-6％[氨的甲醇溶液(7N)]/二氯甲烷洗脫)對粗產(chǎn)物進(jìn)行純化1HNMR(DMSO-d6)δ 7.76(t，J＝1.76Hz，1H)，7.64-7.60(m，1H)，7.51-7.48(m，1H)，7.45-7.41(m，1H)，7.28-7.24(m，1H)，6.32-6.29(m，1H)，6.03-6.00(m，1H)，3.58-3.45(m，2H)，3.41-3.35(m，2H)，1.70-1.62(m，2H)；MS(ESI)m/z 359，361[M+1]+。
實(shí)施例50 8-(3’，5’-二氯聯(lián)苯-3-基)-8-(呋喃-2-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺乙酸鹽
標(biāo)題化合物是如實(shí)施例43中所述，從8-(3-溴苯基)-8-(呋喃-2-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺開始合成的，52％的收率1HNMR(DMSO-d6)δ 7.89(t，J＝1.76Hz，1H)，7.74-7.70(m，1H)，7.63-7.60(m，2H)，7.58-7.57(m，2H)，7.51-7.50(m，1H)，7.44-7.40(m，1H)，6.32-6.30(m，1H)，6.05-6.03(m，1H)，3.59-3.49(m，4H)，1.90(s，3H)，1.70-1.63(m，2H)；MS(ES)m/z425，427[M+1]+。
實(shí)施例51 8-(呋喃-2-基)-8-(3’-甲氧基聯(lián)苯-3-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺乙酸鹽
標(biāo)題化合物是如實(shí)施例43所述，從8-(3-溴苯基)-8-(呋喃-2-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺和(3-甲氧基苯基)硼酸開始合成的，55％的收率1H NMR(DMSO-d6)δ 7.86(t，J＝1.76Hz，1H)，7.62-7.59(m，1H)，7.55-7.51(m，2H)，7.40-7.35(m，2H)，7.14-7.10(m，1H)，7.08-7.06(m，1H)，6.96-6.92(m，1H)，6.33-6.31(m，1H)，6.07-6.05(m，1H)，3.81(s，3H)，3.57-3.53(m，4H)，1.89(s，3H)，1.71-1.63(m，2H)；MS(ES)m/z 387[M+1]+。
實(shí)施例52 1-(3-溴苯基)-1-(2-甲基-1，3-噻唑-4-基)甲胺
標(biāo)題化合物是如實(shí)施例38所述，從2-甲基噻唑-4-甲腈開始合成的，5％的收率1H NMR(DMSO-d6)δ 7.57(t，J＝1.88Hz，1H)，7.40-7.34(m，2H)，7.27-7.23(m，2H)，5.10(s，1H)，2.57(s，3H)；MS(ESI)m/z 266，268[M+1]+。
實(shí)施例53 4-[(3-溴苯基)(異硫氰基)甲基]-2-甲基-1，3-噻唑
將硫代碳酸O，O-二(吡啶-2-基酯)(270ng，1.16mmol)加到攪拌的1-(3-溴苯基)-1-(2-甲基-1，3-噻唑-4-基)甲胺(165mg，0.58mmol)于二氯甲烷(5mL)中的溶液中。將混合物攪拌30分鐘，用二氯甲烷稀釋，用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并濃縮，得到0.19g(定量收率)標(biāo)題化合物，其不經(jīng)進(jìn)一步純化就使用1H NMR(DMSO-d6)δ 7.52-7.38(m，5H)，6.52(s，1H)，2.63(s，3H)。
實(shí)施例54 4-(3-溴苯基)-4-(2-甲基-1，3-噻唑-4-基)-1，3-噻唑烷-2，5-二硫酮
標(biāo)題化合物是如實(shí)施例40所述，從4-[(3-溴苯基)(異硫氰基)甲基]-2-甲基-1，3-噻唑開始合成的，收率是定量的，并且粗產(chǎn)物不經(jīng)進(jìn)一步純化就使用1H NMR(DMSO-d6)δ 7.50-7.46(m，1H)，7.43-7.37(m，2H)，7.36-7.32(m，2H)，2.63(s，3H)。
實(shí)施例55 8-(3-溴苯基)-8-(2-甲基-1，3-噻唑-4-基)-3，4，7，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6(2H)-硫酮
標(biāo)題化合物如實(shí)施例41所述，從4-(3-溴苯基)-4-(2-甲基-1，3-噻唑-4-基)-1，3-噻唑烷-2，5-二硫酮開始合成的，42％的收率。經(jīng)柱色譜(使用0-40％乙酸乙酯/正庚烷洗脫)對粗產(chǎn)物進(jìn)行純化1H NMR(DMSO-d6)δ 10.75(s，1H)，7.71(t，J＝1.88Hz，1H)，7.58-7.56(m，1H)，7.56-7.54(m，1H)，7.40-7.35(m，1H)，7.17-7.16(m，1H)，3.78-3.63(m，2H)，3.47-3.39(m，2H)，2.62(s，3H)，1.79-1.71(m，2H)；MS(ESI)m/z 405，407[M-1]-。
實(shí)施例56 8-(3-溴苯基)-8-(2-甲基-1，3-噻唑-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺
標(biāo)題化合物是如實(shí)施例42所述，從8-(3-溴苯基)-8-(2-甲基-1，3-噻唑-4-基)-3，4，7，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6(2H)-硫酮開始合成的，57％的收率。經(jīng)柱色譜(使用0-10％[氨的甲醇溶液(7N)]/二氯甲烷洗脫)對粗產(chǎn)物進(jìn)行純化1H NMR(DMSO-d6)δ 7.80(br s，1H)，7.67-7.61(m，1H)，7.43-7.39(m，1H)，7.27-7.22(m，1H)，6.96(br s，1H)，6.23(br s，2H)，3.58-3.45(m，2H)，3.43-3.35(m，2H)，2.55(s，3H)，1.72-1.61(m，2H)；MS(ESI)m/z 390，392[M+1]+。
實(shí)施例57 8-(3’，5’-二氯聯(lián)苯-3-基)-8-(2-甲基-1，3-噻唑-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺乙酸鹽
標(biāo)題化合物是如實(shí)施例43所述，從8-(3-溴苯基)-8-(2-甲基-1，3-噻唑-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺開始合成的，42％的收率1HNMR(DMSO-d6)δ 7.96(t，J＝1.76Hz，1H)，7.76-7.72(m，1H)，7.62-7.59(m，4H)，7.43-7.39(m，1H)，6.99(s，1H)，3.60-3.55(m，4H)，2.56(s，3H)，1.88(s，3H)，1.72-1.62(m，2H)；MS(ESI)m/z 456，458[M+1]+。
實(shí)施例581-(3-溴苯基)-1-(噻吩-3-基)甲胺
標(biāo)題化合物是如實(shí)施例38所述，從3-氰基噻吩開始合成的，12％的收率1H NMR(DMSO-d6)δ 7.60(t，J＝1.76Hz，1H)，7.43-7.40(m，1H)，7.39-7.36(m，2H)，7.31-7.29(m，1H)，7.27-7.23(m，1H)，7.02(dd，J＝5.02，1.25Hz，1H)，5.11(s，1H)；MS(ES)m/z 251，253[M+1]+。
實(shí)施例59 3-[(3-溴苯基)(異硫氰基)甲基]噻吩
標(biāo)題化合物是如實(shí)施例53所述，從1-(3-溴苯基)-1-(噻吩-3-基)甲胺開始合成的，收率是定量的MS(ES)m/z 308，310[M-1]-。
實(shí)施例60 4-(3-溴苯基)-4-(噻吩-3-基)-1，3-噻唑烷-2，5-二硫酮
標(biāo)題化合物是如實(shí)施例40所述，從3-[(3-溴苯基)(異硫氰基)甲基]噻吩開始合成的，收率是定量的1H NMR(DMSO-d6)δ 7.58-7.38(m，3H)，7.37-7.24(m，3H)，6.19-6.08(m，1H)。
實(shí)施例61 8-(3-溴苯基)-8-(噻吩-3-基)-3，4，7，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6(2H)-硫酮
標(biāo)題化合物是如實(shí)施例41所述，從4-(3-溴苯基)-4-(噻吩-3-基)-1，3-噻唑烷-2，5-二硫酮開始合成的，44％的收率。經(jīng)柱色譜(使用0-25％乙酸乙酯/正庚烷)對粗產(chǎn)物進(jìn)行純化1H NMR(DMSO-d6)δ 7.58-7.55(m，1H)，7.55-7.48(m，3H)，7.42-7.38(m，1H)，7.38-7.33(m，1H)，7.06(dd，J＝5.14，1.38Hz，1H)，3.74-3.69(m，2H)，3.49-3.42(m，2H)，1.80-1.73(m，2H)；MS(ES)m/z 390，392[M-1]-。
實(shí)施例62 8-(3-溴苯基)-8-(噻吩-3-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺
標(biāo)題化合物是如實(shí)施例42所述，從8-(3-溴苯基)-8-(噻吩-3-基)-3，4，7，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6(2H)-硫酮開始合成的，80％的收率。經(jīng)柱色譜(使用0-8％[氨的甲醇溶液(7N)]/二氯甲烷)對粗產(chǎn)物進(jìn)行純化1HNMR(DMSO-d6)δ 7.68(t，J＝1.76Hz，1H)，7.57-7.54(m，1H)，7.39-7.35(m，3H)，7.25-7.20(m，1H)，7.03-7.01(m，1H)，3.54-3.50(m，2H)，3.39-3.36(m，2H)，1.70-1.64(m，2H)；MS(ESI)m/z 373，375[M-1]-。
實(shí)施例63 8-(3’，5’-二氯聯(lián)苯-3-基)-8-(噻吩-3-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺乙酸鹽
標(biāo)題化合物是如實(shí)施例43所述，從8-(3-溴苯基)-8-(噻吩-3-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺開始合成的，38％的收率1H NMR(DMSO-d6)δ7.84-7.82(m，1H)，7.68-7.64(m，1H)，7.61-7.59(m，1H)，7.58-7.53(m，3H)，7.41-7.36(m，3H)，7.08-7.06(m，1H)，3.56-3.52(m，4H)，1.89(s，3H)，1.73-1.64(m，2H)；MS(ES)m/z 439，441[M-1]-。
實(shí)施例64 8-[3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-8-(噻吩-3-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺乙酸鹽
標(biāo)題化合物是如實(shí)施例43所述，從8-(3-溴苯基)-8-(噻吩-3-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺(2-氟吡啶-3-基)硼酸開始合成的，59％的收率1H NMR(DMSO-d6)δ 8.24-8.21(m，1H)，8.02-7.97(m，1H)，7.80-7.77(m，1H)，7.63-7.60(m，1H)，7.48-7.37(m，5H)，7.09(dd，J＝5.02，1.25Hz，1H)，3.55-3.52(m，4H)，1.89(s，3H)，1.73-1.65(m，2H)；MS(ESI)m/z 390[M-1]-。
實(shí)施例65 8-(3-溴苯基)-3，3-二氟-8-(吡啶-4-基)-3，4，7，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6(2H)-硫酮
將4-(3-溴-苯基)-4-吡啶-4-基-噻唑烷-2，5-二硫酮(1.76g，4.61mmol)和2，2-二氟丙烷-1，3-二胺二鹽酸鹽(4.75g，6.84mmol，描述于Nanjappan，P.et al.Tetrahedron，1994，50(29)，8617-8632中)分散于乙醇(55mL)中。一次性加入三乙胺(15.5mL)。將反應(yīng)混合物用油浴加熱至70℃，攪拌16h，使其冷卻至室溫，然后蒸發(fā)溶劑。殘余物再溶于乙酸乙酯和水中，然后分離各相。有機(jī)相用水洗滌。合并的水層用乙酸乙酯萃取，合并有機(jī)餾分，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾然后真空蒸發(fā)。將殘余物再溶于乙酸乙酯中，在25g硅膠上真空蒸發(fā)，然后經(jīng)柱色譜(使用乙酸乙酯/庚烷(0-33％)洗脫)進(jìn)行純化。對純餾分進(jìn)行真空濃縮得到1.43g(73％收率)標(biāo)題化合物。MS(ES)m/z 423，425[M+1]+。
實(shí)施例66 8-(3-溴苯基)-3，3-二氟-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺
將叔丁基氫過氧化物水溶液(70％，5mL)加到8-(3-溴苯基)-3，3-二氟-8-(吡啶-4-基)-3，4，7，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6(2H)-硫酮(1.41g，3.33mmol)、甲醇(20mL)和氨水(25％，10mL)的混合物中。將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?1h，然后真空蒸發(fā)。將殘余物再溶于二氯甲烷中，用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾然后真空蒸發(fā)。經(jīng)柱色譜(使用二氯甲烷/甲醇/6M氨的甲醇溶液(2000:0:1至2000:400:1)的梯度)對粗產(chǎn)物進(jìn)行純化。對純餾分進(jìn)行真空濃縮得到0.41g(30％收率)標(biāo)題化合物。MS(ES)m/z 406，408[M+1]+。
實(shí)施例67 3，3-二氟-8-[3-(5-甲氧基吡啶-3-基)苯基]-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺乙酸鹽
將8-(3-溴苯基)-3，3-二氟-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺(64mg，165μmol)、5-甲氧基吡啶-3-硼酸(51mg，330μmol)、[1，1’-二(二苯基膦基二茂鐵]二氯化鈀(II)二氯甲烷加合物(15mg，16.5μmol)和碳酸銫(162mg，495μmol)于1，2-二甲氧基乙烷:水:乙醇(6:3:1，3mL)中的混合物在微波中在130℃加熱15分鐘。當(dāng)冷卻至環(huán)境溫度時(shí)，將混合物用水稀釋然后用二氯甲烷萃取。有機(jī)萃取液經(jīng)硫酸鈉干燥，真空濃縮，產(chǎn)物經(jīng)制備性HPLC純化，得到28mg(39％收率)標(biāo)題化合物。1H NMR(DMSO-d6)δ 8.49(dd，J＝4.60，1.46Hz，2H)，8.34(d，J＝1.69Hz，1H)，8.30(d，J＝2.68Hz，1H)，7.83(t，J＝1.53Hz，1H)，7.65-7.57(m，1H)，7.56-7.39(m，5H)，4.01(t，J＝12.37Hz，2H)，3.89(s，3H)，3.85(t，J＝12.95Hz，2H)，1.90(s，3H)；MS(ES)m/z 435[M+1]+。
實(shí)施例68 3，3-二氟-8-[3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺0.75乙酸鹽
標(biāo)題化合物是如實(shí)施例67中所述，從(2-氟吡啶-3-基)硼酸開始合成的，89％的收率。1H NMR(DMSO-d6)δ 8.48(d，J＝5.02Hz，2H)，8.23(d，J＝4.52Hz，1H)，8.00(t，J＝9.03Hz，1H)，7.78(s，1H)，7.58(d，J＝7.28Hz，1H)，7.52-7.39(m，5H)，3.99(t，J＝12.30Hz，2H)，3.83(t，J＝12.67Hz，2H)，1.90(s，2H)；MS(ES)m/z423[M+1]+。
實(shí)施例69 3，3-二氟-8-(2’-氟-5’-甲氧基聯(lián)苯-3-基)-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺0.25乙酸鹽
標(biāo)題化合物是如實(shí)施例67中所述，從(2-氟-5-甲氧基苯基)硼酸開始合成的，72％的收率。1H NMR(DMSO-d6)δ 8.49(br s，2H)，7.73(s，1H)，7.55-7.47(m，3H)，7.43-7.38(m，2H)，7.21(dd，J＝10.23，9.00Hz，1H)，6.97-6.89(m，2H)，3.99(t，J＝12.29Hz，2H)，3.82(t，J＝13.33Hz，2H)，3.77(s，3H)，1.90(br s，1H)；MS(ES)m/z452[M+1]+。
實(shí)施例70 3，3-二氟-8-(2’-氟-3’-甲氧基聯(lián)苯-3-基)-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺0.75乙酸鹽
標(biāo)題化合物是如實(shí)施例67中所述，從(2-氟-3-甲氧基苯基)硼酸開始合成的，70％的收率。1H NMR(DMSO-d6)δ 8.48(d，J＝5.74Hz，2H)，7.70(s，1H)，7.59-7.46(m，3H)，7.42-7.37(m，2H)，7.27-7.09(m，2H)，7.00-6.86(m，1H)，3.99(t，J＝12.18Hz，2H)，3.86(s，3H)，3.85-3.78(m，2H)，1.89(s，2H)；MS(ESI)m/z452[M+1]+。
實(shí)施例71 3，3-二氟-8-[3-(5-氟吡啶-3-基)苯基]-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺乙酸鹽
標(biāo)題化合物是如實(shí)施例67中所述，從(5-氟吡啶-3-基)硼酸開始合成的，69％的收率。1H NMR(DMSO-d6)δ 8.65(s，1H)，8.58(d，J＝2.60Hz，1H)，8.49(d，J＝6.05Hz，2H)，7.93-7.86(m，2H)，7.68-7.55(m，2H)，7.50(dd，J＝4.63，1.42Hz，2H)，7.45(t，J＝7.77Hz，1H)，4.01(t，J＝12.33Hz，2H)，3.85(t，J＝12.83Hz，2H)，1.89(s，3H)；MS(ESI)m/z 423[M+1]+。
實(shí)施例72 3，3-二氟-8-(3’-甲氧基聯(lián)苯-3-基)-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺1.25乙酸鹽
將[1，1’-二(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(II)(23mg，27.1μmol)加到攪拌的并用氮?dú)獯迪吹?3-甲氧基苯基)硼酸(57mg，373μmol)、8-(3-溴-苯基)-3，3-二氟-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫-咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺(110mg，271μmol)和碳酸銫(263mg，0.807mmol)于1，2-二甲氧基乙烷(6mL)、水(3mL)和乙醇(1mL)中的混懸液中。將反應(yīng)小瓶密封，加熱至65℃然后攪拌48h。將反應(yīng)混合物用水(4mL)和二氯甲烷(25mL)稀釋，然后分離各相。有機(jī)層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾然后真空蒸發(fā)，接著經(jīng)制備性HPLC進(jìn)行純化，得到26.7mg(23％收率)標(biāo)題化合物。1H NMR(DMSO-d6)δ 8.48(d，J＝4.29Hz，2H)，7.78(br s，1H)，7.59-7.43(m，5H)，7.37(t，J＝7.81Hz，1H)，7.16-7.00(m，2H)，6.93(d，J＝8.27Hz，1H)，4.01(t，J＝12.41Hz，2H)，3.89-3.77(m，5H)，1.90(s，4H)；MS(ESI)m/z434[M+1]+。
實(shí)施例73 3，3-二氟-8-[3-(5-氯-2-氟吡啶-3-基)苯基]-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺乙酸鹽
標(biāo)題化合物是如實(shí)施例67中所述，從2-氟-5-氯吡啶-3-硼酸開始合成的，73％的收率。1H NMR(DMSO-d6)δ 8.49(br.s.，2H)，8.35-8.27(m，1H)，8.17(dd，J＝8.53，2.51Hz，1H)，7.81(d，J＝1.51Hz，1H)，7.62(d，J＝7.78Hz，1H)，7.54-7.43(m，4H)，4.00(t，J＝12.42Hz，2H)，3.83(t，J＝12.55Hz，2H)，1.91(br.s.，3H)。MS(ESI)m/z 457[M+1]+。
實(shí)施例74 3，3-二氟-8-(吡啶-4-基)-8-(3-(嘧啶-5-基)苯基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺乙酸鹽
標(biāo)題化合物如實(shí)施例67中所述，從嘧啶-5-硼酸開始合成的，87％的收率。1H NMR(DMSO-d6)δ 8.97(s，1H)，8.78(s，2H)，8.26(d，J＝5.52Hz，2H)，7.65(s，1H)，7.44(d，J＝7.66Hz，1H)，7.36(d，J＝8.27Hz，1H)，7.31-7.19(m，3H)，3.78(t，J＝12.56Hz，2H)，3.71-3.56(m，2H)，1.67(s，3H)。MS(ESI)m/z 406[M+1]+。
實(shí)施例75 N-叔丁亞磺?；?3-溴-4-氟苯基-甲亞胺
將3-溴-4-氟-苯甲醛(2.2g，11mmol)、叔丁基亞磺酰胺(2.4g，20mmol)和四乙醇鈦(9.1g，40mmol)于四氫呋喃(10mL)中的混合物在65℃加熱12h。在硅膠上蒸發(fā)溶劑，然后經(jīng)色譜(使用乙酸乙酯/庚烷(0-100％)的洗脫梯度)進(jìn)行純化，得到3.3g(96％)標(biāo)題化合物。MS m/z(ES)308[M+1]+。
實(shí)施例76 1-(3-溴-4-氟苯基)-1-吡啶-4-基甲胺
在-105℃在氬氣氣氛下將叔丁基鋰(1.5M的戊烷溶液，5mL，7.45mmol)加到THF(四氫呋喃)(25mL)中。歷時(shí)10分鐘加入4-碘吡啶(0.84g，4.09mmol)。加入N-叔丁亞磺?；?3-溴-4-氟苯基-甲亞胺(1.14g，3.72mmol)于THF(20mL)中的溶液，將反應(yīng)將混合物在-100℃攪拌1h，然后通過加入水(20mL)淬滅。將混合物在水和乙酸乙酯之間分配，有機(jī)層用硫酸鈉干燥并濃縮。殘余物再溶于甲醇(25mL)，加入鹽酸(1M的乙醚溶液，3.8mL)，然后將混合物攪拌過夜。將混合物在飽和碳酸氫鈉水溶液和二氯甲烷之間分配。有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉干燥并真空濃縮。經(jīng)快速色譜(使用甲醇(0.1％7N氨)/二氯甲烷(0-10％)進(jìn)行梯度洗脫)進(jìn)行純化，得到0.321g(31％收率)標(biāo)題化合物。MS(ESI)m/z282[M+1]+。
實(shí)施例77 4-[(3-溴-4-氟苯基)(異硫氰基)甲基]吡啶
將硫代碳酸O，O-二(吡啶-2-基酯)(0.285g，1.23mmol)加到1-(3-溴-4-氟苯基)-1-吡啶-4-基甲胺(0.230g，0.818mmol)于二氯甲烷(18mL)中的溶液中。將混合物在室溫?cái)嚢?h，然后用二氯甲烷(20mL)稀釋。有機(jī)層用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并真空濃縮，得到0.252g(95％收率)標(biāo)題化合物。MS(ESI)m/z324[M+1]+。
實(shí)施例78 4-(3-溴-4-氟-苯基)-4-吡啶-4-基-1，3-噻唑烷-2，5-二硫酮
在-78℃將4-[(3-溴-4-氟苯基)(異硫氰基)甲基]吡啶(0.252g，0.77mmol)和二硫化碳(0.1mL，1.64mmol)于無水四氫呋喃(6.1mL)中的混合物滴加到攪拌的叔丁醇鉀(0.138g，1.23mmol)于無水四氫呋喃(6mL)中的溶液中。使混合物達(dá)到環(huán)境溫度，同時(shí)攪拌過夜。蒸發(fā)溶劑，將殘余物溶于氯仿-乙酸乙酯(1:1，30mL)中，用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并真空濃縮。經(jīng)柱色譜(使用甲醇(0-10％)/氯仿洗脫)進(jìn)行純化，得到0.230g(70％收率)標(biāo)題化合物。MS(ES)m/z400[M+1]+。
實(shí)施例79 3，3-二氟-3，4，7，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6(2H)-硫酮-4-(3-溴-4-氟芐基)吡啶
將4-(3-溴-4-氟-苯基)-4-吡啶-4-基-1，3-噻唑烷-2，5-二硫酮(0.230g，0.58mmol)、粗制的2，2-二氟丙烷-1，3-二胺二鹽酸鹽(0.63mmol，描述于Nanjappan，P.et al.Tetrahedron，1994，50(29)，8617-8632中)和二異丙基乙胺(0.84mL，4.9mmol)溶于乙醇(10mL)中。將反應(yīng)混合物在70℃攪拌過夜。冷卻至環(huán)境溫度后，將混合物濃縮，再溶于二氯甲烷(30mL)中，用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并真空濃縮。經(jīng)柱色譜(使用乙酸乙酯(0-100％)/庚烷洗脫)進(jìn)行純化，得到0.167g(65％收率)標(biāo)題化合物。MS(ES)m/z 442[M+1]+。
實(shí)施例80 3，3-二氟-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺-4-(3-溴-4-氟芐基)吡啶
將叔丁基氫過氧化物(70％水溶液，0.9mL，5.6mmol)加到3，3-二氟-3，4，7，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6(2H)-硫酮-4-(3-溴-4-氟芐基)吡啶(0.167g，0.38mmol)和氨(30％水溶液，1.7mL)于甲醇(10mL)中的溶液中。將得到的混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。然后將混合物濃縮，殘余物再溶于二氯甲烷(30mL)中，用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并濃縮。經(jīng)柱色譜(使用甲醇(0.1％7N氨)/二氯甲烷(0-10％)洗脫)進(jìn)行純化，得到0.086g(54％)標(biāo)題化合物。MS(ES)m/z425[M+1]+。
實(shí)施例81 3，3-二氟-8-[4-氟-3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺乙酸鹽
將3，3-二氟-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺-4-(3-溴-4-氟芐基)吡啶(0.020g，0.047mmol)、2-氟吡啶-3-硼酸(0.009g，0.061mmol)、[1，1’-二(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(II)二氯甲烷加合物(0.004g，0.005mmol)和碳酸銫(0.046g，0.141mmol)于1，2-二甲氧基乙烷:水:乙醇(6:3:1，1.5mL)中的混合物在微波中在130℃加熱15分鐘。冷卻至環(huán)境溫度后，將混合物濃縮，溶于二氯甲烷(10mL)中，用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥然后真空濃縮。經(jīng)制備性HPLC進(jìn)行純化，得到0.017g(82％)標(biāo)題化合物。1H NMR(DMSO-d6)δ 8.49(dd，J＝4.52，1.51Hz，2H)，8.31(d，J＝4.27Hz，1H)，7.99(s，1H)，7.72-7.61(m，2H)，7.51-7.45(m，3H)，7.32(t，J＝9.41Hz，1H)，3.99(t，J＝12.42Hz，2H)，3.82(t，J＝13.05Hz，2H)，1.90(s，3H)；MS(ES)m/z 441[M+1]+。
實(shí)施例82 3，3-二氟-8-(2’，6-二氟-3’-甲氧基聯(lián)苯-3-基)-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺乙酸鹽
標(biāo)題化合物是如實(shí)施例81中所述，從2-氟-3-甲氧基-苯硼酸開始合成的，86％的收率。1H NMR(DMSO-d6)δ 8.50(d，J＝6.02Hz，2H)，7.69-7.56(m，2H)，7.48(d，J＝6.02Hz，2H)，7.31-7.21(m，3H)，6.95-6.80(m，1H)，4.01(t，J＝12.30Hz，2H)，3.88(s，3H)，3.83(t，J＝13.05Hz，2H)，1.90(s，3H)；MS(ES)m/z 470[M+1]+。
實(shí)施例83 3，3-二氟-8-[4-氟-3-(5-甲氧基吡啶-3-基)苯基]-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺0.5乙酸鹽
標(biāo)題化合物是如實(shí)施例81中所述，從5-甲氧基吡啶-3-硼酸開始合成的，79％的收率。1H NMR(DMSO-d6)δ ppm 8.49(d，J＝4.90Hz，2H)，8.34(d，J＝2.45Hz，1H)，8.24(s，1H)，7.76-7.68(m，1H)，7.63-7.53(m，1H)，7.48(d，J＝5.21Hz，2H)，7.43(br.s.，1H)，7.30(t，J＝9.50Hz，1H)，4.00(t，J＝12.10Hz，2H)，3.72-3.91(m，5H)，1.88(s，2H)；MS(ES)m/z 453[M+1]+。
實(shí)施例84 N-叔丁亞磺?；?3-溴苯基-甲亞胺
將3-溴-苯甲醛(3.7g，20mmol)、叔丁基亞磺酰胺(2.4g，20mmol)和四乙醇鈦(9.1g，40mmol)于四氫呋喃(10mL)中的混合物在65℃加熱12h。在硅膠上蒸發(fā)溶劑，然后經(jīng)色譜(使用乙酸乙酯/庚烷(0-100％)的洗脫梯度)進(jìn)行純化，得到4.9g(84％)標(biāo)題化合物。MS m/z(ES)290[M+1]+。
實(shí)施例85 1-(3-溴苯基)-1-(3-氟吡啶-4-基)甲胺
二異丙基氨基鋰(2M的四氫呋喃溶液，2.5mL，5.0mmol)用無水四氫呋喃(10mL)稀釋，然后在氮?dú)鈿夥障吕鋮s至-78℃。滴加3-氟吡啶(0.43mL，5.0mmol)于無水四氫呋喃(1mL)中的溶液，將溶液在-78℃攪拌30分鐘，然后加入N-叔丁亞磺酰基-3-溴苯基-甲亞胺(0.91g，3.1mmol)于無水四氫呋喃(1mL)中的溶液。5分鐘后，通過加入氯化銨水溶液來淬滅反應(yīng)。對水溶液進(jìn)行后處理，用乙酸乙酯萃取，接著在硅膠上經(jīng)色譜(使用乙酸乙酯/庚烷(1:1)作為洗脫劑)進(jìn)行純化，得到中間體亞磺酰胺(0.9g，2.33mmol)。在甲醇/乙醚(5mL)中用鹽酸(1M的乙醚溶液，3當(dāng)量)處理10分鐘，真空濃縮，用乙酸乙酯和碳酸鉀水溶液萃取，經(jīng)碳酸鉀干燥，然后真空蒸發(fā)得到0.60g(43％)標(biāo)題化合物。MS m/z(APCI)282[M+1]+。
實(shí)施例86 4-[(3-溴苯基)(異硫氰基)甲基]-3-氟吡啶
在25℃將硫代羰基二咪唑(0.37g，2.1mmol)分批加到攪拌的1-(3-溴苯基)-1-(3-氟吡啶-4-基)甲胺(0.60g，2.1mmol)于二氯甲烷中的溶液中。攪拌2h后，將溶液用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并蒸發(fā)，得到0.70g標(biāo)題化合物，收率是定量的。MS m/z(APCI)324[M+1]+。
實(shí)施例87 4-(3-溴苯基)-4-(3-氟吡啶-4-基)-1，3-噻唑烷-2，5-二硫酮
在-78℃將4-[(3-溴苯基)(異硫氰基)甲基]-3-氟吡啶(0.70g，2.1mmol)和二硫化碳(0.27mL，4.4mmol)于無水四氫呋喃(5mL)中的混合物滴加到攪拌的叔丁醇鉀(0.33g，2.9mmol)于無水四氫呋喃(25mL)中的溶液中。歷時(shí)30分鐘使混合物達(dá)到室溫。真空濃縮，在乙酸乙酯和鹽水之間萃取，經(jīng)硫酸鈉干燥，然后真空蒸發(fā)得到0.80g(95％)標(biāo)題化合物。MS m/z(APCI)400[M+1]+。
實(shí)施例88 8-(3-溴苯基)-3，3-二氟-8-(3-氟吡啶-4-基)-3，4，7，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6(2H)-硫酮
將4-(3-溴苯基)-4-(3-氟吡啶-4-基)-1，3-噻唑烷-2，5-二硫酮(0.80g，2.0mmol)、2，2’-二氟-1，3-二氨基丙烷鹽酸鹽(0.38g，2.1mmol)和三乙胺(0.73mL，5.2mmol)在乙醇(10mL)中混合，然后加熱至70℃，并持續(xù)12h。將混合物真空濃縮，殘余物用乙酸乙酯稀釋并首先用碳酸鈉水溶液洗滌，然后用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，然后蒸發(fā)溶劑。在硅膠上經(jīng)色譜(使用乙酸乙酯/庚烷(0-100％)進(jìn)行純化，得到0.50g(56％)標(biāo)題化合物。MSm/z(APCI)443[M+1]+。
實(shí)施例89 8-(3-溴苯基)-3，3-二氟-8-(3-氟吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺
將8-(3-溴苯基)-3，3-二氟-8-(3-氟吡啶-4-基)-3，4，7，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6(2H)-硫酮(0.50g，1.1mmol)溶于甲醇(10mL)中，然后加入氫氧化銨(30％的水溶液，5mL)和叔丁基氫過氧化物(70％的水溶液，3.1mL，23mmol)。將反應(yīng)混合物在40℃加熱12h。真空濃縮，在乙酸乙酯和水之間萃取，經(jīng)硫酸鈉干燥，然后真空蒸發(fā)溶劑得到0.45g(93％)標(biāo)題化合物。MSm/z(APCI)426[M+1]+。
實(shí)施例90 3，3-二氟-8-(3-氟吡啶-4-基)-8-[3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺
將8-(3-溴苯基)-3，3-二氟-8-(3-氟吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺(0.10g，0.24mmol)溶于1，2-二甲氧基乙烷:水:乙醇(6:3:1，3mL)中，然后加入2-氟-3-吡啶基硼酸(0.067g，0.48mmol)和碳酸銫(0.23g，0.71mmol)。向溶液中通入氮?dú)?分鐘。加入[1，1’-二(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(II)(0.020g，0.02mmol)，然后將反應(yīng)混合物在微波爐中在氮?dú)鈿夥障略?30℃加熱1h。真空濃縮，用乙酸乙酯和水對水溶液進(jìn)行后處理，然后真空蒸發(fā)溶劑，接著經(jīng)制備性HPLC純化，得到0.009g(9％)標(biāo)題化合物。1HNMR(CD3OD)δ 8.43(d，J＝3Hz，1H)，8.34(d，J＝5Hz，1H)，8.18(m，1H)，8.04(m，1H)，7.79(m，1H)，7.62(m，2H)，7.53(m，1H)，7.41(m，1H)，7.20(m，1H)，4.13-3.95(m，2H)，3.91-3.69(m，2H)。MS m/z(APCI)441[M+1]+。
實(shí)施例91 3，3-二氟-8-(3-氟吡啶-4-基)-8-(3-(嘧啶-5-基)苯基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺
標(biāo)題化合物是如實(shí)施例90中所述(除了反應(yīng)時(shí)間是30分鐘)，從嘧啶-5-硼酸開始合成的，6％的收率。1H NMR(CD3OD)δ 9.16(s，1H)，9.07(s，2H)，8.42(m，2H)，7.89(s，1H)，7.77(d，1H)，7.70(d，1H)，7.61(m，1H)，7.24(m，1H)，4.16-3.97(m，2H)，3.95-3.74(m，2H)；MS m/z(APCI)424[M+1]+。
實(shí)施例92 2-甲氧基-6-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)吡嗪
將2-氯-6-甲氧基吡嗪(0.50g，3.46mmol)、二頻哪醇二硼烷(0.966g，3.80mmol)、三(二亞芐基丙酮)二鈀(0)(0.095g，0.10mmol)、三環(huán)己基膦(0.116g，0.42mmol)和乙酸鉀(0.509g，5.19mmol)于1，2-二甲氧基乙烷(10mL)中的混合物在微波爐中在氮?dú)鈿夥障略?50℃處理3h。將反應(yīng)混合物在水和乙醚之間分配，然后合并有機(jī)相，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到1.15g(定量收率)粗制的標(biāo)題化合物，其不經(jīng)進(jìn)一步純化就用于下一步。MS(CI)m/z 237。
實(shí)施例93 3，3-二氟-8-[3-(6-甲氧基吡嗪-2-基)苯基]-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺乙酸鹽
標(biāo)題化合物是如實(shí)施例67中所述，從2-甲氧基-6-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)吡嗪開始合成的，78％的收率。1HNMR(DMSO-d6)δ8.68(s，1H)，8.49(d，J＝5.02Hz，2H)，8.27(d，J＝14.05Hz，2H)，7.97(d，J＝7.53Hz，1H)，7.59-7.49(m，3H)，7.44(t，J＝7.65Hz，1H)，4.10-3.93(m，5H)，3.84(t，J＝12.67Hz，2H)，1.89(s，2H)；MS(ES)m/z 436[M+H]+。
測定 用以下測定中的至少一種對化合物進(jìn)行試驗(yàn) β-分泌酶 用于IGEN裂解測定、熒光測定、TR-FRET測定和BiaCore測定的酶描述如下 將人β-分泌酶(AA1-AA 460)的可溶部分在ASP2-Fc10-1-IRES-GFP-neoK哺乳動物表達(dá)載體中克隆。將所述基因與IgG1的Fc結(jié)構(gòu)域(親和標(biāo)簽)融合，然后在HEK293細(xì)胞中穩(wěn)定克隆。將純化的sBACE-Fc儲藏于pH9.2的Tris緩沖液中并且具有95％的純度。
IGEN裂解測定 將酶在40mM MES pH5.0中稀釋至43μg/ml中。將IGEN底物在40mMMES pH5.0中稀釋至12μM。將化合物在二甲基亞砜(在測定中二甲基亞砜的最終濃度為5％)中稀釋至所期望的濃度。測定在來自Greiner的96孔PCR板(#650201)中進(jìn)行。將化合物的二甲基亞砜(3μL)溶液和酶(27μL)加至板，然后預(yù)孵育10分鐘。反應(yīng)用底物(30μL)來啟動。酶的最終稀釋度為20μg/ml；底物的最終濃度為6μM。在室溫(RT)反應(yīng)20分鐘后，反應(yīng)通過以下方法來停止取出10μL的反應(yīng)混合物，然后將其以1:25稀釋在0.20M Tris pH8.0中。產(chǎn)物通過以下方法來定量將50μL稀釋度為1:5000的新生表位抗體(neoepitope antibody)加至50μL稀釋度為1:25的反應(yīng)混合物(所有抗體和鏈霉抗生物素蛋白(streptavidin)涂覆的珠子稀釋在PBS(包含0.5％BSA和0.5％吐溫20)中)。然后，添加100μL的0.2mg/mL鏈霉抗生物素蛋白涂覆的珠子(Dynabeads M-280)和稀釋度為1:5000的釕標(biāo)記的山羊抗兔(Ru-Gar)抗體。將混合物在室溫?fù)u動下孵育2h后，在BioVeris M8分析儀中測量電化學(xué)發(fā)光(electro-chemiluminescene)。二甲基亞砜對照定義了100％活性水平，利用不含有酶(使用40mM MES pH5.0緩沖液來代替)定義了0％活性。
熒光測定 將酶在40mM MES pH5.0中稀釋至52μg/ml。將底物(Dabcyl-Edans)在40mM MES pH5.0中稀釋至30μM。將化合物在二甲基亞砜(在測定中二甲基亞砜的最終濃度為5％)中稀釋至所期望的濃度。測定在Corning 384孔板(圓底、低容量、非結(jié)合性表面，Corning #3676)中進(jìn)行。將酶(9μL)與1μL化合物的二甲基亞砜中溶液一起加至板，然后預(yù)孵育10分鐘。添加底物(10μL)，然后反應(yīng)在室溫避光進(jìn)行25分鐘。酶的最終稀釋度為23μg/ml；底物的最終濃度為15μM(Km為25μM)。產(chǎn)物的熒光在Victor II板讀取器上利用標(biāo)記的Edans肽方案來測量，激發(fā)波長為360nm，發(fā)射波長為485nm。二甲基亞砜對照定義了100％活性水平，利用不含有酶(使用40mM MES pH5.0緩沖液來代替)定義了0％活性。
TR-FRET測定 在反應(yīng)緩沖液(乙酸鈉，chaps，triton x-100，EDTA pH4.5)中將酶稀釋至6μg/mL，將底物(Europium)CEVNLDAEFK(Qsy7)稀釋至200nM。將化合物在二甲基亞砜(在測定中二甲基亞砜的最終濃度為5％)中稀釋至所期望的濃度。測定在Costar 384孔板(圓底、低容量、非結(jié)合性表面，Corning #3676)中進(jìn)行。將酶(9μL)與1μL化合物的二甲基亞砜溶液加至板，混合，然后預(yù)孵育10分鐘。添加底物(10μL)，然后反應(yīng)在室溫避光進(jìn)行15分鐘。反應(yīng)通過加入7μL乙酸鈉(pH為9)來停止。產(chǎn)物的熒光在Victor II板讀取器上來測量，激發(fā)波長為340nm，發(fā)射波長為615nm。酶的最終稀釋度為2.7μg/ml；底物的最終濃度為100nM(Km為290nM)。二甲基亞砜對照定義了100％活性水平，利用不含有酶(使用反應(yīng)緩沖液來代替)定義了0％活性。
BACE Biacore傳感芯片的制備 將肽過渡態(tài)等構(gòu)物(transition state isostere，TSI)或者亂序版本的肽TSI連接至Biacore CM5傳感芯片的表面，從而在Biacore 3000儀器上測定BACE。CM5傳感芯片的表面具有可用于偶聯(lián)肽的4條不同通道。亂序的肽KFES-抑制素-ETIAEVENV(KFES-statine-ETIAEVENV)與通道1偶聯(lián)，而TSI抑制劑KTEEISEVN-抑制素-VAEF(KTEEISEVN-statine-VAEF)與同一芯片的通道2偶聯(lián)。將這兩種肽以0.2mg/mL溶解在20mM乙酸鈉(pH為4.5)中，然后溶液以14K rpm離心，從而除去任何顆粒。葡聚糖層上的羧基通過以下方法來活化以5μL/分鐘的速率注射0.5M N-乙基-N’-(3-二甲氨基丙基)-碳二亞胺和0.5M N-羥基琥珀酰亞胺的1:1混合物，持續(xù)7分鐘。然后，將對照肽的儲備溶液以5μL/分鐘的速率注射到通道1中，持續(xù)7分鐘，然后剩余的活化羧基通過以下方法來阻斷以5μL/分鐘的速率注射1M乙醇胺，持續(xù)7分鐘。
BACE Biacore測定方案 將BACE在pH為4.5的乙酸鈉緩沖液(不含二甲基亞砜的電泳緩沖液)中稀釋至0.5μM，從而進(jìn)行BACE Biacore測定。將稀釋的BACE與二甲基亞砜或化合物的二甲基亞砜稀釋液混合，二甲基亞砜的最終濃度為5％。將BACE/抑制劑混合物在室溫孵育30分鐘，然后以20μL/分鐘的速率注射到CM5 Biacore芯片的通道1和2中。當(dāng)BACE與芯片結(jié)合時(shí)，信號以響應(yīng)單位(RU)來測量。與通道2上的TSI抑制劑結(jié)合的BACE產(chǎn)生某種信號。BACE抑制劑的存在通過與BACE結(jié)合由此抑制BACE與芯片上的肽TSI相互作用而使所述信號減小。與通道1的任何結(jié)合都是非特異性的，并且從通道2的響應(yīng)值減去。將二甲基亞砜對照定義為100％，并且將化合物的作用報(bào)道為相對于二甲基亞砜對照的抑制百分比。
β-分泌酶全細(xì)胞測定 HEK293-APP695的產(chǎn)生 使用Lipofectamine轉(zhuǎn)染劑，根據(jù)制造商提供的方案(Invitrogen)將編碼人完整長度APP695的cDNA的pcDNA3.1質(zhì)粒穩(wěn)定轉(zhuǎn)染到HEK-293細(xì)胞中。群落用0.1-0.5mg/mL的zeocin來選擇。進(jìn)行有限的稀釋克隆，從而得到均質(zhì)的細(xì)胞系。克隆利用自行開發(fā)的ELISA測定通過APP表達(dá)的水平和條件培養(yǎng)基中所分泌的Aβ的水平來表征。
HEK293-APP695的細(xì)胞培養(yǎng) 使穩(wěn)定表達(dá)人野生型APP的HEK293細(xì)胞(HEK293-APP695)在37℃(5％CO2)在DMEM中生長，所述DMEM含有4500g/L葡萄糖、GlutaMAX和丙酮酸鈉(補(bǔ)充有10％FBS、1％非必需氨基酸和0.1mg/mL選擇性抗生素zeocin)。
Aβ40釋放測定 在融合率為80-90％時(shí)收集HEK293-APP695細(xì)胞，然后以0.2x106細(xì)胞/mL的濃度(100mL細(xì)胞混懸液/孔)接種于黑色透明底96-孔聚-D-賴氨酸涂覆的板上。在37℃(5％CO2)過夜孵育后，將細(xì)胞培養(yǎng)基用含有青霉素和鏈霉素(分別為100U/mL和100μg/mL)的細(xì)胞培養(yǎng)基代替，所述的含有青霉素和鏈霉素的細(xì)胞培養(yǎng)基含有二甲基亞砜最終濃度為1％的試驗(yàn)化合物。在37℃(5％CO2)將細(xì)胞暴露于試驗(yàn)化合物中24h。將100μL細(xì)胞培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至圓底聚丙烯96孔板(測定板)，以定量釋放的Aβ的量。保存細(xì)胞培養(yǎng)板，用于如下所述進(jìn)行ATP測定。向測定板的每個(gè)孔都添加50μL的初級檢測溶液(含有0.5μg/mL的兔抗-Aβ40抗體和0.5μg/mL生物素化的單克隆鼠6E10抗體(在含有0.5％BSA和0.5％吐溫20的DPBS中))，然后在4℃孵育過夜。然后，每個(gè)孔都添加50μL次級檢測溶液，所述溶液包含0.5μg/mL釕標(biāo)記的山羊抗兔抗體和0.2mg/mL鏈霉抗生物素蛋白涂覆的珠子(DynabeadsM-280)。將板在室溫劇烈搖動1-2小時(shí)，然后板在BioVcris M8分析儀中測量電化學(xué)發(fā)光。
SH-SY5Y的細(xì)胞培養(yǎng) 使SH-SY5Y細(xì)胞在37℃(5％CO2)在含有GlutaMAX的DMEM/F-121:1(補(bǔ)充有1mM HEPES、10％FBS和1％非必需氨基酸)中生長。
sAPPβ釋放測定 在融合率為80-90％時(shí)收集SH-SY5Y細(xì)胞，然后以1.5x106細(xì)胞/mL的濃度(100mL細(xì)胞混懸液/孔)接種于黑色透明底96孔組織培養(yǎng)板上。在37℃(5％CO2)孵育7h后，將細(xì)胞培養(yǎng)基用90μl含有青霉素和鏈霉素(分別為100U/mL和100μg/mL)的細(xì)胞培養(yǎng)基代替，所述的含有青霉素和鏈霉素的細(xì)胞培養(yǎng)基含有二甲基亞砜最終濃度為1％的試驗(yàn)化合物。在37℃(5％CO2)將細(xì)胞暴露于試驗(yàn)化合物中18h。使用來自Meso Scale Discovery(MSD)的sAPPβ微量板，以測量向細(xì)胞培養(yǎng)基中釋放的sAPPβ，并且根據(jù)制造商提供的方案進(jìn)行測定。簡言之，將25μL細(xì)胞培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至預(yù)先阻斷的MSDsAPPβ微量板。保存細(xì)胞板，用于如下所述進(jìn)行ATP測定。在室溫?fù)u動1小時(shí)期間，通過點(diǎn)樣在微量板的孔中的抗體來捕獲sAPPβ。多次洗滌后，向測定板中添加SULFO-TAG標(biāo)記的檢測抗體(25μL/孔，最終濃度為1nM)，然后將板在室溫?fù)u動下孵育1小時(shí)。多次洗滌后，向板中以150μl/孔添加讀取緩沖液T(Read Buffer T)。在室溫保持10分鐘后，將板在SECTORTM圖像儀中讀取電化學(xué)發(fā)光。
ATP測定 如以上所指出，在從細(xì)胞培養(yǎng)板轉(zhuǎn)移培養(yǎng)基用于Aβ40或sAPPβ測定后，將板用于分析細(xì)胞毒性，所述細(xì)胞毒性分析利用測量總細(xì)胞ATP的ViaLightTM Plus細(xì)胞增殖/細(xì)胞毒性試劑盒(Cambrex BioScience)來進(jìn)行。根據(jù)制造商提供的方案進(jìn)行測定。簡而言之，向每個(gè)孔都添加50μL細(xì)胞溶解試劑。將板在室溫孵育10分鐘。添加100μL復(fù)溶的(reconstituted)ViaLightTMPlus ATP試劑2分鐘后，在Wallac Victor21420多標(biāo)記計(jì)數(shù)器中測量發(fā)光度(luminescence)。
hERG測定 細(xì)胞培養(yǎng) 使表達(dá)hERG的中國倉鼠卵巢K1(CHO)細(xì)胞(描述于Persson，Carlsson，Duker，& Jacobson，2005中)在F-12Ham培養(yǎng)基中在37℃在加濕的環(huán)境(5％CO2)中生長至半數(shù)融合，所述F-12Ham培養(yǎng)基含有L-谷氨酰胺、10％胎牛血清(FCS)和0.6mg/ml潮霉素(都來自Sigma-Aldrich)。使用前，單層利用預(yù)溫?zé)?37℃)的Versene 1:5000(Invitrogen)的3ml等份液來洗滌。吸出此溶液后，將燒瓶在孵育器中在37℃與另外2ml的Versene 1:5000一起孵育6分鐘。然后，細(xì)胞通過輕輕敲擊而與燒瓶底分開，然后將10ml的Dulbecco磷酸鹽緩沖鹽水(含有鈣(0.9mM)和鎂(0.5mM))(PBS；Invitrogen)加至燒瓶，然后將其吸到15ml離心管中，之后離心(50g，4分鐘)。棄去所得到的上清液，然后將沉淀小心地重新懸浮于3ml的PBS中。將細(xì)胞懸浮液的0.5ml等份液取出，然后在自動化的讀取器(Cedex；Innovatis)中確定活細(xì)胞的數(shù)目(基于錐蟲藍(lán)不相容法(trypan blue exclusion))，從而可用PBS調(diào)整細(xì)胞重新懸浮液的體積，以得到期望的最終細(xì)胞濃度。當(dāng)涉及此參數(shù)時(shí)，引用測定中此時(shí)的細(xì)胞濃度。用于在IonWorksTM HT上調(diào)整電壓偏移(voltage offset)的CHO-Kv1.5細(xì)胞以相同的方法來培養(yǎng)和制備，以供使用。
電生理學(xué) 此裝置的原理和操作描述于(Schroeder，Neagle，Trezise，& Worley，2003)中。簡言之，所述技術(shù)以384孔板(PatchPlateTM)為基礎(chǔ)，其中利用抽吸來將細(xì)胞定位在使兩個(gè)獨(dú)立流體腔室分開的小洞上，并且使細(xì)胞保持在其上，由此在每個(gè)孔中試圖進(jìn)行記錄。一旦進(jìn)行了封閉，就將PatchPlateTM底側(cè)上的溶液變成一種包含兩性霉素B的溶液。此溶液可穿透在每個(gè)孔中覆蓋洞的細(xì)胞膜片(patch of cell membrane)，由此使穿孔的全細(xì)胞膜片鉗記錄實(shí)際上得以進(jìn)行。
使用β-Test IonWorksTM HT(來自Essen Instrument)。此裝置不能對溶液進(jìn)行溫?zé)幔虼巳缫韵履菢釉谑覝?約21℃)進(jìn)行操作。在“緩沖液”位置的容器裝有4ml的PBS，而在“細(xì)胞”位置的容器裝有以上所描述的CHO-hERG細(xì)胞懸浮液。將含有待測試化合物(為其最終測試濃度的3倍)的96孔板(V形底，Greiner Bio-one)置于“板1”位置，而將PatchPlateTM鉗夾到PatchPlateTM位置。將每塊化合物板設(shè)計(jì)出12列，從而能構(gòu)建10條由8個(gè)點(diǎn)連成的濃度-作用曲線；板上剩余的兩列用媒介物(DMSO的最終濃度為0.33％)和最大阻斷濃度之上的西沙必利(最終濃度為10μM)占據(jù)，媒介物用于定義測定基線，最大阻斷濃度之上的西沙必利用于定義100％抑制水平。然后，IonWorksTM HT的射流頭(F頭)將3.5μl的PBS加至PatchPlateTM的每個(gè)孔，并且其底側(cè)用“內(nèi)部”溶液灌注，所述“內(nèi)部”溶液具有以下組分(單位為mM)葡萄糖酸鉀(K-Gluconate)100、KCl 40、MgCl2 3.2、EGTA 3和HEPES 5(所有都來自Sigma-Aldrich；使用10M KOH將pH調(diào)整為7.25-7.30)。在啟動和脫泡后，電子頭(E頭)圍繞PatchPlateTM移動，進(jìn)行洞測試(即施加電壓脈沖以確定在每個(gè)孔中的洞是否開放)。然后，F(xiàn)頭將3.5μl的上述細(xì)胞懸浮液分配至PatchPlateTM的每個(gè)孔中，并且細(xì)胞有200秒的時(shí)間來到達(dá)在每個(gè)孔中的洞，并且將洞封閉。此后，E頭圍繞PatchPlateTM移動，以確定在每個(gè)孔中所得到的封閉電阻。接下來，將PatchPlateTM的底側(cè)溶液變成“進(jìn)入”溶液，所述“進(jìn)入”溶液具有以下組分(單位為mM)KCl 140、EGTA 1、MgCl2 1和HEPES 20(使用10M KOH將pH調(diào)整為7.25-7.30)連同100μg/ml的兩性霉素B(Sigma-Aldrich)。歷時(shí)9分鐘用于膜片打孔后，E頭每次圍繞PatchPlateTM的48個(gè)孔移動，以獲得添加化合物前的hERG電流測量值。然后，F(xiàn)頭將源于化合物板的每個(gè)孔的3.5μl溶液加至PatchPlateTM的4個(gè)孔(DMSO在每個(gè)孔中的最終濃度為0.33％)。這通過以下方法來實(shí)現(xiàn)從化合物板的最稀孔移動到化合物板的最濃孔，以使任何化合物遺留的影響最小化。孵育約3.5分鐘后，E頭圍繞PatchPlateTM的全部384個(gè)孔移動，以獲得添加化合物后的hERG電流測量值。以這種方式可得到非累積濃度-作用曲線，其中假如在足夠百分比的孔中達(dá)到驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)(參見以下)，那么每種濃度的試驗(yàn)化合物的作用都基于對1至4個(gè)細(xì)胞的記錄。
添加化合物前和添加化合物后的hERG電流通過單一電壓脈沖來引起，所述單一電壓脈沖的組成為在-70mV保持20秒，以160毫秒的步幅變?yōu)?60mV(從而對泄漏進(jìn)行評價(jià))，以100毫秒的步幅變回為-70mV，以1秒的步幅變?yōu)?40mV，以2秒的步幅變?yōu)?30mV，最后以500毫秒的步幅變?yōu)?70mV。在添加化合物前和添加化合物后的電壓脈沖之間不對膜電勢進(jìn)行任何鉗夾。從電流值減去泄漏值，這基于對在電壓脈沖方案開始時(shí)在+10mV步幅所引起的電流進(jìn)行評價(jià)。以兩種方式中的一種對IonWorksTM HT中的任何電壓偏移進(jìn)行調(diào)整。當(dāng)確定化合物效力時(shí)，將去極化電壓偏斜(depolarisingvoltage ramp)施加于CHO-Kv1.5細(xì)胞，并且記錄到一個(gè)電壓，電流軌跡(current trace)在此電壓出現(xiàn)拐點(diǎn)(即在此時(shí)觀察到通道由于偏斜方案而活化)。先前已經(jīng)利用相同的電壓指令在常規(guī)的電生理學(xué)中確定了出現(xiàn)上述現(xiàn)象的電壓，并且發(fā)現(xiàn)其為-15mV(數(shù)據(jù)未顯示)，因而可將此值用作參考點(diǎn)，將偏移電勢(offset potential)錄入到IonWorksTM HT軟件中。當(dāng)確定hERG的基礎(chǔ)電生理性質(zhì)時(shí)，任何偏移都通過以下方法來調(diào)整在IonWorksTM HT中確定hERG尾電流反轉(zhuǎn)電勢(reversal potential)，將其與在常規(guī)電生理學(xué)中所確定的值(-82mV)比較，然后在IonWorksTM HT軟件中進(jìn)行必要的偏移調(diào)整。電流信號在2.5kHz采集。
通過采用在-70mV初始保持時(shí)段的電流的40毫秒平均值(基線電流)，并且從尾電流響應(yīng)的峰值減去所述平均值，借助IonWorksTM HT軟件從減去泄漏值的軌跡自動測量掃描前和掃描后的hERG電流大小。在每個(gè)孔中引起的電流的驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)為掃描前的封閉電阻>60MΩ，掃描前的hERG尾電流幅度>150pA，掃描后的封閉電阻>60MΩ。對hERG電流的抑制程度通過以下方法來評價(jià)就每個(gè)孔而言，掃描后的hERG電流值除以各自掃描前的hERG電流值。
結(jié)果 本發(fā)明化合物的典型IC50值在約1至約10,000nM的范圍內(nèi)。示例的最終化合物的生物學(xué)數(shù)據(jù)在下表1中給出。
表權(quán)利要求
1.游離堿形式的式I的化合物，或其可藥用鹽、溶劑化物或鹽的溶劑化物
其中
A獨(dú)立選自任選被一個(gè)或多個(gè)R1取代的5、6或7元雜環(huán)；
B獨(dú)立選自任選被一個(gè)或多個(gè)R2取代的5或6元雜芳族環(huán)；
C獨(dú)立選自苯基或5或6元雜芳族環(huán)基團(tuán)，所述苯基或雜芳族環(huán)基團(tuán)任選被一個(gè)或多個(gè)R3取代；
R1獨(dú)立選自鹵素、氰基、硝基、OR6、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C0-6烷基芳基、C0-6烷基雜芳基、C0-6烷基C3-6環(huán)烷基、C0-6烷基C3-6環(huán)烯基、C0-6烷基C3-6環(huán)炔基、C0-6烷基C3-6雜環(huán)基、NR6R7、CONR6R7、NR6(CO)R7、O(CO)R6、CO2R6、COR6、(SO2)NR6R7、NR6(SO2)R7、SOR6、SO2R6、OSO2R6和SO3R6，其中所述C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C0-6烷基芳基、C0-6烷基雜芳基、C0-6烷基C3-6環(huán)烷基、C0-6烷基C3-6環(huán)烯基、C0-6烷基C3-6環(huán)炔基和C0-6烷基C3-6雜環(huán)基任選被一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)D取代；或
兩個(gè)R1取代基可與它們所相連的原子一起形成任選被一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)D取代的環(huán)或雜環(huán)；
R2、R3和R4獨(dú)立選自鹵素、氰基、硝基、OR6、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C0-6烷基芳基、C0-6烷基雜芳基、C0-6烷基C3-6環(huán)烷基、C0-6烷基C3-6環(huán)烯基、C0-6烷基C3-6環(huán)炔基、C0-6烷基C3-6雜環(huán)基、NR6R7、CONR6R7、NR6(CO)R7、O(CO)R6、CO2R6、COR6、(SO2)NR6R7、NR6(SO2)R7、SO2R6、SOR6、OSO2R6和SO3R6，其中所述C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C0-6烷基芳基、C0-6烷基雜芳基、C0-6烷基C3-6環(huán)烷基、C0-6烷基C3-6環(huán)烯基、C0-6烷基C3-6環(huán)炔基和C0-6烷基C3-6雜環(huán)基任選被一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)D取代；或
兩個(gè)R2取代基、兩個(gè)R3取代基或兩個(gè)R4取代基可與它們所相連的原子一起形成任選被一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)D取代的環(huán)或雜環(huán)；
R5獨(dú)立選自氫、氰基、OR6、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C0-6烷基芳基、C0-6烷基雜芳基、C0-6烷基C3-6環(huán)烷基、C0-6烷基C3-6環(huán)烯基、C0-6烷基C3-6環(huán)炔基、C0-6烷基C3-6雜環(huán)基、CONR6R7、CO2R6、COR6、SO2R6和SO3R6，其中所述C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C0-6烷基芳基、C0-6烷基雜芳基、C0-6烷基C3-6環(huán)烷基、C0-6烷基C3-6環(huán)烯基、C0-6烷基C3-6環(huán)炔基或C0-6烷基C3-6雜環(huán)基任選被一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)D取代；
D獨(dú)立選自鹵素、硝基、CN、OR6、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C0-6烷基芳基、C0-6烷基雜芳基、C0-6烷基C3-6環(huán)烷基、C0-6烷基C3-6環(huán)烯基、C0-6烷基C3-6環(huán)炔基、C0-6烷基雜環(huán)基、氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、NR6R7、CONR6R7、NR6(CO)R7、O(CO)R6、CO2R6、COR6、(SO2)NR6R7、NR6SO2R7、SO2R6、SOR6、OSO2R6和SO3R6，其中所述C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C0-6烷基芳基、C0-6烷基雜芳基、C0-6烷基C3-6環(huán)烷基、C0-6烷基C3-6環(huán)烯基、C0-6烷基C3-6環(huán)炔基或C0-6烷基雜環(huán)基任選被一個(gè)或多個(gè)取代基取代，所述取代基獨(dú)立選自鹵素、硝基、氰基、OR6、C1-6烷基、氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、氟甲氧基、二氟甲氧基和三氟甲氧基；
R6和R7獨(dú)立選自氫、C1-6烷基、氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、C2-6烯基、C2-6炔基、C0-6烷基芳基、C0-6烷基雜芳基、C0-6烷基C3-6環(huán)烷基、C0-6烷基C3-6環(huán)烯基、C0-6烷基C3-6環(huán)炔基和C0-6烷基雜環(huán)基；或
R6和R7可一起形成含有一個(gè)或多個(gè)選自N、O和S的雜原子的5或6元雜環(huán)；
m＝0、1、2或3；
n＝0、1、2或3；
p＝0、1、2或3；
q＝0、1、2或3。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中A為任選被一個(gè)或多個(gè)R1取代的6元雜環(huán)。
3.權(quán)利要求1或2的化合物，其中B為6元雜芳族環(huán)。
4.權(quán)利要求3的化合物，其中B為吡啶基。
5.權(quán)利要求1或2的化合物，其中B為5元雜芳族環(huán)。
6.權(quán)利要求5的化合物，其中B選自呋喃基、噻吩基和噻唑基。
7.權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)的化合物，其中R5為氫。
8.權(quán)利要求1至7中任一項(xiàng)的化合物，其中m為0。
9.權(quán)利要求1至7中任一項(xiàng)的化合物，其中m為2。
10.權(quán)利要求9的化合物，其中R1為鹵素。
11.權(quán)利要求1至10中任一項(xiàng)的化合物，其中n為0。
12.權(quán)利要求1至11中任一項(xiàng)的化合物，其中q為0。
13.權(quán)利要求1至11中任一項(xiàng)的化合物，其中C為被一個(gè)或多個(gè)R3取代的苯基。
14.權(quán)利要求13的化合物，其中R3獨(dú)立選自鹵素、氰基、OR6、C1-6烷基和OSO2R6，其中所述C1-6烷基被一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)D取代；D為鹵素以及R6為C1-6烷基。
15.權(quán)利要求1至14中任一項(xiàng)的化合物，其中C為嘧啶基。
16.權(quán)利要求1至15中任一項(xiàng)的化合物，其中C為被一個(gè)或多個(gè)R3取代的吡啶基。
17.權(quán)利要求16的化合物，其中R3獨(dú)立選自鹵素、氰基和OR6，以及R6為C1-6烷基。
18.權(quán)利要求1的化合物，其中
A為6元雜環(huán)；
B為任選被一個(gè)或多個(gè)R2取代的5或6元雜芳族環(huán)；
C獨(dú)立選自苯基或5或6元雜芳族環(huán)基團(tuán)，所述苯基或雜芳族環(huán)基團(tuán)任選被一個(gè)或多個(gè)R3取代；
R3獨(dú)立選自鹵素、氰基、OR6，C1-6烷基和OSO2R6，其中所述C1-6烷基被一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)D取代；
R5為氫；
D為鹵素；
R6為C1-6烷基；
m＝0；
n＝0；
p＝0、1或2；
q＝0。
19.權(quán)利要求1的化合物，其中
A為被一個(gè)或多個(gè)R1取代的6元雜環(huán)；
B為6元雜芳族環(huán)；
C為苯基或6元雜芳族環(huán)基團(tuán)，所述苯基或雜芳族環(huán)基團(tuán)被一個(gè)或多個(gè)R3取代；
R1為鹵素；
R3選自鹵素和OR6；
R5為氫；
R6為C1-6烷基；
m＝2；
n＝0；
p＝1或2；
q＝0。
20.權(quán)利要求1的化合物，其中
A為被一個(gè)或多個(gè)R1取代的6元雜環(huán)；
B為任選被一個(gè)R2取代的6元雜芳族環(huán)；
C為苯基或6元雜芳族環(huán)基團(tuán)，所述苯基或雜芳族環(huán)基團(tuán)任選被一個(gè)或多個(gè)R3取代；
R1為鹵素；
R2為鹵素；
R3選自鹵素和OR6；
R4為鹵素；
R5為氫；
R6為C1-6烷基；
m＝2；
n＝0或1；
p＝0、1或2；
q＝0或1。
21.游離堿形式的化合物或其可藥用鹽、溶劑化物或鹽的溶劑化物，所述化合物選自
3’-(6-氨基-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫-咪唑并[1，5-a]嘧啶-8-基)-聯(lián)苯-3-甲腈鹽酸鹽；
8-(3’-甲氧基聯(lián)苯-3-基)-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺0.25乙酸鹽；
8-[3-(5-甲氧基吡啶-3-基)苯基]-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺0.25乙酸鹽；
8-(3’-氯聯(lián)苯-3-基)-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺0.25乙酸鹽；
8-[3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺0.5乙酸鹽；
8-(2’-氟-3’-甲氧基聯(lián)苯-3-基)-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺0.25乙酸鹽；
8-(2’-氟-5’-甲氧基聯(lián)苯-3-基)-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺0.25乙酸鹽；
3’-(6-氨基-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-8-基)-6-氟聯(lián)苯-3-甲腈0.25乙酸鹽；
甲磺酸3’-(6-氨基-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-8-基)-5-氯聯(lián)苯-3-基酯0.5乙酸鹽；
3’-(6-氨基-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-8-基)-4-氟聯(lián)苯-3-甲腈0.25乙酸鹽；
8-(3’-氯-2’-氟聯(lián)苯-3-基)-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺0.25乙酸鹽；
8-(吡啶-4-基)-8-[3’-(三氟甲基)聯(lián)苯-3-基]-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺0.25乙酸鹽；
8-[3’-(甲磺?；?聯(lián)苯-3-基]-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺0.25乙酸鹽；
8-(3’，5’-二氯聯(lián)苯-3-基)-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺0.25乙酸鹽；
8-(3’-氯-5’-甲氧基聯(lián)苯-3-基)-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺0.25乙酸鹽；
8-(2’，3’-二氯聯(lián)苯-3-基)-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺0.25乙酸鹽；
8-[3-(5-氯-2-氟吡啶-3-基)苯基]-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺0.25乙酸鹽；
8-(3’-乙氧基聯(lián)苯-3-基)-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺0.5乙酸鹽；
8-(5’-氯-2’-氟聯(lián)苯-3-基)-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺0.25乙酸鹽；
8-(4’-氟-3’-甲氧基聯(lián)苯-3-基)-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺0.25乙酸鹽；
8-(吡啶-4-基)-8-(3-(嘧啶-5-基)苯基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺0.25乙酸鹽；
8-[3-(5-氟吡啶-3-基)苯基]-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺0.25乙酸鹽；
甲磺酸3’-(6-氨基-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-8-基)-5-甲氧基聯(lián)苯-3-基酯0.25乙酸鹽；
8-(2’，5’-二氯聯(lián)苯-3-基)-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺0.25乙酸鹽；
8-(3’-氯-4’-氟聯(lián)苯-3-基)-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺0.25乙酸鹽；
8-(3’，5’-二氯聯(lián)苯-3-基)-8-(呋喃-3-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺乙酸鹽；
8-[3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-8-(呋喃-3-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺乙酸鹽；
8-(3’，5’-二氯聯(lián)苯-3-基)-8-(呋喃-2-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺乙酸鹽；
8-(呋喃-2-基)-8-(3’-甲氧基聯(lián)苯-3-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺乙酸鹽；
8-(3’，5’-二氯聯(lián)苯-3-基)-8-(2-甲基-1，3-噻唑-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺乙酸鹽；
8-(3’，5’-二氯聯(lián)苯-3-基)-8-(噻吩-3-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺乙酸鹽；
8-[3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-8-(噻吩-3-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺乙酸鹽；
3，3-二氟-8-[3-(5-甲氧基吡啶-3-基)苯基]-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺乙酸鹽；
3，3-二氟-8-[3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺0.75乙酸鹽；
3，3-二氟-8-(2’-氟-5’-甲氧基聯(lián)苯-3-基)-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺0.25乙酸鹽；
3，3-二氟-8-(2’-氟-3’-甲氧基聯(lián)苯-3-基)-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺0.75乙酸鹽；
3，3-二氟-8-[3-(5-氟吡啶-3-基)苯基]-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺乙酸鹽，以及
3，3-二氟-8-(3’-甲氧基聯(lián)苯-3-基)-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺1.25乙酸鹽。
22.游離堿形式的化合物或其可藥用鹽、溶劑化物或鹽的溶劑化物，所述化合物選自
3，3-二氟-8-[3-(5-氯-2-氟吡啶-3-基)苯基]-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺乙酸鹽；
3，3-二氟-8-(吡啶-4-基)-8-(3-(嘧啶-5-基)苯基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺乙酸鹽；
3，3-二氟-8-[4-氟-3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺乙酸鹽；
3，3-二氟-8-(2’，6-二氟-3’-甲氧基聯(lián)苯-3-基)-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺乙酸鹽；
3，3-二氟-8-[4-氟-3-(5-甲氧基吡啶-3-基)苯基]-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺0.5乙酸鹽；
3，3-二氟-8-(3-氟吡啶-4-基)-8-[3-(2-氟吡啶-3-基)苯基]-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；
3，3-二氟-8-(3-氟吡啶-4-基)-8-(3-(嘧啶-5-基)苯基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺；以及
3，3-二氟-8-[3-(6-甲氧基吡嗪-2-基)苯基]-8-(吡啶-4-基)-2，3，4，8-四氫咪唑并[1，5-a]嘧啶-6-胺乙酸鹽。
23.一種藥物組合物，其包含作為活性成分的治療有效量的權(quán)利要求1至22中任一項(xiàng)的化合物及可藥用賦形劑、載體或稀釋劑。
24.權(quán)利要求1至22中任一項(xiàng)的化合物或其可藥用鹽，其用作藥物。
25.權(quán)利要求1至22中任一項(xiàng)的化合物作為用于治療或預(yù)防Aβ相關(guān)病理的藥物的用途。
26.權(quán)利要求1至22中任一項(xiàng)的化合物作為用于治療或預(yù)防Aβ相關(guān)病理的藥物的用途，其中所述Aβ相關(guān)病理為唐氏綜合征、β-淀粉樣血管病、腦淀粉樣血管病、遺傳性腦出血、與認(rèn)知缺損相關(guān)的障礙、MCI(“輕度認(rèn)知缺損”)、阿爾茨海默病、記憶喪失、與阿爾茨海默病相關(guān)的注意力缺陷癥狀、與阿爾茨海默病相關(guān)的神經(jīng)變性、混合型血管起源的癡呆、變性起源的癡呆、早老性癡呆、老年性癡呆、與帕金森病相關(guān)的癡呆、進(jìn)行性核上麻痹或皮質(zhì)基質(zhì)變性。
27.權(quán)利要求1至22中任一項(xiàng)的化合物在制備用于治療或預(yù)防Aβ相關(guān)病理的藥物中的用途。
28.權(quán)利要求1至22中任一項(xiàng)的化合物在制備用于治療或預(yù)防Aβ相關(guān)病理的藥物中的用途，其中所述Aβ相關(guān)病理為唐氏綜合征、β-淀粉樣血管病、腦淀粉樣血管病、遺傳性腦出血、與認(rèn)知缺損相關(guān)的障礙、MCI(“輕度認(rèn)知缺損”)、阿爾茨海默病、記憶喪失、與阿爾茨海默病相關(guān)的注意力缺陷癥狀、與阿爾茨海默病相關(guān)的神經(jīng)變性、混合型血管起源的癡呆、變性起源的癡呆、早老性癡呆、老年性癡呆、與帕金森病相關(guān)的癡呆、進(jìn)行性核上麻痹或皮質(zhì)基質(zhì)變性。
29.抑制BACE活性的方法，其包括使所述BACE與權(quán)利要求1至22中任一項(xiàng)的化合物接觸。
30.治療或預(yù)防哺乳動物的Aβ相關(guān)病理的方法，其包括將治療有效量的權(quán)利要求1至22中任一項(xiàng)的化合物給予所述患者。
31.權(quán)利要求30的方法，其中所述Aβ相關(guān)病理為唐氏綜合征、β-淀粉樣血管病、腦淀粉樣血管病、遺傳性腦出血、與認(rèn)知缺損相關(guān)的障礙、MCI(“輕度認(rèn)知缺損”)、阿爾茨海默病、記憶喪失、與阿爾茨海默病相關(guān)的注意力缺陷癥狀、與阿爾茨海默病相關(guān)的神經(jīng)變性、混合型血管起源的癡呆、變性起源的癡呆、早老性癡呆、老年性癡呆、與帕金森病相關(guān)的癡呆、進(jìn)行性核上麻痹或皮質(zhì)基質(zhì)變性。
32.權(quán)利要求30的方法，其中所述哺乳動物為人。
33.治療或預(yù)防哺乳動物的Aβ相關(guān)病理的方法，其包括將治療有效量的權(quán)利要求1至22中任一項(xiàng)的化合物和至少一種認(rèn)知增強(qiáng)藥物、記憶增強(qiáng)藥物或膽堿酯酶抑制劑給予所述患者。
34.權(quán)利要求33的方法，其中所述Aβ相關(guān)病理為唐氏綜合征、β-淀粉樣血管病、腦淀粉樣血管病、遺傳性腦出血、與認(rèn)知缺損相關(guān)的障礙、MCI(“輕度認(rèn)知缺損”)、阿爾茨海默病、記憶喪失、與阿爾茨海默病相關(guān)的注意力缺陷癥狀、與阿爾茨海默病相關(guān)的神經(jīng)變性、混合型血管起源的癡呆、變性起源的癡呆、早老性癡呆、老年性癡呆、與帕金森病相關(guān)的癡呆、進(jìn)行性核上麻痹或皮質(zhì)基質(zhì)變性。
35.權(quán)利要求33的方法，其中所述哺乳動物為人。
全文摘要
本發(fā)明涉及具有以右結(jié)構(gòu)式I的新穎化合物及其可藥用鹽、組合物和使用方法。這些新穎的化合物可用于治療或預(yù)防認(rèn)知缺損、阿爾茨海默病、神經(jīng)變性和癡呆。
文檔編號A61K31/519GK101506212SQ200780030470
公開日2009年8月12日 申請日期2007年6月12日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月14日
發(fā)明者斯蒂芬·伯格, 喬格·霍倫茲, 凱瑟琳娜·霍格丁, 卡林·科爾莫丁, 尼克拉斯·普洛貝克, 迪迪爾·羅蒂希, 費(fèi)爾南多·塞格爾梅布爾 申請人:阿斯利康(瑞典)有限公司, 阿斯特克斯醫(yī)療公司