專利名稱：注射用本芴醇脂肪乳的制備及其在瘧疾治療中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥學(xué)領(lǐng)域，涉及一種脂肪乳注射劑，特別涉及一種本芴醇脂肪乳注射劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
青蒿素是我國學(xué)者在20世紀(jì)70年代初從青蒿中分離提純出的一種有效的抗痕單體，它是含有過氧橋結(jié)構(gòu)的新型倍半萜內(nèi)酯化合物，具有快速、高效、無抗藥性、低毒性的特點，被世界衛(wèi)生組織稱為“治療瘧疾的最大希望”，可視為我國藥學(xué)工作者對人類社會的最大貢獻。它的發(fā)現(xiàn)成為世界抗瘧史繼奎寧之后又一個重要的里程。但研究表明，長期單獨服用青蒿素制劑易使病原蟲產(chǎn)生抗藥性，而將青蒿素與其它抗瘧藥品聯(lián)合制成復(fù)合制劑，也能對非并發(fā)型的瘧疾有近95%的療效。因此，2004年2月，WHO對瘧疾治療用藥政策進行 了改革，提出停止使用青蒿素類單方抗瘧疾藥，而提倡采用以青蒿素類藥物為基礎(chǔ)的聯(lián)合藥物(Artemisinin-based combination therapies,簡稱ACTs療法)。目前，這種以青蒿素類藥物為基礎(chǔ)的聯(lián)合藥物主要有蒿甲醚-苯芴醇、青蒿琥酯一氨酚喹、青蒿琥酯一周效磺胺-乙嘧啶、青蒿琥酯一甲氟喹、氨酚喹和周效磺胺-乙嘧啶聯(lián)合用藥等，其中蒿甲醚-苯芴醇聯(lián)合用藥的效果最好。這是因為蒿甲醚-苯芴醇聯(lián)合用藥可以增效互補青蒿素類衍生物蒿甲醚對瘧原蟲裂殖體有較強的殺滅作用，對于多種抗藥性瘧疾和抗氯喹惡性瘧疾療效顯著。但是它又存在作用時間短，復(fù)發(fā)率高等缺點。本芴醇?xì)绡懺x干凈徹底，有效率達到95%以上，復(fù)發(fā)率低于5%，但起效慢。所以將兩藥復(fù)方后可以同時克服蒿甲醚復(fù)發(fā)率高和本芴醇作用慢的缺點。具有控制癥狀快、殺滅瘧原蟲徹底、對抗性蟲株有效、延緩產(chǎn)生抗藥性等優(yōu)點。并且，此復(fù)方與現(xiàn)有其它抗瘧藥無交叉抗性，使用方便、安全。此復(fù)方口服片劑已于2009年4月8日獲得美國FDA的上市批準(zhǔn)。但是，目前，蒿甲醚與本芴醇的復(fù)方劑型只有口服制劑，如“專利申請?zhí)柺?0106722. 9的中國專利”公開了蒿甲醚/本芴醇復(fù)方口服片劑、復(fù)方口服糖漿、復(fù)方栓劑等?！皩＠暾?zhí)柺?00610037383. 5的中國專利”公開了蒿甲醚/本芴醇復(fù)方的自乳化劑。“專利申請?zhí)柺?00710057537. I的中國專利”公開了蒿甲醚/本芴醇復(fù)方的滴丸劑?！皩＠暾?zhí)柺?00710057538. 6的中國專利公開了一種治療瘧疾的本芴醇滴丸劑的制備方法”。這些都是口服劑型，在臨床使用時不能用于瘧疾的緊急治療，同時雖然它們在不同程度上提高了本芴醇的口服生物利用度，但是由于本芴醇的脂肪依賴性(即本芴醇的口服吸收受食物的影響，患者服用藥物時吃高脂肪食物，才能有較高的藥物吸收率和較高的血藥濃度殺滅瘧疾蟲)使得本芴醇在口服時需要增加服用劑量及次數(shù)來保障藥物的臨床治療效果。所以，本芴醇在臨床使用時劑量高達1840mg，甚至達到2880mg，這樣長期高劑量的服用會加速抗藥性的產(chǎn)生，從而大大縮短本芴醇的使用壽命，降低使用效果。另外從患者的角度，高劑量、頻繁服藥無疑增加經(jīng)濟負(fù)擔(dān)，實際上，費用高目前已經(jīng)成為瘧疾患者治療的主要屏障。為了克服上述缺陷，有必要開發(fā)本芴醇的新劑型。脂肪乳注射劑是一種新的脂溶性藥物載體。它是以大豆油為主要成分，用精制卵磷脂為乳化劑，甘油為等滲劑，經(jīng)高壓均質(zhì)而成。它具有生物相容性好、物理穩(wěn)定性高、便于制備、安全性好、載藥量高等特色，非常適合于注射。同時，它還能改善營養(yǎng)不良病人的淋巴細(xì)胞活性，為 患者提供營養(yǎng)，非常適用于惡性瘧及一般瘧疾的緊急治療。綜上所述，為了保護本芴醇的臨床使用壽命，提高本芴醇的生物利用度，本發(fā)明公開一種本芴醇脂肪乳的注射劑及制備方法。

發(fā)明內(nèi)容
為了提高本芴醇的生物利用度，滿足臨床治療惡性療瘧疾用于注射的需求，本發(fā)明提供一種本芴醇注射劑即本芴醇脂肪乳劑。由于是注射劑，所以它的生物利用度是100%。它在用于注射時無需添加任何助溶齊U，因此降低了毒副作用的發(fā)生率，并且，它還可以為瘧疾患者提供身體所需的營養(yǎng)，改善患者的淋巴細(xì)胞活性，有助于患者抵抗瘧疾和康復(fù)。本發(fā)明所述的本芴醇脂肪乳注射劑，由以下成分加工制成
本芴醇O. 03 35wt%，
注射用油10. O 30. 0wt%，
乳化劑O. 6 30. 0wt%,
增溶劑O 10wt%，
助乳化劑O 5wt%，
等滲劑2. 25 7wt%，
抗氧化劑O. 002 O. 075wt%,其余為注射用水。其中，所述注射用油是大豆油、茶油、麻油、中長鏈脂肪酸酯、橄欖油、莪術(shù)油、薏米仁油、大蒜油、紅花油、花椒油、川芎油、青蒿油、沙棘油、冬青油、月見草油、當(dāng)歸油、生姜油、荊芥油、連翅油、桉葉油、紫蘇油、陳皮油、牡荊油、玫瑰油、蓖麻油、薄荷油、茵陳油、小茴香油、松木油、丁香油、八角茴香油、麝香草油、肉桂油、艾葉油、蘇子油、姜黃油、白千層油、熏衣草油、木香油、廣藿香油、馬鞭草油、苦艾油、香紫蘇油、蒼術(shù)油、香桃木油、檸檬油、枳實油、丁香羅勒油、紅紫蘇葉油、術(shù)(松)榴油、椰子油、砂仁油、橄欖油、香茅油、香葉油、香薷草油、留蘭香油、杜杉油、廣霍香油、蘇合香油、黑加倫油、五味子油、石菖蒲油、蛇床子油、黃柏果油、薰衣草油、迷迭香油、香檸檬油、白檀油、胡蘿卜籽油、柏木葉油、芹菜籽油、牛至油、香茅醛油、芫荽油、橙花油、肉豆蘧油、洋蔥油、檀香油、萬壽菊油、百里香油、依蘭油中的任一種或多種混合物。其中，所述乳化劑是蛋黃卵磷脂、大豆卵磷脂、氫化蛋黃卵磷脂、氫化大豆卵磷脂、人工合成卵磷脂中的任一種；其中，所述助乳化劑是吐溫80、F68、油酸鈉、油酸鉀、油酸中的任一種或任幾種；其中，所述增溶劑是無水乙醇、氯仿、丙酮或異丙醇的任一種；其中，所述等滲劑是甘油、葡萄糖或木糖醇的任一種。
其中，所述抗氧化劑為維生素Ε。 本發(fā)明還提供了本芴醇脂肪乳注射劑的制備方法，包括以下步驟步驟I :將O. 03 35wt%的本荷醇放入O 10wt%的增溶劑中進行溶解,然后與10. O 30. 0wt%的注射用油混合，在80°C水浴中蒸發(fā)10 120min除去增溶劑；在氮氣保護下加入O. 6 30. 0wt%的乳化劑和O. 002 O. 075wt%的抗氧化劑，加熱至40 80。。得到形成油相混合物；步驟2 :將2. 25 7wt%的等滲劑、(T5wt%的助乳化劑和注射用水在4(T80°C下進行混合，形成水相混合物；步驟3 :在氮氣保護下將步驟2得到的水相混合物與步驟I得到的油相混合物進行混合，然后在40 80°C, 5000 12000r/min條件下高速分散5 30min后,再機械攪拌60 120min，用O. lmol/L NaOH或HCL調(diào)節(jié)pH至6. O 9. 0，在壓力為90 IlOMPa條件下進行均質(zhì)6 9次，得到均勻的乳狀溶液；步驟4 :將步驟3所得乳狀溶液過濾、通氮氣密封，經(jīng)100 125 °C滅菌處理15 50min或經(jīng)O. 22Mm無菌濾膜過濾后，25°C以下貯藏。本發(fā)明還提供了本芴醇脂肪乳注射劑在治療瘧疾中的應(yīng)用。本藥物劑型可以是肌肉注射或靜脈注射。根據(jù)體內(nèi)抗瘧活性檢測(詳見5. 1)，實驗時各組小鼠腹腔內(nèi)定量接種含有IX IO7個被鼠瘧原蟲寄生的紅細(xì)胞，接種量O. 2ml/只。于接種后第二日按組給藥，按WHO規(guī)定的4d抑制性試驗法，連續(xù)給藥3天。本芴醇脂肪乳給藥組(濃度分別為90、45、22.5 mg/kg/d)，尾注射給藥。結(jié)果顯示各個本芴醇脂肪乳注射劑給藥組小鼠的轉(zhuǎn)陰率均為100%，說明本芴醇脂肪乳具有很好的抗瘧活性，可以用于瘧疾治療。本發(fā)明方法制備的本芴醇脂肪乳注射劑將本芴醇的生物利用度提高到100%。并且，可以利用脂肪乳抑制瘧原蟲生長、營養(yǎng)供給的特性，增強本芴醇的抗瘧效果，同時為瘧疾患者提供身體所需的營養(yǎng)，改善患者的淋巴細(xì)胞活性，有助于患者抵抗瘧疾和康復(fù)。本發(fā)明方法制備的本芴醇脂肪乳注射劑可直接用于注射，不再需要助溶載體，從而降低了對人體的毒副作用，同時能增加藥物的穩(wěn)定性。


圖I :小鼠血液中含瘧原蟲(圖1A)及轉(zhuǎn)陰后不含瘧原蟲(圖1B)的顯微鏡照片
具體實施例方式本發(fā)明對注射用本芴醇脂肪乳的制劑配方中各種輔料的用量范圍進行了驗證。下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作詳細(xì)說明，但不僅限于下列實例。一、不同油相制備的本芴醇脂肪乳劑注射劑實施例I :處方
權(quán)利要求
1.一種本芴醇脂肪乳注射劑，其特征在于，由以下成分加工制成 本荀醇O. 03 35wt%，注射用油10. O 30. 0wt%，乳化劑O. 6 3(). 0wt%, 增溶劑O 10wt%， 助乳化劑O 5wt%， 等滲劑2. 25 7wt%，抗氧化劑O. 002 O. 075wt%, 其余為注射用水。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的本芴醇脂肪乳注射劑，其特征在于所述注射用油為大豆油、茶油、麻油、中長鏈脂肪酸酯、橄欖油、莪術(shù)油、薏米仁油、大蒜油、紅花油、花椒油、川芎油、青蒿油、沙棘油、冬青油、月見草油、當(dāng)歸油、生姜油、荊芥油、連翹油、桉葉油、紫蘇油、陳皮油、牡荊油、玫瑰油、蓖麻油、薄荷油、茵陳油、小茴香油、松木油、丁香油、八角茴香油、麝香草油、肉桂油、艾葉油、蘇子油、姜黃油、白千層油、熏衣草油、木香油、廣藿香油、馬鞭草油、苦艾油、香紫蘇油、蒼術(shù)油、香桃木油、檸檬油、枳實油、丁香羅勒油、紅紫蘇葉油、術(shù)(松)榴油、椰子油、砂仁油、橄欖油、香茅油、香葉油、香薷草油、留蘭香油、杜杉油、廣霍香油、蘇合香油、黑加倫油、五味子油、石菖蒲油、蛇床子油、黃柏果油、薰衣草油、迷迭香油、香檸檬油、白檀油、胡蘿卜籽油、柏木葉油、芹菜籽油、牛至油、香茅醛油、芫荽油、橙花油、肉豆蘧油、洋蔥油、檀香油、萬壽菊油、百里香油、依蘭油中的任一種或多種混合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的本芴醇脂肪乳注射劑，其特征在于所述乳化劑為蛋黃卵磷月旨、大豆卵磷脂、氫化蛋黃卵磷脂、氫化大豆卵磷脂或人工合成卵磷脂。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的本芴醇脂肪乳注射劑，其特征在于所述助乳化劑為吐溫80、F68、油酸鈉、油酸鉀或油酸中的任一種或任幾種。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的本芴醇脂肪乳注射劑，其特征在于所述增溶劑為無水乙醇、氯仿、丙酮或異丙醇。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的本芴醇脂肪乳注射劑，其特征在于所述等滲劑是甘油、葡萄糖或木糖醇。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述的本芴醇脂肪乳注射劑，其特征在于所述抗氧化劑為維生素E0
8.根據(jù)權(quán)利要求I所述的本芴醇脂肪乳注射劑，其特征在于由以下成分加工制成
9.權(quán)利要求I 7所述任一本芴醇脂肪乳注射劑的制備方法，其特征在于，步驟如下 步驟I :將O. 03 35wt%的本芴醇放入O 10wt%的增溶劑中進行溶解，然后與10. O 30. 0wt%的注射用油混合，在80°C水浴中蒸發(fā)10 120min除去增溶劑；在氮氣保護下加入O.6 30. 0wt%的乳化劑和O. 002 O. 075wt%的抗氧化劑，加熱至40 80°C得到形成油相混合物； 步驟2 :將2. 25 7wt%的等滲劑、(T5wt%的助乳化劑和注射用水在4(T80°C下進行混合，形成水相混合物； 步驟3 :在氮氣保護下將步驟2得到的水相混合物與步驟I得到的油相混合物進行混合，然后在40 80°C, 5000 12000r/min條件下高速分散5 30min后，再機械攪拌60 120min，用O. lmol/L NaOH或HCL調(diào)節(jié)pH至6. O 9. 0，在壓力為90 IlOMPa條件下進行均質(zhì)6 9次，得到均勻的乳狀溶液； 步驟4 :將步驟3所得乳狀溶液過濾、通氮氣密封，經(jīng)100 125°C滅菌處理15飛Omin或經(jīng)O. 22ΜΠ1無菌濾膜過濾后，25 °C以下貯藏。
10.權(quán)利要求I所述的本芴醇脂肪乳注射劑在制備治療瘧疾的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種本芴醇脂肪乳注射制劑，含有0.03~35wt%的本芴醇，10.0~30.0wt%的注射用油，0.6~30.0wt%的乳化劑，0~10wt%的增溶劑，0~5wt%的助乳化劑，2.25~7wt%的等滲劑，0.002~0.075wt%的抗氧化劑，其余為注射用水。還公開了上述本芴醇脂肪乳注射制劑的制備方法、藥效學(xué)及安全性評價。本發(fā)明本芴醇脂肪乳具有生物相容性好、物理穩(wěn)定性高、便于制備、安全性好、載藥量高等特色，粒徑小于200μm，非常適合于注射，如靜脈注射、肌肉注射。同時可以利用大豆油脂肪乳抑制鐮狀瘧原蟲、惡性瘧原蟲生長的特性，增強藥物的抗瘧效果，提高它們的生物利用度并降低毒副作用。還能為瘧疾患者提供身體所需的營養(yǎng)，改善患者的淋巴細(xì)胞活性，有助于患者抵抗瘧疾和康復(fù)。
文檔編號A61P33/06GK102895187SQ201210338450
公開日2013年1月30日 申請日期2012年9月13日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月13日
發(fā)明者馬玉樊, 陳濤, 王汝濤, 王惟嬌, 盧婷利, 趙雯, 王熒 申請人:西安力邦制藥有限公司