專利名稱：一種治療仔豬黃白痢的中藥提取物復(fù)方注射劑及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療仔豬黃白痢的獸藥制劑，尤其涉及一種治療仔豬黃白痢的中藥提取物復(fù)方注射劑及制備方法。
背景技術(shù)：
仔豬黃痢、白痢是由埃希氏大腸桿菌引起的吮乳仔豬多發(fā)性腸道傳染病，統(tǒng)稱大腸桿菌病，該病分布很廣，凡養(yǎng)母豬的地方均有發(fā)生，是造成仔豬育成率低、影響?zhàn)B豬業(yè)經(jīng)濟效益的主要傳染病之一。其中仔豬黃痢是初生仔豬常發(fā)的一種急性腸道傳染病，主要發(fā)生于7日齡以內(nèi)仔豬，發(fā)病率和死亡率都很高，由于發(fā)病急、病程短，日齡小，給治療工作帶來很大困難。仔豬白痢，主要發(fā)生于14 30日齡仔豬，發(fā)病率高，死亡率低，經(jīng)適時治療， 雖大部分都可治愈，但在一定程度上阻礙仔豬的生長發(fā)育。目前，該病的治療主要以各種抗菌藥物為主，如青霉素、土霉素、氯霉素、喹諾酮等，但是由于抗生素的長期反復(fù)使用以及濫用，致使該病原微生物對產(chǎn)生了耐藥性，而且藥物殘留影響了畜產(chǎn)品的品質(zhì)，一方面對動物性產(chǎn)品的正常出口貿(mào)易造成極大障礙，另一方面也給消費者健康帶來危害。因此，尋找無(低)藥殘、無(低)污染、能替代抗生素的促生長物質(zhì)的研究作為重點。中草藥長期使用較少產(chǎn)生耐藥性，不易出現(xiàn)殘留、抗藥性、毒副作用，具有安全性和可靠性，是其它抗生素?zé)o可比擬的。多年來，一些獸醫(yī)工作者在前人的經(jīng)驗基礎(chǔ)上，努力探索，在用中草藥防治仔豬黃、白痢方面進行了有益的嘗試。張敬禮等報道止痢湯、郁金散、白頭翁湯對仔豬大腸桿菌病有較好的預(yù)防和治療作用，對仔豬黃痢的治愈率在93%以上.有效率100% ；對仔豬自痢病的治愈率在100%。秦四海報道，由白頭翁、黃柏、秦皮、黃連、黃芪、當歸、板栗雄花絮等組成的自擬中草藥復(fù)方具有較好的治療仔豬黃痢效果。陳錦嬋試驗表明用白頭翁12g、 龍膽草6g、黃連5g、紅糖3g制成每毫升Ig生藥的濃縮液，以每頭仔豬灌服預(yù)先溫?zé)岷玫闹兴帩饪s液3mL，每天2次，連用3d的劑量，對仔豬黃痢的治療有著很好的效果，治愈率高達 93.9%。王自然報道自擬中草藥復(fù)方在治療仔豬黃痢時能獲得較好的療效(人工致病治愈率83. 3 %、臨床治愈率86. 9% )，與敏感的抗菌西藥相當，且按8倍劑量使用仍較安全。李義端報道，中藥“腹瀉一劑靈”對豬腹瀉有較好的治療效果，平均治愈率達96. 6%。張曉駟等在乳仔豬日糧中添加中草藥提取物“福樂寶I號”，能較好地預(yù)防乳仔豬腹瀉，特別在仔豬斷乳期間，其增重與防腹瀉效果優(yōu)于抗生素。楊宏斌等報道了新型復(fù)方中藥制劑沙大凈(注射用針劑及口服液)對治療仔豬黃、白痢的臨床試驗研究，其藥劑成分包括穿心蓮、白扁豆、黨參、蒼術(shù)、秦皮等天然中藥為原料，結(jié)果表明沙大凈口服液組對黃痢的治愈率是83%、有效率是92%，，白痢的治愈率是88 %、有效率是95 % ；沙大凈注射液組對黃痢的治愈率是92 %、有效率是96 %，對白痢的治愈率是93%、有效率是98%。趙恒章等報道了中草藥注射液對仔豬大腸桿菌病治療效果研究，中草藥注射液由河南職業(yè)技術(shù)師范學(xué)院中獸醫(yī)教研室大腸桿菌病課題組研制，主要由石膏、滑石、白頭翁、蒼術(shù)等11味中藥組成，其對仔豬黃白痢最高治愈率97.6%，平均為97. 3%。孫志良等研究了復(fù)方白毛藤注射液對大腸桿菌的體外抑菌作用和對豬大腸桿菌病的治療效果。郭小清等報道了中藥防治仔豬黃白痢的臨床療效試驗，其中痢可安注射液主要成分為硫酸小檗堿等，其高、中、低劑量治療仔豬黃白痢的治愈率分別為93. 02%, 91. 67%,80. 00%，有效率分別為97. 67%,94. 44%,86. 67%。唐朝忠等報道了中藥仔痢停對仔豬黃痢和白痢的治療試驗，其中中藥藥仔痢停是以白頭翁、黨參、干姜、黃柏、黃芩、赤芍、白芍、秦皮、郁金、茵陳、麥芽、藿香按3 :2:1:3:2:1:1:2:1:1:1:2 比例組方，混合，粉碎，過篩，拌料飼喂母豬，結(jié)果顯示，中藥組治愈率為88.5%，有效率為 100%。黃猛等采用白頭翁、黃柏、秦皮、龍膽草等10多味中草藥制成散劑，治療仔豬黃白痢等仔豬腹瀉疾病，治愈率達94. 5%。朱兆榮等篩選出白頭翁、黃芪和甘草等中草藥制成 “十滴水”治療仔豬黃白痢的口服液克痢王，以氟哌酸和慶大霉素作西藥對照組，結(jié)果表明克痢王組治愈率為94. 01%和96. 34%。李文雄等報道了中西醫(yī)結(jié)合防治仔豬黃白痢，中藥方劑為方劑白頭翁20g、黃連10g、黃柏10g、苦參10g、龍膽草5g、穿心蓮15g、二花IOg, 給藥方式為拌食。黃品呂等報道了中草藥治療仔豬黃白痢，采用鐵莧菜90g、大飛揚60g 煎汁灌服。吳俊偉等申請專利“一種用于治療仔豬黃白痢的復(fù)方中藥制劑”，專利申請?zhí)?200710093250. 4，發(fā)明公開了一種用于治療仔豬黃白痢的復(fù)方中藥制劑-金根注射液，它是由金銀花和板藍根兩味藥材經(jīng)現(xiàn)代中藥提取工藝，提取分離其有效成分精制而成，用于治療仔豬黃白痢不會產(chǎn)生耐藥性，且無藥物殘留，無毒副作用。另外還有許多文獻報道了喂服治療仔豬黃白痢的中藥組方，其中分別含有黃芩、白頭翁、秦皮、鐵莧菜、苦參以及穿心蓮。我國的中獸藥研究開發(fā)雖已取得一定的進展，且在一定范圍內(nèi)對畜禽疾病的控制取得了較好的效果，積累了豐富的臨床經(jīng)驗。并具有一定的理論基礎(chǔ)。中草藥不但可以組成復(fù)方，也可單方使用。從目前豬病的復(fù)雜性來看，中草藥在豬病防治方面的優(yōu)點越發(fā)突顯出來，尤其是在混合感染的治療和預(yù)防以及食品安全方面。隨著中草藥制劑技術(shù)的發(fā)展，作為傳統(tǒng)而經(jīng)典的豬病防治手段，中草藥必將大放異彩。目前，我國已經(jīng)有多種產(chǎn)品出現(xiàn).一些中草藥復(fù)方制劑已經(jīng)在豬疾病的防治方面發(fā)揮了重要作用。有的治療效果與某些抗生素相當，有的效果還優(yōu)于抗生素。因此，開展中草藥防治豬病不但是可持續(xù)畜牧業(yè)發(fā)展的要求， 也是人們對提高生活質(zhì)量和綠色食品消費的要求。在取得成效的同時，也存在一些問題。從總體上看，數(shù)量多、水平低、缺乏規(guī)?；a(chǎn)和自主創(chuàng)新能力，研究開發(fā)費用投入不足，缺乏市場經(jīng)濟和國際國內(nèi)規(guī)范方面的經(jīng)驗。尤其是添加量大、有效成分不明、作用機理不清、作用效果不穩(wěn)定、劑型單一，口服劑型偏多而注射劑型偏少缺乏毒理安全方面的研究、原料和質(zhì)量控制標準不完備等?！吨腥A人民共和國獸藥規(guī)范》(1992年版，二部)中的中藥制劑共1 個方，其中1 個為散劑，占82.4%，其余為流浸膏、膏劑、酊劑、針劑等。盡管地方標準也有一些其它劑型，但數(shù)量有限，合格的不多。這樣不僅滿足不了國內(nèi)外市場的需要.更談不上走出國門與世界同類先進產(chǎn)品相抗衡。鑒于以上問題，急需研制安全、高效、方便的新藥。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種低毒、高效、無殘留的治療仔豬黃白痢的中藥提取物復(fù)方注射劑。
本發(fā)明所要解決的另一個技術(shù)問題是提供該復(fù)方注射劑的制備方法。為解決上述問題，本發(fā)明所述的ー種治療仔豬黃白痢的中藥提取物復(fù)方注射劑， 其特征在于該注射劑每IOOmL注射液中包括以下原輔料純度彡98%的硫酸黃連素10 50mg 純度彡98%的黃芩苷50 200mg30 1白頭翁提取物250 400mg 30 1秦皮提取物250 400mg50 1四季青提取物250 400mg 30 1鐵莧菜提取物250 500mg20 1苦參提取物250 500mg 20 1穿心蓮提取物250 500mg吐溫-800.75mL亞硫酸鈉 lOOmg。該注射劑為pH = 7. 5的水針注射劑。如上所述的ー種治療仔豬黃白痢的中藥提取物復(fù)方注射劑的制備方法，包括以下 步驟(1)按配比稱量各組分；(2)將黃芩苷、硫酸黃蓮素分別溶于20mL的注射用水中，用氫氧化鈉調(diào)pH至 7. O 7. 5，并使所述黃芩苷和硫酸黃蓮素溶解，分別得到黃芩苷溶液和硫酸黃蓮素溶液；(3)將所述黃芩苷溶液和硫酸黃蓮素溶液混合后，加入50mL注射用水，再依次加 入30 1白頭翁提取物、30 1秦皮提取物、50 1四季青提取物、30 1鐵莧菜提取物、 20 1苦參提取物、20 1穿心蓮提取物，使其溶解，得到混合物溶液；(4)在所述混合物溶液中加入1 2g活性炭，煮沸10 15分鐘，自然冷卻后，經(jīng) 離心、抽濾，得到濾液;(5)在所述濾液中依次加入吐溫-80、亞硫酸鈉，混合均勻后加90 95mL注射用 水，并用氫氧化鈉調(diào)PH值至7. 5，然后定容至IOOmL ；最后分裝于西林瓶中，經(jīng)沸水浴加熱滅 菌后，即得水針注射劑。所述30 1白頭翁提取物的制備方法包括以下步驟(1)將白頭翁的根粉碎后過40 80目篩，得到白頭翁粉；(2)在所述白頭翁粉中加入其質(zhì)量7倍的蒸餾水，用氫氧化鈉調(diào)pH至10，在80°C 溫度下浸潤4h后過濾，得到濾液A和沉淀物A ；(3)在所述沉淀物A中加入其質(zhì)量5倍的蒸餾水，用氫氧化鈉調(diào)pH至10，在80°C 溫度下浸潤池后過濾，得到濾液B和沉淀物B ；(4)合并所述濾液A和所述濾液B，并用氫氧化鈉調(diào)pH至7，經(jīng)減壓濃縮后，得到濃 縮液；(5)所述濃縮液按其體積的3倍加入質(zhì)量濃度為95%的乙醇，沉淀24h后，離心 lOmin，得到上清液；(6)所述上清液依次經(jīng)減壓濃縮、干燥后，即得膏狀的白頭翁提取物。所述30 1秦皮提取物的制備方法包括以下步驟(1)將秦皮粉碎后過40 80目篩，得到秦皮粉；(2)在所述秦皮粉中按其質(zhì)量的3倍加入質(zhì)量濃度為95%的乙醇，在沸水浴中回 流《!，經(jīng)減壓回收乙醇后，得到濃縮藥物；(3)所述濃縮藥物按其質(zhì)量的1 2倍加蒸餾水沉淀，經(jīng)真空干燥后，即得膏狀的 秦皮提取物。
所述50 1四季青提取物的制備方法包括以下步驟(1)將四季青粉碎后過40 80目篩，得到四季青粉；(2)將所述四季青粉按其質(zhì)量的8 10倍加蒸餾水，在100°C溫度下煎煮3次，每次煮沸1小時，過濾后，合并濾液；(3)所述濾液經(jīng)減壓濃縮后，得到濃縮液；該濃縮液按其體積的8 10倍加入質(zhì)量濃度為95%的乙醇，攪勻，放置3 5天后，回收乙醇，得到上清液；(4)所述上清液依次經(jīng)減壓濃縮至糖漿狀后，用質(zhì)量濃度為95%的乙醇分次提取，合并提取液；所述提取液放置1天，過濾減壓回收乙醇，即得糖漿狀的四季青提取物。所述30 1鐵莧菜提取物的制備方法包括以下步驟(1)將鐵莧菜干燥全草粉碎后過40 80目篩，得到鐵莧菜粉；(2)在所述鐵莧菜粉中按其質(zhì)量的10倍加入蒸餾水，在100°C溫度下煎煮2 3 次，每次煮沸1小時，過濾后，合并濾液；(3)所述濾液經(jīng)減壓濃縮、干燥后，即得鐵莧菜提取物。所述20 1苦參提取物的制備方法包括以下步驟(1)將苦參粉碎后過40 80目篩，得到苦參粉；(2)在所述苦參粉中加入其質(zhì)量7倍、質(zhì)量濃度為95%的乙醇，回流他，得到濾液 A和沉淀物A ；(3)在所述沉淀物A中加入其質(zhì)量5倍、質(zhì)量濃度為95%的乙醇，回流4h，得到濾液B和沉淀物B ；(4)合并所述濾液A和所述濾液B，經(jīng)減壓濃縮回收乙醇后，得到濃縮液；該濃縮液干燥后，即得膏狀的苦參提取物。所述20 1穿心蓮提取物的制備方法包括以下步驟(1)將穿心蓮粉碎后過40 80目篩，得到穿心蓮粉；(2)在所述穿心蓮粉中加入其質(zhì)量7倍的蒸餾水，在80°C溫度下浸潤4h后過濾， 得到濾液A和沉淀物A ；(3)在所述沉淀物A中加入其質(zhì)量5倍的蒸餾水，在80°C溫度下浸潤池后過濾， 得到濾液B和沉淀物B ；(4)合并所述濾液A和所述濾液B，經(jīng)減壓濃縮后，得到濃縮液；(5)所述濃縮液按其體積的3倍加入質(zhì)量濃度為95%的乙醇，沉淀24h后，離心 lOmin，得到上清液；(6)所述上清液依次經(jīng)減壓濃縮、干燥后，即得膏狀的穿心蓮提取物。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點1、本發(fā)明采用具有止瀉、退熱作用的中草藥黃連、黃芩、白頭翁、秦皮、鐵莧菜、四季青、苦參和穿心蓮，根據(jù)其有效成分的性質(zhì)，對處方各藥有效成分進行提取，通過單味中草藥有效提取物的體外抑菌試驗和組方進行體外抑菌試驗，篩選出防治仔豬黃白痢的最佳配方，提取物的量經(jīng)脫色、過濾、除菌、添加穩(wěn)定劑，按照中藥制劑學(xué)要求制備成復(fù)方注射液，作為治療仔豬黃白痢的新制劑。通過外觀和理化性質(zhì)、無菌、粘膜刺激、肌肉刺激、溶血和熱原檢查，表明注射劑符合制劑學(xué)要求。2、本發(fā)明對各有效成分提取物對致病性大腸桿菌進行進行體外抑菌活性研究，結(jié)果硫酸黃連素純品、黃芩苷純品、30 1白頭翁提取物、30 1秦皮提取物、50 1四季青、 30 1鐵莧菜提取物、20 1苦參提取物和20 1穿心蓮提取物對仔豬致病性大腸桿菌均有較好的抑菌效果，其中硫酸黃連素純品和黃芩苷純品的體外抑菌效果最為顯著。結(jié)果見表1。表1八種中草藥提取物對八種大腸桿菌的MIC測定結(jié)果(mg/ml)
權(quán)利要求
1.一種治療仔豬黃白痢的中藥提取物復(fù)方注射劑，其特征在于該注射劑每IOOmL注射液中包括以下原輔料純度彡98%的硫酸黃連素10 50mg 純度彡98%的黃芩苷50 200mg30 1白頭翁提取物250 400mg 30 1秦皮提取物250 400mg50 1四季青提取物250 400mg 30 1鐵莧菜提取物250 500mg20 1苦參提取物250 500mg 20 1穿心蓮提取物250 500mg吐溫-800. 75mL 亞硫酸鈉lOOmg。
2.如權(quán)利要求1所述的一種治療仔豬黃白痢的中藥提取物復(fù)方注射劑，其特征在于 該注射劑為pH = 7. 5的水針注射劑。
3.如權(quán)利要求2所述的一種治療仔豬黃白痢的中藥提取物復(fù)方注射劑的制備方法，包括以下步驟(1)按配比稱量各組分；(2)將黃芩苷、硫酸黃蓮素分別溶于20mL的注射用水中，用氫氧化鈉調(diào)pH至7.0 7. 5，并使所述黃芩苷和硫酸黃蓮素溶解，分別得到黃芩苷溶液和硫酸黃蓮素溶液；(3)將所述黃芩苷溶液和硫酸黃蓮素溶液混合后，加入50mL注射用水，再依次加入 30 1白頭翁提取物、30 1秦皮提取物、50 1四季青提取物、30 1鐵莧菜提取物、 20 1苦參提取物、20 1穿心蓮提取物，使其溶解，得到混合物溶液；(4)在所述混合物溶液中加入1 2g活性炭，煮沸10 15分鐘，自然冷卻后，經(jīng)離心、 抽濾，得到濾液；(5)在所述濾液中依次加入吐溫-80、亞硫酸鈉，混合均勻后加90 95mL注射用水，并用氫氧化鈉調(diào)PH值至7. 5，然后定容至IOOmL ；最后分裝于西林瓶中，經(jīng)沸水浴加熱滅菌后， 即得水針注射劑。
4.如權(quán)利要求1或3所述的一種治療仔豬黃白痢的中藥提取物復(fù)方注射劑，其特征在于所述30 1白頭翁提取物的制備方法包括以下步驟(1)將白頭翁的根粉碎后過40 80目篩，得到白頭翁粉；(2)在所述白頭翁粉中加入其質(zhì)量7倍的蒸餾水，用氫氧化鈉調(diào)pH至10，在80°C溫度下浸潤4h后過濾，得到濾液A和沉淀物A ；(3)在所述沉淀物A中加入其質(zhì)量5倍的蒸餾水，用氫氧化鈉調(diào)pH至10，在80°C溫度下浸潤池后過濾，得到濾液B和沉淀物B ；(4)合并所述濾液A和所述濾液B，并用氫氧化鈉調(diào)pH至7，經(jīng)減壓濃縮后，得到濃縮液；(5)所述濃縮液按其體積的3倍加入質(zhì)量濃度為95%的乙醇，沉淀24h后，離心lOmin， 得到上清液；(6)所述上清液經(jīng)減壓濃縮后，即得膏狀的白頭翁提取物。
5.如權(quán)利要求1或3所述的一種治療仔豬黃白痢的中藥提取物復(fù)方注射劑，其特征在于所述30 1秦皮提取物的制備方法包括以下步驟(1)將秦皮粉碎后過40 80目篩，得到秦皮粉；(2)在所述秦皮粉中按其質(zhì)量的3倍加入質(zhì)量濃度為95%的乙醇，在沸水浴中回流他， 經(jīng)減壓回收乙醇后，得到濃縮藥物；(3)所述濃縮藥物按其質(zhì)量的1 2倍加蒸餾水沉淀，經(jīng)真空干燥后，即得膏狀的秦皮提取物。
6.如權(quán)利要求1或3所述的一種治療仔豬黃白痢的中藥提取物復(fù)方注射劑，其特征在于所述50 1四季青提取物的制備方法包括以下步驟(1)將四季青粉碎后過40 80目篩，得到四季青粉；(2)將所述四季青粉按其質(zhì)量的8 10倍加蒸餾水，在100°C溫度下煎煮3次，每次煮沸1小時，過濾后，合并濾液；(3)所述濾液經(jīng)減壓濃縮后，得到濃縮液；該濃縮液按其體積的8 10倍加入質(zhì)量濃度為95%的乙醇，攪勻，放置3 5天后，回收乙醇，得到上清液；(4)所述上清液依次經(jīng)減壓濃縮至糖漿狀后，用質(zhì)量濃度為95%的乙醇分次提取，合并提取液；所述提取液放置1天，過濾減壓回收乙醇，即得糖漿狀的四季青提取物。
7.如權(quán)利要求1或3所述的一種治療仔豬黃白痢的中藥提取物復(fù)方注射劑，其特征在于所述30 1鐵莧菜提取物的制備方法包括以下步驟(1)將鐵莧菜干燥全草粉碎后過40 80目篩，得到鐵莧菜粉；(2)在所述鐵莧菜粉中按其質(zhì)量的10倍加入蒸餾水，在100°C溫度下煎煮2 3次，每次煮沸1小時，過濾后，合并濾液；(3)所述濾液經(jīng)減壓濃縮后，即得鐵莧菜提取物。
8.如權(quán)利要求1或3所述的一種治療仔豬黃白痢的中藥提取物復(fù)方注射劑，其特征在于所述20 1苦參提取物的制備方法包括以下步驟(1)將苦參粉碎后過40 80目篩，得到苦參粉；(2)在所述苦參粉中加入其質(zhì)量7倍、質(zhì)量濃度為95%的乙醇，回流他，得到濾液A和沉淀物A;(3)在所述沉淀物A中加入其質(zhì)量5倍、質(zhì)量濃度為95%的乙醇，回流4h，得到濾液B 和沉淀物B ；(4)合并所述濾液A和所述濾液B，經(jīng)減壓濃縮回收乙醇后，即得膏狀的苦參提取物。
9.如權(quán)利要求1或3所述的一種治療仔豬黃白痢的中藥提取物復(fù)方注射劑，其特征在于所述20 1穿心蓮提取物的制備方法包括以下步驟(1)將穿心蓮粉碎后過40 80目篩，得到穿心蓮粉；(2)在所述穿心蓮粉中加入其質(zhì)量7倍的蒸餾水，在80°C溫度下浸潤4h后過濾，得到濾液A和沉淀物A ；(3)在所述沉淀物A中加入其質(zhì)量5倍的蒸餾水，在80°C溫度下浸潤池后過濾，得到濾液B和沉淀物B ；(4)合并所述濾液A和所述濾液B，經(jīng)減壓濃縮后，得到濃縮液；(5)所述濃縮液按其體積的3倍加入質(zhì)量濃度為95%的乙醇，沉淀24h后，離心IOmin， 得到上清液；(6)所述上清液經(jīng)減壓濃縮后，即得膏狀的穿心蓮提取物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種治療仔豬黃白痢的中藥提取物復(fù)方注射劑，該注射劑每100ml注射液中包括以下原輔料純度≥98％的硫酸黃連素10～50mg；純度≥98％的黃芩苷50～200mg；30∶1白頭翁提取物250～400mg；30∶1秦皮提取物250～400mg；50∶1四季青提取物250～400mg；30∶1鐵莧菜提取物250～500mg；20∶1苦參提取物250～500mg；20∶1穿心蓮提取物250～500mg；吐溫-800.75ml；亞硫酸鈉100mg。本發(fā)明采用具有止瀉、退熱作用的中草藥黃連、黃芩、白頭翁、秦皮、鐵莧菜、四季青、苦參和穿心蓮，根據(jù)其有效成分的性質(zhì)，對處方各藥有效成分進行提取，配制出符合制劑學(xué)要求的復(fù)方注射劑，該注射劑純中藥組合無污染，給藥方便，療效非常顯著。
文檔編號A61K36/71GK102274303SQ201110192438
公開日2011年12月14日 申請日期2011年7月5日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月5日
發(fā)明者常亮, 李 杰, 楊明, 王珂, 薛健, 豆林濤, 賀奮義, 賀泂杰, 郭慧琳, 陳伯祥 申請人:甘肅省畜牧獸醫(yī)研究所