專利名稱：長(zhǎng)春西汀聚合物膠束制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物制備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種長(zhǎng)春西汀聚合物膠束及其制備方法。
背景技術(shù)：
長(zhǎng)春西汀(vinpocetine)是從夾竹桃科小蔓長(zhǎng)春花(Vinca minor L.)中提取的吲哚類生物堿長(zhǎng)春胺(vincamine)的衍生物，是20世紀(jì)70年代匈牙利Gedeon Richter公司開(kāi)發(fā)的腦循環(huán)代謝改善劑，該藥作為改善腦循環(huán)的首選藥物，主要用于治療腦梗塞、腦出血后遺癥及腦動(dòng)脈硬化癥等多種類型的循環(huán)障礙性腦血管疾病。但人體內(nèi)肝臟細(xì)胞對(duì)長(zhǎng)春西汀具有極強(qiáng)的代謝作用，存在嚴(yán)重的肝臟首過(guò)效應(yīng)， 藥物主要代謝產(chǎn)物為阿樸長(zhǎng)春胺酸，由腎臟排泄，其藥理作用與原形藥相似，但藥效較低； 而且長(zhǎng)春西汀在體內(nèi)分布廣泛，自血漿消除較快，雖然易透過(guò)血腦屏障但其在腦部的生物利用率很低，腦脊液中濃度為血濃度的1/30 ；同時(shí)由于長(zhǎng)春西汀在水中溶解度極低，所以無(wú)論是靜脈注射還是口服，動(dòng)物及人體實(shí)驗(yàn)都顯示其在腦部的生物利用度最高只是3. 7%。聚乙二醇-聚乳酸共聚物根據(jù)分子結(jié)構(gòu)不同可以分為線型共聚物和星型共聚物兩種，線型共聚物根據(jù)分子鏈組成不同，又可分為兩嵌段共聚物、三嵌段共聚物和多嵌段共聚物。以兩端基均為羥基的PEG引發(fā)丙交酯開(kāi)環(huán)聚合，可以形成三嵌段聚乙二醇-聚乳酸共聚物(PLA-PEG-PLA)，或?qū)汕抖喂簿畚颩PEG-PLA偶聯(lián)，得到分子鏈兩端均為PEG的三嵌段共聚物(PEG-PLA-PEG)。“長(zhǎng)春西汀兩親性殼聚糖共聚物自組裝膠束的制備”(王宇；喬明曦；沈慶文； 陳大為，中國(guó)科學(xué)院上海冶金研究所；材料物理與化學(xué)(專業(yè))博士論文2000年度)公開(kāi)了制備殼聚糖共聚物自組裝膠束載藥系統(tǒng)，是采用溶劑蒸發(fā)法，制得的載藥膠束平均粒徑為(127. 4 士 8. 0)nm,載藥量為7. 8%,包封率為75. 7%。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)制備的長(zhǎng)春西汀制劑生物利用度低、水中溶解性差等問(wèn)題，提供一種新型的長(zhǎng)春西汀聚合物膠束制劑。該制劑能增加藥物在水中的溶解度， 利用膠束納米級(jí)的粒徑和親水性的外殼使藥物能在血液中長(zhǎng)時(shí)間循環(huán)并保持穩(wěn)定，促進(jìn)藥物的吸收。本發(fā)明的另一目的是提供上述長(zhǎng)春西汀聚合物膠束制劑的制備方法。本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)上述目的
本發(fā)明通過(guò)對(duì)載體材料的篩選，最后選擇了經(jīng)FDA批準(zhǔn)的生物可降解的疏水性材料聚乳酸(PLA)與可注射用親水性高分子聚乙二醇(PEG)的嵌段共聚物PEG-PLA (聚乙二醇聚乳酸)為載體材料，采用物理包埋的方法制備疏水性藥物長(zhǎng)春西汀載藥膠束，該長(zhǎng)春西汀聚合物膠束制劑載藥量相對(duì)較高，粒徑相對(duì)較小且分布均勻。一種長(zhǎng)春西汀聚合物膠束制劑，是由PEG-PLA包埋長(zhǎng)春西汀形成，長(zhǎng)春西汀與PEG-PLA的質(zhì)量比為廣12:20 (其中6 10:20的比例最佳)；PEG-PLA的重均分子量為 7000 45000，其中聚乙二醇的分子量為2000 15000，聚乳酸的分子量為5000 30000。上述長(zhǎng)春西汀聚合物膠束制備的膠束粒徑為5(T200nm，載藥量為2 30%，最佳載藥量平均可達(dá)20. 35%。上述聚合物膠束制劑可以通過(guò)薄膜水化法、溶劑擴(kuò)散法和透析法等制備，其中薄膜水化法最優(yōu)，本發(fā)明通過(guò)對(duì)載藥量、包封率、粒徑及其分布為綜合評(píng)價(jià)指標(biāo)，對(duì)薄膜水化法制備膠束的主要影響因素水化溫度、有機(jī)溶劑的種類及用量、水化時(shí)間、水化轉(zhuǎn)速、水化水用量、投藥量進(jìn)行了篩選，最終得出以下制備步驟
(1)將長(zhǎng)春西汀與PEG-PLA按質(zhì)量比為廣12:20溶于有機(jī)溶劑中，配成0.42%g/ m廣0. 64% g/ml的有機(jī)溶液；
(2)將有機(jī)溶液攪拌混合均勻，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，形成聚合物藥物膜；
(3)加入去離子水使聚合物藥物膜骨架軟化，然后攪拌形成聚合物膠束，-10°C _30°C 驟冷處理；
(4)驟冷處理后的膠束用微孔膜過(guò)濾，除去未包裹的長(zhǎng)春西汀，將過(guò)濾所得膠束溶液中加入凍干保護(hù)劑，然后冷凍干燥得到長(zhǎng)春西汀聚合物膠束凍干粉。上述制備方法中，步驟(1)所述有機(jī)溶劑為本領(lǐng)域常用的有機(jī)溶劑，包括乙腈、乙腈-冰乙酸(體積比17:1)、二氯甲烷、丙酮或丙酮-冰乙酸(體積比17:1)，其中使用二氯甲烷能夠達(dá)到最佳的效果。有機(jī)溶劑為二氯甲烷時(shí)，步驟(2)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)條件為30°C減壓旋蒸anirTlOmin，然后升溫至60°C減壓旋蒸30mirT60min，旋蒸轉(zhuǎn)速為50r/mirT90r/min。步驟(3)優(yōu)選加入去離子水量為長(zhǎng)春西汀藥物量的0. 3^2倍，能夠達(dá)到最佳效果的軟化水用量為長(zhǎng)春西汀藥物量的0. 8 1倍；水化時(shí)間為0. 5 20h，最佳水化時(shí)間為 lTl2h ；水化溫度為3(T90°C，選用75 85°C達(dá)到最佳的效果；攪拌轉(zhuǎn)速為50(T2000r/min， 經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明最適轉(zhuǎn)速在120(Tl600r/min。步驟(4)所述微孔膜的孔徑優(yōu)選為0. 45 μ m或0. 22 μ m。步驟(4)中，本發(fā)明以重均分子量為100(Tl0000的PEG或Pluronic F68 (簡(jiǎn)稱 F68)作為凍干保護(hù)劑，所得膠束凍干粉均可復(fù)溶，但前者的保護(hù)效果明顯優(yōu)于后者，最佳凍干保護(hù)劑為重均分子量為3350的PEG。本發(fā)明采用優(yōu)化后的薄膜水化法制備長(zhǎng)春西汀聚合物膠束制劑，通過(guò)單因素篩選，得到對(duì)膠束制備影響較為顯著的三個(gè)因素水化溫度、水化時(shí)間和投藥量，并對(duì)他們進(jìn)行正交設(shè)計(jì)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，最終得出薄膜水化法制備長(zhǎng)春西汀聚合物膠束的最佳工藝，其最佳制備條件為水化溫度80°C，水化時(shí)間12h，投藥量為PEG-PLA的40% mg/mg。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果
將長(zhǎng)春西汀制備成膠束制劑，其內(nèi)核可以作為疏水性藥物的容器，提高長(zhǎng)春西汀在水中的溶解度，改善藥物的生物利用度，降低毒副作用，外殼可對(duì)長(zhǎng)春西汀起保護(hù)作用，提高長(zhǎng)春西汀的穩(wěn)定性。本發(fā)明的長(zhǎng)春西汀聚合物膠束制劑大大改善了長(zhǎng)春西汀口服吸收差， 生物利用度低的不足。


圖1為本發(fā)明所用藥物長(zhǎng)春西汀的IR圖。圖2為本發(fā)明所用材料PEG-PLA的IR圖。圖3為本發(fā)明所用藥物長(zhǎng)春西汀膠束的頂圖。圖4為實(shí)施例4所得載藥聚合物膠束粒子的動(dòng)態(tài)光散射法測(cè)定膠束粒徑圖。圖5為實(shí)施例5所得載藥聚合物膠束粒子的透射電鏡圖。
具體實(shí)施例方式以下通過(guò)實(shí)施例進(jìn)一步解釋本發(fā)明，但并不因此將本發(fā)明限制在所述是勢(shì)力范圍內(nèi)。實(shí)施例中如無(wú)特殊說(shuō)明，均為本領(lǐng)域常規(guī)實(shí)驗(yàn)手段和試劑。實(shí)施例1薄膜水化法制備載藥聚合物膠束
精密稱取PEG-PLA 20 mg，放入50 mL的干燥圓底燒瓶中，加入5 mg/mL的長(zhǎng)春西汀/ 乙腈溶液0.8 mL，補(bǔ)加3 mL乙腈溶解，振搖，使聚合物和藥物在有機(jī)溶液中分散均勻。水浴加熱到60 °C，減壓旋蒸45 min，轉(zhuǎn)速為75 r/min，除去有機(jī)溶劑。分別于70°C保溫5 min 使固體骨架膜融化，獲得透明的凝膠樣樣品。加入5 mL同溫度去離子水，于同樣溫度下恒速1900 r/min攪拌2 h水化，冷卻至室溫，在_20°C冰箱中放置驟冷，用0. 22 μ m微孔濾膜過(guò)濾掉未包裹的藥物，向過(guò)濾所得的膠束溶液中加入凍干保護(hù)劑PEG3350(表示重均分子量為3350)，然后冷凍干燥制得長(zhǎng)春西汀膠束凍干粉。上述膠束制備方法所制得的載藥膠束， 其載藥量為7. 42%。實(shí)施例2溶劑擴(kuò)散法制備載藥聚合物膠束
精密稱取20 mg的PEG-PLA與4 mg的長(zhǎng)春西汀，共溶于0. 5 mL的乙腈溶液中，于600 r/min磁力攪拌轉(zhuǎn)速下緩慢滴加于5 mL去離子水中，置于通風(fēng)櫥中同速攪拌4 h，除去有機(jī)溶劑，放置于冰箱中冷卻，用0. 22 μ m微孔濾膜過(guò)濾，除去未包裹的藥物，向過(guò)濾所得的膠束溶液中加入凍干保護(hù)劑，然后冷凍干燥制得長(zhǎng)春西汀膠束凍干粉。上述膠束制備方法所制得的載藥膠束，其載藥量為6. 43%。實(shí)施例3透析法制備載藥聚合物膠束
精密稱量40 mg的PEG-PLA和20 mg的長(zhǎng)春西汀溶解于10 mL N, N- 二甲基甲酰胺 (DMF)中，于45 °C的恒溫水浴中溫浴5 min，磁力攪拌使混勻。將溶液轉(zhuǎn)移至截留分子量為 3500的透析袋中，置于2 L去離子水中透析，分別于第2 h，4 h，6 h，8 h，12 h，24 h更換新鮮去離子水。透析完成后，取出透析袋內(nèi)的溶液，以3000 r/min離心10 min，上清液經(jīng)由 0. 22 μ m微孔濾膜過(guò)濾，向過(guò)濾所得的膠束溶液中加入凍干保護(hù)劑F68，然后冷凍干燥制得長(zhǎng)春西汀膠束凍干粉。上述膠束制備方法所制得的載藥膠束，其載藥量為2. 58%。實(shí)施例4正交試驗(yàn)一制備載藥聚合物膠束
薄膜水化法制備膠束精密稱取20 mg的PEG-PLA與8 mg的長(zhǎng)春西汀，一同放入50 mL 的干燥圓底燒瓶中，加入5 mL的二氯甲烷，攪拌20 min，使聚合物和藥物在有機(jī)溶液中分散均勻。水浴加熱到30 °C，減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)8 min，然后升溫度至60 °C，減壓旋蒸52 min，轉(zhuǎn)速一直保持為80r/min，除去有機(jī)溶劑。于80 °C保溫5 min使固體骨架膜融化，獲得透明的凝膠樣樣品。加入7. 5 mL的同溫度去離子水，保鮮膜封口后，于同樣水浴溫度下以1200 r/min的轉(zhuǎn)速磁力攪拌水化4h，再以1400 r/min的轉(zhuǎn)速磁力攪拌水化4h，再以1600 r/min 的轉(zhuǎn)速磁力攪拌水化4h，之后立即放入冰箱(_20°C)中驟冷，分別用0.45μπι、0.22μπι微孔濾膜過(guò)濾掉未包裹的藥物，向過(guò)濾所得的膠束溶液中加入凍干保護(hù)劑PEG3350，然后冷凍干燥制得長(zhǎng)春西汀膠束凍干粉。得到的載藥膠束載藥量為20. 35%。
實(shí)施例5正交試驗(yàn)二制備載藥聚合物膠束
薄膜水化法制備膠束精密稱取20 mg的PEG-PLA與10 mg的長(zhǎng)春西汀，一同放入50 mL的干燥圓底燒瓶中，加入5 mL的二氯甲烷，攪拌20 min，使聚合物和藥物在有機(jī)溶液中分散均勻。水浴加熱到30 °C，減壓旋蒸8 min，然后升溫度至60 °C，減壓旋蒸52 min，轉(zhuǎn)速一直保持為80r/min，除去有機(jī)溶劑。于70°C保溫5 min使固體骨架膜融化，獲得透明的凝膠樣樣品。加入7. 5 mL的同溫度去離子水，保鮮膜封口后，于同樣水浴溫度下以1200 r/ min的轉(zhuǎn)速磁力攪拌水化4h，再以1400 r/min的轉(zhuǎn)速磁力攪拌水化4h，再以1600 r/min的轉(zhuǎn)速磁力攪拌水化4h，之后立即放入冰箱(_20°C )中驟冷，分別用0. 45 μ m、0. 22 μ m微孔濾膜過(guò)濾掉未包裹的藥物，向過(guò)濾所得的膠束溶液中加入凍干保護(hù)劑PEG3350，然后冷凍干燥制得長(zhǎng)春西汀膠束凍干粉。得到的載藥膠束載藥量為15.90%。
權(quán)利要求
1.一種長(zhǎng)春西汀聚合物膠束制劑，其特征在于是由PEG-PLA包埋長(zhǎng)春西汀形成，長(zhǎng)春西汀與PEG-PLA的質(zhì)量比為廣12:20 ；PEG-PLA的重均分子量為7000 45000，其中聚乙二醇的分子量為2000 15000，聚乳酸的分子量為500(Γ30000。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述長(zhǎng)春西汀聚合物膠束制劑，其特征在于膠束粒徑為5(T200nm， 載藥量為2 30%。
3.權(quán)利要求1或2所述長(zhǎng)春西汀聚合物膠束制劑的制備方法，其特征在于步驟如下(1)將長(zhǎng)春西汀與PEG-PLA按質(zhì)量比為廣12:20溶于有機(jī)溶劑中，配成0.42%g/ m廣0. 64% g/ml的有機(jī)溶液；(2)將有機(jī)溶液攪拌混合均勻，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，形成聚合物藥物膜；(3)加入去離子水使聚合物藥物膜骨架水化，然后攪拌形成聚合物膠束，-IO0C^-300C 驟冷處理；(4)驟冷處理后的膠束用微孔膜過(guò)濾，除去未包裹的長(zhǎng)春西汀，將過(guò)濾所得膠束溶液中加入凍干保護(hù)劑，然后冷凍干燥得到長(zhǎng)春西汀聚合物膠束凍干粉。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述長(zhǎng)春西汀聚合物膠束制劑的制備方法，其特征在于步驟(1)所述有機(jī)溶劑為乙腈、體積比為17:1的乙腈-冰乙酸、二氯甲烷、丙酮或體積比為17:1的丙酮-冰乙酸。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述長(zhǎng)春西汀聚合物膠束制劑的制備方法，其特征在于步驟(1)有機(jī)溶劑為二氯甲烷時(shí)，步驟(2)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)條件為30°C減壓旋蒸anirTlOmin，然后升溫至 60°C減壓旋蒸30mirT60min，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)轉(zhuǎn)速為50r/mirT90r/min。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述長(zhǎng)春西汀聚合物膠束制劑的制備方法，其特征在于步驟(3)加入去離子水的量為長(zhǎng)春西汀藥物量的0. 3 2倍，水化時(shí)間為0. 5 20h，溫度為3(T90°C，攪拌轉(zhuǎn)速為 50(T2000r/min。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述長(zhǎng)春西汀聚合物膠束制劑的制備方法，其特征在于步驟(4)所述微孔膜的孔徑為0. 45 μ m或0. 22 μ m。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述方法，其特征在于步驟(4)所述凍干保護(hù)劑為重均分子量為 1000^10000 的 PEG 或 F68。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種長(zhǎng)春西汀聚合物膠束制劑及其制備方法，屬于藥物制備技術(shù)領(lǐng)域。該長(zhǎng)春西汀聚合物膠束制劑是由聚乙二醇聚乳酸包埋長(zhǎng)春西汀形成，長(zhǎng)春西汀與聚乙二醇聚乳酸的質(zhì)量比為1~12:20；聚乙二醇聚乳酸的重均分子量為7000~45000，其中聚乙二醇的分子量為2000~15000，聚乳酸的分子量為5000~30000。本發(fā)明采用經(jīng)過(guò)條件篩選的薄膜水化法制備長(zhǎng)春西汀聚合物膠束制劑，對(duì)水化溫度、時(shí)間及投藥量等都做了最佳限制，得到的產(chǎn)品能明顯改善長(zhǎng)春西汀口服吸收差、生物利用度低的不足。
文檔編號(hào)A61K47/34GK102327208SQ20111030462
公開(kāi)日2012年1月25日 申請(qǐng)日期2011年10月10日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月10日
發(fā)明者李嘉慧, 李桃, 楊帆, 謝華廷, 黃志軍, 黃淑玲 申請(qǐng)人:廣東藥學(xué)院