專利名稱：：苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種具有抗腫瘤的活性化合物——苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物，及其在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。(二)
背景技術(shù)：
：惡性腫瘤是嚴(yán)重危害人類健康的常見(jiàn)病之一。據(jù)最新報(bào)道，全世界有4000多萬(wàn)人患惡性腫瘤，其中每年新增患者900多萬(wàn)、死亡700多萬(wàn)，我國(guó)每年惡性腫瘤發(fā)病人數(shù)約160萬(wàn)、死亡約130萬(wàn)。目前惡性腫瘤發(fā)生與死亡還有日趨嚴(yán)重的趨勢(shì)，有些地區(qū)已經(jīng)成為人口死亡的首要原因。因此，開(kāi)發(fā)新穎的抗腫瘤藥物具有重要的意義。苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物是一種含氟原子的化合物。由于氟原子半徑小、又具有最大的電負(fù)性，所形成的C-F鍵能要比C-H鍵能大得多，增加了含氟有機(jī)物的穩(wěn)定性；且由于氟原子的體積小，因而常認(rèn)為是H原子的非經(jīng)典的電子等排體，易產(chǎn)生拮抗作用，即不干擾含氟藥物與相應(yīng)細(xì)胞受體間的相互作用，能在分子水平代替正常代謝藥物，欺騙性地?fù)饺肷锎蠓肿?，?dǎo)致致死合成。當(dāng)藥物分子中引入氟原子時(shí)，其電效應(yīng)和模擬效應(yīng)不僅改變了分子內(nèi)部電子密度的分布，而且還能提高化合物的脂溶性和滲透性，在生物膜上的溶解性得到增強(qiáng)，促進(jìn)其在生物體內(nèi)吸收與傳遞速度，使生理作用發(fā)生變化。所以，含氟藥物具有用量少、毒性低、藥效高、代謝能力強(qiáng)等特點(diǎn)。含氟藥物的研究開(kāi)發(fā)，主要集中在含氟芳香、雜環(huán)化合物的研究開(kāi)發(fā)上，如二氟尼柳(氟苯水楊酸)具有很好的抗炎活性。雖然二氟尼柳作為非甾體抗炎藥已經(jīng)應(yīng)用于臨床中，但通過(guò)對(duì)二氟尼柳進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，制備具有抗腫瘤活性的含氟新藥，具有非常重大的意義，也必將引起越來(lái)越多的科學(xué)工作者的關(guān)注。發(fā)明人前期研究中，制備了結(jié)構(gòu)如式(I)所示的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物。式(I)中R,、R2各自獨(dú)立為H、C1C6的烷基或取代垸基、C3C6的環(huán)烷基、C6C10的芳基或取代芳基，所述取代烷基的取代基為苯基、鹵素、硝基或C1C3垸氧基，所述取代芳基的取代基為鹵素、硝基、C1C3烷氧基、C1C3的烷基；或者Rj、R2連接成環(huán)、與同R,、R2相連的N構(gòu)成C4C10的雜環(huán)基。式(I)所示的化合物已在中國(guó)專利公開(kāi)號(hào)CN101318909A中公開(kāi)，并公開(kāi)了在制備抗炎藥物和鎮(zhèn)痛藥物中的應(yīng)用。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明公開(kāi)了式(I)所示化合物的醫(yī)藥新用途，如式(1-1)式(1-12)所示之一的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>(1-12)。本發(fā)明所述的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，所述的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物優(yōu)選為式(1-1)式(1-11)所示之一的化合物，更優(yōu)選為式(1-2)、式(1-3)、式(1-4)、式(1-5)、式(1-9)、式(1-10)或式(1-11)所示的化合物，最優(yōu)選為式(1-10)或式(1-11)所示的化合物。較為具體的，經(jīng)發(fā)明人實(shí)驗(yàn)證實(shí)，所述的腫瘤為A549細(xì)胞株導(dǎo)致的肺癌時(shí)，式(1-10)所示的化合物具有顯著的抗腫瘤活性，式(1-2)所示的化合物具有較好的抗腫瘤活性，式(1-3)、或式(1-12)所示的化合物具有一定的抗腫瘤活性。所述的腫瘤為Ishikawa細(xì)胞導(dǎo)致的子宮內(nèi)膜癌時(shí)，式(1-10)或式(1-11)所示的化合物具有非常顯著的抗腫瘤活性，式(1-3)、(1-4)、(1-5)或(1-9)所示的化合物具有顯著的抗腫瘤活性，式(1-1)、(1-6)、(1-7)或(1-8)具有較好的抗腫瘤活性，式(1-2)所示的化合物具有一定的抗腫瘤活性。本發(fā)明所涉及的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物的制備方法及性質(zhì)和特性參數(shù)，已在中國(guó)專利公開(kāi)號(hào)CN101318909A和ChinChemLett,2008，19，1419-1422中所述。本發(fā)明所述的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物應(yīng)用的有益效果主要體現(xiàn)在(1)、提供了一種新的有顯著抗腫瘤活性的抗腫瘤藥物，為新藥篩選提供了研究基礎(chǔ)；(2)、式(1-10)或式(1-11)所示的化合物具有非常顯著的抗腫瘤作用，式(1-2)、式(1-3)、式(1-4)、式(1-5)或式(1-9)所示的化合物具有顯著的抗腫瘤作用，式(1-1)、(1-6)、(1-7)或(1-8)具有較好的抗腫瘤作用，式(I-12)所示的化合物具有一定的抗腫瘤作用。(3)所述的腫瘤為A549細(xì)胞株導(dǎo)致的肺癌時(shí)，式(1-10)所示的化合物具有顯著的抗腫瘤活性，式(1-2)所示的化合物具有較好的抗腫瘤活性。(4)所述的腫瘤為Ishikawa細(xì)胞導(dǎo)致的子宮內(nèi)膜癌時(shí)，式(1-10)或式(I-ll)所示的化合物具有非常顯著的抗腫瘤活性，式(I-3)、(1-4)、(1-5)、(I-9)所示的化合物具有顯著的抗腫瘤活性，(1-1)、(1-6)、(I-7)或(I-8)所示的化合物具有較好的抗腫瘤活性。具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步描述，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不僅限于此制備苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物按照中國(guó)專利公開(kāi)號(hào)CN101318909A所述的制備方法制備式(1-1)式(1-12)所示的化合物1-1~1-12。實(shí)施例1~12:抗肺癌活性測(cè)試測(cè)試方法體外抗腫瘤活性測(cè)試方法A.原理細(xì)胞通過(guò)線粒體水解酶將噻唑蘭(MTT)分解為不溶于水的蘭紫色結(jié)晶并沉積在細(xì)胞中，結(jié)晶物能被二甲基亞砜溶解，用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在490nm波長(zhǎng)處測(cè)定其光吸收值，間接反映細(xì)胞的增殖情況和數(shù)量變化。B.細(xì)胞A549,肺癌細(xì)胞株。C.實(shí)驗(yàn)步驟(l)樣品的準(zhǔn)備取化合物1-1~1-12，對(duì)于可溶樣品，每lmg用20jiLDMSO溶解，取2pL用1000pL培養(yǎng)液稀釋，使?jié)舛葹?00fig/mL，再用培養(yǎng)液連續(xù)稀釋至使用濃度。(2)細(xì)胞的培養(yǎng)培養(yǎng)基的配制每1000mL培養(yǎng)基中含80萬(wàn)單位青霉素、1.0g鏈霉素、10%滅活小牛血清。細(xì)胞的培養(yǎng)將腫瘤細(xì)胞接種于培養(yǎng)基中，置37"C、5%C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，35d傳代。(3)測(cè)定樣品對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用將細(xì)胞用EDTA-胰酶消化液消化，并用培養(yǎng)基稀釋成lxl()S/mL，加到96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，每孔100pL，置37。C、5%C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。接種24h后，傾去培養(yǎng)基，加入用培養(yǎng)基稀釋的樣品，每孔200pL，每個(gè)濃度加3孔，置37X:、5%C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，72h后在細(xì)胞培養(yǎng)孔中加入5mg/mL的MTT，每孔10^L，置37。C孵育3h，加入DMSO，每孔150|iL，用振蕩器振蕩，使甲臢完全溶解，用酶標(biāo)儀在490nm波長(zhǎng)下比色。以同樣條件用不含樣品、含同樣濃度DMSO的培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞作為對(duì)照，計(jì)算樣品對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的半數(shù)抑制濃度(IC50)。對(duì)比例1按照實(shí)施例112的體外抗腫瘤活性測(cè)試方法進(jìn)行測(cè)試，所不同的是，使用的樣品是順鉑藥品。將制備的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物I-1I-12進(jìn)行了抗八549活性測(cè)試，試驗(yàn)結(jié)果如下表l:各化合物對(duì)A549的ICso(拜d/L)實(shí)施例化合物IC50jimol/L評(píng)價(jià)10<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>(l)樣品的準(zhǔn)備取化合物1-11-12，對(duì)于可溶樣品，每lmg用20^LDMSO溶解，取2iiL用1000(iL培養(yǎng)液稀釋，使?jié)舛葹?00|ig/mL，再用培養(yǎng)液連續(xù)稀釋至使用濃度。(2)細(xì)胞的培養(yǎng)培養(yǎng)基的配制每1000mL培養(yǎng)基中含80萬(wàn)單位青霉素、1.0g鏈霉素、10%滅活小牛血清。細(xì)胞的培養(yǎng)將腫瘤細(xì)胞接種于培養(yǎng)基中，置37°C、5%C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，35d傳代。(3)測(cè)定樣品對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用將細(xì)胞用EDTA-胰酶消化液消化，并用培養(yǎng)基稀釋成lxl06/mL，加到96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，每孔100(iL，置37"C、5%C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。接種24h后，傾去培養(yǎng)基，加入用培養(yǎng)基稀釋的樣品，每孔200)iL，每個(gè)濃度加3孔，置37"C、5%C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，72h后在細(xì)胞培養(yǎng)孔中加入5mg/mL的MTT，每孔10piL，置37。C孵育3h，加入DMSO，每孔150)aL，用振蕩器振蕩，使甲臢完全溶解，用酶標(biāo)儀在490nm波長(zhǎng)下比色。以同樣條件用不含樣品、含同樣濃度DMSO的培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞作為對(duì)照，計(jì)算樣品對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的半數(shù)抑制濃度(IC50)。對(duì)比例2按照實(shí)施例1324的體外抗腫瘤活性測(cè)試方法進(jìn)行測(cè)試，所不同的是，使用的樣品是順鉑藥品?？鼓[瘤活性測(cè)試結(jié)果將制備的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物I-1I-12進(jìn)行了抗Ishika窗活性測(cè)試，試驗(yàn)結(jié)果如下表2:化合物對(duì)Ishikawa的IC5。(pmol/L)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>按照抗腫瘤活性的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，化合物I-io和I-ll具有非常顯著的抗Ishikawa子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞活性，化合物I-3、I-4、I-5和I-9具有顯著的抗Ishikawa子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞活性，化合物I-1、I-6、I-7和I-8具有較好的抗Ishikawa子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞活性，化合物I-2具有一定的抗Ishikawa子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞活性。權(quán)利要求1.如式(I-1)～式(I-12)所示之一的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用；2.如權(quán)利要求1所述的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物為式(1-1)式(1-11)所示之一的化合物。3.如權(quán)利要求1所述的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物為式(1-2)、式(1-3)、式(I隱4)、式(1-5)、式(1-9)、式(1-10)或式(1-11)所示的化合物。4.如權(quán)利要求1所述的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物為式(1-10)或式(1-11)所示的化合物。5.如權(quán)利要求1所述的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物為式(1-2)、式(1-3)、式(1-10)或式(1-12)所示的化合物，所述的腫瘤為A549細(xì)胞株導(dǎo)致的肺癌。6.如權(quán)利要求1所述的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物為式(1-1)式(1-11)所示之一的化合物，所述的腫瘤為Ishikawa細(xì)胞導(dǎo)致的子宮內(nèi)膜癌。7.如權(quán)利要求1所述的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，其特征在于式(1-10)所示的化合物在抗A549細(xì)胞株導(dǎo)致的肺癌藥物中的應(yīng)用。8.如權(quán)利要求1所述的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，其特征在于，式(1-10)或式(1-11)所示的化合物在抗Ishikawa細(xì)胞導(dǎo)致的子宮內(nèi)膜癌藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了如式(I-1)～式(I-12)所示之一的苯甲酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明提供了一種新的有顯著抗腫瘤活性的抗腫瘤藥物，為新藥篩選提供了研究基礎(chǔ)；其中，式(I-10)或式(I-11)所示的化合物具有非常顯著的抗腫瘤作用，式(I-2)、式(I-3)、式(I-4)、式(I-5)或式(I-9)所示的化合物具有顯著的抗腫瘤作用，式(I-1)、(I-6)、(I-7)或(I-8)具有較好的抗腫瘤作用，式(I-12)所示的化合物具有一定的抗腫瘤作用。文檔編號(hào)A61P11/00GK101502523SQ20091009655公開(kāi)日2009年8月12日申請(qǐng)日期2009年3月6日優(yōu)先權(quán)日2009年3月6日發(fā)明者蔣劍松,鐘光祥,陳路路申請(qǐng)人:浙江工業(yè)大學(xué)