專利名稱：一種從南方紅豆杉葉中提取紫杉黃酮的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及紫杉黃酮的提取技術(shù)，具體涉及一種從南方紅豆杉葉中提取紫杉黃酮的方法。
背景技術(shù)：
紅豆杉葉中含有紫杉醇、紫杉黃酮和紅豆杉多糖等藥效成份，紫杉黃酮含有共同的母核C6-C3-C6結(jié)構(gòu)，具有調(diào)節(jié)心臟血管系統(tǒng)作用、抗炎及抗免疫作用、抗微生物作用、對消化性潰瘍的作用和抗腫瘤作用等。授權(quán)號為ZL200910157034.0的中國發(fā)明專利公開了一種南方紅豆杉葉片的提取物及提取方法，提取方法包括葉片烘干、粉碎過篩、浸入乙醇溶齊IJ、攪拌下超聲提取、提取液減壓濃縮去醇、氯仿萃取脫脂、水相濃縮干燥步驟，得到紫杉黃酮的混合物，該紫杉黃酮的混合物紫杉黃酮的重量含量為65 70 %，該紫杉黃酮的混合物主要成份包括蘆丁 -3-0-槲皮素、蘆丁 -3-0-山奈酚、蘆丁 -3-0-楊梅酮、山奈酚-7-0-葡萄糖和葡萄糖-7-0-槲皮素等。該提取方法提取復(fù)雜，紫杉黃酮的純度較低，不超過70 %。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種從南方紅豆杉葉中提取紫杉黃酮的方法，該方法提取的紫杉黃酮純度較高，不低于75%。本發(fā)明解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案為:一種從南方紅豆杉葉中提取紫杉黃酮的方法，其步驟如下:
1、將新鮮的南方紅豆杉葉片在50°c溫度下烘干24h，粉碎，過8號篩為粉料，裝入超臨界萃取釜中；
2、超臨界萃取釜中，在萃取溫度為20 40°C，CO2流體壓力為20 40MPa，夾帶劑乙醇流速0.10 0.40 ml/min下,萃取I 3 h,萃取得到萃取物；
3、在萃取物中添加甲醇吸收為吸收液，所述甲醇的添加量為上述粉料2g的萃取物中添加甲醇1ml，吸收液用AB-8樹脂層析，然后用質(zhì)量百分濃度為80%的乙醇洗脫，得到第一洗脫液，第一洗脫液500Pa減壓濃縮60min，得到第一濃縮液，第一濃縮液用100目聚酰胺層析，再用質(zhì)量百分濃度為20 % 60%的乙醇洗脫，洗脫液濃縮干燥，得到含有紫杉黃酮的淡黃色粉末。紫杉黃酮采用Al3+-蘆丁二元絡(luò)合物熒光光度法定量，其中激發(fā)光譜帶寬3nm，激發(fā)波長λ ex436nm，發(fā)射光譜帶寬5nm，λ em483nm，蘆丁標準溶液熒光強度對相應(yīng)濃度作圖定量；該淡黃色粉末中紫杉黃酮重量含量為75 80 %。該淡黃色粉末中紫杉黃酮包括蘆丁-3-0-槲皮素、蘆丁-3-0-山奈酚、蘆丁 -3-0-楊梅素、葡萄糖-7-0-山奈酚、葡萄糖-7-0-槲皮素、楊梅素-3-0-蕓香糖、槲皮素-3-0-蕓香糖、山萘酚-7-0-葡萄糖、銀杏素、金松雙黃酮等成分。提取液中10種有效成分含量的測定采用高效液相色譜法分析，色譜柱為Varian，Microsorb- MV100C18，檢測波長360nm，流動相為甲醇/水=55 45，磷酸調(diào)pH=2.5 ;柱溫為25°C，流速為1.0 ml/min,進樣量為10 μ I， 標準物質(zhì)外標法定量；10種有效成分含量總含量約95%。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點在于一種從南方紅豆杉葉中提取紫杉黃酮的方法，通過超臨界萃取釜萃取，甲醇吸收，AB-8樹脂層析后，再用100目聚酰胺層析，乙醇洗脫，洗脫液濃縮干燥得到含有紫杉黃酮的淡黃色粉末，紫杉黃酮重量含量為75 80 %，紫杉黃酮的純度較高，且提取方法簡單，省略氯仿脫脂步驟，因此是一種紫杉黃酮的純度較高，方法簡單，實施方便的從南方紅豆杉葉中提取紫杉黃酮的方法。
具體實施例方式以下結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步詳細描述。實施例1
一種從南方紅豆杉葉中提取紫杉黃酮的方法，先將新鮮的南方紅豆杉葉片經(jīng)50°C溫度條件下烘干24h，粉碎，過8號篩為粉料，稱重50g，裝入超臨界萃取釜中；超臨界萃取釜中在萃取溫度為28°C，C(V流體壓力為25MPa，夾帶劑乙醇流速0.27 ml/min下，萃取1.5h，得到萃取物；萃取物中加25ml甲醇吸收為吸收液,吸收液用AB-8樹脂(市售)層析,AB-8樹脂為弱極性，表面積480 520 ( m2/g )，粒子半徑13 14nm，含水量64% ;層析后用質(zhì)量百分濃度為80%的乙醇洗脫，得到第一洗脫液，第一洗脫液500Pa減壓濃縮60min，得到第一濃縮液，第一濃縮液用100目聚酰胺(市售)層析，用質(zhì)量百分濃度為60%的乙醇洗脫，洗脫液濃縮干燥，得到含有紫杉黃酮的淡黃色粉末。該粉末采用Al3+-蘆丁二元絡(luò)合物熒光光度法定量，該粉末中紫杉黃酮重量含量為80 %。實施例2
與實施例1基本相同，所不同的只是萃取溫度為20°C，CO2流體壓力為20MPa，夾帶劑乙醇流速0.10 ml/min，萃取時間3h，聚酰胺層析后，用質(zhì)量百分濃度為20%的乙醇洗脫，得到的粉末中紫杉黃酮重量含量為75 %。實施例3
與實施例1基本相同，所不同的只是萃取溫度為40°c，CO2流體壓力為40MPa，夾帶劑乙醇流速0.40 ml/min,萃取時間lh， 聚酰胺層析后，用質(zhì)量百分濃度為40%的乙醇洗脫，得到的粉末中紫杉黃酮重量含量為78 %。
權(quán)利要求
1.一種從南方紅豆杉葉中提取紫杉黃酮的方法，其特征在于步驟如下: 1)將新鮮的南方紅豆杉葉片在50°c溫度下烘干24h，粉碎，過8號篩為粉料，裝入超臨界萃取釜中； 2)超臨界萃取釜中，在萃取溫度為20 40°C，CO2流體壓力為20 40MPa，夾帶劑乙醇流速0.10 0.40 ml/min下,萃取I 3 h,萃取得到萃取物； 3)在萃取物中添加甲醇吸收為吸收液，所述甲醇的添加量為上述粉料2g的萃取物中添加甲醇1ml，吸收液用AB-8樹脂層析，然后用質(zhì)量百分濃度為80%的乙醇洗脫，得到第一洗脫液，第一洗脫液500Pa減壓濃縮60min，得到第一濃縮液，第一濃縮液用100目聚酰胺層析，再用質(zhì)量百分濃度為20 % 60%的乙醇洗脫，洗脫液濃縮干燥，得到含有紫杉黃酮的淡黃色粉末。`
全文摘要
本發(fā)明公開了一種從南方紅豆杉葉中提取紫杉黃酮的方法，通過超臨界萃取釜萃取，甲醇吸收，AB-8樹脂層析后，再100目聚酰胺層析，乙醇洗脫，洗脫液濃縮干燥得到含有紫杉黃酮的淡黃色粉末，紫杉黃酮重量含量為75～80%，紫杉黃酮的純度較高，且提取方法簡單，省略氯仿脫脂步驟，因此是一種紫杉黃酮的純度較高，方法簡單，實施方便的從南方紅豆杉葉中提取紫杉黃酮的方法。
文檔編號A61P31/00GK103099826SQ201210589638
公開日2013年5月15日 申請日期2012年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月31日
發(fā)明者王強, 謝雪娣 申請人:寧波泰康紅豆杉生物工程有限公司