專利名稱：以氨基酸為穩(wěn)定劑的多西他賽聚合物膠束藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及以氨基酸為穩(wěn)定劑的聚合物膠束載藥系統(tǒng)及其制備。
背景技術(shù)：
聚合物膠束是近年來發(fā)展起來的針對難溶性藥物的載藥系統(tǒng)，是有兩親性嵌段聚 合物組成，臨界膠束濃度(CMC)低(< 100g/ml)，具有核-殼狀結(jié)構(gòu)，其中核為疏水性部 分，殼為親水性部分。聚合物膠束可以將難溶性藥物包裹于核部分達(dá)到對難溶性藥物的 增溶。載藥聚合物膠束往往選擇生物降解性兩親高分子為材料，這類兩親性聚合物可以 是二嵌段物A-B型或三嵌段物A-B-A、B-A-B型，其結(jié)構(gòu)見見參考文獻Torchilin，V. P.， Structure and design of polymeric surfactant-based drug delivery systems. JControlRelease,2001. 73(2-3) :p. 137-72.嵌段共聚物具有臨界膠束濃度(CMC)較低、載 藥量較高的特點，其中親水部分(殼)往往是聚乙二醇、聚維酮等，親脂部分往往是聚酯，如 氧丙烯、乳酸、L-賴氨酸、天冬氨酸、β-苯甲酞L-天冬氨酸酯、Y-芐基-L-谷氨酸酯、己 內(nèi)酮、精胺的聚合物。許多藥物為疏水性藥物，其成藥性需要增加其溶解度得以解決。以表面活性劑膠 束增溶而增加藥物溶解度的辦法為常見的手段，在抗癌藥物的制劑中常見，如聚山梨酯80 用于多西他賽和聚氧乙烯蓖麻油用于紫杉醇等。然而，該類增溶辦法存在諸多不足，包括 (1)高過敏發(fā)生率，大多數(shù)表面活性劑具有一定的過敏性，聚山梨酯80中的油酸和聚氧乙 烯蓖麻油中的蓖麻油均具有一定的過敏性，患者在使用含表面活性劑的制劑前往往需要進 行脫敏處理，例如現(xiàn)在紫杉醇和多西他賽的市售制劑；(2)藥物在腫瘤特異分布程度低，因 而，對正常組織的毒性較大，最大耐受量(MTD)較低，導(dǎo)致化療時不能在腫瘤部位分布足夠 的藥物，使腫瘤耐藥；(3)市售制劑不穩(wěn)定，在復(fù)配注射液時，操作復(fù)雜，易產(chǎn)生沉淀。與常用的表面活性劑增溶劑、助溶劑(如環(huán)糊精類)和潛溶劑相比，由于聚合 物膠束載藥系統(tǒng)選擇生物降解性材料為材料，其安全性較高，無明顯過敏性、溶血性和刺 激性。更重要的是，聚合物膠束具有較大的高通透性和高滯留性(enhanced permeation andretention, EPR)，可以實現(xiàn)對腫瘤組織和炎癥組織的被動靶向，S卩(1)聚合物膠束中親 水的殼部分具有較高的親水性，特別是當(dāng)親水部分為高比例的聚乙二醇時(例如我們申請 的專利CN03105348，CN200610145383中的聚合物PEG均超過10%，一般為40% )，可以躲 避網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)RES和單核巨嗤細(xì)胞系統(tǒng)MPS的清除，賦予聚合物膠束的長循環(huán)性能；(2) 聚合物膠束具有粒徑小的特點，我們申請的專利CN03105348，CN200610145383中的聚合物 膠束粒徑約20nm，低粒徑(一般小于IOOnm)可以增強聚合物膠束對血管滲透供應(yīng)癌癥的脈 管系統(tǒng)并導(dǎo)致物質(zhì)更容易滯留腫瘤，即EI^R效應(yīng)較強。聚合物膠束的安全性和腫瘤被動靶 向性，使其成為一種新型靶向給藥系統(tǒng)，對抗腫瘤藥和治療炎癥等具有較大的前景。目前， 注射用紫杉醇聚合物膠束已經(jīng)進入臨床研究，在韓國已經(jīng)上市。載藥聚合物膠束的制備方 法一般有物理包埋法、化學(xué)結(jié)合法、靜電作用法、凝膠復(fù)溶法、乳化-溶劑蒸發(fā)法，聚合物膠 束分散于水溶液后經(jīng)冷凍干燥得到聚合物膠束凍干品，也可以通過一定的吸收劑吸收、固化后使用。聚合物膠束通常用于注射給藥，應(yīng)進行過濾滅菌或熱壓滅菌，以保證制劑的無菌 符合要求。甲基聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物(mPEG PDLLA)膠束最早由加拿大X. Zhang 艮道(見參考文獻 Zhang, X. , etal. , Anti-tumor efficacy and biodistribution of intravenouspolymeric micellar paclitaxel. Anticancer Drugs,1997. 8(7) p. 696-701.)，由于其理想的增溶特性和EI5R行為吸引了廣泛關(guān)注，并申請專利 US5877205 和 US5922754。見參考文獻 Yamamoto, Y.，et al.，Long-circulating poly (ethylene glycol)-poly(D,L-lactide)block copolymer micelles with modulated surfacecharge. JControl Release, 2001. 77 C 2) :p. 27-38. Samyang 公司的 Genexol PM 是以mPEG-PDLLA為材料的紫杉醇聚合物，體外和動物體內(nèi)的生物相容性較好，未見明顯 毒性，紫杉醇同位素體內(nèi)分布實驗表明，膠束進入體內(nèi)后迅速解離，釋放藥物，聚合物在 體內(nèi)可以在15小時內(nèi)降解。見參考文獻Kim，S. C.，D.W. Kim，et al. (2001). In vivo evaluationof polymeric micellar paclitaxel formulation :toxicity and efficacy. J ControlRelease 72(1-3) : 191-202。然而，現(xiàn)有載藥聚合物膠束的穩(wěn)定性不高，影響其進一 步推廣 Carstens,M. G. ,P. H. de Jong, et al. (2008).The effect of core compositionin biodegradable oligomeric micelles as taxane formulations. Eur J PharmBiopharm 68(3) :596-606。以紫杉醇為例當(dāng)采用mPEG-PDLLA 55/45 (X/Y，X為PEG的質(zhì)量，Y為聚丙交酯的質(zhì) 量)制備紫杉醇聚合物膠束時，其水分散液的穩(wěn)定性只有24小時，至72小時時，超過30% 的藥物泄露，見專利US20030143184。目前解決載藥聚合物膠束穩(wěn)定性的方法主要是從聚合 物上進行選擇(Du,Chen et al. 2006)。我們在中國專利CN03105348. 3中申請了一種新的 聚合物膠束，采用mPEG、PDLLA質(zhì)量比小于50/50的嵌段共聚物制備聚合物膠束，這種聚合 物膠束由于增加了核的親脂性可以提高載藥量和膠束的穩(wěn)定性。但我們發(fā)現(xiàn)通過設(shè)計和合 成新聚合物的方式解決聚合物膠束的穩(wěn)定性的研究成本高、安全性挑戰(zhàn)大、解決效果不理 想。US2007003625申請了一種以聚乳酸為疏水嵌段的聚合物載藥系統(tǒng)，然而，該類專利關(guān)注 的增溶能力，對于聚合物膠束的穩(wěn)定性無明顯改善。我們考察了不同的添加劑對聚合物膠束穩(wěn)定性的影響。我們發(fā)現(xiàn)脂質(zhì)對聚合物膠 束的穩(wěn)定性有一定提高，見CN200610145383。然而，該技術(shù)的穩(wěn)定性對于某些藥物仍然難以 滿足臨床需求，例如多西他賽等藥物，聚合物膠束的物理穩(wěn)定性只數(shù)分鐘或數(shù)小時。在試驗中我們意外發(fā)現(xiàn)，添加某些小分子氨基酸可以提高載藥膠束的物理穩(wěn)定 性，例如多西他賽聚合物膠束的穩(wěn)定性在加入精氨酸后穩(wěn)定性大大提高，可以穩(wěn)定5天以 上。氨基酸(amino acid)是含有氨基和羧基的一類有機化合物的通稱，人體所需的氨 基酸約有20種。氨基酸是生物功能大分子蛋白質(zhì)的基本組成單位，是構(gòu)成動物營養(yǎng)所需蛋 白質(zhì)的基本物質(zhì)，來源易得，具有較高的安全性。實驗發(fā)現(xiàn)氨基酸能提高載藥膠束的物理穩(wěn)定性，至今尚未見有相關(guān)研究的報道。為此，本發(fā)明提供一種以氨基酸為穩(wěn)定劑的藥物載體，所述藥物載體為兩親性嵌 段共聚物和氨基酸混合組成，這種藥物載體具有穩(wěn)定性高的特點。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種藥物組合物，該組合物含有藥物，兩親性嵌段共聚物 和氨基酸。本發(fā)明的藥物組合物，根據(jù)需要還可含有其他藥物可接受的載體。本發(fā)明的藥物組合物，其中兩親性嵌段共聚物和氨基酸可以以任何重量比例配 比。優(yōu)選的兩者的重量配比為1-100 0.01-100，特別優(yōu)選的重量配比為100 0.5-30， 最優(yōu)選的重量配比為100 1-15。本發(fā)明的藥物組合物，其中的兩親性嵌段共聚物屬于現(xiàn)有技術(shù)，可以包括二嵌段 物和三嵌段物，構(gòu)成兩親性嵌段共聚物親水區(qū)包括但不限于聚乙二醇(PEG)、單甲基聚乙二 醇(mPEG)、聚維酮、殼聚糖、聚甲基丙烯酸等及其衍生物。疏水區(qū)包括但不限于聚氧丙烯、 聚苯乙烯、聚氨基酸(如聚β-苯甲酰-L-天冬氨酸、聚Y-芐基-L-谷氨酸和聚天冬氨酸 等)、聚酯(聚己內(nèi)酯)，可用生物降解型高分子材料(如聚乳酸、聚羥基乙酸及其衍生物 等)作為共聚物的疏水嵌段。其中優(yōu)選的兩親性嵌段共聚物是單甲基聚乙二醇_b-聚D， L-丙交醋共聚物(mPEG-PDLLA)。本發(fā)明的藥物組合物，其中的氨基酸包括任何一種或多種氨基酸，常見的20種氨 基酸，具體如甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、天冬氨酸、天冬酰 胺、谷氨酸、谷氨酰胺、精氨酸、賴氨酸、組氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色 氨酸、脯氨酸。本發(fā)明的藥物組合物，可通過以下方法制備藥物，氨基酸，兩親性嵌段共聚物用 有機溶劑溶解。除去有機溶劑后即得到凝膠狀混合聚合物膠束。其中所述有機溶劑是指非 水溶劑，選自但不限于乙腈、短鏈脂肪醇、丙酮、乙醚等。本發(fā)明的藥物組合物，其制備可以采用物理包埋法、化學(xué)結(jié)合法、靜電作用法、凝 膠_復(fù)溶法、乳化_溶劑蒸發(fā)法等制備，凝膠_復(fù)溶法，其中優(yōu)選凝膠_復(fù)溶法。聚合物膠束分散于水溶液后經(jīng)冷凍干燥得到聚合物膠束凍干品，也可以通過一定 的吸收劑吸收、固化后使用。聚合物膠束復(fù)溶可以得到低于IOOnm的混合聚合物膠束(如果粒徑過大可以通過 高速均質(zhì)化或高壓乳勻化達(dá)到低于IOOnm的狀態(tài))，該聚合物膠束可通過一定的工藝，如冷 凍干燥、噴霧干燥、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、減壓蒸發(fā)、薄膜蒸發(fā)等進一步制備成適宜制劑，如注射劑、滴 眼劑、外用制劑、口服制劑、氣霧劑、粉霧劑等。聚合物膠束用于注射給藥時，可進行過濾滅菌或熱壓滅菌，以保證制劑的無菌符 合要求。本發(fā)明的藥物組合物，其中所述藥物包括各種疏水性藥物和親水性藥物，優(yōu)選的是 疏水性藥物，更優(yōu)選的是以下藥物紫杉醇、多西他賽、順鉬、卡鉬、奧沙利鉬、5-氟尿喀陡、依托泊苷、苯丙氨酸氮芥、 苯丁酸氮芥、六甲三聚氰胺、甲氨蝶呤、甲環(huán)亞硝脲、去甲長春花堿、替尼泊苷、高三尖杉酯 堿、羥喜樹堿以及抗VEGF藥物等；抗生素藥物如氯霉素、紅霉素、依托紅霉素、唬乙紅霉素、麥迪霉素、交沙霉素、 克拉霉素、羅他霉素、磺胺嘧啶、甲氧芐氨嘧啶、吠喃妥因、利副平、利福昔明、異丁呱利福霉 素、氨苯砜、醋氨苯砜、咪康唑、伊曲康唑、喹諾酮類抗生素等；心血管藥物如硝苯地平、尼 卡地平、尼群地平、尼伐地平、桂利嗪、哌克昔林、嗎多明、洋地黃毒甙、地高辛、毛花甙丙、去乙酞毛花甙、普羅帕酮、胺碘酮、硝酸甘油、戊四硝酯、環(huán)扁桃酯、煙酸生育酚酯等；抗糖尿病藥物如甲苯黃丁脲、格列本脲、格列吡嗪等；非甾體抗炎藥物如氯馬斯汀、賽庚啶、苯噻啶、酮替芬、曲尼司等。本發(fā)明的藥物組合物，在制備成注射劑、滴眼劑、外用制劑、口服制劑、氣霧劑、粉 霧劑等不同制劑時，根據(jù)需要可加入適宜的藥物可接受的載體，諸如粘合劑、填充劑、稀釋 劑、潤滑劑、崩解劑、著色劑、調(diào)味劑和濕潤劑等，這些制劑的制備都屬于現(xiàn)有技術(shù)，可根據(jù) 現(xiàn)有技術(shù)的方法制備。所述藥物可接受的載體選自甘露醇、山梨醇、焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、硫代硫酸 鈉、鹽酸半胱氨酸、巰基乙酸、蛋氨酸、維生素C、EDTA 二鈉、EDTA鈣鈉，一價堿金屬的碳酸 鹽、醋酸鹽、磷酸鹽或其水溶液、鹽酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化鈉、氯化鉀、乳酸鈉、木 糖醇、麥芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纖維 素及其衍生物、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、土溫80、瓊脂、碳酸鈣、碳酸氫鈣、表面 活性劑、聚乙二醇、環(huán)糊精、環(huán)糊精、磷脂類材料、高嶺土、滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂寸。本發(fā)明的組合物在使用時根據(jù)病人的情況確定用法用量，可每日，周，月服1-3 次，每次1-20劑，如1-20支或?；蚱?。本發(fā)明的藥物組合物，其中的兩親性嵌段共聚物的親水區(qū)包括但不限于聚乙二醇 (PEG)、單甲基聚乙二醇(mPEG)、聚維酮、殼聚糖、聚甲基丙烯酸等及其衍生物。其中嵌段共 聚物親水區(qū)的衍生物是指對親水區(qū)末端采用對某些器官、組織、細(xì)胞、細(xì)胞器、分子有特異 親和性的分子修飾得到的衍生物，包括具有組織或細(xì)胞特異性的蛋白質(zhì)或多肽、生長因子、 維生素及其類似物(如葉酸)、多糖、糖肽或糖蛋白、留體及其類似物、激素、輔助因子、遺傳 分子、某些藥物分子。如對腦特異的含有CNSRLHLRC，CENWffGDVC, WRCVLREGPAGGCAffFNRHRL, 和CLSSRLDAC片段的多肽、蛋白質(zhì)；對腎特異的含有CLPVASC和CGAREMC片段的多肽、蛋白 質(zhì)；對肺特異的含有CGFECVRQCPERC，CGFELETC，CTLRDRNC和CIGEVEVC片段的多肽、蛋白質(zhì)； 對皮肽特異的含有CVALCREACGEGC片段的多肽、蛋白質(zhì)；對脾特異的含有SWCEPGWCR片段的 多肽、蛋白質(zhì)；對小腸特異的含有YSGKWGW片段的多肽、蛋白質(zhì)，對子宮特異的含有GLSGGRS 片段的多肽、蛋白質(zhì)；對腎上腺特異的含有LMLPRAD片段的多肽、蛋白質(zhì)；對視網(wǎng)膜組織特 異的含有CRDVVSVIC和CSCFRDVCC片段的多肽、蛋白質(zhì)；具有抑制整合蛋白表達(dá)細(xì)胞與細(xì) 胞外基質(zhì)蛋白結(jié)合作用的多肽、蛋白質(zhì)，這類蛋白質(zhì)或多肽含有CRGDC，CRGDCL，NGR(AHA)， DGR(AHA)，CRGDCA, RCDVVV，SLIDIP, TIRSVD, KRGD, RRGP 和 RGDL 片段；具有腫瘤特異性的抗 體；對實體瘤血管內(nèi)膜特異的含有CDCRGDCFC和CNGRCVSGCAGRC片段的多肽、蛋白質(zhì)；以及 其他對腫瘤細(xì)胞有特異親和力的分子。以下通過試驗數(shù)據(jù)說明本發(fā)明的有益效果1、加氨基酸和不加氨基酸的比較數(shù)據(jù)移取2ml 50mg/ml聚合物乙腈溶液至茄型瓶中，加入2ml 5mg/ml多西他賽乙腈溶 液，將茄型瓶置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，減壓(-0. IMPa)，水浴溫度50°C，轉(zhuǎn)速20轉(zhuǎn)/分，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā) 30分鐘，加入IOml注射用水，取下茄型瓶，至渦旋儀渦旋1分鐘，所得溶液經(jīng)0. 22 μ m濾膜 過濾，取濾液裝于IOml西林瓶中；同法制備聚合物膠束，以0. 2mg/ml精氨酸水溶液代替注 射用水，得精氨酸_聚合物膠束。分別觀察兩種膠束的穩(wěn)定性。
結(jié)果發(fā)現(xiàn)精氨酸-聚合物膠束的物理外觀可以穩(wěn)定5天以上，而無精氨酸的聚合 物膠束只能穩(wěn)定30分鐘。以上試驗表明加入精氨酸的聚合物膠束的穩(wěn)定性更佳。2、不同共聚物和氨基酸配比的比較數(shù)據(jù)多西他賽藥物組合物的制備及穩(wěn)定性考察2. 1藥物組合物的制備移取IOml 50mg/ml聚合物乙腈溶液至茄型瓶中，加入IOml 5mg/ml多西他賽乙腈 溶液，將茄型瓶置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，減壓(-0. IMPa)，水浴溫度50°C，轉(zhuǎn)速20轉(zhuǎn)/分，旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)30分鐘，加入50ml 0. 2mg/ml精氨酸水溶液旋轉(zhuǎn)水化1分鐘，取下茄型瓶，至渦旋儀渦旋 1分鐘，所得溶液經(jīng)0. 22 μ m濾膜過濾，取濾液裝于IOml西林瓶中，每瓶2ml，立即凍干得白 色固體。固體加0. 9%氯化鈉注射液或5%葡萄糖注射液5ml復(fù)配制備得澄清透明略帶淡 藍(lán)色乳光的多西他賽聚合物膠束溶液。所得膠束溶液于25攝氏度靜止24h，目檢結(jié)果溶液澄清透明，無混濁無沉淀，西 林瓶底部無藥物結(jié)晶析出.制備了不同配比的多西他賽聚合物膠束，見下表表 權(quán)利要求
一種以氨基酸為穩(wěn)定劑的多西他賽聚合物膠束藥物組合物，其特征在于，該組合物含有多西他賽，兩親性嵌段共聚物和氨基酸，其中兩親性嵌段共聚物和氨基酸的重量配比為100∶1 15，其中兩親性嵌段共聚物包括二嵌段物和三嵌段物，構(gòu)成兩親性嵌段共聚物親水區(qū)包括但不限于聚乙二醇、單甲基聚乙二醇、聚維酮、殼聚糖、聚甲基丙烯酸，疏水區(qū)包括但不限于聚氧丙烯、聚苯乙烯、聚氨基酸、聚酯、可用生物降解型高分子材料，其中的氨基酸選自甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酸、谷氨酰胺、精氨酸、賴氨酸、組氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸或脯氨酸。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的藥物組合物，其特征在于，其中的兩親性嵌段共聚物是單甲基聚 乙二醇_b-聚D，L-丙交醋共聚物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的藥物組合物，其特征在于，其中的聚合物膠束通過現(xiàn)有技術(shù)制備 成適宜的藥物制劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的藥物組合物，其特征在于，所述藥物制劑是注射劑、滴眼劑、外用 制劑、口服制劑、氣霧劑或粉霧劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的藥物組合物，其特征在于所述的組合物在使用時根據(jù)病人的情況 確定用法用量，可每日，周，月服1-3次，每次1-20劑，如1-20支或?；蚱?br> 6.根據(jù)權(quán)利要求1的藥物組合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟多西他賽， 氨基酸，兩親性嵌段共聚物用有機溶劑溶解，除去有機溶劑后即得到凝膠狀混合聚合物膠 束，其中所述有機溶劑選自但不限于乙腈、短鏈脂肪醇、丙酮、乙醚。
全文摘要
本發(fā)明涉及以氨基酸為穩(wěn)定劑的多西他賽聚合物膠束藥物組合物及其制備方法，該藥物組合物由多西他賽，兩親性嵌段共聚物和氨基酸組成，其中的兩親性嵌段共聚物包括二嵌段物和三嵌段物，其中的氨基酸選自20種常見氨基酸，兩親性嵌段共聚物與氨基酸的配比(w/w)是100/0.01-1.00/99.99。
文檔編號A61K31/337GK101972480SQ201010114289
公開日2011年2月16日 申請日期2010年1月19日 優(yōu)先權(quán)日2010年1月19日
發(fā)明者吳建梅 申請人:南京泛太化工醫(yī)藥研究所;太極集團有限公司