專(zhuān)利名稱：芫根總皂苷制備降血糖藥物的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從芫根植株中提取得到的芫根總皂苷制備降血糖藥物的用途，屬于藥用天然產(chǎn)物領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
大量的流行病學(xué)研究表明，血糖異常升高是糖尿病發(fā)生的一個(gè)危險(xiǎn)因素，糖尿病是一種常見(jiàn)的內(nèi)分泌代謝性疾病，是繼心血管疾病及癌癥之后危害人類(lèi)健康的第三大疾患。由于糖尿病具有患病率、致殘率及并發(fā)癥高的特點(diǎn)，因此已成為醫(yī)學(xué)界頗為矚目并倍加重視的疾病之一。目前的降血糖藥物多為西藥或中藥的大復(fù)方，西藥(包括注射劑和口服降糖藥) 作用強(qiáng)而迅速，過(guò)量導(dǎo)致病人低血糖癥而被迫停藥，結(jié)果又致停藥癥狀反跳；中藥大復(fù)方基本上是都是由天然中草藥經(jīng)簡(jiǎn)單的炮制和提取制成的，不僅成分相當(dāng)復(fù)雜、制備不便，而且難以進(jìn)行更深入的結(jié)構(gòu)/藥效研究，也不利于藥物質(zhì)量控制和中藥現(xiàn)代化。我國(guó)有著豐富的中草藥資源，如何合理開(kāi)發(fā)這些天然植物資源，利用現(xiàn)代藥物化學(xué)分析技術(shù)和生物學(xué)實(shí)驗(yàn)手段，尋找一類(lèi)安全有效的天然植物降血糖藥物已經(jīng)成為醫(yī)學(xué)、 生物學(xué)領(lǐng)域廣泛關(guān)注的焦點(diǎn)，也是提升我國(guó)降血糖藥物產(chǎn)業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的關(guān)鍵。芫根(Brassica rapa L.)，又名蔓菁，二年生草本，現(xiàn)廣泛栽種于青藏高原。芫根生長(zhǎng)在海拔高、溫差大、日照強(qiáng)的高原環(huán)境中，適應(yīng)能力強(qiáng)，產(chǎn)量高，營(yíng)養(yǎng)豐富，通常作為飼料應(yīng)用于畜牧業(yè)，其肉質(zhì)根還可以作為蔬菜或果品供人食用，具有清熱解毒、滋補(bǔ)增氧的功效。目前開(kāi)發(fā)利用芫根的現(xiàn)有技術(shù)中，尚未見(jiàn)關(guān)于芫根總皂苷降血糖功效方面的報(bào)道。皂苷廣泛存在于自然界，在菌類(lèi)、蕨類(lèi)、單子葉、雙子葉植物等中具有分布。大量研究顯示，植物皂苷是植物生長(zhǎng)過(guò)程中產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物，具有抗炎、抗腫瘤、抗菌和抗病毒、抗生育和降低膽固醇、降低高血脂、抑制血栓形成等作用。因此，開(kāi)發(fā)利用植物皂苷具有巨大的生物學(xué)、 醫(yī)學(xué)意義。本發(fā)明通過(guò)提取芫根總皂苷并對(duì)其進(jìn)行降血糖活性檢測(cè)，拓寬了芫根綜合開(kāi)發(fā)利用的途徑，為探索天然的、有效的降血糖藥物提供了理論依據(jù)，符合高原植物資源的有效利用和藏藥新藥開(kāi)發(fā)的需要，有利于推動(dòng)民族地區(qū)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的之一是提供以皂苷類(lèi)化合物為主要成分的芫根總皂苷提取物；本發(fā)明還提供上述芫根總皂苷提取物的制備方法；本發(fā)明還提供上述芫根總皂苷提取物在治療和/預(yù)防血糖異常升高癥的藥物制備中的用途。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為從芫根根塊中提取到總皂苷，得率為2 6重量％，呈固態(tài)棕黃色，易溶于乙醇，易溶于熱水。利用四氧嘧啶和腎上腺素所致的糖尿病小鼠模型進(jìn)行芫根總皂苷降血糖作用功效實(shí)驗(yàn)，除非另有說(shuō)明，本發(fā)明中的％為重量百分比。
本發(fā)明芫根總皂苷提取物的制備方法具體為方法A:(1)將芫根原料置于提取釜中，加入3 10倍生藥體積的低級(jí)醇，低級(jí)醇為Cl C5醇類(lèi)，其濃度為50 95%，提取溫度為30 80°C，勻速攪拌6 12h，過(guò)濾得到濾液，并反復(fù)提取1 4次，合并濾液得到粗提液；(2)提取液減壓濃縮后，溶于30 70°C熱水，浸膏與水的體積比為1 2 3，按 1 1 3體積加入石油醚萃取，除去親脂性雜質(zhì)；C3)按1 1 3體積加入正丁醇進(jìn)行萃取，減壓濃縮至無(wú)有機(jī)溶劑味的固體，得到粗制總皂苷；(4)將粗制總皂苷加入少量甲醇至溶解，然后一邊攪拌一邊加入少量乙酸乙酯，混合均勻，析出總皂苷，反復(fù)處理3 9次，干燥后即得到精制總皂苷，該芫根總皂苷得率為 3 5重量％，純度為39 70 %。方法B:(1)將芫根原料置于提取釜中，加入3 10倍生藥體積的低級(jí)醇，低級(jí)醇為Cl C5醇類(lèi)，其濃度為50 95%，提取溫度為30 80°C，勻速攪拌6 12h，過(guò)濾得到濾液，并反復(fù)提取1 4次，合并濾液得到粗提液；(2)粗提液濃縮至原來(lái)的1/3后，利用大孔吸附樹(shù)脂吸附，用1倍柱體積的水洗去水溶性雜質(zhì)，例如糖等，改用30% 80%乙醇對(duì)其進(jìn)行梯度洗脫，收集洗脫液；(3)將洗脫液減壓濃縮至無(wú)有機(jī)溶劑味固體，得到粗制總皂苷；(4)將粗制總皂苷加入少量甲醇至溶解，然后一邊攪拌一邊加入少量乙酸乙酯，混合均勻，析出總皂苷，反復(fù)處理3 9次，干燥后即得到精制總皂苷，該芫根總皂苷得率為 2 3重量％，純度為65 90%。方法C (1)將芫根原料置于提取釜中，加入3 10倍生藥體積的低級(jí)醇，低級(jí)醇為Cl C5醇類(lèi)，其濃度為50 95%，提取溫度為30 80°C，勻速攪拌6 12h，過(guò)濾得到濾液，并反復(fù)提取1 4次，合并濾液得到粗提液；(2)將粗提液濃縮，加入30°C 70°C熱水，浸膏與水的體積比為1 2 3，2000 3000rp離心20 30min得到沉淀和上清液兩部分；(3)將沉淀物加入50 95%乙醇進(jìn)行回流提取，將過(guò)濾液濃縮、干燥得到一部分總皂苷；(4)將上清液減壓濃縮，2000 3000rpm離心20 30min，用水洗沉淀物，干燥得到另一部分總皂苷；(5)合并以上兩個(gè)部分得到總皂苷，該芫根總皂苷得率為4 6重量％，純度為 42 75%。所述制備方法中的芫根原料均為芫根的塊根，經(jīng)切片后自然風(fēng)干，然后粉碎得到粉狀物，粉碎細(xì)度達(dá)到40 200目；上述方法B中所用的大孔吸附樹(shù)脂為DlOl或SA-3或AB_8 ；上述方法A、B中所用的甲醇為無(wú)水或含水甲醇，所用乙酸乙酯濃度為100%。所述干燥方法為減壓真空干燥、冷凍干燥或噴霧干燥。
采用制備藥物制劑的常規(guī)方法和助劑，將芫根總皂苷制備成各種制劑，例如粉劑、 片劑、膠囊、顆粒劑、緩釋片、緩釋膠囊、滴丸或液體制劑等。上述制劑應(yīng)用于臨床治療肥胖癥、高血脂癥及制成含芫根總皂苷減肥降脂保健品。本發(fā)明用Liebermarm反應(yīng)檢測(cè)所提的芫根總皂苷，反應(yīng)中溶液呈黃一紅一藍(lán)一紫一綠色變化，可以確定其為皂苷類(lèi)化合物?？傇碥盏亩繙y(cè)定是利用苷元與香蘭素的硫酸試劑發(fā)生的顯色反應(yīng)，產(chǎn)生有色物質(zhì)，以齊墩果酸為標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，利用紫外分光光度法測(cè)定總皂苷純度。通過(guò)上述方法制備的芫根總皂苷在降血糖方面有顯著的效果。利用四氧嘧啶和腎上腺素所致的糖尿病小鼠模型進(jìn)行芫根總皂苷降血糖作用功效實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示，芫根皂苷對(duì)四氧嘧啶和腎上腺素致糖尿病小鼠具有顯著降血糖作用。本發(fā)明方法得到的芫根總皂苷原料易得，方法簡(jiǎn)單，生產(chǎn)成本低，產(chǎn)品中總皂苷含量較高，質(zhì)量穩(wěn)定、易于控制。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1、采用方法A，取曬干芫根塊根粉碎至100目，用3倍體積50%乙醇，在30°C的水浴中攪拌他，抽濾得到粗提液，反復(fù)提取4次，合并濾液。30°C減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮濾液，將所得浸膏溶于30°C熱水，浸膏體積/水體積為1 2.5，按1 1體積加入石油醚對(duì)其進(jìn)行萃取，除去脂溶性雜質(zhì)。再用正丁醇反復(fù)萃取3次，減壓回收正丁醇后得到粗總皂苷。將得到的粗總皂苷溶于少量無(wú)水甲醇，然后滴入乙酸乙酯(體積比為1 0.5)，攪拌混勻，有總皂苷析出。反復(fù)處理5次，收集析出的總皂苷，冷凍干燥。所得芫根總皂苷為棕黃色，得率為 4. 95%，純度為39%實(shí)施例2采用方法A，取曬干芫根塊根粉碎至40目，用6倍體積75 %乙醇，在80°C的水浴中攪拌他，抽濾得到粗提液，反復(fù)提取2次，合并濾液。70°C減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮濾液，將浸膏溶于70°C熱水，浸膏體積/水體積為1 2，按1 2體積加入石油醚對(duì)其進(jìn)行萃取，除去脂溶性雜質(zhì)。再用正丁醇反復(fù)萃取5次，減壓回收正丁醇后得到粗總皂苷。將得到的粗總皂苷溶于少量無(wú)水甲醇，然后滴入乙酸乙酯(體積比為1 0.8)，攪拌混勻，有總皂苷析出。反復(fù)處理5次，收集析出的總皂苷，45°C減壓真空干燥。所得芫根總皂苷為棕黃色，得率為3.5%，純度為57%實(shí)施例3 采用方法A，取曬干芫根塊根粉碎至200目，用10倍體積95 %乙醇，在65 °C的水浴中攪拌他，抽濾得到粗提液，反復(fù)提取4次，合并濾液。65°C減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮濾液，將浸膏溶于熱水，浸膏體積/水體積為1 2，按1 1體積加入石油醚對(duì)其進(jìn)行萃取，除去脂溶性雜質(zhì)。再用正丁醇反復(fù)萃取6次，減壓回收正丁醇后得到粗總皂苷。將得到的粗總皂苷溶于少量無(wú)水甲醇，然后滴入乙酸乙酯(體積比為1 0.5)，攪拌混勻，有總皂苷析出。反復(fù)處理5次，收集析出的總皂苷，45°C減壓真空干燥。所得芫根總皂苷為棕黃色，得率為3. 1%，純度為67%。
實(shí)施例4、
采用方法B，取曬干芫根塊根粉碎粉碎至100目，用3倍體積80%乙醇，在40°C的水浴中攪拌他，抽濾得到粗提液，反復(fù)提取4次，合并濾液。40°C減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮濾液至原來(lái)體積的1/3。將濃縮液經(jīng)過(guò)大孔吸附樹(shù)脂D101，使液體中的皂苷吸附于樹(shù)脂，棄去流出液，再用1倍柱體積的蒸餾水沖洗樹(shù)脂柱，棄去流出液，繼而分別用3倍柱體積的30%、 60%、90%乙醇進(jìn)行梯度洗脫，并收集洗脫液，減壓濃縮后得到粗總皂苷。將得到的粗總皂苷溶于少量無(wú)水甲醇，然后滴入乙酸乙酯(體積比為1 1)，攪拌混勻，有總皂苷析出。反復(fù)處理5次，收集析出的總皂苷，40°C減壓真空干燥。所得芫根總皂苷為棕黃色，得率為 2. 97%，純度為 65%。實(shí)施例5采用方法B，取曬干芫根塊根粉碎粉碎至100目，用6倍體積95%乙醇，在65°C的水浴中攪拌他，抽濾得到粗提液，反復(fù)提取4次，合并濾液。65°C減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮濾液至原來(lái)體積的1/3。將濃縮液經(jīng)過(guò)大孔吸附樹(shù)脂D101，使液體中的皂苷吸附于樹(shù)脂，棄去流出液，再用1倍柱體積的蒸餾水沖洗樹(shù)脂柱，棄去流出液，繼而分別用2倍柱體積的20%、 40^^60^^80^^90%乙醇進(jìn)行梯度洗脫，并收集洗脫液，減壓濃縮后得到粗總皂苷。將得到的粗總皂苷溶于少量無(wú)水甲醇，然后滴入乙酸乙酯(體積比為1 0.7)，攪拌混勻，有總皂苷析出。反復(fù)處理5次，收集析出的總皂苷，45°C減壓真空干燥。所得芫根總皂苷為棕黃色，得率為2. 56 %，純度為75 %。實(shí)施例6、采用方法B，取曬干芫根塊根粉碎粉碎至40目，用10倍體積60%乙醇，在70°C的水浴中攪拌12h，抽濾得到粗提液，反復(fù)提取2次，合并濾液。70°C減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮濾液至原來(lái)體積的1/3。將濃縮液經(jīng)過(guò)大孔吸附樹(shù)脂AB-8，使液體中的皂苷吸附于樹(shù)脂，棄去流出液，再用1倍柱體積的蒸餾水沖洗樹(shù)脂柱，棄去流出液，繼而分別用2倍柱體積的20%、 40^^60^^80^^90%乙醇進(jìn)行梯度洗脫，并收集洗脫液，減壓濃縮后得到粗總皂苷。將得到的粗總皂苷溶于少量無(wú)水甲醇，然后滴入乙酸乙酯(體積比為1 0.5)，攪拌混勻，有總皂苷析出。反復(fù)處理5次，收集析出的總皂苷，45°C減壓真空干燥。所得芫根總皂苷為棕黃色，得率為2. 11%，純度為87%。實(shí)施例7、采用方法C，取曬干芫根塊根粉碎至100目，用3倍體積60%乙醇，在40°C的水浴中攪拌12h，抽濾得到粗提液，反復(fù)提取4次，合并濾液。濾液經(jīng)減壓濃縮得到浸膏，溶于 40°C熱水，浸膏與水的體積比為1 2.5，后以3000印111的速度離心201^11，分離上清液和沉淀。將沉淀物用3倍生藥體積的60%乙醇進(jìn)行回流提取，過(guò)濾濃縮，40°C減壓真空干燥得到總皂苷；將上清液減壓濃縮，3000rpm離心20min，用水洗沉淀物，45°C減壓真空干燥得到另一部分總皂苷，合并兩部分總皂苷。所得芫根總皂苷為棕黃色，得率為5. 7%，純度為42%實(shí)施例8 采用方法C，取曬干芫根塊根粉碎至100目，用6倍體積75%乙醇，在60°C的水浴中攪拌他，抽濾得到粗提液，反復(fù)提取2次，合并濾液。濾液經(jīng)減壓濃縮得到浸膏，溶于70°C 熱水，浸膏與水的體積比為1 2，后以2500rpm的速度離心30min，分離上清液和沉淀。將沉淀物用3倍生藥體積的95%乙醇進(jìn)行回流提取，過(guò)濾濃縮，45°C減壓真空干燥得到總皂苷；將上清液減壓濃縮，2500rpm離心30min，用水洗沉淀物，45°C減壓真空干燥得到另一部分總皂苷，合并兩部分總皂苷。所得芫根總皂苷為棕黃色，得率為4. 9%，純度為60%實(shí)施例9采用方法C，取曬干芫根塊根粉碎至200目，用10倍體積90%乙醇，在70°C的水浴中攪拌他，抽濾得到粗提液，反復(fù)提取4次，合并濾液。濾液經(jīng)減壓濃縮得到浸膏，溶于70°C 熱水，浸膏與水的體積比為1 2，后以3000rpm的速度離心30min，分離上清液和沉淀。將沉淀物用5倍生藥體積的90%乙醇進(jìn)行回流提取，過(guò)濾濃縮，45°C減壓真空干燥得到總皂苷；將上清液減壓濃縮，3000rpm離心30min，用水洗沉淀物，45°C減壓真空干燥得到另一部分總皂苷，合并兩部分總皂苷。所得芫根總皂苷為棕黃色，得率為4. 1%，純度為70%。實(shí)施例10片劑取芫根總皂苷50g，加入50g可壓淀粉和40g羧甲基淀粉鈉，混合均勻，以 70%的乙醇為潤(rùn)濕劑，制軟材，18目篩制粒，烘干，16目篩整粒，加入3g硬脂酸鎂為潤(rùn)滑劑， 混合均勻，壓片、包衣，制成1000片包衣片。實(shí)施例11膠囊取芫根總皂苷50g，加入80g可壓淀粉和20g羧甲基纖維素鈉，混合均勻，以 70%的乙醇為濕潤(rùn)劑，制軟材，24目篩制粒，烘干，20目篩整粒，加入3g硬脂酸鎂，混合均勻，裝膠囊，制成1000粒膠囊。實(shí)施例12顆粒劑取芫根總皂苷100g，加入450g蔗糖粉、IOOg梭甲基纖維素鈉、IOOg微晶纖維素和50g檸檬酸，混合均勻，以3% PVP為潤(rùn)濕劑制軟材，20目篩制粒，烘干，18目篩整粒，分裝，制成粒徑為830 880 μ m的1000袋顆粒劑。每袋重0. 72 0. 78g。實(shí)施例13 粉針劑取芫根總皂苷12g，羥丙基-ρ-環(huán)糊精135g，加注射用水3L，攪成糊狀，再加70°C 85°C的注射用水3L，溶解時(shí)溫度控制在70°C 85°C，加甘露醇450g溶解，再用 ImoL/L鹽酸溶液調(diào)pH值至5. 6，加入針用炭后室溫?cái)嚢?，過(guò)濾脫炭，精濾.濾液按每只2ml 進(jìn)行分裝，采用速凍法干燥，將制品取出，進(jìn)行封口，即得到性狀為白色疏松塊狀物或粉末， 即得粉針劑。實(shí)施例14滴丸將150g聚乙二醇4000在水浴上加熱得熔融液，趁熱加入芫根總皂苷50g， 攪拌均勻，65°C保溫1小時(shí)，用滴丸機(jī)滴制，滴速120滴/分鐘，滴制溫度65 75°C，在15°C 左右的液體石蠟中冷卻，制得丸重約60mg，干燥，包衣，即得滴丸。實(shí)施例15口服液取蒸餾水適量，加入20g芫根總皂苷、180g蔗糖粉、20g檸檬酸，攪拌溶解， 過(guò)濾，濾液補(bǔ)充蒸餾水至10000ml，加入香精適量，攪拌均勻，分裝，每支10ml，壓蓋，100°C 消毒1小時(shí)，檢查合格，即得口服液。實(shí)施例16粉劑取芫根總皂苷30g，粉碎成粒徑為20 μ m粉狀物，加入500g蔗糖粉、IOOg梭甲基纖維素鈉、IOOg微晶纖維素混合均勻，分裝，制成1000袋粉劑。每袋重0. 68 0. 73g。 添加量為食品或飼料的0. 01 1%。將上述實(shí)施例1制備所得的芫根總皂苷進(jìn)行如下藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)
將本發(fā)明實(shí)施例1制備所得的芫根總皂苷對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠模型的降血糖作用實(shí)驗(yàn)1.實(shí)驗(yàn)材料與方法 取雄性昆明種小鼠60只，28-32g,適應(yīng)性飼養(yǎng)后隨機(jī)分組，禁食12小時(shí)；每只小鼠尾靜脈注射85mg/kg的四氧嘧啶，7 后眼眶取血測(cè)定血糖，血糖達(dá)到界定值 16. 9mmol/L)的則確定為糖尿病小鼠，按血糖的高低隨機(jī)分組，分別為模型組、陽(yáng)性組和總皂苷1(0. 5g/kg)、總皂苷II(lg/kg)和總皂苷III(2g/kg)組；對(duì)模型組每日給予 0. 5%羧甲基纖維素鈉(CMC)溶液0. 4ml,陽(yáng)性組給予50mg/kg格列本脲，總皂苷各組給予相應(yīng)劑量的總皂苷提取物，給藥持續(xù)7天，第八天眼眶取血，以葡萄糖氧化酶法測(cè)定血清血糖。小鼠第八天眼眶取血后處死，解剖分別取肝、腎、胸腺和脾臟，稱重，計(jì)算臟器指數(shù)。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS10. 0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用t檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較。2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表1芫根總皂苷對(duì)實(shí)驗(yàn)鼠血糖的影響
組別與劑量初始血糖(dl)給藥7天后血糖(d7)模型組-24. 0±2. 823. 2±2. 1陽(yáng)性組(50mg/kg)24. 0±2. 519. 9±3. 4*總皂苷 1(0. 5g/kg)24. 0±2. 419. 7±2. 0*總皂苷II(lg/kg)23. 9±2. 617. 6 ±3. 4林總皂苷 III(2g/kg)24. 0±3. 018. 7±3. 6林注與模型組比較，“*”Ρ<0·5，“**”Ρ<0·01表2芫根總皂苷對(duì)實(shí)驗(yàn)鼠臟器指數(shù)的影響
權(quán)利要求
1.一種芫根總皂苷制備降血糖藥物的用途，其特征在于將芫根總皂苷提取物制備成降血糖的藥物，所述芫根總皂苷是通過(guò)如下步驟制備的(1)將芫根原料置于提取釜中，加入3 10倍生藥體積的低級(jí)醇，低級(jí)醇為Cl C5醇類(lèi)，其濃度為50 95%，提取溫度為30 80°C，勻速攪拌6 12h，過(guò)濾得到濾液，并反復(fù)提取1 4次，合并濾液得到粗提液；(2)提取液減壓濃縮后，溶于30 70°C熱水，浸膏與水的體積比為1 2 3，按 1 1 3體積加入石油醚萃取，除去親脂性雜質(zhì)；(3)按1 1 3體積加入正丁醇進(jìn)行萃取，減壓濃縮至無(wú)有機(jī)溶劑味的固體，得到粗制總皂苷；(4)將粗制總皂苷加入少量甲醇至溶解，然后一邊攪拌一邊加入少量乙酸乙酯，混合均勻，析出總皂苷，反復(fù)處理3 9次，干燥后即得到精制總皂苷，該芫根總皂苷得率為3 5 重量％，純度為39 70%。
2.一種芫根總皂苷制備降血糖藥物的用途，其特征在于將芫根總皂苷提取物制備成降血糖的藥物，所述芫根總皂苷是通過(guò)如下步驟制備的(1)將芫根原料置于提取釜中，加入3 10倍生藥體積的低級(jí)醇，低級(jí)醇為Cl C5醇類(lèi)，其濃度為50 95%，提取溫度為30 80°C，勻速攪拌6 12h，過(guò)濾得到濾液，并反復(fù)提取1 4次，合并濾液得到粗提液；(2)粗提液濃縮至原來(lái)的1/3后，利用大孔吸附樹(shù)脂吸附，用1倍柱體積的水洗去水溶性雜質(zhì)，例如糖等，改用30% 80%乙醇對(duì)其進(jìn)行梯度洗脫，收集洗脫液；(3)將洗脫液減壓濃縮至無(wú)有機(jī)溶劑味固體，得到粗制總皂苷；(4)將粗制總皂苷加入少量甲醇至溶解，然后一邊攪拌一邊加入少量乙酸乙酯，混合均勻，析出總皂苷，反復(fù)處理3 9次，干燥后即得到精制總皂苷，該芫根總皂苷得率為2 3 重量％，純度為65 90%。
3.一種芫根總皂苷制備降血糖藥物的用途，其特征在于將芫根總皂苷提取物制備成降血糖的藥物，所述芫根總皂苷是通過(guò)如下步驟制備的(1)將芫根原料置于提取釜中，加入3 10倍生藥體積的低級(jí)醇，低級(jí)醇為Cl C5醇類(lèi)，其濃度為50 95%，提取溫度為30 80°C，勻速攪拌6 12h，過(guò)濾得到濾液，并反復(fù)提取1 4次，合并濾液得到粗提液；(2)將粗提液濃縮，加入30°C 70°C熱水，浸膏與水的體積比為1 2 3，2000 3000rp離心20 30min得到沉淀和上清液兩部分；(3)將沉淀物加入50 95%乙醇進(jìn)行回流提取，將過(guò)濾液濃縮、干燥得到一部分總皂苷；(4)將上清液減壓濃縮，2000 3000rpm離心20 30min，用水洗沉淀物，干燥得到另一部分總皂苷；(5)合并以上兩個(gè)部分得到總皂苷，該芫根總皂苷得率為4 6重量％，純度為42 75%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的用途，其中所述芫根原料均為芫根的塊根，經(jīng)切片后自然風(fēng)干，然后粉碎得到粉狀物，粉碎細(xì)度達(dá)到40 200目。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的用途，其中所述的干燥方法為減壓真空干燥、冷凍干燥或噴霧干燥。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的用途，其中將芫根總皂苷提取物制備成粉劑、片劑、膠囊、顆粒劑、緩釋片、緩釋膠囊、滴丸或液體制劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及從芫根植株中提取得到的芫根總皂苷制備降血糖藥物的用途，芫根總皂苷不僅可以降低四氧嘧啶致糖尿病小鼠的血糖，還能同時(shí)改善臟器的病變，同時(shí)對(duì)腎上腺素所致的動(dòng)物高血糖也進(jìn)行了相關(guān)藥效試驗(yàn)，結(jié)果顯示也有顯著的降血糖作用。
文檔編號(hào)A61K36/31GK102258555SQ201110239059
公開(kāi)日2011年11月30日 申請(qǐng)日期2011年8月19日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月19日
發(fā)明者蔣思萍, 高平 申請(qǐng)人:西藏自治區(qū)高原生物研究所