專利名稱：膽堿類似物修飾的腦靶向納米給藥系統(tǒng)及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬生物技術(shù)制藥領(lǐng)域，涉及一種新型基因藥物遞送系統(tǒng)，具體涉及膽堿類似物修飾的腦靶向納米給藥系統(tǒng)及其制備方法。
背景技術(shù)：
研究顯示，由于血腦屏障的存在，幾乎所有的大分子物質(zhì)和98%的小分子物質(zhì)均不進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)，從而維持了腦部微環(huán)境的穩(wěn)態(tài)。但是，血腦屏障同時(shí)也阻斷了治療藥物的入腦。為了克服這一腦部疾病治療的最大障礙，目前的腦靶向給藥系統(tǒng)大多采用配體修飾策略，經(jīng)受體介導(dǎo)內(nèi)吞入腦。然而，目前采用的配體大多為大分子多肽，在體內(nèi)可被酶解。研究還顯示，血腦屏障上還有一類轉(zhuǎn)運(yùn)體表達(dá)，它們負(fù)責(zé)腦內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的正常供應(yīng)，例如葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體(GluTl)和膽堿轉(zhuǎn)運(yùn)體等，其分別負(fù)責(zé)腦內(nèi)葡萄糖和膽堿的正常需求，具有轉(zhuǎn)運(yùn)速度快，轉(zhuǎn)運(yùn)能力高的優(yōu)點(diǎn)，因此研究人員注意到其可以考慮作為腦靶向給藥系統(tǒng)的新祀點(diǎn)?，F(xiàn)有技術(shù)公開了膽堿是合成磷脂酰乙酰膽堿和乙酰膽堿的前提物質(zhì)，其腦部需求量大，腦內(nèi)的高膽堿濃度說(shuō)明了膽堿轉(zhuǎn)運(yùn)體的高轉(zhuǎn)運(yùn)能力，并且其血漿濃度大約只有膽堿轉(zhuǎn)運(yùn)體米氏常數(shù)的25%，生理?xiàng)l件下未被飽和，因此有研究試圖利用膽堿轉(zhuǎn)運(yùn)體介導(dǎo)給藥系統(tǒng)入腦。然而，天然的膽堿分子不能被進(jìn)一步修飾到給藥系統(tǒng)上。構(gòu)建一種高效的膽堿類似物修飾的腦靶向納米基因給藥系統(tǒng)引起有關(guān)研究者的關(guān)注。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，利用膽堿轉(zhuǎn)運(yùn)體介導(dǎo)的機(jī)制，提供種新型高效的腦靶向納米基因給藥系統(tǒng)，尤其涉及膽堿類似物修飾的腦靶向納米給藥系統(tǒng)及其制備方法。本發(fā)明利用具有高膽堿轉(zhuǎn)運(yùn)體親和力的膽堿類似物作為腦靶向頭基，通過(guò)親水性聚合物修飾到樹枝狀大分子載體材料上，構(gòu)建膽堿類似物修飾的腦靶向納米給藥系統(tǒng)。具體而言，本發(fā)明的膽堿類似物修飾的腦靶向納米給藥系統(tǒng)，其特征在于，由樹枝狀高分子材料，親水性聚合物，膽堿類似物(以下稱:化合物10或簡(jiǎn)稱10)，包含有目的基因的載體組成。本發(fā)明中，樹枝狀高分子材料，親水性聚合物和膽堿類似物通過(guò)共價(jià)連接方式得到靶向載體，其中，親水性聚合物與樹枝狀高分子材料的分子比是I 10: 1，膽堿類似物與樹枝狀聞分子材料的分子比為I 10: 1，祀向載體與包含有目的基因的載體復(fù)合質(zhì)量比為0.1 6: I ;優(yōu)選靶向載體與包含有目的基因的載體復(fù)合質(zhì)量比為0.05 6: I。本發(fā)明構(gòu)建的腦靶向載體，與包含有目的基因片段的載體復(fù)合，可以實(shí)現(xiàn)目的基因腦內(nèi)的表達(dá)。本發(fā)明中，膽 堿類似物選自式⑴結(jié)構(gòu)的化合物10，
權(quán)利要求
1.膽堿類似物修飾的腦靶向納米給藥系統(tǒng)，其特征在于，由樹枝狀高分子材料，親水性聚合物，膽堿類似物和包含有目的基因的載體組成； 所述的樹枝狀高分子材料，親水性聚合物和膽堿類似物組成靶向載體，其中， 親水性聚合物與樹枝狀高分子材料的分子比是I 10: I，膽堿類似物與樹枝狀高分子材料的分子比為I 10:1 ； 所述的靶向載體與包含有目的基因的載體復(fù)合質(zhì)量比為0.1 6: I。
2.按權(quán)利要求1所述的膽堿類似物修飾的腦靶向納米給藥系統(tǒng)，其特征在于，所述的膽堿類似物為式(I)結(jié)構(gòu)的化合物10，
3.按權(quán)利要求1所述的膽堿類似物修飾的腦靶向納米給藥系統(tǒng)，其特征在于，所述的樹枝狀高分子材料選自樹枝狀聚賴氨酸或聚酰胺-胺。
4.按權(quán)利要求1所述的膽堿類似物修飾的腦靶向納米給藥系統(tǒng)，其特征在于，所述的親水性聚合物選自聚乙二醇PEG或聚氧乙烯；
5.按權(quán)利要求1所述的膽堿類似物修飾的腦靶向納米給藥系統(tǒng)，其特征在于，所述的包含有目的基因的載體選自質(zhì)粒DNA或小干擾RNA。
6.權(quán)利要求1的膽堿類似物修飾的腦靶向納米給藥系統(tǒng)的制備方法，其特征在于，其包括步驟: 將樹枝狀高分子材料和親水性聚合物以1:1 10的分子比溶于pH值7.4 8.0的磷酸鹽緩沖液中，室溫?cái)嚢?0 120分鐘，生成樹狀高分子材料-親水性聚合物，超濾法除去未反應(yīng)的親水性聚合物，將膽堿類似物以I 10: I的分子比與制得的樹狀高分子材料-親水性聚合物反應(yīng)2 24小時(shí)后生成子靶向載體，超濾法除去未反應(yīng)的膽堿類似物；制得的靶向載體溶于等滲磷酸鹽緩沖液中，與含有目的基因的載體以0.1 6: I的質(zhì)量t匕，渦旋復(fù)合得腦靶向納米基因給藥系統(tǒng)。
7.按權(quán)利要求6的方法，其特征在于，所述的膽堿類似物為式(I)結(jié)構(gòu)的化合物10。
8.權(quán)利要求1的膽堿類似物修飾的腦靶向納米給藥系統(tǒng)在介導(dǎo)高膽堿轉(zhuǎn)運(yùn)體密度區(qū)域的外源基因的表達(dá)中的用途。
全文摘要
本發(fā)明屬生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種膽堿類似物修飾的腦靶向基因給藥系統(tǒng)，本發(fā)明利用具有高膽堿轉(zhuǎn)運(yùn)體親和力的膽堿類似物為腦靶向頭基，通過(guò)親水性聚合物修飾到樹枝狀大分子載體材料上，構(gòu)建得到腦靶向納米給藥系統(tǒng)。本發(fā)明利用膽堿轉(zhuǎn)運(yùn)體機(jī)制介導(dǎo)基因的腦部表達(dá)；轉(zhuǎn)運(yùn)體具有轉(zhuǎn)運(yùn)能力高，轉(zhuǎn)運(yùn)速度快的特點(diǎn)；靶向頭基為小分子化合物，與多肽蛋白類分子相比具有合成制備簡(jiǎn)單，穩(wěn)定高，無(wú)免疫原性等優(yōu)點(diǎn)，由于體內(nèi)膽堿轉(zhuǎn)運(yùn)體生理?xiàng)l件下只有四分之一被飽和，所述的膽堿類似物活性比膽堿高既能有效地與轉(zhuǎn)運(yùn)體結(jié)合，又不影響體內(nèi)膽堿的正常作用，臨床應(yīng)用前景好。
文檔編號(hào)A61K47/22GK103169985SQ20111044090
公開日2013年6月26日 申請(qǐng)日期2011年12月24日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月24日
發(fā)明者蔣晨, 李劍峰 申請(qǐng)人:復(fù)旦大學(xué)