專利名稱：抗腫瘤的pH敏感緩釋植入劑及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種抗腫瘤藥物劑型，特別涉及一種抗腫瘤的PH敏感緩釋植入劑及制備方法。
背景技術(shù)：
衛(wèi)生部公布的2009年我國城市與農(nóng)村居民主要疾病死亡率及構(gòu)成統(tǒng)計(jì)顯示，惡性腫瘤在我國城市與農(nóng)村居民主要疾病死亡構(gòu)成中分別占38%和24. 62%,已經(jīng)成為嚴(yán)重威脅我國人民健康的頭號殺手。隨著癌癥發(fā)病和死亡人數(shù)的持續(xù)增加，因癌癥而帶來的疾病經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)和對社會經(jīng)濟(jì)發(fā)展的不良影響將會越來越明顯的顯現(xiàn)出來，因此關(guān)于癌癥的研究和治療已經(jīng)成為一個非常重要的領(lǐng)域。在腫瘤生長部位直接植入緩控釋化療藥，使腫瘤組織長時間與高濃度的化療藥接觸，避免了長時間持續(xù)靜脈用藥所帶來的不便和口服藥物的肝臟首過效應(yīng)，同時，緩釋植入劑可以解決傳統(tǒng)的全身化療藥物具有難以通過人體屏障(如治療腦瘤的血腦屏障)，藥物局部濃度低、全身反應(yīng)嚴(yán)重、作用腫瘤時間短而影響療效等缺點(diǎn)，而緩釋植入劑可以避開人體屏障，直接增加局部藥物濃度，延長化療藥物的作用時間，從而將抗腫瘤藥物的毒副作用控制在最小的程度，提高了用藥安全性，因而被廣泛用于臨床。腫瘤部位由于在有氧或者無氧條件下高速糖酵解產(chǎn)生的乳酸，使得腫瘤部位的 PH低于正常組織，在實(shí)體瘤內(nèi)細(xì)胞外的pH(6. 5)明顯低于正常組織的細(xì)胞外的pH(7. 4) [VAUPEL P, KALLIOffSKI F, OKUNIEFF P. Blood flow, oxygen and nutrient supply, and metabolicmicroenvironment of human tumors :a review[J]. Cancer Res,1989,49 (23) 6449-6465.]。利用pH敏感性材料制備的新劑型可以在體內(nèi)正常環(huán)境和腫瘤部位具有不同的釋藥速率，在正常人體環(huán)境時，藥物釋放很慢甚至不釋放，在腫瘤部位加速藥物釋放，提高治療效果。聚(β-氨基酯)(PBAE)是一種無毒、生物相容性好、可生物降解的pH敏感性材料，在PH值范圍為7. 0至7. 4的液體介質(zhì)中，這種聚合物是不溶的，但是在pH為6. 5時， 這種聚合物很快溶解掉。[Lynn，D. Μ. ；Amiji, Μ. M. ；Langer, R, pH-Responsive Polymer Microspheres Rapid Release of Encapsulated Material within the Range of Intracellular pH(pages 1707-1710),Angew. Chem. , Int. Ed. 2001,40(9),1707-1710.]由于PBAE具有以上的優(yōu)點(diǎn)，它可以作為設(shè)計(jì)pH敏感藥物控釋系統(tǒng)中的理想材料。由羥基乙酸和乳酸制成的共聚物聚乳酸-羥基乙酸共聚物Poly (D， L-lactide-co-glycolide) (PLGA)已成為納米粒等載體的首選材料，是公認(rèn)的生物相容性好、可降解、可用于體內(nèi)的材料，已被FDA批準(zhǔn)應(yīng)用于藥品生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種具有良好的生物相容性、可生物降解、在腫瘤部位可以加速藥物釋放的抗腫瘤的PH敏感緩釋植入劑。
3
本發(fā)明的第二個目的是提供一種抗腫瘤的PH敏感緩釋植入劑的制備方法。本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下一種抗腫瘤的pH敏感緩釋植入劑的制備方法，包括如下步驟按質(zhì)量比為60-99 40-1的比例取聚乳酸-羥基乙酸共聚物和聚(β _氨基酯) 混合為混合物，按比例稱取所述混合物0. 1-0. 3g，溶解于2-6ml有機(jī)溶劑中，加入脂溶性抗癌藥物10-30mg，漩渦或者超聲使所述藥物分散均勻，作為油相；在攪拌下，將所述油相加入到40-90ml質(zhì)量百分濃度為0. 5% -2. 5%的分子量為3萬 7萬的乳化劑聚乙烯醇或者泊洛沙姆188水溶液中，攪拌3-6分鐘，在0-10°C，以20-25w功率超聲分散90-120秒，形成水包油型溶液，在200-400轉(zhuǎn)/分鐘攪拌8-12小時，揮發(fā)掉有機(jī)溶劑；再以10000-12000轉(zhuǎn) /分鐘離心速度離心10-15分鐘，收集納米粒，蒸餾水洗滌，固液分離除去水，再加水2-細(xì)1 分散后，冷凍干燥得到抗腫瘤的PH敏感緩釋納米粒，將所述納米粒制成片或丸，射線滅菌后，得到抗腫瘤的PH敏感緩釋植入劑。所述聚乳酸-羥基乙酸共聚物的類型為PLGA(lactide glycolide 50 50, MW = 40-75kDa), PLGA(lactide glycolide 65 35, MW = 40_75kDa)、 PLGAdactide glycolide 75 25，MW = 66_107kDa)或 PLGA(lactide glycolide 85 15, MW = 50-75kDa)。所述聚乳酸-羥基乙酸共聚物和聚(β-氨基酯)的質(zhì)量比為80 20。所述有機(jī)溶劑為二氯甲烷、甲醇、乙醇、四氫呋喃、二甲基甲酰胺或二甲基亞砜。所述脂溶性抗癌藥物為多烯紫杉醇、紫杉醇、替莫唑胺、喜樹堿、長春新堿或加入三乙胺后的阿霉素。上述方法制備的一種抗腫瘤的pH敏感緩釋植入劑。本發(fā)明中的抗腫瘤的pH敏感緩釋植入劑的特點(diǎn)包括(1)植入劑中的納米級顆粒 O50nm左右)，分布較均勻；(2)載藥量大、穩(wěn)定性好(3)體外藥物釋放試驗(yàn)證明，不同pH值下，抗腫瘤藥物從本發(fā)明的抗腫瘤的PH敏感緩釋納米粒中呈現(xiàn)不同的藥物釋放速率。相比較pH為6. 5時，pH為7. 4藥物釋放速率較慢，從而推斷本發(fā)明的植入劑對正常組織的副作用?。?4)在腫瘤組織迅速釋放藥物，發(fā)揮長期高效抑制腫瘤的作用。


圖1為pH敏感性聚合物PBAE合成示意圖。圖2為抗腫瘤的pH敏感緩釋納米粒(PLGA PBAE = 80 20) FESEM照片。圖3不同pH值下多烯紫杉醇從抗腫瘤的pH敏感緩釋納米粒(PLGA PBAE = 80 20)中體外藥物釋放曲線。
具體實(shí)施例方式
下面的實(shí)施例可以使本專業(yè)技術(shù)人員更全面地理解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明，與該領(lǐng)域相關(guān)的普通人員，對本發(fā)明進(jìn)行的一些非本質(zhì)的調(diào)整和改進(jìn)，仍屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。 本發(fā)明所采用的聚(β_氨基酯)縮寫為ΡΒΑΕ，分子量為IOkDa,采用文獻(xiàn)報(bào)道的方法合成，合成路線如圖 1 所示。[Lynn，D. Μ. ；Amiji, Μ. Μ. ；Langer, R, pH-ResponsivePolymerMicrospheres :Rapid Release of Encapsulated Material within the Range of Intracellular pH(pagesl707-1710), Angew. Chem.，Int.Ed.2001，40 (9)，1707-1710·]實(shí)施例1一種抗腫瘤的pH敏感緩釋植入劑的制備方法，包括如下步驟按質(zhì)量比為80 20的比例取聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)，其PLGA類型為 (lactide glycolide 50 50，MW = 40_75kDa)，和聚(β -氨基酯)(PBA^ 混合為混合物，準(zhǔn)確稱取PLGA與PBAE混合物共0. 2g，將其完全溶解于2ml 二氯甲烷中，加入抗癌藥物多烯紫杉醇20mg，漩渦使藥物分散均勻，作為油相；在攪拌的條件下，將該油相加入到60ml 質(zhì)量百分濃度為2%的分子量為3萬 7萬聚乙烯醇(PVA)水溶液中，攪拌5分鐘；接著在冰浴條件下，以25w功率超聲分散120秒，形成水包油型溶液，低速攪拌(300轉(zhuǎn)/分鐘)攪拌10小時，揮發(fā)掉有機(jī)溶劑；接著以12000rpm離心速度離心15分鐘收集納米粒，用蒸餾水洗滌3次，固液分離除去水，加水2ml分散后，冷凍干燥得到得到抗腫瘤的pH敏感緩釋納米粒。掃描電鏡所示(圖2)，納米粒子大小較均一，外表光滑，呈球形，粒徑大約在250nm 左右。如表1所示，(1)納米粒分布較窄，粒徑大約在200nm左右；(2)納米粒的kta電位在-15mv左右，表面電荷的絕對值較高，粒子之間相互排斥作用較強(qiáng)，因而在分散相中較穩(wěn)定；(3)載有多烯紫杉醇納米粒的藥物包封率達(dá)到80%以上。如圖3所示，載多烯紫杉醇納米粒的釋放曲線呈兩相釋放特征并伴隨初始的“突釋效應(yīng)”，同時也可以發(fā)現(xiàn)，相比較在PH =7. 4，納米顆粒在pH = 6. 5條件下有更快的釋放速度，這樣證明在腫瘤組織部位，載有多烯紫杉醇的PH敏感高分子聚合物(PLGA PBAE = 80 20)納米?？梢园l(fā)揮更佳的治療效果。最后取納米粒IOOmg壓片，射線滅菌后，制成抗腫瘤的pH敏感緩釋植入劑。表1為載有多烯紫杉醇的pH敏感高分子聚合物(PLGA PBAE = 80 20)納米粒的粒徑和粒徑分布；Zeta電位；藥物包封率。(n = 6)
權(quán)利要求
1.一種抗腫瘤的PH敏感緩釋植入劑的制備方法，其特征是包括如下步驟按質(zhì)量比為60-99 40-1的比例取聚乳酸-羥基乙酸共聚物和聚(β-氨基酯)混合為混合物，按比例稱取所述混合物0. 1-0. 3g，溶解于2-6ml有機(jī)溶劑中，加入脂溶性抗癌藥物10-30mg，漩渦或者超聲使所述藥物分散均勻，作為油相；在攪拌下，將所述油相加入到 40-90ml質(zhì)量百分濃度為0. 5% -2. 5%的分子量為3萬 7萬的乳化劑聚乙烯醇或者泊洛沙姆188水溶液中，攪拌3-6分鐘，在0-10°C，以20-25w功率超聲分散90-120秒，形成水包油型溶液，在200-400轉(zhuǎn)/分鐘攪拌8-12小時，揮發(fā)掉有機(jī)溶劑；再以10000-12000轉(zhuǎn)/ 分鐘離心速度離心10-15分鐘，收集納米粒，蒸餾水洗滌，固液分離除去水，再加水2-細(xì)1分散后，冷凍干燥得到抗腫瘤的PH敏感緩釋納米粒，將所述納米粒制成片或丸，射線滅菌后， 得到抗腫瘤的PH敏感緩釋植入劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種抗腫瘤的PH敏感緩釋植入劑的制備方法，其特征是所述聚乳酸-羥基乙酸共聚物的類型為PLGA(lactide glycolide 50 50，MW = 40_75kDa)、 PLGA(lactide glycolide 65 35，MW = 40_75kDa)、PLGA(lactide glycolide 75 25，MW = 66-107kDa)或PLGA(lactide glycolide 85 15，MW = 50_75kDa)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種抗腫瘤的pH敏感緩釋植入劑的制備方法，其特征是所述聚乳酸-羥基乙酸共聚物和聚(β-氨基酯)的質(zhì)量比為80 20。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種抗腫瘤的pH敏感緩釋植入劑的制備方法，其特征是所述有機(jī)溶劑為二氯甲烷、甲醇、乙醇、四氫呋喃、二甲基甲酰胺或二甲基亞砜。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種抗腫瘤的pH敏感緩釋植入劑的制備方法，其特征是所述脂溶性抗癌藥物為多烯紫杉醇、紫杉醇、替莫唑胺、喜樹堿、長春新堿或加入三乙胺后的阿毒素。
6.權(quán)利要求1-5之一的方法制備的一種抗腫瘤的pH敏感緩釋植入劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了抗腫瘤的pH敏感緩釋植入劑及制備方法，方法為取聚乳酸-羥基乙酸共聚物和聚(β-氨基酯)溶解有機(jī)溶劑中，加入脂溶性抗癌藥物使分散，為油相；攪拌下，將油相加入到乳化劑水溶液中，攪拌，超聲分散，形成水包油型溶液，攪拌，揮發(fā)有機(jī)溶劑；離心，收集納米粒，蒸餾水洗滌，固液分離除去水，加水分散，冷凍干燥得到納米粒，將納米粒制成片或丸，射線滅菌，得到抗腫瘤的pH敏感緩釋植入劑。本發(fā)明植入劑中的納米級顆粒分布較均勻；載藥量大、穩(wěn)定性好，相比較pH為6.5時，pH為7.4藥物釋放速率較慢，從而推斷本發(fā)明的植入劑對正常組織的副作用??；在腫瘤組織迅速釋放藥物，發(fā)揮長期高效抑制腫瘤的作用。
文檔編號A61K47/34GK102225204SQ20111015426
公開日2011年10月26日 申請日期2011年6月9日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月9日
發(fā)明者萬冬, 梅林 , 潘杰, 陳嬌嬌 申請人:天津工業(yè)大學(xué)