專利名稱：用于抑制法呢基蛋白轉移酶的化合物的制作方法
背景WO 95/10516(1995年4月20日公開)公開了用于抑制法呢基蛋白轉移酶的三環(huán)化合物。
鑒于法呢基蛋白轉移酶抑制劑的現(xiàn)實意義，對本領域的一個寶貴的貢獻將是用作法呢基蛋白轉移酶抑制劑的化合物。本發(fā)明即提供了此種貢獻。
本發(fā)明概述本發(fā)明提供用于抑制法呢基蛋白轉移酶(FPT)的化合物。本發(fā)明的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物可以用下式代表
其中a、b、c和d中之一代表N或NR9，其中R9為O-、-CH3或-(CH2)nCO2H，其中n為1-3，而其余的a、b、c和d基團代表CR1或CR2；或a、b、c和d各自獨立選自CR1或CR2；每個R1和每個R2獨立選自H、鹵代、-CF3、-OR10(如-OCH3)、-COR10、-SR10(如-SCH3和-SCH2C6H5)、-S(O)tR11(其中t是0、1或2，如-SOCH3和-SO2CH3)、-SCN、-N(R10)2、-NR10R11、-NO2、-OC(O)R10、-CO2R10、-OCO2R11、-CN、-NHC(O)R10、-NHSO2R10、-CONHR10、-CONHCH2CH2OH、-NR10COOR11、
-SR11C(O)OR11(如-SCH2CO2CH3)、-SR11N(R75)2，其中每個R75獨立選自H和-C(O)OR11(如-S(CH2)2NHC(O)O-叔丁基和-S(CH2)2NH2)、苯并三唑-1-基氧基、四唑-5-基硫代或取代的四唑-5-基硫代(如烷基取代的四唑-5-基硫代，像1-甲基-四唑-5-基硫代)、鏈炔基、鏈烯基或烷基，所述烷基或鏈烯基任選被鹵代、-OR10或-CO2R10取代；R3和R4是相同的或不同的，且各自獨立代表H、R1和R2的任何取代基或者R3和R4一起代表與苯環(huán)(環(huán)III)稠合的飽和或不飽和C5-C7稠環(huán)；R5、R6、R7和R8各自獨立代表H、-CF3、-COR10、烷基或芳基，所述烷基或芳基任選被下列基團取代-OR10、-SR10、-S(O)tR11、-NR10COOR11、-N(R10)2、-NO2、-COR10、-OCOR10、-OCO2R11、-CO2R10、OPO3R10，或R5與R6結合代表＝O或＝S，和/或R7與R8結合代表＝O或＝S；R10代表H、烷基、芳基或芳烷基(如芐基)；R11代表烷基或芳基；X代表N、CH或C，其中C可含有與碳原子11相連的任選雙鍵(由虛線表示)；碳原子5和6之間的虛線表示任選的雙鍵，如此當存在雙鍵時，A和B獨立代表-R10、鹵代、-OR11、-OCO2R11或-OC(O)R10，當碳原子5和6之間無雙鍵存在時，A和B各自獨立代表H2、-(OR11)2、H和鹵代、二鹵代、烷基和H、(烷基)2、-H和-OC(O)R10、H和-OR10、＝O、芳基和H、＝NOR10或-O-(CH2)p-O-，其中p是2、3或4；和W選自
其中R12選自(a)H；(b)烷基；(c)芳烷基(如芐基)；和(d)雜芳基烷基(雜芳烷基)(如-CH2-咪唑基)；R13和R14各自獨立選自(a)H；(b)-C(O)OR16，其中R16代表烷基、芳烷基和雜芳烷基；(c)-SO2R17，其中R17選自NH2、-N(烷基)2(其中每個烷基可以相同或不同，如-N(CH3)2)、烷基(如C1-6烷基，如甲基)、芳基、芳烷基、雜芳基和雜芳烷基；(d)-C(O)R18，其中R18選自芳基(如苯基)、烷基、芳烷基、雜芳基和雜芳烷基；(e)C1-6烷基；(f)芳烷基；和(g)C3-6環(huán)烷基；r為0、1或2；s代表1、2、3、4或5(優(yōu)選3或4)；每個-CY2-基團中的每個Y獨立選自H或-OH，前提為每個-CY2-中的兩個Y取代基不都為-OH，且氮的α位的-CY2-基團中兩個Y都為H，優(yōu)選每個Y是H以使每個-CY2-基團為-CH2-基團，使下式的基團
形成3、4、5、6或7(優(yōu)選5或6)元環(huán)(如哌啶基或吡咯烷基)；v為0、1或2；R15選自(a)雜芳基(咪唑基)；(b)選自下列的基團
(5)-CH(OCH2CH3)2(6)-OH，和(7)-CN；和(c)選自下列的雜環(huán)烷基
z為0、1、2、3、4或5，其中每個-CH2-基團任選被-OH取代，即每個-CH2-基團的每一H任選被-OH基團取代，且每個-CH2-基團的任選取代不依賴于任何其它-CH2-基團上的取代，通常每個-CH2-是未被取代的；R22代表選自下列的基團
(5)烷基(如-CH3)，(6)-OR23，其中R23選自烷基、芳基和H，以及(7)
其中R24和R25獨立選自-NH2、烷氧基(如-OCH3)、-OH、-CH2CO2H、-OCH2Ph(如-OCH2C6H5)、-CH(OCH3)CH(CH3)2、
烷基、芳基、H、芳烷基和雜芳烷基；或R24和R25一起形成具有4或5個(-CH2-)基團的碳鏈以使R24和R25與它們所連接的氮一起形成5或6元雜環(huán)烷基環(huán)。
本發(fā)明的化合物抑制法呢基蛋白轉移酶和致癌基因蛋白Ras的法呢基化。因此，本發(fā)明進一步提供通過給予有效量的上述的三環(huán)類化合物從而抑制哺乳動物(特別是人)法呢基蛋白轉移酶(如ras法呢基蛋白轉移酶)的方法。給予病人本發(fā)明的抑制法呢基蛋白轉移酶的化合物可以用于治療下述的癌癥。
本發(fā)明提供通過給予有效量的本發(fā)明化合物抑制或治療細胞(包括轉化的細胞)異常生長的方法。細胞的異常生長指不依賴于正常調節(jié)機制(如接觸抑制的喪失)的細胞生長。這包括下列的異常生長(1)表達激活的Ras致癌基因的腫瘤細胞(腫瘤)；(2)其中Ras蛋白因為另一種基因的致癌突變而被激活的腫瘤細胞；及(3)其中出現(xiàn)異常的Ras激活的其它增生性疾病的良性和惡性細胞。
本發(fā)明也提供通過給予需要此治療的哺乳動物(如人)有效量的三環(huán)化合物抑制或治療腫瘤生長的方法。具體地講，本發(fā)明提供通過給予有效量的上述化合物來抑制或治療表達激活的Ras致癌基因的腫瘤生長的方法?？杀灰种频哪[瘤的例子包括(但不限于)肺癌(如肺腺癌)、胰癌(如胰腺癌像外分泌性的胰腺癌)、結腸癌(如結腸直腸癌像結腸腺癌和結腸腺瘤)、骨髓性白血病(如急性骨髓性白血病(AML))、甲狀腺濾泡癌、脊髓發(fā)育不良綜合征(MDS)、膀胱癌、上皮癌、乳腺癌和前列腺癌。
相信本發(fā)明也提供通過給予需要此治療的哺乳動物(如人)本文所述的有效量的三環(huán)化合物抑制或治療某些良性和惡性增生性疾病的方法，在這些增生性疾病中，Ras蛋白因為其它基因的致癌突變而被異常激活，即所述Ras基因本身不被突變所激活為致癌形式。例如，通過本文所述的三環(huán)化合物可以抑制或治療良性增生性紊亂神經(jīng)纖維瘤病或其中Ras因為酪氨酸激酶癌基因(如neu、src、abl、lck和fyn)突變或過度表達而被激活的腫瘤。
本發(fā)明方法中使用的三環(huán)化合物可以抑制或治療細胞的異常生長。不希望受到理論的束縛，相信這些化合物可以通過阻斷G-蛋白異戊二烯化而抑制G-蛋白(如ras p21)的功能而起作用，從而使它們用于治療增生性疾病如腫瘤生長和癌癥。不希望受到理論的束縛，相信這些化合物可以抑制ras法呢基蛋白轉移酶，從而顯示針對ras轉化細胞的抗增生活性。
本發(fā)明詳述如在此所用，除特別指明外，下列術語定義為AC-代表乙?；鵐H+-代表質譜中分子的分子離子加氫；苯并三唑-1-基氧基代表
1-甲基-四唑-5-基硫代代表
鏈烯基-代表具有至少一個碳-碳雙鍵且含有2-12個碳原子(優(yōu)選2-6個碳原子，并最優(yōu)選3-6個碳原子)的直鏈和支鏈碳鏈；鏈炔基-代表具有至少一個碳-碳三鍵且含有2-12個碳原子(優(yōu)選2-6個碳原子)的直鏈和支鏈碳鏈；烷基-(包括芳烷基和雜芳烷基的烷基部分)-代表含有1-20個碳原子，優(yōu)選1-6個碳原子的直鏈和支鏈碳鏈；
芳烷基-代表與上述定義的烷基連接的如下定義的芳基，優(yōu)選其中所述烷基為-CH2-(如芐基)；芳基(包括芳烷基的芳基部分)-代表含有6-15個碳原子并具有至少一個芳環(huán)(如芳基是苯環(huán))的碳環(huán)基，碳環(huán)的所有可取代的碳原子可以作為可能的連接點，所述碳環(huán)任選被下列的一個或多個基團取代(如1-3個)鹵代、烷基、羥基、烷氧基、苯氧基、CF3、氨基、烷氨基、二烷基氨基、-COOR10或-NO2；BOC-代表-C(O)OC(CH3)3；-CH2-咪唑基代表通過咪唑環(huán)上可取代的碳與-CH2-連接的咪唑基，即
如-CH2-(2-、4-或5-)咪唑基，像
Et-代表乙基鹵代-代表氟、氯、溴和碘；雜芳基-代表任選被R3、R4、苯基和或-CH2C(O)OCH3取代的環(huán)基，所述環(huán)基具有至少一個選自氧、硫或氮的雜原子，所述雜原子間斷碳環(huán)結構且具有足夠的離域電子數(shù)以提供芳族特性，所述芳族雜環(huán)基優(yōu)選含有2-14個碳原子，如(2-、4-或5-)咪唑基、三唑基、
2-、3-或4-吡啶基或吡啶基N-氧化物(任選被R3和R4取代)，其中吡啶基N-氧化物可用下式表示
雜芳基烷基(雜芳烷基)-代表連接有上述定義的烷基上的如上定義的雜芳基，優(yōu)選烷基為-CH2-(如-CH2-(4-或5-)咪唑基)；雜環(huán)烷基-代表含有3-15個碳原子、優(yōu)選4-6個碳原子的飽和、支鏈或非支鏈碳環(huán)，所述碳環(huán)被1-3個選自-O-、-S-或-NR10-的雜原子間斷，適當?shù)碾s環(huán)烷基包括(1)2-或3-四氫呋喃基，(2)2-或3-四氫噻吩基，(3)2-、3-或4-哌啶基，(4)2-或3-吡咯烷基，(5)2-或3-哌嗪基，(6)2-或4-二氧六環(huán)基；和Ph-代表苯基本文涉及的下列溶劑和試劑用縮寫表示四氫呋喃(THF)；異丙醇(iPrOH)；乙醇(EtOH)；甲醇(MeOH)；乙酸(HOAc或AcOH)；乙酸乙酯(EtOAc)；N，N-二甲基甲酰胺(DMF)；三氟乙酸(TFA)；三氟乙酸酐(TFAA)；1-羥基苯并三唑(HOBT)；1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(DEC)；二異丁基氫化銨(DIBAL)；和4-甲基嗎啉(NMM)。
所述取代基R1、R2、R3及R4的位置基于下面的編號環(huán)結構進行參照
本領域技術人員也可以理解C-11鍵上的碳原子的S和R立體構型為
式1.0化合物包括其中底部哌啶基為4-或3-哌啶基的化合物，即
式1.0化合物包括其中R2和R4為H、R1和R3為鹵代(優(yōu)選獨立選自溴或氯)的化合物。例如，R1為溴，R3為氯。這些化合物包括其中R1在3位，R3在8位，如3-Br和8-Cl的化合物。式1.0化合物也包括其中R2為H，R1、R3和R4為鹵素(優(yōu)選獨立選自溴或氯)的化合物。
優(yōu)選式1.0化合物由下式1.1代表
其中所有的取代基與式1.0中定義相同。
優(yōu)選，R2為H，R1、R3和R4為鹵代；a為N，b、c和d為碳；A和B各自代表H2；R5和R6之間不存在任選的雙鍵；X為CH；且R5、R6、R7和R8為H。更優(yōu)選R1、R3和R4獨立選自溴和氯。最優(yōu)選，R1為Br，R3和R4獨立選自Cl和Br。
更優(yōu)選式1.0化合物由式1.2和式1.3的化合物代表
并最優(yōu)選式1.4和1.5的化合物
其中R1、R3和R4各自獨立選自鹵代，優(yōu)選Br或Cl；且A、B、X和W與式1.0中定義相同。更優(yōu)選，A和B各自為H2；且C5和C6之間任選鍵不存在；X為CH。最優(yōu)選，R1為Br；R3和R4獨立為Br或Cl，還更優(yōu)選R3為Cl，R4為Br；A和B各自為H2；且C5和C6之間任選鍵不存在；X為CH；R5、R6、R7和R8為H。
R15的例子包括
當W代表
并且r為0(1)R12優(yōu)選選自(a)H；(b)烷基；(c)芳烷基；和(d)雜芳烷基；并最優(yōu)選R12選自(a)H；(b)甲基；(c)-CH2-咪唑基；和(d)芐基；(2)優(yōu)選，R13和R14獨立選自(a)H；(b)-C(O)OR16，其中R16為烷基；(c)-SO2R17；其中R17為烷基或芳基；(d)-C(O)R18，其中R18為芳基；和(e)烷基；最優(yōu)選，R13和R14獨立選自(a)H；(b)-C(O)OC(CH3)3；(c)-SO2CH3；和(d)-C(O)-苯基。優(yōu)選，當R13或R14其中之一為-C(O)OR16、-SO2R17、-C(O)R18、烷芳基或環(huán)烷基時，剩余的R13或R14為H。優(yōu)選的取代基結合包括(1)R12為烷基(更優(yōu)選甲基)，R13為-C(O)OR16(更優(yōu)選-C(O)OC(CH3)3)，和R14為H；(2)R12為雜芳烷基(更優(yōu)選-CH2-(4或5)-咪唑基)，R13為H或-C(O)OR16(更優(yōu)選H或-C(O)OC(CH3)3)，和R14為H；(3)R12為芳烷基(更優(yōu)選芐基)，R13為-C(O)OR16(更優(yōu)選-C(O)OC(CH3)3)，和R14為H；(4)R12為H，R13為-C(O)OR16(更優(yōu)選-C(O)OC(CH3)3)，和R14為H；(5)R12為H，R13為-SO2R17(更優(yōu)選-SO2CH3)，和R14為H；和(6)R12為H，R13為-C(O)R18(更優(yōu)選-C(O)-苯基)和R14為H。
本領域中的技術人員會理解前述W取代基可得自具有一個羧基和氨基基團的氨基酸。所述氨基酸的例子包括但不限于甘氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、天冬酰胺和組氨酸。例如，見Morrison和Boyd，OrganicChemistry，第五版，Allyn和Bacon，Inc.，Boston，1346-1347頁，其公開在此引入作為參考。
當W代表
并且r為1或2。優(yōu)選R12為H；并且R13和R14獨立選自烷基，最優(yōu)選R13和R14為相同的烷基基團(如甲基)。
當W代表
s優(yōu)選為3，即形成吡咯烷酮環(huán)，并優(yōu)選R13為H或-C(O)OR16，其中R16為烷基；最優(yōu)選R13為H或-C(O)OC(CH3)3。
當W代表
并且v為0，優(yōu)選R12代表H，R15代表雜芳基或雜環(huán)烷基。最優(yōu)選當R15為雜芳基時，所述雜芳基為咪唑基
并且當R15為雜環(huán)烷基時，所述雜環(huán)烷基為
當W代表
并且v為1或2，優(yōu)選R12代表H，R15為雜環(huán)烷基。最優(yōu)選R12為H和R15為雜環(huán)烷基，例如
當W代表
并且z為0，優(yōu)選R22代表
并且R24和R25優(yōu)選為H。
當W代表
并且z為1、2、3、4或5，優(yōu)選R22代表-OR23，并且R23優(yōu)選為烷基，最優(yōu)選為甲基。
優(yōu)選式1.2A和1.3A化合物
其中X為CH或N，R1、R3和R4為鹵素。
本發(fā)明優(yōu)選的化合物為由下式代表的化合物
其中R1、R3和R4為鹵素，其余的取代基與上述定義相同，更優(yōu)選式1.5A的化合物。
本領域中的技術人員理解W取代基
其中r為0包括
和W取代基
其中v為0包括
其中W為
并且r為0的式1.0的代表性化合物包括
其中W為
并且r為1或2的式1.0的代表性化合物包括
其中W為
并且s為3的式1.0的代表性化合物包括
其中W為
并且v為0的式1.0的代表性化合物包括
其中W為
并且v為1的式1.0的代表性化合物包括
其中W為
并且z為0的式1.0化合物包括
其中W為
并且z為1、2、3、4或5的式1.0化合物包括
本發(fā)明化合物也包括
或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物本發(fā)明的化合物也包括1-N-氧化物，即如下式的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物
其中～～～～代表化合物的其余部分。
化合物的旋光度((+)-或(-)-)是于25℃在甲醇或乙醇中測定的。
本發(fā)明包括無定形狀態(tài)或結晶狀態(tài)的上述化合物。
引入環(huán)體系的線表示所指定的鍵可以連接于任何可取代的環(huán)碳原子上。
部分本發(fā)明的化合物可以以不同的異構體(如對映體或非對映異構體)，包括阻轉異構體(即其中7元環(huán)為固定的構象，使得由于10-溴代取代基的存在導致11-位碳原子位于稠合的苯環(huán)平面的上方或下方的化合物)存在。本發(fā)明意欲包括所有此類純形式和混合物形式的異構體，包括外消旋混合物。也包括烯醇形式。
某些三環(huán)化合物具有酸性，例如那些具有羧基或酚羥基的三環(huán)化合物。這些化合物可以形成藥學上可接受的鹽。此類鹽的實例包括鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鋁鹽、金鹽、銀鹽和鋰鹽。例如，具有-OR23基團(其中R23為H)的化合物可以形成鈉鹽或鋰鹽-即具有-ONa或-OLi基團的化合物。也包括與藥學上可接受的胺如氨、烷基胺、羥基烷基胺、N-甲基葡糖胺等形成的鹽。
某些堿性的三環(huán)化合物也可形成藥學上可接受的鹽，如酸加成鹽。例如，吡啶-氮原子可與強酸形成鹽，而具有堿性取代基如氨基的化合物也可與弱酸形成鹽。適合形成鹽的酸的例子為鹽酸、硫酸、磷酸、乙酸、檸檬酸、草酸、丙二酸、水楊酸、蘋果酸、富馬酸、琥珀酸、抗壞血酸、馬來酸、甲磺酸和其它本領域熟知的無機酸和羧酸。通過方便的方法是使游離堿形式與足量的所需酸接觸產(chǎn)生鹽來制備所述鹽。通過用適當?shù)南A水溶液，如稀氫氧化鈉、碳酸鉀、氨和碳酸氫鈉水溶液處理所述鹽可以再生成所述游離堿形式。這些游離堿的形式在某些物理性質，如在極性溶劑中的溶解度方面與它們各自的鹽形式有些不同，但對于本發(fā)明的目的而言，所述酸和堿的鹽與它們各自的游離堿形式卻是等同的。
所有這些酸和堿的鹽可用作本發(fā)明范圍內的藥學上可接受的鹽，且對于本發(fā)明的目的而言，認為所有的酸和堿的鹽與相應化合物的游離形式是等同的。
可以根據(jù)WO 95/10516(1995年4月20日公開)、申請系列號08/410187(1995年3月24日遞交)、申請系列08/577951號(1995年12月22日遞交，目前已放棄)、申請系列08/615760號(1996年3月13日遞交，目前已放棄)、WO 97/23478(1997年7月3日公開，公開系列號08/577951和08/615760的目的物質)、申請系列08/710225(1996年9月13日遞交)和申請系列08/877453(1997年6月17日遞交)中所述方法和下述方法制備本發(fā)明的化合物，這些公開在此引入作為參考。
本發(fā)明的化合物可以用下列方法制備，即于約25℃、在DMF中，通過使下式的化合物(其中所有的取代基與式1.0中定義相同)
與適當保護的哌啶基乙酸(如1-N-叔丁氧基羰基哌啶基乙酸)以及DEC/HOBT/NMM反應約18小時，產(chǎn)生下式的化合物
然后使式21.0化合物與TFA或10％硫酸的二氧六環(huán)和甲醇溶液反應，接著與氫氧化鈉反應，得到式20.0化合物
例如，根據(jù)上述方法，通過使式19.0化合物與1-N-叔丁氧基羰基哌啶基-4-乙酸反應，可以制備下式的化合物
如，式22.0化合物包括下列化合物
這些化合物的制備方法分別在制備實施例3、4、5、6、7、8、9、10、11、12和13中描述。
本發(fā)明的化合物可以用下列方法制備，即于約25℃、在DMF中，通過使下式的化合物
與適當保護的哌啶基乙酸(如1-N-叔丁氧基羰基哌啶基乙酸)以及DEC/HOBT/NMM反應約18小時，產(chǎn)生下式的化合物
然后使式21.1化合物與含有TFA的醚或10％硫酸的二氧六環(huán)和甲醇溶液反應，接著與氫氧化鈉反應，得到式22.1化合物
在偶合試劑例如DEC和HOBT存在下、在二甲基甲酰胺中，通過使式22.1化合物與適當?shù)聂人岱磻梢灾苽溆墒?.7代表的本發(fā)明的酰胺化合物
或者使式22.1化合物與酰氯或酸酐在溶劑如吡啶中反應。
式1.7上的W基團可含有官能團，通過本領域中所熟知的方法如水解可將其轉化為其它官能團。例如，通過用甲醇鉀鹽酸鹽處理，然后用酸處理，可使式16.0-B化合物轉化為式74-B化合物，式35.0-B化合物轉化為式52.0-B化合物。同樣，通過用酸如三氟乙酸或用HCl氣體飽和的二氧六環(huán)處理，可使式86.0-B和89.0-B化合物分別轉化為88.0-B和90.0-B化合物。
用間-氯代過氧苯甲酸氧化下式的相應的吡啶基化合物
可以制備具有1-N-O基團的化合物
該反應可以于適當?shù)臏囟认?、在適當?shù)挠袡C溶劑例如二氯甲烷(通常為無水的)中進行，產(chǎn)生在三環(huán)環(huán)體系的環(huán)I的1位具有N-O取代基的本發(fā)明的化合物。
一般而言，在加入間-氯代過氧苯甲酸前，將原料三環(huán)反應物的有機溶劑溶液冷卻至約0℃。然后在反應過程中將該反應物溫熱至室溫。通過標準的分離方法可以回收所需產(chǎn)物。例如，用適當堿的水溶液如飽和的碳酸氫鈉或氫氧化鈉(如1N氫氧化鈉)水溶液洗滌，讓經(jīng)無水硫酸鎂干燥。真空濃縮含有產(chǎn)物的溶液。用標準方法，如經(jīng)硅膠層析(像快速柱層析)純化產(chǎn)物。
或者用中間體
通過上述氧化過程，用間-氯代過氧苯甲酸和
制備N-O化合物，其中
為保護基團，如BOC。氧化后，用本領域熟知的技術脫去保護基團。然后使N-O中間體進一步反應產(chǎn)生本發(fā)明的化合物。
式19.0化合物包括式19.1化合物
根據(jù)本領域已知的方法，例如用WO 95/10516、U.S.5151423中所述方法和下列所述方法可以制備式19.1化合物。由包括下列步驟的方法也可以制備上述中間體化合物(a)在強堿存在下，使下式的酰胺
其中R11a為Br，R5a為氫，R6a為C1-C6烷基、芳基或雜芳基；R5a為C1-C6烷基、芳基或雜芳基，R6a為氫；R5a和R6a獨立選自C1-C6烷基和芳基；或R5a和R6a與它們所連接的氮一起形成含有4-6個碳原子或包括3-5個碳原子以及1個選自-O-和-NR9a(其中R9a為H、C1-C6烷基或苯基)的雜部分的環(huán)；與下式的化合物
其中R1a、R2a、R3a和R4a獨立選自氫和鹵素，R7a為Cl或Br，反應得到下式的化合物
(b)使步驟(a)的化合物與(i)POCl3反應得到下式的氰基化合物
；或(ii)DIBALH反應得到下式的醛化合物
(c)使上述氰基化合物或醛與下式的哌啶衍生物反應
其中L為選自Cl或Br的離去基團，分別得到下式的酮或醇
(d)(i)用CF3SO3H使酮環(huán)化得到式13.0a化合物，其中虛線代表雙鍵；或(d)(ii)用多磷酸使醇環(huán)化得到中間體化合物，其中虛線代表單鍵。
WO 95/10516、U.S.5151423公開了制備中間體化合物的方法并按下面所述使用三環(huán)酮中間體。下式的中間體
其中R11、R1a、R2a、R3a和R4a獨立選自氫和鹵素，可以用下列方法制備，該方法包括(a)使下式的化合物
(i)在鈀催化劑和一氧化碳的存在下，與式NHR5aR6a的胺反應，其中R5a和R6a與上述方法中定義相同，得到下式的酰胺
；或
(ii)在鈀催化劑和一氧化碳的存在下，與式R10aOH的醇反應，其中R10a為C1-C6低級烷基或C3-C6環(huán)烷基，得到下式的酯
，然后使該酯與式NHR5aR6a的胺反應，得到酰胺；(b)在強堿存在下，使酰胺與下式的碘代芐基化合物反應
其中R1a、R2a、R3a、R4a和R7a與上述定義相同，得到下式的化合物
；和(c)用式R8aMgL試劑，其中R8a為C1-C8烷基、芳基或雜芳基，L為Br或Cl，使步驟(b)的化合物環(huán)化，前提為在環(huán)化前，使其中R5a或R6a為氫的化合物與適當?shù)腘-保護基反應。
用具有高度對映選擇性的酶催化酯基轉移方法可以制備式19.2化合物的(+)-異構體
優(yōu)選使19.3的外消旋化合物
與酶如Toyobo LIP-300和?；瘎┤缛一惗∷狨シ磻?；然后根據(jù)本領域熟知的方法使生成的(+)-酰胺與(-)-對映的胺分離，接著水解酰胺，例如在回流下用酸例如硫酸水解，然后根據(jù)本領域熟知的技術用DIBAL還原產(chǎn)生的化合物得到相應的旋光性式19.2的富集(+)-異構體?；蛘呤紫葘⑹?9.3外消旋的化合物還原為相應的式19.2外消旋化合物，然后根據(jù)上述用酶(Toyobo LIP-300)和?；瘎┨幚淼玫?+)-酰胺，將其水解得到旋光性富集(+)-異構體。
本領域技術人員可以理解用上述的酶方法，可以制備其中具有其它的R1、R2、R3和R4取代基的式1.0化合物。
為制備式1.0化合物，其中W為
r為0，并且R13和R14選自H或-C(O)OR16，在DEC和HOBt存在下，在二甲基甲酰胺中將式20.0或22.0化合物與適當?shù)谋槐Ｗo的下述氨基酸反應
分別制備下式化合物
式23.0或24.0化合物與TFA在二氯甲烷中反應分別得到去保護的化合物
通過將式1.0化合物，其中W為
r為0，R12為H，R13和R14都為H，與適當?shù)穆却姿狨?
TEA和二氯甲烷反應制備式1.0化合物，其中W為
r為0，R12為H，R13或R14為H，剩余的R13或R14為-C(O)OR16。
在適當?shù)挠袡C溶劑(如二氯甲烷)中，將式25.0或26.0化合物與適當?shù)幕酋Ｂ?R17SO2Cl)或適當?shù)孽Ｂ?R18C(O)Cl)及TEA反應，制備式25.0或26.0化合物，其中R13選自-SO2R17或-C(O)R18。
通過將式20.0或22.0化合物與適當取代的羧酸和例如DEC、HOBT和N-甲基嗎啉反應，或將式20.0或22.0化合物與適當取代的酰氯反應可以制備式1.0化合物，其中W為
r為1或2，R12為H。
例如，式20.0或22.0化合物可以與得自丙酸的
反應，其中R13和R14為，例如，烷基(如甲基)。此處的氨基羧酸不能得自商業(yè)，所需的氨基羧酸可以通過丙烯酸乙酯與適當?shù)陌被衔?如Ahn，K.H.et al.，Tetrahedron Letters，35，1875-1878(1994)所述)反應，隨后將該酯水解制備。
例如，式20.0或22.0化合物也可以與得自丁酸的
反應，其中R13和R14為，例如，烷基(如甲基)。此處的氨基羧酸不能得自商業(yè)，適當?shù)孽Ｂ瓤梢杂肎oel，O.P.et al.，Synthesis，p.538(1973)所述相似的方法制備。該酰氯然后與式20.0或22.0化合物反應分別得到化合物
然后該氯原子可用適當?shù)陌诽鎿Q得到所需的化合物。
此處R13或R14皆為H，然后起始物質為被保護的氨基羧酸
其中z為較適當?shù)谋Ｗo基團(如，BOC，CBZ(羰基芐氧基)或TFA)。然后用式20.0或22.0化合物偶合該被保護的氨基羧酸分別得到氨基保護的中間體
然后將該氨基保護的中間體(20.0B或22.0B)烷基化，并采用本領域中已知的標準方法除去該保護基團。
制備式1.0化合物，其中W為
v為0，R12為H，可以通過將式20.0或22.0化合物與氯代乙酰氯、TEA和二氯甲烷反應得到下式化合物
然后用適當?shù)膲A如碳酸鈉和任選的適當?shù)娜軇?如DMF)，將式26.0或27.0化合物中-C(O)CH2Cl基團中的氯原子用適當?shù)挠H核試劑，R15，置換。
自式20.0或22.0化合物制備式1.0化合物，其中W為
z為0，R22為
可以通過與乙二酰氯(oxallyl chloride)和過量的胺
反應來制備。
通過將式20.0或22.0化合物與適當取代的二羧酸(將其用適當?shù)耐榛蚍蓟鶊F保護為單酯)反應可制備式1.0化合物，其中W為
z為1、2、3、4或5，R22為-OR23，R23為，如烷基。通過該酯的堿水解(如NaOH)可得到相應的酸(即R23為H)。通過使用DEC、HOBT和NMM，將適當?shù)娜〈放c上面所產(chǎn)生的羧酸反應制備該化合物，其中R22為-NR24R25。例如，對于其中z為3的化合物，可使用戊二酸鹽(其中R23為烷基，如甲基)
對于其中z為2的化合物，可使用琥珀酸鹽(其中R23為烷基，如甲基)
對于其中z為1的化合物，可使用丙二酸鹽(其中R23為烷基，如甲基)
反應方案1表明了本發(fā)明化合物的制備。
方案1
用下面的實施例來示范說明本發(fā)明所用的化合物，這些不應構成對本公開范圍的限制。
制備實施例1
將10g(60.5mmol)4-吡啶基乙酸乙酯和120ml無水二氯甲烷于-20℃混合，加入10.45g(60.5mmol)MCPBA并于-20℃攪拌1小時，然后于25℃攪拌67小時。加入另外的3.48g(20.2mmol)MCPBA并于25℃攪拌24小時。用二氯甲烷稀釋并用飽和的碳酸氫鈉(水溶液)洗滌，然后用水洗滌。硫酸鎂干燥，真空濃縮至殘留物，層析(硅膠，2％-5.5％(10％氫氧化銨的甲醇溶液)/二氯甲烷)得到8.12g的產(chǎn)品化合物。質譜.MH+＝182.15步驟B
將3.5g(60.5mmol)步驟A的產(chǎn)品、17.5ml乙醇和96.6ml的10％氫氧化鈉混合，并于67℃將該混合物加熱2小時。加入2N鹽酸(水溶液)調至ph＝2.37，并真空濃縮至殘留物。加入200ml無水乙醇，通過celite過濾并用無水乙醇(2×50ml)洗滌濾餅。真空濃縮合并的濾液得到2.43g目標化合物。
制備實施例2
通過公布于PCT國際公開WO95/10516號的方法制備目標化合物。
制備實施例3
步驟A
將14.95g(39mmol)的8-氯-11-(1-乙氧基-羰基-4-哌啶基)-11H-苯并[5，6]芳庚并[1，2-b]吡啶和150ml的二氯甲烷混合，然后加入13.07g(42.9mmol)的(nBu)4NNO3，并冷卻該混合物至0℃。在1.5小時內緩慢(滴加)加入6.09ml(42.9mmol)的TFAA于20ml二氯甲烷中的溶液。將該混合物于0℃放置過夜，然后按順序用飽和碳酸氫鈉(水溶液)、水和鹽水洗滌。將該有機溶液用硫酸鈉干燥，真空濃縮為殘留物并層析該殘留物(硅膠，乙酸乙酯/己烷梯度)分別得到4.32g和1.90g的3A(i)和3A(ii)化合物產(chǎn)品。
化合物3A(i)的質譜MH+＝428.2；化合物3A(ii)的質譜MH+＝428.3；步驟B
將22.0g(51.4mmol)的得自步驟A的3A(i)的產(chǎn)品、150ml的85％乙醇(水溶液)、25.85g(0.463mol)鐵粉和2.42g(21.8mmol)氯化鈣合并，并加熱回流過夜。加入12.4g(0.222mol)鐵粉和1.2g(10.8mmol)氯化鈣，并加熱回流2小時。加入另外的12.4g(0.222mol)鐵粉和1.2g(10.8mmol)氯化鈣，并再加熱回流2小時。通過celite過濾該熱混合物，用50ml的熱乙醇洗滌該celite，真空濃縮該濾液為殘留物。加入100ml的無水乙醇，濃縮為殘留物并層析該殘留物(硅膠，甲醇/二氯甲烷梯度)得到16.7g化合物產(chǎn)品。
步驟C
將16.47g(41.4mmol)的得自步驟B的產(chǎn)品和150ml的48％HBr(水溶液)混合，并冷卻至-3℃。緩慢加入(滴加)18ml的溴，然后緩慢加入(滴加)8.55g(0.124mol)的NaNO2于85ml水中的溶液。于-3℃-0℃攪拌45分鐘，然后通過加入50％的氫氧化鈉(水溶液)調至Ph＝10。用乙酸乙酯萃取，用鹽水洗滌該萃取液并用硫酸鈉干燥該萃取液。濃縮為殘留物并層析(硅膠，乙酸乙酯/己烷梯度)分別得到3C(i)(10.6g)和3C(ii)(3.28g)兩種產(chǎn)品化合物。
化合物3C(i)的質譜MH+＝461.2；化合物3C(ii)的質譜MH+＝539；步驟D
通過將步驟C的產(chǎn)物3C(i)溶于濃鹽酸中并于約100℃加熱約16小時使其水解。冷卻該混合物，用1M氫氧化鈉水溶液中和。用二氯甲烷萃取，經(jīng)硫酸鎂干燥萃取物，過濾并真空濃縮得到目標化合物。
質譜MH+＝466.9。
步驟E
將得自步驟D的目標化合物(1.160g，2.98mmol)溶于20ml DMF中，于室溫下攪拌，加入0.3914g(3.87mmol)4-甲基嗎啉、0.7418g(3.87mmol)DEC、0.5229g(3.87mmol)HOBT和0.8795g(3.87mmol)1-N-叔丁氧基羰基-哌啶基-4-乙酸。于室溫下，將該混合物攪拌2天，然后真空濃縮為殘留物，使其分配于二氯甲烷和水之間。順序用保護的碳酸氫鈉水溶液、10％磷酸二氫鈉水溶液和鹽水洗滌有機相。經(jīng)硫酸鎂干燥有機相，過濾并真空濃縮為殘留物。殘留物經(jīng)層析(硅膠，2％甲醇/二氯甲烷+氨)得到1.72g產(chǎn)物。m.p.＝94.0-94.5℃。質譜MH+＝616.3，元素分析計算值C，60.54；H，6.06；N，6.83。實測值C，59.93；H，6.62；N，7.45。
步驟F
將1.67g(2.7mmol)步驟E的產(chǎn)物和20ml二氯甲烷合并，于0℃攪拌。加入20ml TFA，將該混合物攪拌2小時，然后用1N氫氧化鈉水溶液堿化該混合物。用二氯甲烷萃取，用硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮，得到1.16g產(chǎn)物。m.p.＝140.2-140.8℃。質譜MH+＝516.2。
制備實施例4
于-5℃，將25.86g(55.9mm)4-(8-氯代-3-溴代-5，6-二氫-11H-苯并[5，6]芳庚并[1，2-b]吡啶-11-亞基-1-哌啶-1-甲酸乙酯和250ml濃硫酸混合，然后加入4.8g(56.4mmol)亞硝酸鈉，攪拌2小時。將該混合物傾至600g冰中，用濃氫氧化銨水溶液堿化。過濾該混合物，用300ml水洗滌，然后用二氯甲烷萃取。用200ml水洗滌萃取物，經(jīng)硫酸鎂堿化，接著過濾并真空濃縮為殘留物。層析(硅膠，10％乙酸乙酯/二氯甲烷)得到24.4g(產(chǎn)率86％)產(chǎn)物。m.p.＝165-167℃。質譜MH+＝506(CI)，元素分析計算值C，52.13；H，4.17；N，8.29。實測值C，52.18；H，4.51；N，8.16。
步驟B
于20℃，將步驟A的產(chǎn)物(20g，40.5mmol)和200ml濃硫酸混合，然后將該混合物冷卻至0℃。向該混合物中加入7.12g(24.89mmol)1，3-二溴代-5，5-二甲基海因，于20℃攪拌3小時。冷卻至0℃，再加入1.0g(3.5mmol)二溴代海因，于20℃攪拌2小時。將該混合物傾至400g冰中，于0℃用濃氫氧化銨水溶液堿化，過濾收集產(chǎn)生的固體。用300ml水洗滌固體，在200ml丙酮中制成淤漿，過濾得到19.79g(產(chǎn)率85.6％)產(chǎn)物。m.p.＝236-237℃。質譜MH+＝584(CI)，元素分析計算值C，45.11；H，3.44；N，7.17。實測值C，44.95；H，3.57；N，7.16。
步驟C
于50℃，將25g(447mmol)鐵屑、10g(90mmol)氯化鈣和20g(34.19mmol)步驟B產(chǎn)物的700ml 90∶10乙醇/水懸浮液混合。于回流下，將該混合物加熱過夜，通過Celite過濾，用2×200ml熱乙醇洗滌濾餅。合并濾液和洗滌液，真空濃縮為殘留物。用600ml二氯甲烷萃取殘留物，用300ml水洗滌，用硫酸鎂干燥。過濾并真空濃縮為殘留物，然后層析(硅膠，30％乙酸乙酯/二氯甲烷)得到11.4g(產(chǎn)率60％)產(chǎn)物。m.p.＝211-212℃。質譜MH+＝554(CI)，元素分析計算值C，47.55；H，3.99；N，7.56。實測值C，47.45；H，4.31；N，7.49。
步驟D
于-10℃，緩慢(分次)將步驟C的產(chǎn)物(20g，35.9mmol)加至8g(116mmol)亞硝酸鈉的120ml濃鹽酸水溶液中。于0℃將產(chǎn)生的混合物攪拌2小時，然后于0℃、用1小時緩慢加至(滴加)150ml(1.44mol)50％次磷酸。于0℃攪拌3小時，然后傾至600g冰中，用濃氫氧化銨水溶液堿化。用2×300ml二氯甲烷萃取，用硫酸鎂干燥萃取物，然后過濾并真空濃縮為殘留物。層析(硅膠，25％乙酸乙酯/己烷)得到13.67g(產(chǎn)率70％)產(chǎn)物。m.p.＝163-165℃。質譜MH+＝539(CI)，元素分析計算值C，48.97；H，4.05；N，5.22。實測值C，48.86；H，3.91；N，5.18。
步驟E
將6.8g(12.59mmol)步驟D的產(chǎn)物和100ml濃鹽酸水溶液混合，于85℃攪拌過夜。冷卻該混合物，然后傾至300g冰中，用濃氫氧化銨水溶液堿化。用2×300ml二氯甲烷萃取，用硫酸鎂干燥萃取物，過濾并真空濃縮為殘留物，然后層析(硅膠，10％甲醇/乙酸乙酯+2％氫氧化銨水溶液)得到5.4g(產(chǎn)率92％)產(chǎn)物。m.p.＝172-174℃。質譜MH+＝467(FAB)，元素分析計算值C，48.69；H，3.65；N，5.97。實測值C，48.83；H，3.39；N，5.97。
步驟F根據(jù)與下列制備實施例5步驟C基本相同的方法，使上述步驟E的目標化合物與1-N-叔丁氧基羰基哌啶基-4-乙酸反應產(chǎn)生下式的化合物
步驟G
根據(jù)與下列制備實施例5步驟D基本相同的方法，使得自上述步驟F的目標化合物去保護得到制備實施例4的目標化合物。
制備實施例5
根據(jù)與制備實施例3步驟D所述基本相同的方法，水解2.42g4-(8-氯代-3-溴代-5，6-二氫-11H-苯并[5，6]芳庚并[1，2-b]吡啶-11-亞基-1-哌啶-1-甲酸乙酯得到1.39g(69％)產(chǎn)物。
步驟B
將步驟A的產(chǎn)物(1g，2.48mmol)和25ml干燥甲苯混合，加入2.5ml的1M DIBAL甲苯溶液并回流加熱該混合物。0.5小時后，加入另一部分的2.5ml的1M DIBAL甲苯溶液并回流加熱1小時。(用以50％甲醇/二氯甲烷+氫氧化銨的水溶液作展開劑的TLC檢測該反應)。冷卻該反應物至室溫，加入50ml的1N鹽酸水溶液并攪拌5分鐘。加入100ml的1N氫氧化鈉水溶液，然后用乙酸乙酯萃取(3×150ml)。用硫酸鎂干燥萃取液，過濾并真空濃縮得到1.1g的目標化合物。
步驟C
將步驟B的目標化合物(0.501g，1.28mmol)和20ml無水DMF混合，然后加入1-N-叔-丁氧基羰基哌啶基-4-乙酸(0.405g，1.664mmol)、DEC(0.319g，1.664mmol)、HOBT(0.225g，1.664mmol)和4-甲基嗎啉(0.168g，1.664mmol)，將該混合物于室溫下攪拌過夜。真空濃縮該混合物為殘留物，然后在150ml二氯甲烷和150ml飽和碳酸氫鈉水溶液之間分配該殘留物。用另一部分的150ml二氯甲烷萃取該水相。用硫酸鎂干燥該有機相，并真空濃縮為殘留物。將該殘留物通過色譜(硅膠，500ml己烷，1L 1％甲醇/二氯甲烷+0.1％氫氧化銨水溶液，然后1L2％甲醇/二氯甲烷+0.1％氫氧化銨水溶液)得到0.575g的產(chǎn)物。m.p.＝115-125℃。質譜MH+＝616。
步驟D
將步驟C的產(chǎn)物(0.555g，0.9mmol)和15ml二氯甲烷混合，冷卻該混合物至0℃。加入15ml TFA并于0℃攪拌2小時。于40-45℃真空濃縮為殘留物，然后在150ml二氯甲烷和100ml飽和碳酸氫鈉水溶液之間分配該殘留物。用100ml二氯甲烷萃取該水層，合并該萃取液并用硫酸鎂干燥。真空濃縮得到0.47g產(chǎn)物。m.p.＝140-150℃。質譜MH+＝516。
制備實施例6 步驟A
將制備實施例4步驟D的產(chǎn)物(16.6g，0.03mol)和乙腈與水的3∶1的溶液(212.65ml乙腈和70.8ml水)混合，并于室溫下將所得淤漿攪拌過夜。加入NaIO4(32.833g，0.153mol)，然后加入RuO2(0.31g，2.30mol)，于室溫下攪拌得到1.39g(69％產(chǎn)率)產(chǎn)物。(RuO2的加入伴隨有放熱反應，溫度由20℃升至30℃。)將該混合物攪拌1.3小時(約30分鐘后溫度降至25℃)，然后過濾除去該固體并用二氯甲烷洗滌該固體。真空濃縮該濾液為殘留物，并將該殘留物用二氯甲烷溶解。過濾除去不溶的固體，并用二氯甲烷洗滌該固體。用水洗滌該濾液，濃縮至體積約200ml，用漂白劑洗滌，然后用水洗滌。用6N鹽酸水溶液萃取。冷卻該水相萃取液至0℃，緩慢加入50％的氫氧化鈉水溶液調至pH＝4，同時保持溫度＜30℃。用二氯甲烷萃取兩次，用硫酸鎂干燥并真空濃縮為殘留物。將該殘留物于20ml乙醇中制成淤漿并冷卻至0℃。通過過濾收集所得固體，并真空干燥該固體得到7.95g的產(chǎn)物。1H NMR(CDCl3，200MHz)8.7(s，1H)；7.85(m，6H)；7.5(d，2H)；3.45(m，2H)；3.15(m，2H)。
步驟B
將21.58g(53.75mmol)步驟A的產(chǎn)物與500ml無立乙醇和甲苯的1∶1的混合液混合，加入1.43g(37.8mmol)硼氫化鈉，于回流下將該混合物加熱10分鐘。將該混合物冷卻至0℃，加入10ml水，然后用1MHCl水溶液將pH調至約4-5，同時保持溫度低于10℃。加入250ml乙酸乙酯，分離各層。用鹽水(3×50ml)洗滌有機層，然后經(jīng)硫酸鈉干燥。真空濃縮為殘留物(24.01g)，殘留物經(jīng)層析(硅膠，30％已烷/二氯甲烷)得到產(chǎn)物。將不純的組分再次層析純化。共獲得產(chǎn)物18.57g。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.7(s，1H)；7.9(m，1H)；7.5(雙雙峰，2H)；6.2(m，1H)；6.1(m，1H)；3.5(m，1H)；3.4(m，1H)；3.2(m，2H)。
步驟C
將步驟B的產(chǎn)物(18.57g，46.02mmol)與500ml的氯仿混合，然后加入SOCl2(6.70ml，91.2mmol)，將該混合物于室溫下攪拌4小時。在5分鐘內加入35.6g(0.413mol)的哌嗪于800ml THF中的溶液，并于室溫下攪拌該混合物1小時。將該混合物加熱回流過夜，然后冷卻至室溫，用1L二氯甲烷稀釋該混合物。用水(5×200ml)洗滌，用三氯甲烷(3×100ml)提取含水洗液。合并所有的有機溶液，用鹽水(3×200ml)洗滌，用硫酸鎂干燥。真空濃縮為殘留物，經(jīng)色譜(硅膠，5％，7.5％，10％的甲醇/二氯甲烷+氫氧化銨梯度洗脫)得到18.49g為外消旋混合物的目標化合物。
步驟D-對映體的制備
通過制備手性色譜(手性填料AD，5cm×50cm柱，流速100ml/min.，20％iPrOH/己烷+0.2％二乙胺)分離外消旋目標化合物得到9.14g的(+)-異構體和9.30g的(-)-異構體。
(+)-異構體的物理化學數(shù)據(jù)m.p.＝74.5-77.5℃。質譜MH+＝471.9；[α]25D＝+97.4°(8.48mg/2ml甲醇)。
(-)-異構體的物理化學數(shù)據(jù)m.p.＝82.9-84.5℃。質譜MH+＝471.8；[α]25D＝-97.4°(8.32mg/2ml甲醇)。
步驟E
將步驟D的(-)-異構體產(chǎn)物(3.21g，6.80mmol)與150ml無水DMF混合。加入1-N-叔-丁氧基羰基哌啶基-4-乙酸(2.15g，8.8mmol)、DEC(1.69g，8.8mmol)、HOBT(1.19g，8.8mmol)和N-甲基嗎啉(0.97ml，8.8mmol)，于室溫下攪拌該混合物過夜。真空濃縮除去DMF并加入50ml飽和的碳酸氫鈉水溶液。用二氯甲烷萃取(2×250ml)，用50ml鹽水洗滌該萃取液并用硫酸鎂干燥。真空濃縮為殘留物，經(jīng)色譜(硅膠，2％甲醇/二氯甲烷+10％氫氧化銨)得到4.75g產(chǎn)物。m.p.＝75.7-78.5℃。質譜MH+＝697；[α]25D＝-5.5°(6.6mg/2ml甲醇)。
步驟F
將步驟E的產(chǎn)物(4.70g，6.74mmol)與30ml甲醇混合，然后1小時內每次10ml加入共50ml的10％硫酸/二氧六環(huán)溶液。將該混合物傾入50ml的水中，并加入15ml的50％氫氧化鈉水溶液調至pH約為10-11。過濾除去所得固體，用二氯甲烷(2×250ml)萃取該濾液。真空濃縮水層除去甲醇，再用250ml的二氯甲烷萃取。用硫酸鎂干燥合并的萃取液并真空濃縮得到產(chǎn)物。m.p.＝128.1-131.5℃。質譜MH+＝597；[α]25D＝-6.02°(9.3mg/2ml甲醇)。
制備實施例7
步驟A
于5℃，將4-(8-氯代-3-溴代-5，6-二氫-11H-苯并[5，6]芳庚并[1，2-b]吡啶-11-亞基)-1-哌啶-1-甲酸乙酯(15g，38.5mmol)與150ml濃硫酸混合，然后加入3.89g(38.5mmol)硝酸鉀，攪拌4小時。將該混合物傾至3L冰中，用50％氫氧化鈉水溶液堿化。用二氯甲烷萃取，經(jīng)硫酸鎂干燥，然后過濾，真空濃縮為殘留物。從丙酮中重結晶得到6.69g產(chǎn)物。1H NMR(CDCl3，200 MHz)8.5(s，1H)；7.75(s，1H)；7.6(s，1H)；7.35(s，1H)；4.15(q，2H)；3.8(m，2H)；3.5-3.1(m，4H)；3.0-2.8(m，2H)；2.6-2.2(m，4H)；1.25(t，3H)。
步驟B
將步驟A的產(chǎn)物(6.69g，13.1mmol)與100ml 85％乙醇/水混合，然后加入0.66g(5.9mmol)氯化鈣和6.56g(117.9mmol)鐵，然后于回流下將該混合物加熱過夜。通過celite過濾熱的反應混合物，用熱乙醇洗滌濾餅。真空濃縮濾液得到7.72g產(chǎn)物。質譜MH+＝478.0。
步驟C
將7.70g步驟B的產(chǎn)物與35ml乙酸混合，然后加入45ml溴的乙酸溶液，于室溫下將該混合物攪拌過夜。加入300ml 1N氫氧化鈉水溶液，然后加入75ml 50％氫氧化鈉水溶液，用乙酸乙酯萃取。經(jīng)硫酸鎂干燥萃取物，真空濃縮為殘留物。將殘留物層析(硅膠，20％-30％乙酸乙酯/己烷)得到3.47g產(chǎn)物(以及另外的1.28g部分純化的產(chǎn)物)。質譜MH+＝555.9。
1H NMR(CDCl3，300 MHz)8.5(s，1H)；7.5(s，1H)；7.15(s，1H)，4.5(s，2H)；4.15(m，3H)；3.8(br s，2H)；3.4-3.1(m，4H)；9-2.75(m，1H)；2.7-2.5(m，2H)；2.4-2.2(m，2H)；1.25(m，3H)。
步驟D
將亞硝酸叔丁酯(0.557g，5.4mmol)與3ml DMF合并，將該混合物加熱至60-70℃。緩慢加入(滴加)2.00g(3.6mmol)步驟C的產(chǎn)物與4ml DMF的混合物，然后將該混合物冷卻至室溫。于40℃再加入另外的0.64ml亞硝酸叔丁酯，將該混合物再加熱至60-70℃ 0.5小時。冷卻至室溫，將該混合物傾至150ml水中。用二氯甲烷萃取，經(jīng)硫酸鎂干燥并真空濃縮為殘留物。層析(硅膠，10％-20％乙酸乙酯/己烷)得到0.74g產(chǎn)物。質譜MH+＝541.0。
1H NMR(CDCl3，200 MHz)8.52(s，1H)；7.5(d，2H)；7.2(s，1H)，4.15(q，2H)；3.9-3.7(m，2H)；3.5-3.1(m，4H)；3.0-2.5(m，2H)；2.4-2.2(m，2H)；2.1-1.9(m，2H)；1.26(t，3H)。
步驟E
將步驟D的產(chǎn)物(0.70g，1.4mmol)與8ml濃鹽酸水溶液混合，于回流下將該混合物加熱過夜。加入30ml 1N氫氧化鈉水溶液，然后加入5ml 50％氫氧化鈉水溶液，用二氯甲烷萃取。用硫酸鎂干燥萃取物，真空濃縮得到0.59g目標化合物。質譜M+＝468.7。m.p.＝123.9-124.2℃。
步驟F
根據(jù)制備實施例5步驟C所述方法，使步驟E的目標化合物(6.0g，12.8mmol)與3.78g(16.6mmol)1-N-叔丁氧基羰基哌啶基-4-乙酸反應，得到8.52g產(chǎn)物。質譜MH+＝694.0(FAB)。1H NMR(CDCl3，200MHz)8.5(d，1H)；7.5(d，2H)；7.2(d，1H)，4.15-3.9(m，3H)；3.8-3.6(m，1H)；3.5-3.15(m，3H)；2.9(d，2H)；2.8-2.5(m，4H)；2.4-1.8(m，6H)；1.8-1.6(br d，2H)；1.4(s，9H)；1.25-1.0(m，2H)。
步驟G
將8.50g步驟F的產(chǎn)物與60ml二氯甲烷混合，然后冷卻至0℃，加入55ml TFA。于0℃將該混合物攪拌3小時，然后加入500ml 1N氫氧化鈉水溶液，接著加入30ml 50％氫氧化鈉水溶液。用二氯甲烷萃取，經(jīng)硫酸鎂干燥，真空濃縮，得到7.86g產(chǎn)物。質譜M+＝593.9(FAB)。1H NMR(CDCl3，200 MHz)8.51(d，1H)；7.52(雙雙峰，2H)；7.20(d，1H)，4.1-3.95(m，2H)；3.8-3.65(m，2H)；3.5-3.05(m，5H)；3.0-2.5(m，6H)；2.45-1.6(m，6H)；1.4-1.1(m，2H)。
制備實施例8 步驟A
制備得自制備實施例7步驟E的目標化合物(8.1g)的甲苯溶液，加入17.3ml 1M DIBAL的甲苯溶液。于回流下加熱該混合物，用40分鐘緩慢加入(滴加)21ml 1M DIBAL/甲苯溶液。將該反應混合物冷卻至約0℃，加入700ml 1M鹽酸水溶液。分離并棄去有機相。用二氯甲烷洗滌水相，棄去萃取物，然后加入50％氫氧化鈉水溶液堿化水相。用二氯甲烷萃取，經(jīng)硫酸鎂干燥萃取物，真空濃縮得到7.30g目標化合物，為對映體的外消旋混合物。
步驟B-對映體的分離
用制備性手性層析(Chiralpack AD，5cm×50cm柱，用20％異丙醇/己烷+0.2％二乙胺洗脫)分離步驟A的外消旋的目標化合物，得到目標化合物的(+)-異構體和(-)-異構體。
(+)-異構體的理化數(shù)據(jù)m.p.＝148.8℃；質譜MH+＝469；[α]D25＝+65.6°(12.93mg/2ml甲醇)(-)-異構體的理化數(shù)據(jù)m.p.＝112℃；質譜MH+＝469；[α]D25＝-65.2°(3.65mg/2ml甲醇)步驟C
(+)-異構體根據(jù)與制備實施例5步驟C所述基本相同的方法，使制備實施例8步驟B目標化合物的(+)-異構體(1.33g)與1.37g 1-N-叔丁氧基羰基哌啶基-4-乙酸反應，得到2.78g產(chǎn)物。質譜MH+＝694.0(FAB)；[α]D25＝+34.1°(5.45mg/2ml甲醇)。
步驟D
通過與制備實施例5步驟D所述基本相同的方法，處理2.78g步驟C的產(chǎn)物，得到1.72g產(chǎn)物。m.p.＝104.1℃。質譜MH+＝594；[α]D25＝+53.4°(11.42mg/2ml甲醇)。
制備實施例9 步驟A
將原料酮(40.0g，0.124mol)與200ml硫酸混合，冷卻至0℃。用1.5小時緩慢加入13.78g(0.136mol)硝酸鉀，然后加熱至室溫并攪拌過夜。用與制備實施例4步驟A所述基本相同的方法處理反應物。層析(硅膠，用20％、30％、40％、50％乙酸乙酯/己烷，然后用100％乙酸乙酯洗脫)得到28g 9-硝基產(chǎn)物以及少量的7-硝基產(chǎn)物和19g 7-硝基化合物與9-硝基化合物的混合物。
步驟B
根據(jù)與制備實施例4步驟C基本相同的方法，使步驟A的9-硝基產(chǎn)物(28g，76.2mmol)、400ml 85％乙醇/水、3.8g(34.3mmol)氯化鈣和38.28g(0.685mol)鐵反應，得到24g產(chǎn)物。
步驟C
將步驟B的產(chǎn)物(13g，38.5mmol)與140ml乙酸混合，用20分鐘緩慢加入2.95ml(57.8mmol)溴的10ml乙酸溶液。于室溫下攪拌該反應混合物，然后真空濃縮為殘留物。加入二氯甲烷和水，然后用50％氫氧化鈉水溶液將pH調至8-9。順序用水和鹽水洗滌有機相，經(jīng)硫酸鈉干燥。真空濃縮得到11.3g產(chǎn)物。
步驟D
將100ml濃鹽酸水溶液冷卻至0℃，然后加入5.61g(81.4mmol)亞硝酸鈉，攪拌10分鐘。緩慢加入(逐份)11.3g(27.1mmol)步驟C的產(chǎn)物，于0-3℃將該混合物攪拌2.25小時。緩慢加入(滴加)180ml 50％次磷酸水溶液，于0℃放置過夜。用30分鐘緩慢加入(滴加)150ml 50％氫氧化鈉將pH調至9，然后用二氯甲烷萃取。順序用水和鹽水洗滌萃取物，用硫酸鈉干燥。真空濃縮為殘留物，層析(硅膠，2％乙酸乙酯/二氯甲烷)得到8.6g產(chǎn)物。
步驟E
將步驟D的產(chǎn)物(8.6g，21.4mmol)與300ml甲醇混合，冷卻至0-2℃。加入1.21g(32.1mmol)硼氫化鈉，于約0℃攪拌該混合物1小時。再加入0.121g(3.21mmol)硼氫化鈉并于0℃再攪拌2小時，然后于0℃放置過夜。真空濃縮為殘留物，使其分配于二氯甲烷和水之間。分離有機相，真空(50℃)濃縮得到8.2g產(chǎn)物。
步驟F
將步驟E的產(chǎn)物(8.2g，20.3mmol)與160ml二氯甲烷混合，冷卻至0℃，然后用30分鐘緩慢加入(滴加)14.8ml(203mmol)二氯亞砜。將該混合物溫熱至室溫，攪拌4.5小時，然后真空濃縮為殘留物，加入二氯甲烷，順序用1N氫氧化鈉水溶液和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥。真空濃縮為殘留物，然后加入無水THF和8.7g(101mmol)哌嗪，于室溫下攪拌過夜。真空濃縮為殘留物，加入二氯甲烷，順序用0.25N氫氧化鈉水溶液、水和鹽水洗滌。經(jīng)硫酸鈉干燥并真空濃縮，得到9.46g粗品產(chǎn)物。層析(硅膠，5％甲醇/二氯甲烷+氨)得到3.59g目標化合物，為外消旋物。1H NMR(CDCl3，200 MHz)8.43(d，1H)；7.55(d，1H)；7.45(d，1H)；7.11(d，1H)；5.31(s，1H)；4.86-4.65(m，1H)；3.57-3.40(m，1H)；2.98-2.55(m，6H)；2.45-2.20(m，5H)。
步驟G-對映體的分離
根據(jù)制備實施例6步驟D所述方法，層析分離步驟F的外消旋的目標化合物(5.7g)，用30％異丙醇/己烷+0.2％二乙胺洗脫，得到2.88g目標化合物的R-(+)-異構體和2.77g目標化合物的S-(-)-異構體。
R-(+)-異構體的理化數(shù)據(jù)質譜MH+＝470.0；[α]D25＝+12.1°(10.9mg/2ml甲醇)S-(-)-異構體的理化數(shù)據(jù)質譜MH+＝470.0；[α]D25＝-13.2°(11.51mg/2ml甲醇)步驟H根據(jù)與制備實施例5步驟C和D所述基本相同的方法，由步驟F的外消旋化合物獲得制備實施例9的外消旋目標化合物。同樣，分別由步驟G的(-)-和(+)-異構體獲得制備實施例9的目標化合物的(-)-和(+)-異構體。
制備實施例10 步驟A
于20℃，將制備實施例4步驟E的目標化合物(13g，33.3mmol)與300ml甲苯合并，然后加入32.5ml(32.5mmol)1M DIBAL的甲苯溶液。于回流下將該混合物加熱1小時，冷卻至20℃，再加入32.5ml 1MDIBAL溶液，于回流下加熱1小時。將該混合物冷卻至20℃，將其傾至400g冰、500ml乙酸乙酯和300ml 10％氫氧化鈉水溶液的混合物中。用二氯甲烷(3×200ml)萃取水層，用硫酸鎂干燥有機相，然后真空濃縮為殘留物。層析(硅膠，12％甲醇/二氯甲烷+4％氫氧化銨)得到10.4g目標化合物，為外消旋物。質譜MH+＝469(FAB)。部分1H NMR(CDCl3，400MHz)8.38(s，1H)；7.57(s，1H)；7.27(d，1H)；7.06(d，1H)；3.95(d，1H)。
步驟B-對映體的分離
用制備手性層析(Chiralpack AD，5cm×50cm柱，用5％異丙醇/己烷+0.2％二乙胺洗脫)層析分離步驟A的外消旋的目標化合物，得到目標化合物的(+)-異構體和(-)-異構體。
(+)-異構體的理化數(shù)據(jù)質譜MH+＝469(FAB)；[α]D25＝+43.5°(c＝0.402，EtOH)；部分1H NMR(CDCl3，400MHz)8.38(s，1H)；7.57(s，1H)；7.27(d，1H)；7.05(d，1H)；3.95(d，1H)。
(-)-異構體的理化數(shù)據(jù)質譜MH+＝469(FAB)；[α]D25＝-41.8°(c＝0.328，EtOH)；部分1H NMR(CDCl3，400MHz)8.38(s，1H)；7.57(s，1H)；7.27(d，1H)；7.05(d，1H)；3.95(d，1H)。
步驟C根據(jù)制備實施例9步驟H的方法，可以獲得制備實施例10的目標化合物的外消旋化合物，即(+)-和(-)-異構體。
制備實施例11 根據(jù)WO 95/10516(1995年4月20公開)的制備實施例40的方法、然后進行WO 95/10516實施例193所述方法可以制備下式的化合物
根據(jù)與制備實施例6步驟D基本相同的方法，可以分離(+)-和(-)-異構體。
R-(+)-異構體的理化數(shù)據(jù)13C NMR(CDCl3)155.8(C)；146.4(CH)；140.5(CH)；140.2(C)；136.2(C)；135.3(C)；133.4(C)；132.0(CH)；129.9(CH)；125.6(CH)；119.3(C)；79.1(CH)；52.3(CH2)；52.3(CH)；45.6(CH2)；45.6(CH2)；30.0(CH2)；29.8(CH2)；[α]D25＝+25.8°(8.46mg/2ml MeOH)。
(-)-異構體的理化數(shù)據(jù)13C NMR(CDCl3)155.9(C)；146.4(CH)；140.5(CH)；140.2(C)；136.2(C)；135.3(C)；133.3(C)；132.0(CH)；129.9(CH)；125.5(CH)；119.2(C)；79.1(CH)；52.5(CH2)；52.5(CH)；45.7(CH2)；45.7(CH2)；30.0(CH2)；29.8(CH2)；[α]D25＝-27.9°(8.90mg/2ml MeOH)。
根據(jù)與制備實施例5步驟C和D基本相同的方法，用相應的外消旋化合物，即下式化合物的(+)-異構體或(-)-異構體可以分離獲得制備實施例11的目標化合物的外消旋化合物的(+)-異構體或(-)-異構體。
制備實施例12
根據(jù)Collect.Czech.Chem.Comm.(1990)55，2086所述方法。將(氨基氧基)乙酸半鹽酸鹽(0.2g，0.915mmol)和丙酮(0.2g，3mmol)溶于2ml吡啶中，并放置18小時。真空濃縮，使殘留物分配于乙酸乙酯和1N HCl之間。用硫酸鎂干燥有機層，真空濃縮得到白色固體mp＝77.3-78℃。
制備實施例13
根據(jù)制備實施例12的方法，但是用2-氨基氧基丙酸半鹽酸鹽代替(氨基氧基)乙酸，得到為無色油狀的產(chǎn)物。
制備實施例14
根據(jù)制備實施例12的方法，但是用4-吡啶甲醛N-氧化物代替丙酮，得到產(chǎn)物，使其從水中重結晶得到白色固體。mp＝227-228℃。
制備實施例15
根據(jù)制備實施例12的方法，但是用2-羥基苯甲醛代替丙酮，得到為白色固體的產(chǎn)物，mp＝152-153.5℃。
實施例1
將式28.0化合物(制備實施例8，0.149g，0.25mmol)
與1-羥基苯并三唑水合物(0.067g，0.5mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.096g，0.5mmol)、N-BOC-甘氨酸(0.087g，0.5mmol)和無水二甲基甲酰胺(5ml)混合，于室溫、氮氣下將產(chǎn)生的混合物攪拌過夜。真空濃縮得到油狀物，將其用二氯甲烷稀釋，用1M鹽酸和1M氫氧化鈉水溶液洗滌，然后用無水硫酸鎂干燥。過濾并真空濃縮，得到式2.0化合物(+-異構體，0.16g，85％，mp 116-123℃)。
實施例2
向溶于無水二氯甲烷(10ml)中的式2.0化合物(實施例1，0.145g)中加入三氟乙酸(2ml)，于室溫下將產(chǎn)生的溶液攪拌1小時。緩慢加入50％氫氧化鈉水溶液，接著加入二氯甲烷和鹽水。將該混合物充分振搖，分離有機相，用無水硫酸鎂干燥。過濾并真空濃縮，得到式16.0(+-異構體，0.086g，68％，mp 131-138℃)。
實施例3
將式28.0化合物(制備實施例8，0.10g，0.17mmol)與1-羥基苯并三唑水合物(0.045g，0.34mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.064g，0.34mmol)、N-叔丁氧基羰基-L-丙氨酸(0.064g，0.34mmol)和無水二甲基甲酰胺(10ml)合并，于室溫、氮氣下將產(chǎn)生的混合物攪拌過夜。真空濃縮得到油狀物，將其用二氯甲烷稀釋，用1M鹽酸和1M氫氧化鈉水溶液洗滌，然后用無水硫酸鎂干燥。過濾并真空濃縮，得到式3.0化合物(+-異構體，0.095g，74％，mp 135-142℃)。
實施例4
向溶于無水二氯甲烷(10ml)中的式3.0化合物(實施例3，0.09g)中加入三氟乙酸(1ml)，于室溫下將產(chǎn)生的溶液攪拌1小時。緩慢加入50％氫氧化鈉水溶液，接著加入二氯甲烷和鹽水。將該混合物充分振搖，分離有機相，用無水硫酸鎂干燥。過濾并真空濃縮，得到式17.0(+-異構體，0.053g，68％，mp 122.7-128℃)。
實施例5
將式28.0化合物(制備實施例8，0.10g，0.17mmol)與1-羥基苯并三唑水合物(0.045g，0.34mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.064g，0.34mmol)、N-叔丁氧基羰基-D-丙氨酸(0.064g，0.34mmol)和無水二甲基甲酰胺(10ml)合并，于室溫、氮氣下將產(chǎn)生的混合物攪拌過夜。真空濃縮得到油狀物，將其用二氯甲烷稀釋，用1M鹽酸和1M氫氧化鈉水溶液洗滌，然后用無水硫酸鎂干燥。過濾并真空濃縮，得到式4.0化合物(+-異構體，0.104g，81％，mp 135.1-142.3℃)。
實施例6
向溶于無水二氯甲烷(10ml)中的式4.0化合物(實施例5，0.10g)中加入三氟乙酸(1ml)，于室溫下將產(chǎn)生的溶液攪拌1小時。緩慢加入50％氫氧化鈉水溶液，接著加入二氯甲烷和鹽水。將該混合物充分振搖，分離有機相，用無水硫酸鎂干燥。過濾并真空濃縮，得到式18.0(+-異構體，0.056g，64％，mp 103℃(DEC))。
實施例7
根據(jù)類似于實施例1、3和5的方法，通過使式28.0化合物(制備實施例8)與氨基酸N-叔丁氧基羰基-L-苯丙氨酸反應制備式5.0化合物(+-異構體)。產(chǎn)率76％，mp128.6-134℃。
實施例8
根據(jù)類似于實施例1、3和5的方法，通過使式28.0化合物(制備實施例8)與氨基酸N-(α)-叔丁氧基羰基-L-組氨酸反應制備式6.0化合物(+-異構體)。產(chǎn)率32％，mp96.0-99.7℃。
實施例9
根據(jù)類似于實施例1、3和5的方法，通過使式28.0化合物(制備實施例8)與氨基酸N-(α)-叔丁氧基羰基-L-脯氨酸反應制備式7.0化合物(+-異構體)。產(chǎn)率52％，mp110℃。
實施例10
根據(jù)類似于實施例2、4和6的方法，由式5.0化合物(實施例7)制備式8.0化合物(+-異構體)。產(chǎn)率70％，mp116-119℃。
實施例11
根據(jù)類似于實施例2、4和6的方法，由式6.0化合物(實施例8)制備式9.0化合物(+-異構體)。產(chǎn)率51％，mp101℃。
實施例12
根據(jù)類似于實施例2、4和6的方法，由式7.0化合物(實施例9)制備式10.0化合物(+-異構體)。產(chǎn)率46％，mp131.6℃。
實施例13
于0℃，向溶于無水二氯甲烷(50ml)的式28.0化合物(制備實施例8，0.51g，0.85mmol)和三乙胺(0.18ml，1.3mmol)中加入溶于二氯甲烷(10ml)中的ClCH2C(O)Cl(氯代乙酰氯)(0.28ml，1.2eq)。攪拌1.5小時，加入1M鹽酸，振搖混合物。分離有機相，用1N氫氧化鈉水溶液洗滌，然后用鹽水洗滌，用無水硫酸鎂干燥。過濾并真空濃縮得到式31.0化合物(0.58g，100％，mp 124.0-134.5℃)。
步驟B
于130℃將式31.0化合物(0.12g，0.18mmol)、嗎啉(5ml)和無水碳酸鈉(0.038g，2eq)攪拌過夜。真空濃縮后，用二氯甲烷稀釋殘留物，用水洗滌，經(jīng)無水硫酸鎂干燥。過濾并真空濃縮得到黃色殘留物(0.17g)，將其經(jīng)制備性板層析(硅膠)純化，用5％甲醇-二氯甲烷和濃氫氧化銨展開，得到式13.0化合物(0.096g，75％，mp 116.6℃)。
實施例14
于130℃，將式31.0化合物(實施例13，0.12g，0.18mmol)、無水二甲基甲酰胺(10ml)、咪唑(0.037g，0.54mmol)和無水碳酸鈉(0.057g，0.54mmol)攪拌過夜。將該混合物冷卻至室溫，用水稀釋，過濾，用水洗滌固體。用二氯甲烷稀釋固體，用水洗滌，然后用1N氫氧化鈉水溶液洗滌。分離有機相，用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮得到固體(0.084g)，經(jīng)制備性板層析(硅膠)，用5％甲醇-二氯甲烷和濃氫氧化銨洗脫，得到式14.0化合物(0.06g，48％，mp 148.9℃)。
實施例15
于0℃，向溶于無水二氯甲烷(10ml)中的式28.0化合物(制備實施例8，0.21g，0.34mmol)中加入草酰氯(1.0ml)和吡啶(0.08ml，3eq)的二氯甲烷(10ml)溶液。將產(chǎn)生的溶液攪拌5分鐘，加入濃氫氧化銨，將混合物攪拌過夜。用二氯甲烷和水稀釋該混合物，振搖，然后分離各相。用鹽水洗滌有機相，然后用1M鹽酸、1N氫氧化鈉水溶液和鹽水洗滌。分離有機相，用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮，得到固體(0.17g)，經(jīng)制備性板層析(硅膠)，用5％甲醇-二氯甲烷和濃氫氧化銨洗脫，得到式15.0化合物(0.086g，37％，mp 152.8℃)。
實施例16
向溶于無水二氯甲烷(10ml)中的式16.0化合物(實施例2，0.10g，)中加入三乙胺(0.032ml，1.5eg)和甲磺酰氯(0.014ml，1.2eq)，于室溫下攪拌生成的溶液過夜。用二氯甲烷稀釋該溶液，用1M鹽酸洗滌，然后用1N氫氧化鈉水溶液洗滌。分離有機相，經(jīng)無水硫酸鎂干燥。過濾并真空濃縮得到式11.0化合物(0.099g，89％，mp 116℃)。
實施例17
向溶于無水二氯甲烷(10ml)中的式16.0化合物(實施例2，0.07g，)中加入三乙胺(0.022ml，1.5eg)和苯甲酰氯(0.014ml，1.2eq)，于室溫下攪拌生成的溶液過夜。用二氯甲烷稀釋該溶液，用1M鹽酸洗滌，然后用1N氫氧化鈉水溶液洗滌。分離有機相，經(jīng)無水硫酸鎂干燥。過濾并真空濃縮得到式12.0化合物(0.066g，85％，mp 117.2℃)。
實施例18
將2g(15mmol)3-(二甲基氨基)丙酸甲酯溶于20ml乙醇中，然后加入20ml 1M氫氧化鋰。于室溫下，將該反應混合物攪拌16小時。蒸發(fā)溶劑。將產(chǎn)生的物質溶于水中，將pH調至約6。濃縮反應混合物得到產(chǎn)物。質譜MH+＝118。
實施例19(+)-4-(3，10-二溴代-8-氯代-6，11-二氫-5H-苯并[5，6]芳庚并[1，2-b]吡啶-11-基]-1-[4-(二甲基氨基)-1-氧代丁基]-4-哌啶基]乙?；鵠-哌啶
于約0-約4℃，將制備實施例8的產(chǎn)物(0.1g，0.23mmol)
溶于8ml DMF中，加入0.04g(0.22mmol)4-(二甲基氨基)丁酸鹽酸鹽、0.04g(0.22mmol)DEC、0.03g(0.22mmol)HOBT和0.1ml N-甲基嗎啉。將該反應混合物攪拌過夜，使其溫熱至室溫。去除揮發(fā)物，然后使其分配于水和二氯甲烷之間。用二氯甲烷萃取水相。合并二氯甲烷組分，經(jīng)硫酸鎂干燥，然后濃縮。經(jīng)快速層析純化，首先用5％甲醇-氨-二氯甲烷洗脫，然后用10％甲醇-氨-二氯甲烷洗脫得到式12.2化合物。質譜MH+＝709，mp＝69-71℃。
實施例20(+)-4-(3，10二溴代-8-氯代-6，1 1-二氫-5H-苯并[5，6]芳庚并[1，2-b]吡啶-11-基]-1-[4-(二甲基氨基)-1-氧代丙基]-4-哌啶基]乙?；鵠-哌啶
根據(jù)與上述實施例19所述基本相同的方法，但是用3-(二甲基氨基)丙酸(實施例18)代替4-(二甲基氨基)丁酸鹽酸鹽，制備式12.3化合物。FAB-MS-MH+＝695，mp＝82-84℃。
實施例21(+)-4-(3，10-二溴代-8-氯代-6，11-二氫-5H-苯并[5，6]芳庚并[1，2-b]吡啶-11-基]-1-[4-(二甲基氨基)-1-氧代乙基]-4-哌啶基]乙酰基]-哌啶
根據(jù)與上述實施例19所述基本相同的方法，但是用N，N-二甲基甘氨酸代替4-(二甲基氨基)丁酸鹽酸鹽，制備式12.1化合物。FAB-MS-MH+＝681，mp＝123-124℃。
實施例22(+)-4-(3，10-二溴代-8-氯代-6，11-二氫-5H-苯并[5，6]芳庚并[1，2-b]吡啶-11-基]-1-[4-(哌啶基)-1-氧代乙基]-4-哌啶基]乙酰基]-哌啶
根據(jù)與上述實施例19所述基本相同的方法，但是用1-哌啶丙酸代替4-(二甲基氨基)丁酸鹽酸鹽，制備式14.2化合物。FAB-MSMH+＝735，mp＝127-128℃。
實施例23(+)-4-(3，10-二溴代-8-氯代-6，11-二氫-5H-苯并[5，6]芳庚并[1，2-b]吡啶-11-基]-1-[4-(四氫-2H-1，4-噻嗪-4-基)-1-氧代乙基]-1-二氧化物]-4-哌啶基]乙酰基]-哌啶
根據(jù)與上述實施例19所述基本相同的方法，但是用硫代嗎啉S-二氧化物乙酸代替4-(二甲基氨基)丁酸鹽酸鹽，制備式14.1化合物。mp＝140-141℃。
實施例24(+)-4-[2-[4-(3，10-二溴代-8-氯代-6，11-二氫-5H-苯并[5，6]芳庚并[1，2-b]吡啶-11-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙基]-δ-氧代-1-哌啶-戊酸甲酯
根據(jù)與上述實施例19所述基本相同的方法，但是用戊二酸一甲酯代替4-(二甲基氨基)丁酸鹽酸鹽，制備式15.1化合物。FAB-MS-MH+＝724，mp＝101-102℃。
實施例25(+)-4-[2-[4-[(3，10-二溴代-8-氯代-6，11-二氫-5H-苯并[5，6]芳庚并[1，2-b]吡啶-11-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙基]-γ-氧代-1-哌啶-丁酸甲酯
根據(jù)與上述實施例19所述基本相同的方法，但是用丁二酸一甲酯代替4-(二甲基氨基)丁酸鹽酸鹽，制備式15.2化合物。FAB-MS-MH+＝710，mp＝114-115℃。
實施例26(+)-4-[2-[4-[(3，10-二溴代-8-氯代-6，11-二氫-5H-苯并[5，6]芳庚并[1，2-b]吡啶-11-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙基]-β-氧代-1-哌啶-丁酸乙酯
根據(jù)與上述實施例19所述基本相同的方法，但是用丙二酸一甲酯代替4-(二甲基氨基)丁酸鹽酸鹽，制備式15.3化合物。FAB-MS-MH+＝710，mp＝77-78℃。
實施例27
將制備實施例8步驟D的(+)產(chǎn)物(0.01g，0.017mmol)溶于0.5mlDMF中，于室溫下攪拌，加入0.003g(0.017mmol)DEC、0.002g(0.017mmol)HOBT和0.003g(0.017mmol)制備實施例12的產(chǎn)物。于室溫下，將該混合物攪拌18小時，然后真空濃縮為殘留物，使其分配于乙酸乙酯和水之間。用碳酸氫鈉水溶液和鹽水依次洗滌有機相。經(jīng)硫酸鎂干燥有機相，過濾并真空濃縮為殘留物。殘留物經(jīng)硅膠層析，用二氯甲烷(用氨飽和)-甲醇(95％-5％)洗脫，得到為白色固體的產(chǎn)物(0.01g)。M.p.＝84℃-90℃，質譜MH+＝709。
實施例26-60根據(jù)實施例27的方法，但是用下表1所列酸代替制備實施例12的產(chǎn)物，得到式1.7化合物
其中W與表1定義相同。在W取代基下的括號中給出形成的化合物的式號。
表1
表1-續(xù)
表1-續(xù)
表1-續(xù)
表1-續(xù)
實施例62
將制備實施例8步驟D的(+)產(chǎn)物(0.744g，1.25mmol)溶于20ml含有三乙胺(0.348ml，2.5mmol)的二氯甲烷中，于室溫下攪拌，加入0.1ml(1.26mmol)氯代乙酰氯。攪拌10小時，然后加入20ml 1N鹽酸。用碳酸氫鈉水溶液洗滌有機層，經(jīng)硫酸鎂干燥，真空濃縮得到0.71g產(chǎn)物。
步驟B
將步驟A的產(chǎn)物(0.120g，0.78mmol)、0.0365g(0.535mmol)4-甲基咪唑和0.057g(0.535mmol)碳酸鈉溶于10ml DMF中，于120-130℃攪拌18小時。冷卻至25℃，加入30ml水，過濾沉淀的固體。將固體溶于50ml二氯甲烷中，用1N氫氧化鈉洗滌。經(jīng)硫酸鎂干燥有機層，真空濃縮。將殘留物經(jīng)硅膠TLC板層析，用甲醇-二氯甲烷(用氨飽和)(5-95)，得到為白色固體的產(chǎn)物0.06g，mp＝148.9℃。
實施例63-75根據(jù)實施例62的方法，但是用下表2所列胺代替4-甲基咪唑，得到式1.7化合物
其中W與表2定義相同。在W取代基下的括號中給出形成的化合物的式號。
表2
表2-續(xù)
表2續(xù)
實施例76
將1當量的實施例59產(chǎn)物(化合物104.0-B，表1)溶于含有1.2當量的1N氫氧化鈉的甲醇溶液的甲醇中，于25℃攪拌48小時。用1N鹽酸酸化至pH為2，用二氯甲烷萃取。經(jīng)硫酸鎂干燥有機層，真空濃縮。經(jīng)制備性硅膠TLC純化殘留物，用甲醇-二氯甲烷-乙酸(5-94-1)展開，得到為白色固體的產(chǎn)物，mp＝240.1℃。
實施例77
將1當量的實施例30的產(chǎn)物(化合物8.0-B，表1)溶于95％的含有1.1當量氫氧化鋰的乙醇水溶液中，于25℃攪拌16小時。真空濃縮得到為白色固體的產(chǎn)物。
實施例78
根據(jù)實施例77的方法，但是用實施例60的產(chǎn)物(化合物105.0-B，表1)代替實施例59的產(chǎn)物(化合物104.0-B，表1)，得到為白色固體的產(chǎn)物。
實施例79
根據(jù)實施例77的方法，但是用實施例61的產(chǎn)物(化合物106.0-B，表1)代替實施例59的產(chǎn)物(化合物104.0-B，表1)，得到為白色固體的產(chǎn)物。
實施例80
將1當量的實施例43的產(chǎn)物(化合物68.0-B，表1)溶于95％的含有1.1當量氫氧化鈉的甲醇水溶液中，于25℃攪拌16小時。真空濃縮得到為白色固體的產(chǎn)物。mp＝215.5-216.2℃
實施例81
將1當量的實施例58的產(chǎn)物(化合物101.0-B，表1)溶于95％的含有1.1當量氫氧化鈉的甲醇水溶液中，于25℃攪拌16小時。真空濃縮得到為白色固體的產(chǎn)物。mp＝240℃(d)。
實施例82
將1.0當量的實施例81的產(chǎn)物(化合物107.0-B)溶于含有5.0當量氯化銨和DEC、HOBT以及N-甲基嗎啉各1.0當量的DMF中。于室溫下，將該混合物攪拌18小時，然后真空濃縮為殘留物，使其分配于乙酸乙酯和水之間。用碳酸氫鈉水溶液和鹽水依次洗滌有機相。用硫酸鎂干燥有機相，過濾并真空濃縮為殘留物。將殘留物經(jīng)硅膠層析，得到為白色固體的產(chǎn)物。mp＝125.5-126.5℃。
實施例83
將1.0當量的實施例78的產(chǎn)物(化合物18.0-B)溶于含有5.0當量氯化銨和DEC、HOBT以及N-甲基嗎啉各1.0當量的DMF中。于室溫下，將該混合物攪拌18小時，然后真空濃縮為殘留物，使其分配于乙酸乙酯和水之間。用碳酸氫鈉水溶液和鹽水依次洗滌有機相。用硫酸鎂干燥有機相，過濾并真空濃縮為殘留物。將殘留物經(jīng)硅膠層析，得到為白色固體的產(chǎn)物。mp＝142.8-143.3℃。
實施例84
將1.0當量的實施例80的產(chǎn)物(化合物70.0-B)溶于含有5.0當量氯化銨和DEC、HOBT以及N-甲基嗎啉各1.0當量的DMF中。于室溫下，將該混合物攪拌18小時，然后真空濃縮為殘留物，使其分配于乙酸乙酯和水之間。用碳酸氫鈉水溶液和鹽水依次洗滌有機相。用硫酸鎂干燥有機相，過濾并真空濃縮為殘留物。將殘留物經(jīng)硅膠層析，得到為白色固體的產(chǎn)物。mp＝119.2-120℃。
實施例85
將1.0當量的實施例81的產(chǎn)物(化合物107.0-B)溶于含有5.0當量氯化銨和DEC、HOBT以及N-甲基嗎啉各1.0當量的DMF中。于室溫下，將該混合物攪拌18小時，然后真空濃縮為殘留物，使其分配于乙酸乙酯和水之間。用碳酸氫鈉水溶液和鹽水依次洗滌有機相。用硫酸鎂干燥有機相，過濾并真空濃縮為殘留物。將殘留物經(jīng)硅膠層析，得到為白色固體的產(chǎn)物。
實施例86
將1.0當量的實施例79的產(chǎn)物(化合物19.0-B)溶于含有5.0當量氯化銨和DEC、HOBT以及N-甲基嗎啉各1.0當量的DMF中。于室溫下，將該混合物攪拌18小時，然后真空濃縮為殘留物，使其分配于乙酸乙酯和水之間。用碳酸氫鈉水溶液和鹽水依次洗滌有機相。用硫酸鎂干燥有機相，過濾并真空濃縮為殘留物。將殘留物經(jīng)硅膠層析，得到為白色固體的產(chǎn)物。
實施例87
將1.0當量的實施例59的產(chǎn)物(化合物104.0-B，表1)溶于含有4.0當量無水肼的二氯甲烷中，攪拌48小時，然后真空濃縮，將殘留物經(jīng)制備性硅膠TLC層析，用甲醇-二氯甲烷5-95洗脫，得到為黃色固體的產(chǎn)物。mp＝90℃。
實施例88
將1.0當量的實施例59的產(chǎn)物(化合物104.0-B，表1)溶于含有1.4當量氫氧化鋰的甲醇中，攪拌18小時。加入含有DEC、HOBT以及N-甲基嗎啉和O-叔丁基二甲基硅烷基羥胺各1.0當量的DMF。于室溫下，將該混合物攪拌48小時，然后真空濃縮為殘留物，使其分配于乙酸乙酯和水之間。用硫酸鎂干燥有機相，過濾，將殘留物經(jīng)硅膠層析，用甲醇-二氯甲烷(5-95)洗脫得到為白色固體的產(chǎn)物。mp＝103.0℃。
實施例89
將1.0當量的實施例59的產(chǎn)物(化合物104.0-B，表1)溶于含有3.0當量氫氧化鉀和3.0當量甘氨酸鹽酸叔丁酯的甲醇中，攪拌7天。真空濃縮，殘留物經(jīng)硅膠層析，用甲醇-二氯甲烷(5-95)洗脫，得到為黃色固體的產(chǎn)物。mp＝108℃。
實施例90
將1.0當量的實施例59的產(chǎn)物(化合物104.0-B，表1)溶于含有3.0當量氫氧化鉀和3.0當量O-芐基羥胺鹽酸鹽的甲醇中，攪拌48小時。真空濃縮，殘留物經(jīng)硅膠層析，用甲醇-二氯甲烷-乙酸(10-89.5-0.5)洗脫，得到為黃色固體的產(chǎn)物。mp＝75℃。
實施例91
將1.0當量的實施例59的產(chǎn)物(化合物104.0-B，表1)溶于含有4.0當量甲胺的甲醇中，攪拌18小時。真空濃縮，殘留物經(jīng)硅膠層析，用甲醇-二氯甲烷(用氨飽和)(5-95)洗脫，得到為黃色固體的產(chǎn)物。mp＝86-132℃。
實施例92
將1.0當量的實施例52的產(chǎn)物(化合物86.0-B，表1)溶于含有2當量三氟乙酸的二氯甲烷中，攪拌2小時。真空濃縮，使其分配于二氯甲烷和碳酸氫鈉水溶液之間。用硫酸鎂干燥有機層，真空濃縮為白色固體的產(chǎn)物，mp＝120.6-120.8℃。
實施例93
將1.0當量的實施例53的產(chǎn)物(化合物89.0-B，表1)溶于含有2當量三氟乙酸的二氯甲烷中，攪拌2小時。真空濃縮，使其分配于二氯甲烷和碳酸氫鈉水溶液之間。用硫酸鎂干燥有機層，真空濃縮為白色固體的產(chǎn)物，mp＝114-115℃。
實施例94
將1.0當量的實施例1的產(chǎn)物溶于含有2當量三氟乙酸的二氯甲烷中，攪拌2小時。真空濃縮，使其分配于二氯甲烷和碳酸氫鈉水溶液之間。用硫酸鎂干燥有機層，真空濃縮。將殘留物溶于含有1.5當量三乙胺和1.2當量二甲基氨磺酰氯的二氯甲烷中。攪拌18小時，然后用1N鹽酸和1N氫氧化鈉依次洗滌。用硫酸鎂干燥有機層，真空濃縮得到產(chǎn)物，mp＝124.4-130℃。
實施例95
將1.0當量的實施例1的產(chǎn)物溶于含有2當量三氟乙酸的二氯甲烷中，攪拌2小時。真空濃縮，使其分配于二氯甲烷和碳酸氫鈉水溶液之間。用硫酸鎂干燥有機層，真空濃縮。將殘留物溶于10當量磺酰胺水溶液中，回流48小時。真空濃縮，殘留物經(jīng)硅膠層析，用甲醇-二氯甲烷(用氨飽和)(5-95)洗脫，得到產(chǎn)物，mp＝151.9℃。
實施例96
將實施例31的產(chǎn)物(化合物16.0-B，表1)(372.1mg，0.468mmol)溶于3ml 6M鹽酸中，于室溫下將該溶液攪拌過夜。將該反應混合物加至25ml水中，過濾產(chǎn)生的沉淀，用0.1M鹽酸洗滌。用氯化鈉飽和濾液，連續(xù)萃取48小時得到粗品產(chǎn)物。將合并的粗品產(chǎn)物經(jīng)快速層析純化(C-18反相硅膠，50％甲醇/0.17M乙酸-90％甲醇/0.17M乙酸梯度)。將產(chǎn)生的物質溶于甲醇中，加至水中，將產(chǎn)生的懸浮液蒸發(fā)至干，得到為白色固體的目標化合物(mp 133.5-141.2℃，加熱2℃-3℃/min)。
實施例97
將實施例34的產(chǎn)物(化合物24.0-B，表1)(450.0mg，0.56mmol)溶于20ml二氯甲烷中，冷卻至0℃，緩慢加入8ml三氟乙酸。1小時后，用50％氫氧化鈉水溶液和水稀釋冷卻的混合物。用二氯甲烷萃取該混合物，然后將其用硫酸鎂干燥，蒸發(fā)得到為黃色固體的目標化合物(230mg，mp 161.0℃-163.0℃)。
實施例98
將實施例96的產(chǎn)物(化合物74.0-B)(93.6mg，0.129mmol)和1-羥基苯并三唑(27.3mg，0.202mmol)溶于1ml DMF中。加入氯化銨(14.8mg，0.276mmol)、N-甲基嗎啉(70μl)和DEC·HCl(30.8mg，0.161mmol)。4小時后，蒸發(fā)該混合物，經(jīng)快速層析純化殘留物(C-18反相硅膠，50％甲醇/0.17M乙酸-90％甲醇/0.17M乙酸梯度洗脫)。冷凍干燥從乙酸/水產(chǎn)生的物質，得到為褐色固體的目標化合物(67.7mg，mp 115.2℃-122.0℃，加熱2℃-3℃/min)。
實施例99
將1.0當量的實施例77的產(chǎn)物(化合物14.0-B)溶于含有DEC、HOBT、N-甲基嗎啉和吡咯烷各1.0當量的DMF中。于室溫下，將該混合物攪拌18小時，然后真空濃縮為殘留物，使其分配于乙酸乙酯和水之間。用碳酸氫鈉水溶液和鹽水依次洗滌有機相。用硫酸鎂干燥有機相，過濾并真空濃縮為殘留物。將殘留物經(jīng)硅膠層析，得到為白色固體的產(chǎn)物。
實施例100
將1.0當量的實施例77的產(chǎn)物(化合物14.0-B)溶于含有DEC、HOBT、N-甲基嗎啉和哌啶各1.0當量的DMF中。于室溫下，將該混合物攪拌18小時，然后真空濃縮為殘留物，使其分配于乙酸乙酯和水之間。用碳酸氫鈉水溶液和鹽水依次洗滌有機相。用硫酸鎂干燥有機相，過濾并真空濃縮為殘留物。將殘留物經(jīng)硅膠層析，得到為白色固體的產(chǎn)物。mp＝135-136℃。
實施例101
將1.0當量的實施例77的產(chǎn)物(化合物14.0-B)溶于含有DEC、HOBT、N-甲基嗎啉和嗎啉各1.0當量的DMF中。于室溫下，將該混合物攪拌18小時，然后真空濃縮為殘留物，使其分配于乙酸乙酯和水之間。用碳酸氫鈉水溶液和鹽水依次洗滌有機相。用硫酸鎂干燥有機相，過濾并真空濃縮為殘留物。將殘留物經(jīng)硅膠層析，得到為白色固體的產(chǎn)物。mp＝135-136℃。
實施例102
將1.0當量的實施例77的產(chǎn)物(化合物14.0-B)溶于含有DEC、HOBT、N-甲基嗎啉和二甲胺各1.0當量的DMF中。于室溫下，將該混合物攪拌18小時，然后真空濃縮為殘留物，使其分配于乙酸乙酯和水之間。用碳酸氫鈉水溶液和鹽水依次洗滌有機相。用硫酸鎂干燥有機相，過濾并真空濃縮為殘留物。將殘留物經(jīng)硅膠層析，得到為白色固體的產(chǎn)物。mp＝133-134℃。
測定根據(jù)WO 95/10516(1995年4月20日公開)中所述的下列測定方法測定FPT IC50(法呢基蛋白轉移酶的抑制，體外酶測定)和COS細胞IC50(細胞基測定)。GGPT IC50(香葉基香葉基蛋白轉移酶的抑制，體外酶測定)、細胞墊測定和抗腫瘤活性(體內抗腫瘤研究)可以用WO95/10516中所述測定方法測定。在此引入WO 95/10516的公開作參考。
另外的測定方法根據(jù)與上述方法基本相同的方法進行，但是用另外的指標腫瘤細胞系代替T24-BAG細胞。測定可以用表達激活的K-ras基因的DLD-1-BAG人結腸癌細胞或表達激活的K-ras基因的SW620-BAG人結腸癌細胞進行。用本領域已知的其它的腫瘤細胞系也可以證實本發(fā)明化合物的抑制其它類型的癌細胞的活性。
軟瓊脂測定無貼壁依賴性生長為致瘤細胞系的特征。將人腫瘤細胞懸浮于含有0.3％瓊脂糖和指定濃度的法呢基轉移酶抑制劑的生長培養(yǎng)基中。將該溶液涂在用含有相同濃度的法呢基轉移酶抑制劑作為上層的0.6％瓊脂糖固化的生長培養(yǎng)基上。待上層固化后，將培養(yǎng)板于37℃、5％二氧化碳下孵育10-16天使集落生長。孵育后，用MTT(3-[4，5-二甲基-噻唑-2-基]-2，5-二苯基溴化四唑鎓，噻唑蘭)(1mg/ml的PBS溶液)涂于所述瓊脂上進行集落染色。對集落進行計數(shù)并計算IC50。
化合物2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0、11.0、12.0、12.1、12.2、12.3、13.0、14.1、14.2、15.1、15.2、15.3、16.0、17.0-B、18.0-B、23.0-B、79.0-B、104.0-B和108.0-B的FPT IC50(H-ras)值在2-31.7nM(納摩爾)范圍內。
化合物6.0、7.0、8.0、10.0、11.0、12.0、12.1、12.3、13.0、14.1、14.2、15.1、15.2和15.3的Cos細胞IC50值在10-700nM范圍內。
化合物6.0-B、7.0-B、8.0-B、9.0-B、10.0-B、11.0-B、12.0-B、13.0、14.0-B、16.0-B、17.0-B、18.0B、19.0-B、20.0-B、21.0-B、22.0-B、23.0-B、24.0-B、26.0-B、30.0-B、32.0-B、33.0-B、34.0-B、35.0-B、37.0-B、38.0-B、39.0-B、44.0-B、49.0-B、50.0-B、51.0-B、52.0-B、53.0-B、54.0-B、55.0-B、56.0-B、57.0-B、58.0-B、59.0-B、60.0-B、63.0-B、64.0-B、67.0-B、68.0-B、69.0-B、70.0-B、71.0-B、72.0-B、74.0-B、75.0-B、76.0-B、77.0-B、79.0-B、81.0-B、82.0-B、85.0-B、86.0-B、88.0-B、89.0-B、90.0-B、92.0-B、95.0-B、101.0-B、107.0-B、114.0-B、114.2-B、114.3-B和114.4-B的FPTIC50值在0.7-18nM范圍內。
化合物2.0、3.0、4.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0、12.1、12.3、16.0、6.0-B、7.0-B、9.0-B、10.0-B、11.0-B、12.0-B、13.0-B、17.0-B和18.0-B的FPT IC50(k-ras)值在14.5-71.2nM范圍內。
化合物6.0、16.0、17.0、18.0、6.0-B、7.0-B、9.0-B、10.0-B、11.0-B、12.0-B、13.0-B、14.0-B、16.0-B、17.0-B、18.0-B、19.0-B、22.0-B、23.0-B、24.0-B、26.0-B、30.0-B、32.0-B、33.0-B、34.0-B、35.0-B、37.0-B、38.0-B、39.0-B、44.0-B、49.0-B、50.0-B、51.0-B、52.0-B、53.0-B、54.0-B、55.0-B、56.0-B、57.0-B、58.0-B、59.0-B、60.0-B、63.0-B、64.0-B、68.0-B、69.0-B、70.0-B、71.0-B、72.0-B、74.0-B、75.0-B、77.0-B、79.0-B、81.0-B、82.0-B、85.0-B、88.0-B、89.0-B、92.0-B、95.0-B、101.0-B、104.0-B、107.0-B、108.0-B、114.0-B、114.2-B、114.3-B和114.4-B的Cos細胞在9-＞1000nM范圍內。
化合物10.0、12.1、12.3、15.2、16.0、18.0、6.0-B、9.0-B、10.0-B、11.0-B、12.0-B、13.0-B、14.0-B、16.0-B、17.0-B、18.0-B、19.0-B、21.0-B、22.0-B、23.0-B、24.0-B、26.0-B、30.0-B、32.0-B、33.0-B、34.0-B、35.0-B、37.0-B、38.0-B、39.0-B、44.0-B、49.0-B、50.0-B、52.0-B、53.0-B、54.0-B、55.0-B、56.0-B、57.0-B、59.0-B、60.0-B、63.0-B、64.0-B、68.0-B、69.0-B、70.0-B、71.0-B、72.0-B、74.0-B、75.0-B、77.0-B、79.0-B、81.0-B、82.0-B、85.0-B、88.0-B、89.0-B、92.0-B、95.0-B、101.0-B、104.0-B、107.0-B、114.0-B、114.2-B、114.3-B和114.4-B的軟瓊脂值在19.5-＞500nM范圍。
在由本發(fā)明在此所述的化合物制備藥用組合物時，惰性的藥學上可接受的載體可以為固體或液體。固體制劑包括粉劑、片劑、分散顆粒劑、膠囊劑、扁囊劑和栓劑。粉劑和片劑可含有約5-約70％的活性組分。適當?shù)墓腆w載體是本領域已知的，如碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石粉、蔗糖、乳糖。片劑、粉劑、扁囊劑和膠囊劑為適合口服給藥的固體劑型。
制備栓劑時，首先將低熔點的蠟如脂肪酸甘油酯或可可脂的混合物融化，攪拌下將活性組分均勻分散其中。融化將融化的均勻混合物傾至常規(guī)大小的模中，使其冷卻并因此固化。
液體制劑包括溶液、懸浮液和乳液。適合胃腸外注射的實例為水或水-丙二醇溶液。
液體制劑也可以包括供鼻內給藥的溶液。
適合吸入的氣霧劑制劑可包括溶液和粉末形式的固體，它們可以與藥學上可接受的載體例如惰性壓縮氣體混合。
也包括，在使用前將其轉化為供口服或胃腸外給藥的液體形式制劑的固體制劑。此類液體制劑包括溶液、懸浮液和乳劑。
也可以將本發(fā)明的化合物透皮給藥。透皮組合物可以為膏劑、洗劑、氣霧劑和/或乳劑，包括如常規(guī)本領域此目的的骨架或藥庫型的透皮貼劑。
優(yōu)選該化合物口服給藥。
優(yōu)選該藥用制劑為單位劑型。為此類劑型時，該制劑可以分為含有適當量(如達到所需目的的有效量)的活性組分的單位劑量。
制劑的單位劑型中活性化合物的量可以根據(jù)具體使用的情況在約0.1mg-1000mg、更優(yōu)選在約1mg-300mg之間變化或調整。
根據(jù)病人的需要和待治療疾病的嚴重程度可以改變使用，的實際劑量。本領域技術人員可以容易地決定特殊情況下的合適劑量。一般而言，治療以比該化合物的最佳劑量稍低的劑量開始。此后，逐漸增加劑量至在特定情況下達到最佳效果。為方便起見，可以將每日總劑量分開，并根據(jù)需要在全天中分次給藥。
在考慮了各種因素如病人的年齡、身體狀況和體積以及治療的癥狀的嚴重程度后，根據(jù)醫(yī)師的判斷調整本發(fā)明的化合物及其藥學上可接受的鹽的給藥量和頻率。口服給藥的一般推薦劑量方案為每天10mg-2000mg、優(yōu)選每天10-1000mg在全天分2-4次給藥以阻斷腫瘤生長。當在該劑量范圍內給藥時，所述化合物是無毒性的。
下列為含有本發(fā)明化合物的藥用劑型的實施例。本發(fā)明的藥用組合物方面的范圍不受所提供的實施例的限制。
藥物劑型實施例實施例A-片劑
制備方法將序號1和2的成分在適合的混合器中混合10-15分鐘。將與序號3成分的混合物制粒。如果需要可通過粗篩(如1/4”，0.63cm)磨碎濕顆粒。干燥濕顆粒。如果需要，過篩干燥的顆粒并使其與序號4的成分混合10-15分鐘。加入序號5的成分并混合1-3分鐘。在合適的壓片機上將該混合物壓片成適當?shù)拇笮『椭亓俊?br> 實施例B-膠囊
制備方法使序號1，2和3的成分在適合的混合器中混合10-15分鐘。加入序號4的成分并混合1-3分鐘。在合適的包囊機上將該混合物填入兩節(jié)的硬明膠膠囊中。
盡管結合以上提出的具體的實施方案介紹了本發(fā)明，它的許多另外的方案、修改和變化對本領域普通技術人員來說應是顯而易見的。所有這些選擇、修改和變化都將認為是在本發(fā)明的精神和范圍內。
權利要求
1.下式的化合物
或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物，其中a、b、c和d中之一代表N或NR9，其中R9為O-、-CH3或-(CH2)nCO2H，其中n是1-3，而其余的a、b、c和d基團代表CR1或CR2；或每個a、b、c和d獨立選自CR1或CR2；每個R1和每個R2獨立選自H、鹵代、-CF3、-OR10、-COR10、-SR10、-S(O)tR11(其中t為0、1或2)、-SCN、-N(R10)2、-NR10R11、-NO2、-OC(O)R10、-CO2R10、-OCO2R11、-CN、-NHC(O)R10、-NHSO2R10、-CONHR10、-CONHCH2CH2OH、-NR10COOR11、
-SR11C(O)OR11、-SR11N(R75)2，其中每個R75獨立選自H和-C(O)OR11、苯并三唑-1-基氧基、四唑-5-基硫代或取代的四唑-5-基硫代、鏈炔基、鏈烯基或烷基，所述烷基或鏈烯基任選被鹵代、-OR10或-CO2R10取代；R3和R4是相同的或不同的，且各自獨立代表H、R1和R2的任何取代基或者R3和R4一起代表與苯環(huán)(環(huán)III)稠合的飽和或不飽和C5-C7環(huán)；R5、R6、R7和R8各自獨立代表H、-CF3、-COR10、烷基或芳基，所述烷基或芳基任選被下列基團取代-OR10、-SR10、-S(O)tR11、-NR10COOR11、-N(R10)2、-NO2、-COR10、-OCOR10、-OCO2R11、-CO2R10、OPO3R10，或R5與R6結合代表＝O或＝S，和/或R7與R8結合代表＝O或＝S；R10代表H、烷基、芳基或芳烷基；R11代表烷基或芳基；X代表N、CH或C，其中C可含有與碳原子11結合的任選雙鍵(由虛線代表)；碳原子5和6之間的虛線代表任選的雙鍵，如此當存在雙鍵時，A和B獨立代表-R10、鹵代、-OR11、-OCO2R11或-OC(O)R10，當碳原子5和6之間無雙鍵存在時，A和B各自獨立代表H2、-(OR11)2、H和鹵代、二鹵代、烷基和H、(烷基)2、-H和-OC(O)R10、H和-OR10、＝O、芳基和H、＝NOR10或-O-(CH2)p-O-，其中p是2、3或4；和W選自下列基團
其中R12選自(a)H；(b)烷基；(c)芳烷基；和(d)雜芳烷基；R13和R14各自獨立選自(a)H；(b)-C(O)OR16，其中R16代表烷基、芳烷基和雜芳基烷基；(c)-SO2R17，其中R17選自NH2、-N(烷基)2，其中每個烷基可以相同或不同，為烷基、芳基、芳烷基、雜芳基和雜芳烷基；(d)-C(O)R18，其中R18選自芳基、烷基、芳烷基、雜芳基和雜芳烷基；(e)C1-6烷基；(f)芳烷基；和(g)C3-6環(huán)烷基；r為0、1或2；s代表1、2、3、4或5；每個-CY2-基團中的每個Y獨立選自H或-OH，前提為-CY2-中的兩個Y不都為-OH，且氮的α位的-CY2-基團中兩個Y都為H，使下式的基團
形成3、4、5、6或7元環(huán)；v為0、1或2；R15選自(a)雜芳基；(b)選自下列的基團
(5)-CH(OCH2CH3)2(6)-OH，和(7)-CN；和(c)選自下列的雜環(huán)烷基
z為0、1、2、3、4或5，其中每個-CH2-基團任選被-OH取代；R22代表選自下列的基團
(5)烷基(如-CH3)，(6)-OR23，其中R23選自烷基、芳基和H，以及
其中R24和R25獨立選自-NH2、烷氧基、-OH、-CH2CO2H、-OCH2Ph、-CH(OCH3)CH(CH3)2、烷基、芳基、H、芳烷基和雜芳烷基；或R4和R5一起形成具有4或5個(-CH2-)基團的碳鏈以使R24和R25與它們所連接的氮一起形成5或6元雜環(huán)烷基環(huán)。
2.權利要求1的化合物，其中R2為H；R1選自Br或Cl；R3選自Br或Cl；R4選自H、Br或Cl；R5、R6、R7和R8為H；A和B各自為H2；且C5和C6不存在任選的鍵。
3.權利要求1-2中任何一項的化合物，其中W選自
其中(1)r為0；(2)R12選自(a)H，(b)烷基，(c)芳烷基，和(d)雜芳烷基；和(3)R13和R14獨立選自(a)H；(b)-C(O)OR16，其中R16代表烷基；(c)-SO2R17，其中R17為烷基或芳基；(d)-C(O)R18，其中R18為芳基；和(e)烷基；(B)
其中(1)r為1或2；(2)R12為H；和(3)R13為烷基，R14為H、烷基或-C(O)OR16，其中R16為烷基；
其中(1)s代表1、2、3、4或5；和(2)R13選自(a)H和-C(O)OR16，其中R16為烷基；(D)
其中(1)v為0；(2)R12為H；和(3)R15選自
和-OH、-CN；(E)
其中(1)v為1或2；(2)R12為H；和(3)R15為雜環(huán)烷基；(F)
其中(1)z為0；(2)R22為-NR24R25；和(3)R24和R25獨立選自H、-NH2、烷基、烷氧基、-OH、-CH2CO2H或-OCH2C6H5；和
其中(1)z為1、2、3、4或5；(2)R22選自OR23、-ONa、-OLi、烷基、
(3)R23為烷基；和(4)R24和R25獨立選自H、-CH(OCH3)CH(CH3)2、
4.權利要求1-3中任何一項的化合物，其中R4為H。
5.權利要求1-3中任何一項的化合物，其中R4選自Cl或Br。
6.權利要求1-5中任何一項的化合物，其中X為CH.
7.權利要求1-6中任何一項的化合物選自
其中R1、R3和R4分別獨立選自鹵代；A、B、X和W與權利要求1定義相同。
8.權利要求1-7中任何一項的化合物，其中R1為Br；R3為Cl；及R4為Br。
9.權利要求1-8中任何一項的化合物，其中所述化合物為下式的化合物
10.權利要求1的化合物選自下列化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物
11.治療腫瘤細胞的方法，該方法包括給予有效量的權利要求1-10中任何一項的化合物。
12.權利要求11的方法，其中受治療的細胞為胰腫瘤細胞、肺癌細胞、骨髓性白血病腫瘤細胞、甲狀腺濾泡腫瘤細胞、脊髓發(fā)育不良腫瘤細胞、表皮癌腫瘤細胞、膀胱癌腫瘤細胞、結腸腫瘤細胞、乳腺腫瘤細胞或前列腺腫瘤細胞。
13.抑制法呢基蛋白轉移酶的方法，該方法包括給予有效量的權利要求1-10中任何一項的化合物。
14.藥用組合物，它包括有效量的權利要求1-10中任何一項的化合物和藥學上可接受的載體。
15.權利要求1-10中任何一項的化合物在治療腫瘤細胞中的用途。
16.權利要求1-10中任何一項的化合物在治療腫瘤細胞的藥物生產(chǎn)中的用途。
17.權利要求1-10中任何一項的化合物在抑制法呢基蛋白轉移酶中的用途。
18.權利要求1-10中任何一項的化合物在抑制法呢基蛋白轉移酶的藥物生產(chǎn)中的用途。
全文摘要
公開新的式(1.0)化合物。式(1.0)化合物可以用式(1.4)或(1.5)化合物代表,其中R
文檔編號A61K31/5377GK1248253SQ97199595
公開日2000年3月22日 申請日期1997年9月11日 優(yōu)先權日1996年9月13日
發(fā)明者F·G·尼奧羅格, A·G·塔韋拉斯, R·J·多爾, T·拉爾瓦尼, C·阿爾瓦雷斯, S·W·雷米斯塞維斯基 申請人:先靈公司