專利名稱：一種抗炎抗病毒藥物組合物及其制備工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥制藥領(lǐng)域，涉及一種抗炎抗病毒藥物組合物，本發(fā)明還涉及該藥物組合物的制備工藝。
背景技術(shù)：
夏枯草，為唇形科夏枯草屬植物夏枯草的花序、果穗及全草。味苦辛，性寒。功能為清肝明目、散結(jié)消腫。主治頭痛眩暈、目赤腫痛、瘰疬癭瘤等病證。全草含三萜皂甙，其甙元是齊墩果酸，還含有游離的齊墩果酸、熊果酸、蕓香甙、金絲桃甙、順咖啡酸、反咖啡酸、鞣質(zhì)、揮發(fā)油、少量生物堿及水溶性鹽類(主要為氯化鉀)?；ㄋ胫泻w燕草素和矢車菊素的花色甙、d-樟腦、d-小茴茵香酮等。經(jīng)動物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，本品具有一定的抗腫瘤作用，另外，本品煎劑對十多種細(xì)菌均有較強(qiáng)的抑制作用。
紫花地丁(Philippine Violet Herb)，別名箭頭草、獨(dú)行虎、羊角子、米布袋。性味苦、辛、寒、無毒。紫花地丁全草含甙類、黃酮類、蠟、蠟酸(Cerotic acid)及不飽和酸等的酯類。主治治疔瘡，癰腫，瘰疬，黃疸，痢疾，腹瀉，目赤，喉痹，毒蛇咬傷。配蒲公英，清熱解毒，散結(jié)消腫力量增強(qiáng)；配銀花，解毒涼血，消腫散熱之功增強(qiáng)。
魚腥草，性味辛、微寒，歸肺經(jīng)，有清熱解毒、消腫、利尿的功效。配蘆根、桔梗、瓜萎等可治肺癰(肺膿瘍)；配黃芩、貝母等可療肺熱咳嗽；配野菊花、蒲公英、金銀花等可治熱毒瘡瘍；配車前子、白茅根、海金砂等可治濕熱淋癥；配黃連、白頭翁、白芍、黃芩等可治濕熱痢疾，也可用鮮品外敷用以治療熱毒瘡瘍癥。此外，藥理研究還表明，本品具有較好的抑菌、提高免疫力、抗炎、鎮(zhèn)痛、止血、鎮(zhèn)咳、利尿等作用，甚至能預(yù)防胃癌和肺癌。文獻(xiàn)表明(王愛平王春華，魚腥草注射液治療急性上呼吸道感染32例療效觀察，中華醫(yī)藥雜志第3卷第6期)魚腥草注射液為新鮮魚腥草蒸餾液，主要有效成分為癸酰乙醛、甲基正壬酮、月桂醛等揮發(fā)油(每1ml注射液相當(dāng)于新鮮魚腥草2g)。具有清熱、解毒之功效，現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，魚腥草注射液有抗病毒、抗菌、抗炎鎮(zhèn)痛、止咳及增強(qiáng)特異性及非特異性免疫(促進(jìn)外周白細(xì)胞吞噬功能，免疫球蛋白形成，增強(qiáng)細(xì)胞免疫、體液免疫反應(yīng)及天然殺傷細(xì)胞的活性，增強(qiáng)患者血及痰中溶菌酶活性及血清溶解素水平)的功能，是一種理想的標(biāo)本兼治中藥制劑。用于急性上呼吸道感染，經(jīng)臨床觀察效果較好，臨床可推廣應(yīng)用。
目前，臨床上采用的抗炎抗病毒中藥有很多種，但還未見有將夏枯草、紫花地丁、魚腥草配伍用于抗炎抗病毒的中藥組合物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種抗炎抗病毒的中藥組合物。
本發(fā)明另一個目的是提供上述藥物組合物的制備工藝。
本發(fā)明的技術(shù)方案是根據(jù)祖國醫(yī)學(xué)的原理，夏枯草清火明目，散結(jié)消腫，魚腥草清熱解毒、消癰排膿，紫花地丁清熱解毒、涼血消腫，三藥合用，具有清熱散火、抗炎、抗菌、抗病毒的功效，用于治療上、下呼吸道感染具有良好的效果。
本發(fā)明的目的是通過下列措施來實(shí)現(xiàn)的一種抗炎抗病毒的中藥，它是由下列重量份的原料藥制備而成夏枯草9～20份，紫花地丁15～30份，魚腥草15～25份。
所述的中藥，它的藥劑是任何一種藥劑學(xué)上允許的劑型。
所述的中藥，它的劑型是注射液、口服液、丸劑、片劑、散劑、顆粒劑、膠囊劑、微囊劑或滴丸劑。
所述的中藥的制備工藝，包含下列步驟a.水提按配方稱取三味藥材，加水煎煮2～3次，每次1～2h，合并煎液，過濾，濾液濃縮至60℃熱測相對密度為1.05～1.15；b.醇沉加乙醇使含醇量達(dá)60～80％，靜置、冷藏24～72h，過濾，濾液回收乙醇；同法醇沉操作1～2次，得回收乙醇后的提取液；c.將回收乙醇后的提取液純化得預(yù)配液，加入藥學(xué)上可接受的輔料，按常規(guī)工藝制成所需劑型，或者d.取回收乙醇后的提取液濃縮成60～80℃熱測相對密度為1.05～1.30的浸膏，加入藥學(xué)上可接受的輔料，按常規(guī)工藝制成所需劑型。
所述的中藥的制備工藝，步驟c中的純化工藝為將提取液上中空纖維超濾柱超濾，取分子截留量小于10000的濾液，得預(yù)配液；或者將提取液上聚酰胺柱用60～95％的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，得預(yù)配液；或者將提取液加4％的明膠水溶液適量，靜置，加乙醇使含醇量達(dá)60～80％，冷藏，過濾，濾液回收乙醇，得預(yù)配液。
中空纖維超濾柱是通過選用一定分子量大小的纖維膜，以達(dá)到去除大于該分子量的所有雜質(zhì)，保留小于該分子量的有效成分。
本發(fā)明的有益效果一、實(shí)驗(yàn)試劑5％葡萄糖注射液，復(fù)方丹參注射液，維生素C注射液，生理鹽水。
二、實(shí)驗(yàn)動物小鼠，大鼠，家兔。
三、實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果1、本注射液(按實(shí)施例1制備)抗炎作用1.1對小鼠耳殼二甲苯致腫的影響取小鼠30只，健康，體重20±2g，雌雄兼用，隨機(jī)分3組，每組10只，給藥組尾靜脈注射本注射液5.2ml/kg。陽性對照組尾靜脈注射復(fù)方丹參注射液1.3ml/kg加維生素C注射液2.6ml/kg，空白對照組尾靜脈注射5％葡萄糖注射液5.2ml/kg，給藥5d。末次給藥30min后，將二甲苯0.03m1均勻滴于右耳殼上，左耳殼滴等量的蒸餾水對照。40min后處死小鼠，用直徑8mm的打孔器在雙耳對稱處取下耳片.用分析天平稱重，左右兩耳片重量差為腫脹度。結(jié)果見表1。
表1 本發(fā)明藥物對小鼠耳殼腫脹的影響

與空白對照組比，*P＜0.05；與陽性對照組比較，△P＜0.011.2對由蛋清誘發(fā)大鼠足跖炎癥的影響取大鼠30只，健康，體重140±10g，雌雄兼用。隨機(jī)分3組，每組10只。給藥組尾靜脈注射本注射液3.6ml/kg；陽性對照組尾靜脈注射復(fù)方丹參注射液0.9ml/kg加維生素C注射液1.8ml/kg，空白對照組尾靜脈注射5％葡萄糖注射液3.6ml/kg。給藥5d，末次給藥15min后，灌胃給水10ml，然后立即于大鼠后左足跖皮下注射10％的新鮮蛋清0.1ml，分別于5min、30min、60min、120min、240min、360min測定大鼠左右足跖的厚度，以其差值為腫脹度，結(jié)果見表2。
表2 對大鼠由蛋清所致足跖腫脹的影響

給藥組與空白對照組比較，*P＜0.01；與陽性對照組比較，△P＜0.05以上結(jié)果表明，本注射液對二甲苯誘導(dǎo)小鼠耳殼急性炎癥有較強(qiáng)的抑制作用；對蛋清引起的大鼠足跖炎癥，在不同時間的腫脹度也均有很強(qiáng)的抑制作用，且優(yōu)于對照藥。
1.3對棉球肉芽組織增生的影響取體重140-170g大鼠40只，雌雄各半，隨機(jī)分為4組，乙醚麻醉后給大鼠鼠蹊部各包埋20mg無菌棉球一個制作肉芽組織增生模型。各組按體表面積計(jì)算大鼠的用藥量觀察對棉球肉芽組織增生的影響。1組予本注射液5.2ml/kg，2組予本注射液2.6ml/kg，3組注射0.5％地塞米松磷酸鈉0.005ml/kg，4組給等量生理鹽水，均腹腔注射連續(xù)給藥7天，于第8天處死大鼠，分離肉芽組織，置80℃烤箱中干燥5小時后稱重。結(jié)果，1、2、3組均能抑制棉球肉芽組織增生，見表3。
表3 本注射液對大鼠肉芽組織增生的影響

2、抑菌試驗(yàn)2.1制造陽性瘡瘍及急性腹膜炎病理模型將12只家兔隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對照組。在每只家兔左側(cè)同一部位剪毛、剃毛，用手術(shù)刀切約1cm長小口，深及皮下，從傷口向內(nèi)注入5億個/kg金黃色葡萄球菌，形成陽性瘡瘍；同時，給每只兔腹腔注射接種大腸桿茵K8830億個/kg，造成急性腹膜炎癥模型。實(shí)驗(yàn)組提前3天采用耳靜脈注射本注射液，每只兔按10ml/kg·次，每天早晚各1次，共給藥8天，結(jié)束前24小時停止給藥；對照組不給任何藥物，比較各組差異。
本注射液對家兔接種金色葡萄球菌形成陽性瘡瘍的試驗(yàn)結(jié)果如表4。接種3天后，對照組家兔傷口皮膚周圍有紅、腫、熱、觸痛等炎癥反應(yīng)。
表4 本注射液對家免實(shí)驗(yàn)陽性瘡瘍的影響

捕殺觀察家兔腹腔接種大腸桿菌K88形成急性腹膜炎癥試驗(yàn)，結(jié)果見表5。
表5 本注射液對家免實(shí)驗(yàn)性腹膜炎的主要病理變化

注“+”表示有病理變化；“-”表示無病理變化2.2體內(nèi)抑菌試驗(yàn)小鼠40只，雌雄各半，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對照組。每只小鼠皮下接種0.2ml稀釋度為10-3的培養(yǎng)菌液，同時給實(shí)驗(yàn)組小鼠注射本注射液1.0ml/只，對照組小鼠腹腔注射生理鹽水1.0ml/只，每天早晚各1次，連續(xù)注射1周，觀察其死亡、存活數(shù)，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)處理。
接種沙門氏桿菌小鼠保護(hù)試驗(yàn)的結(jié)果見表6。
表6 接種沙門氏桿菌小鼠保護(hù)試驗(yàn)結(jié)果

差異極顯著接種枯草桿菌小鼠保護(hù)試驗(yàn)的結(jié)果見表7。
表7 接種枯草桿菌小鼠保護(hù)試驗(yàn)結(jié)果

差異極顯著結(jié)果表明，家免體表創(chuàng)口接種化膿性金色葡萄球菌后，局部潰爛面積，無論是體表、皮內(nèi)側(cè)，或是肌肉層，實(shí)驗(yàn)組較對照組均有極顯著性差異(P＜0.01)；家免腹腔接種大腸桿菌K88后，第6天捕殺觀察腹腔內(nèi)臟炎癥變化，對照組于6天內(nèi)可全部形成急性化膿性彌漫性腹膜炎；實(shí)驗(yàn)組除2只有少許漿膜滲出物和1只形成局限腹膜炎外，其余3只無任何病理變化；本注射液不僅對沙門氏桿菌、枯草桿菌的生長有較強(qiáng)的抑制作用，實(shí)驗(yàn)組較對照組均有極顯著性差異(P＜0.01)，而且可減少小鼠死亡率，提高存活率，有其治療作用。
2.3、體外抑菌作用采用試管內(nèi)藥液稀釋法進(jìn)行體外抑菌實(shí)驗(yàn)。用肉湯培養(yǎng)基將本注射液稀釋成1∶2，……1∶16，……1∶256(按倍數(shù)稀釋，如表8稀釋度)。經(jīng)高壓滅菌30min后，待冷卻每管加二白金耳培養(yǎng)6h的菌液，于37℃溫箱中培養(yǎng)24h后，觀察各管中細(xì)菌生長情況，結(jié)果見表8。最低抑菌濃度(MIC)對金葡菌為0.032g/mL；對肺炎雙球菌為0.063g/mL；對溶血性鏈球菌為0.063g/mL；對流感桿菌為0.13g/mL，對大腸桿菌為0.25g/mL。
表8 本注射液的體外抑菌作用(試管法)

“++”明顯生長 “+”少量生長 “0”無菌3、抗病毒試驗(yàn)3.1、本注射液對不同稀釋度的單純皰疹病毒1型、2型(HSV-1，HSV-2)抑制實(shí)驗(yàn)待Vero細(xì)胞長成單層后，將HSV-1，HSV-2稀釋成10、100、1000和10000四個TCID50的病毒攻擊量，將每個TCID50的病毒接種8管，其中4管為本注射液組，4管為病毒對照組，另設(shè)4管作藥物細(xì)胞對照組。病毒對照組換維持液，本注射液組和藥物細(xì)胞對照組均換本注射液的最大無毒濃度藥液，即濃度為1000μg/ml藥液。然后將所有培養(yǎng)管旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)一周，每天觀察記錄細(xì)胞病變情況，當(dāng)病毒對照組出現(xiàn)++-+++時判斷結(jié)果。
3.2不同稀釋度的本注射液對單純皰疹病毒的抑制實(shí)驗(yàn)待Vero細(xì)胞長成單層后，用100TCID50的病毒攻擊量接種各管，將本注射液稀釋成1000μg/ml，500μg/ml，250μg/ml，125μg/ml和62.5μg/ml五個濃度，每個濃度設(shè)4管作本注射液組，4管作藥物細(xì)胞對照組，另設(shè)4管作公共病毒對照組，將所有培養(yǎng)管旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)一周，每天觀察記錄細(xì)胞病變情況，當(dāng)病毒對照組出現(xiàn)++-+++時判斷結(jié)果。
本注射液對不同稀釋度RSV抑制實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明當(dāng)病毒感染量大于或等于100TCID50時，本注射液組與病毒對照組相比，病變程度有顯著差異。當(dāng)病毒感染量小于100TCID50時，本注射液無細(xì)胞病變出現(xiàn)，而病毒對照組則有25％細(xì)胞出現(xiàn)病變(見表9)。
表9 本注射液對不同稀釋度單純皰疹病毒抑制實(shí)驗(yàn)結(jié)果

注-細(xì)胞無病變，+25％細(xì)胞病變 ++50％細(xì)胞病變，+++75％細(xì)胞病變，++++100％細(xì)胞病變。
不同稀釋度的本注射液對單純皰疹病毒的抑制實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本注射液抑制單純皰疹病毒的TD0、IC50、MTC和TI值分別是1000μg/ml，500μg/ml，250μg/ml和4。隨著藥液濃度下降，本注射液抑制單純皰疹病毒的作用減弱。本注射液的1000μg/ml、500μg/ml和250μg/ml三個濃度組與病毒對照組相比，病變程度有顯著差異。(見表10)表10 不同稀釋度的本注射液對單純皰疹病毒的抑制實(shí)驗(yàn)結(jié)果

本實(shí)驗(yàn)顯示當(dāng)病毒攻擊量為100TCID50時，本注射治能保護(hù)75％的細(xì)胞免遭病毒攻擊；當(dāng)病毒攻擊量小于100TCID50時，則能完全保護(hù)細(xì)胞而不出現(xiàn)病變。而且進(jìn)一步研究其抑制單純皰疹病毒的TD0，IC50，MTC和TI值分別為1000μg/ml，500μg/ml，250μg/ml和4。
實(shí)驗(yàn)采用的本發(fā)明藥物根據(jù)實(shí)施例1制備，但不僅限于注射劑，其它所有實(shí)施例均能得出上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
具體實(shí)施例方式
以下通過實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的闡述。
實(shí)施例中原料藥材按100g/份計(jì)算。
實(shí)施例1處方夏枯草15份，紫花地丁20份，魚腥草20份。
制備工藝按處方量稱取三味藥材，加水煎煮3次，每次1h，合并煎液，過濾，濾液濃縮至相對密度為1.10(60℃熱測)，加乙醇使含醇量達(dá)70％，靜置、冷藏36h，過濾，濾液回收乙醇，再加乙醇使含醇量達(dá)80％，靜置、冷藏48h，過濾，濾液回收乙醇，加4％的明膠水溶液適量，靜置，加乙醇使含醇量達(dá)80％，冷藏，過濾，濾液回收乙醇，得預(yù)配液，加注射用水至5000ml，加入濃度為0.15％的亞硫酸氫鈉，活性碳脫色，粗濾，精濾，5ml/支灌封，滅菌，制成注射液1000支。
實(shí)施例2處方夏枯草15份，紫花地丁20份，魚腥草20份。
制備工藝按處方量稱取三味藥材，加水煎煮2次，每次2h，合并煎液，過濾，濾液濃縮至相對密度為1.10(60℃熱測)，加乙醇使含醇量達(dá)60％，靜置、冷藏24h，過濾，回收乙醇，濾液上聚酰胺柱，用60％、80％、95％的乙醇梯度洗脫，收集洗脫液，回收乙醇后，得預(yù)配液，加注射用水至2000ml，再加入濃度為0.3％的維生素C，活性碳脫色，粗濾，精濾，2ml/支灌封，滅菌，制成注射液1000支。
實(shí)施例3處方夏枯草10份，紫花地丁15份，魚腥草15份。
制備工藝按處方量稱取三味藥材，加水煎煮2次，每次1.5h，合并煎液，過濾，濾液濃縮至相對密度為1.10(60℃熱測)，加乙醇使含醇量達(dá)60％，靜置、冷藏48h，過濾，濾液回收乙醇，上中空纖維超濾柱超濾，先用50000分子截留量的纖維膜濾去大部分大分子雜質(zhì)，再用10000分子截留量的纖維膜除去分子量為1～5萬的雜質(zhì)，取分子量小于10000的濾液，得預(yù)配液，再加入濃度為0.2％的焦亞硫酸鈉，加注射用水至10000ml，活性碳脫色，粗濾，精濾，10ml/支灌封，滅菌，制成注射液1000支。
實(shí)施例4取例1、例2或例3項(xiàng)下的預(yù)配液，加入濃度為0.1～0.3％的亞硫酸氫鈉，加葡萄糖或氯化鈉調(diào)節(jié)等滲，按常規(guī)工藝制成大輸液，規(guī)格為100ml/瓶、250l/瓶或500ml/瓶。
實(shí)施例5取例1、例2或例3項(xiàng)下的預(yù)配液，常規(guī)加入蔗糖、亞硫酸氫鈉和苯甲酸酯，再加注射用水至10000ml，按常規(guī)工藝制成口服液1000支。
實(shí)施例6處方夏枯草12份，紫花地丁20份，魚腥草15份。
制備工藝按處方量稱取三味藥材，加水煎煮3次，每次2h，合并煎液，過濾，濾液濃縮至相對密度約為1.15(60℃熱測)，加乙醇使含醇量達(dá)70％，靜置、冷藏48h，過濾，回收乙醇；取回收乙醇后的提取液減壓濃縮成相對密度為1.30的稠浸膏(60℃熱測)，常規(guī)加入糊精、羧甲基纖維素鈉、交聯(lián)聚維酮，按常規(guī)工藝制成膠囊劑1000粒。
實(shí)施例7處方夏枯草12份，紫花地丁20份，魚腥草15份。
制備工藝按處方量稱取三味藥材，加水煎煮3次，每次2h，合并煎液，過濾，濾液濃縮至相對密度約為1.10(60℃熱測)，加乙醇使含醇量達(dá)70％，靜置、冷藏48h，過濾，回收乙醇；取回收乙醇后的提取液減壓濃縮成相對密度為1.15的浸膏(60℃熱測)，常規(guī)加入預(yù)膠化淀粉、羧甲基淀粉鈉、羥丙甲纖維素鈉、硬脂酸鎂適量，按常規(guī)工藝制成片劑1000片。
實(shí)施例8處方夏枯草12份，紫花地丁20份，魚腥草15份。
制備工藝按處方量稱取三味藥材，加水煎煮2次，每次2h，合并煎液，過濾，濾液濃縮至相對密度約為1.05(60℃熱測)，加乙醇使含醇量達(dá)60％，靜置、冷藏48h，過濾，濾液回收乙醇；取回收乙醇后的提取液減壓濃縮成相對密度為1.25的浸膏(60℃熱測)，常規(guī)加入蔗糖粉、糊精，按常規(guī)工藝制成顆粒劑1000袋。
權(quán)利要求
1.一種抗炎抗病毒的中藥，其特征在于它是由下列重量份的原料藥制備而成夏枯草9～20份，紫花地丁15～30份，魚腥草15～25份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥，其特征在于它的藥劑是任何一種藥劑學(xué)上允許的劑型。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的中藥，其特征在于所說的劑型是注射液、口服液、丸劑、片劑、散劑、顆粒劑、膠囊劑、微囊劑或滴丸劑。
4.如權(quán)利要求1所述的中藥的制備工藝，其特征在于它包含下列步驟a.水提按配方稱取三味藥材，加水煎煮2～3次，每次1～2h，合并煎液，過濾，濾液濃縮至60℃熱測相對密度為1.05～1.15；b.醇沉加乙醇使含醇量達(dá)60～80％，靜置、冷藏24～72h，過濾，濾液回收乙醇；同法醇沉操作1～2次，得回收乙醇后的提取液；c.將回收乙醇后的提取液純化得預(yù)配液，加入藥學(xué)上可接受的輔料，按常規(guī)工藝制成所需劑型，或者d.取回收乙醇后的提取液濃縮成60～80℃熱測相對密度為1.05～1.30的浸膏，加入藥學(xué)上可接受的輔料，按常規(guī)工藝制成所需劑型。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的中藥的制備工藝，其特征在于步驟c中的純化工藝為將提取液上中空纖維超濾柱超濾，取分子截留量小于10000的濾液，得預(yù)配液；或者將提取液上聚酰胺柱用60～95％的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，得預(yù)配液；或者將提取液加4％的明膠水溶液適量，靜置，加乙醇使含醇量達(dá)60～80％，冷藏，過濾，濾液回收乙醇，得預(yù)配液。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種抗炎抗病毒的中藥及其制備工藝。該中藥是由下列重量份的原料藥制備而成夏枯草9～20份，紫花地丁15～30份，魚腥草15～25份。該制備工藝是按配方稱取三味藥材，通過水提、醇沉、純化或濃縮，加適當(dāng)輔料制備而成。該中藥具有清熱散火、抗炎、抗菌、抗病毒的功效，用于治療上、下呼吸道感染具有良好的效果；該制備工藝簡單，成本低。
文檔編號A61K9/10GK1733149SQ20051004146
公開日2006年2月15日 申請日期2005年8月12日 優(yōu)先權(quán)日2005年8月12日
發(fā)明者郭萍, 周自桂, 范坤民, 陳金祥, 馮改霞, 侯紅妹 申請人:郭萍