專利名稱：治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，具體地說是以中草藥為原料制備的中成藥；本發(fā)明還涉及該藥物的制備方法。
背景技術(shù)：
現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid Arthritis，下簡稱RA)的發(fā)病機理尚不十分清楚，目前普遍認(rèn)為是一極其復(fù)雜的自身免疫過程。中醫(yī)將本病歸屬于“痹病”(Arthralgia Syndrome)范疇。中醫(yī)認(rèn)為寒冷、潮濕、疲勞、創(chuàng)傷及精神刺激、營養(yǎng)不良等均可成為本病的誘因。營血不足、氣血虛弱、肝腎虧損，復(fù)受風(fēng)寒潮濕是本病的主要因素。
目前RA的發(fā)病率仍呈上升趨勢。RA病有反復(fù)發(fā)作，進行性病變的特點，致殘率很高，對人們的工作、生活影響極大。目前，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對RA尚無有效的根治辦法。美國的發(fā)生率約為成人的1％。我國患病率約為0.32-0.36％，可發(fā)生于青少年、成人及老人，女性多于男性。
由于本病的病因不明，目前臨床上，西醫(yī)主要采取減輕患者的病癥狀，控制疾病的發(fā)展，進行已破環(huán)的關(guān)節(jié)骨的修復(fù)，而缺乏根治本病的方案以及預(yù)防本病的措施。中醫(yī)按臨床病程分期、分型辯證治療。中藥復(fù)方治療RA具有獨特的優(yōu)勢既能夠抗炎鎮(zhèn)痛，又具備免疫抑制及免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)，表現(xiàn)出整體調(diào)節(jié)、多層次、多環(huán)節(jié)、多靶點的作用，而且還有緩解和對抗西藥毒副作用的功效，易于長期服用。
但存在的問題是由于RA病情反復(fù)發(fā)作，病程長，不易治愈的特點，西藥治療常用非甾體抗炎藥(NSAIDS)、免疫抑制劑、糖皮質(zhì)激素等進行長期治療，因此，臨床常出現(xiàn)西藥嚴(yán)重的不良反應(yīng)，如胃腸道出血，骨髓抑制，腎功能損害，肺感染等并發(fā)癥。中醫(yī)中藥的治療雖然具有療效好、易于長期服用等優(yōu)點，但同時也存在中醫(yī)療效可重復(fù)性差，缺乏標(biāo)準(zhǔn)化，規(guī)范化的藥理、藥化、藥效學(xué)的研究。更有中藥現(xiàn)有治療RA的處方及中成藥產(chǎn)品，多用毒副作用大的一些中藥，如附子、制川烏、制草烏、制馬錢子、麻黃、細(xì)辛、防己、雷公藤、全竭、蜈蚣、土鱉蟲、毒蛇等，于人體有害。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于改進現(xiàn)有技術(shù)之缺點而提供一種規(guī)范化、重復(fù)性好、無毒副作用、療效佳的治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物。
本發(fā)明的另一目的是提供該治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物的制備方法。
為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取下述設(shè)計方案該方案是基于祖國醫(yī)學(xué)對類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎癥狀的認(rèn)識及治療原則，參考現(xiàn)代藥理研究成果，從祖國醫(yī)藥學(xué)寶庫中，篩選出活血祛風(fēng)、消腫止痛、通利關(guān)節(jié)的中草藥，按中醫(yī)理論組方，提取精華，使其達消炎、鎮(zhèn)痛、通利關(guān)節(jié)而又無毒副作用的目的；另外，通過標(biāo)準(zhǔn)化的生產(chǎn)制備，使藥理、藥化、藥效規(guī)范化。
本發(fā)明藥物是由下列組分按重量比制成桑枝 2-6當(dāng)歸 2-6防風(fēng) 1-4川牛膝 1-4將上述各組分制成本發(fā)明藥物的生產(chǎn)方法是1、按上述重量比取桑枝、當(dāng)歸、防風(fēng)、川牛膝藥材，分別經(jīng)凈選，去除雜質(zhì)，清水淋洗干凈，切碎，容置于提取罐內(nèi)，分別加各藥物質(zhì)量8-16倍量的水，煮沸0.8-1.2小時，各藥液經(jīng)200目篩網(wǎng)過濾，取濾液，在減壓條件下，各提取液濃縮至相對密度，為1.05-1.08(60℃熱測)的濃縮液，再經(jīng)120目篩過濾；2、將濾后各藥材，按上述步驟、條件再分別提取濃縮過濾液兩次；3、把上述各藥材三次提取的濃縮液合并，進行噴霧干燥，分別制得桑枝提取物、當(dāng)歸提取物、防風(fēng)提取物、川牛膝提取物；4、將上述各藥材提取物經(jīng)60目篩網(wǎng)過濾，置混合機內(nèi)進行混合均勻，進行膠囊充填，即為本發(fā)明膠囊劑藥品。
本發(fā)明選用的桑枝性平，祛風(fēng)濕，利關(guān)節(jié)，行水消腫；當(dāng)歸性溫，補血活血，祛濕散寒，養(yǎng)血除痹；防風(fēng)性溫，祛風(fēng)散寒，勝濕止痛，消腫散結(jié)；川牛膝性平，活血祛瘀，通利關(guān)節(jié)。四藥提取物含有下述活血抗炎及止痛的活性成分桑枝黃酮，當(dāng)歸阿魏酸，當(dāng)歸多糖，防風(fēng)香豆素，防風(fēng)色原酮，防風(fēng)多糖，川牛膝杯莧甾酮，川牛膝多糖等。四藥合伍，協(xié)同共達活血祛風(fēng)，消腫止痛，通利關(guān)節(jié)的功能，其適用于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的治療及預(yù)防保健，如關(guān)節(jié)腫脹；關(guān)節(jié)呈對稱性、持續(xù)性的疼痛與壓痛；早晨或睡醒之后，關(guān)節(jié)出現(xiàn)僵硬、活動不靈，需活動或溫暖后方能緩解。實驗室檢查見血沉(ESR)增快；C反應(yīng)蛋白(CRP)增高；類風(fēng)濕因子(RF)呈陽性等。
本發(fā)明藥物使用方法每日兩次，每次2粒膠囊。
為表明本發(fā)明藥物對類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎病癥的治療效果，本發(fā)明藥物曾于2003-2004年進行了動物試驗?，F(xiàn)把動物試驗設(shè)置方案與結(jié)果介紹如下1、實驗材料1.1試驗藥物本發(fā)明藥[藥品試驗代號生科健絡(luò)(JEF)]呈褐色細(xì)粉，易吸潮。
批號03001；生產(chǎn)日期2003.12.03；由香港生物科技研究院有限公司提供。
1.2陽性對照藥萬通筋骨片，國藥準(zhǔn)字Z20025183號，通化萬通藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，批號20031036。
1.3試驗動物NIH小鼠，由廣東省實驗動物中心提供，動物合格證號2002A022；實驗環(huán)境合格證粵檢證字2001C020號。
1.4試劑及藥品致炎劑二甲苯，分析純，廣州化學(xué)試劑廠生產(chǎn)。
冰醋酸，AR級，廣州化學(xué)試劑廠生產(chǎn)。
1.5劑量設(shè)置本發(fā)明藥及陽性對照藥的給藥劑量如下表1所示。
表1 按體表面積等效系數(shù)換算給藥劑量(g/kg表示克/千克，下同)

劑量設(shè)計依據(jù)本發(fā)明藥給70千克成人每日服用的劑量為1克，按體表積換算成小鼠的等效劑量為0.129克/千克。陽性對照藥均采用相當(dāng)于成人服用劑量的3倍作為對照劑量，因此，萬通筋骨片成人(70千克)的每日服用劑量為3.077克，按體表面積換算成小鼠的等效劑量為0.397克/千克，3倍劑量為1.190克/千克。
2、實驗方法2.1本發(fā)明藥急性毒性試驗2.1.1本發(fā)明藥的一次經(jīng)口最大耐受量試驗選用體重18-22克健康NIH小鼠40只，雌雄各半，實驗前禁食不禁水12小時以上，每只小鼠均一次大劑量給予本發(fā)明藥混懸液最大濃度和最大體積0.8毫升；給藥后連續(xù)觀察7天，判斷毒性反應(yīng)，注意小鼠在7天觀察期內(nèi)是否出現(xiàn)精神、活動、飲食異常情況及死亡情況。對于死亡的小鼠應(yīng)立即解剖，肉眼觀察重要臟器心、肝、脾、肺、腎等是否有明顯病變。
2.1.2本發(fā)明藥的多次給藥的最大耐受量實驗選用體重18-22克健康NTH小鼠40只，雌雄各半，實驗前禁食不禁水12小時以上，然后每隔2小時給藥一次，給予本發(fā)明藥混懸液最大濃度進行灌胃0.5毫升/只；全天共給藥4次，給藥后連續(xù)觀察7天，判斷毒性反應(yīng)。記錄小鼠給予受試樣品期間及觀察期內(nèi)是否出現(xiàn)精神，活動，飲食異常情況及死亡情況，對于死亡的小鼠立即進行解剖觀察心、肝、脾、肺、腎等。計算受試樣品的最大耐受量。
2.2.本發(fā)明藥對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的作用選取成年健康NIH小鼠50只，體重25-30克，均為雄性。設(shè)置5個劑量組，分別為空白對照組、本發(fā)明藥低、中、高劑量組和陽性對照組，每組10只小鼠。
實驗開始前各組小鼠分別給藥3天，其中本發(fā)明藥低、中、高劑量組分別給藥劑量為0.129克/千克、0.387克/千克、1.161克/千克，相當(dāng)于70千克成人臨床擬用劑量的1倍、3倍、9倍；空白對照組給藥等體積的生理鹽水；陽性對照組給予萬通筋骨片1.190克/千克，相當(dāng)于70千克成人臨床服用劑量3.077克的3倍。于末次給藥30分鐘后開始進行致炎作用。將二甲苯0.05毫升滴于小鼠的右耳，以左耳作為對照。滴加致炎劑后30分鐘后將小鼠脫頸椎處死，沿耳廓基線剪下兩耳，用直徑9毫米的打孔器分別在左右兩耳同一部位打下圓耳片，稱重，求左、右耳片重量之差與左耳重量的比值作為腫脹度，比較組間差異。
腫脹度＝(右耳重-左耳重)/左耳重*100％抑制率％＝(空白組腫脹度-給藥組腫脹度)/空白組腫脹度×100％2.3本發(fā)明藥的鎮(zhèn)痛作用試驗(化學(xué)剌激法)取體重20±2克的小鼠50只，雌雄各半，隨機分成5組，即空白對照組，本發(fā)明藥低、中、高劑量組和陽性對照組，每組10只小鼠。實驗前連續(xù)給藥3天，其中本發(fā)明藥低、中、高劑量組小鼠灌胃劑量為0.129克/千克、0.387克/千克、1.161克/千克，相當(dāng)于70千克的成年人每日服用本發(fā)明藥的1、3、9倍；陽性對照組給予萬通筋骨片1.190克/千克，相當(dāng)于70千克成人臨床服用劑量的3倍，相當(dāng)于70千克成人臨床服用劑量3.077克的3倍；空白對照組小鼠灌胃給予等體積的生理鹽水。于末次給藥1小時后，每鼠腹腔注射0.6％冰醋酸溶液0.1毫升/10克體重，記錄注射致痛劑后20分鐘內(nèi)各鼠扭體次數(shù)，計算藥物的鎮(zhèn)痛百分率。
藥物的鎮(zhèn)痛抑制率％＝(空白組扭體數(shù)-給藥組扭體數(shù))÷空白組扭體數(shù)×100％3.實驗結(jié)果3.1本發(fā)明藥急性毒性試驗結(jié)果3.1.1本發(fā)明藥的一次經(jīng)口最大耐受量試驗結(jié)果小鼠灌胃給予本發(fā)明藥混懸液最大濃度(該樣品的最大溶解度為50％，為深褐色勻質(zhì)溶液)和最大體積0.8毫升后，當(dāng)天無出現(xiàn)動物死亡；連續(xù)觀察7天，小鼠毛色、活動、飲食均正常，無死亡發(fā)生。給藥后的第8天處死動物，解剖肉眼觀察心、肝、脾、肺、腎等均無異常發(fā)現(xiàn)。由于給藥體積及濃度不能再增大，按體表面積折算成70千克的成年人一次性口服本發(fā)明藥的總量不少于155.2克，相當(dāng)于70千克的成年人每日服用劑量(1克/日)的155倍。
3.1.2本發(fā)明藥的多次給藥的最大耐受量試驗結(jié)果小鼠當(dāng)天給予受試樣品最大濃度(該樣品的最大溶解度為50％；為深褐色勻質(zhì)溶液)共計4次后無一例死亡，連續(xù)觀察7天見小鼠毛色光滑，活動良好，飲食正常，無死亡發(fā)生。給藥后的第8天處死動物，解剖肉眼觀察心、肝、脾、肺、腎等均無異常發(fā)現(xiàn)。提示小鼠給予本發(fā)明藥混懸液的總量為1克，即本發(fā)明藥對于小鼠的最大耐受量不少于1克，按體重表面積折算成70千克的成年人服用劑量不少于387.9克，相當(dāng)于70千克的成年人每日服用劑量(1克/日)的約388倍，由此說明，本發(fā)明藥在此劑量下，未出現(xiàn)毒性反應(yīng)。
3.2本發(fā)明藥的對二甲苯致小鼠耳腫脹的試驗結(jié)果二甲苯致小鼠耳腫脹的試驗結(jié)果見表2所示。
表2 對小鼠二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的作用(X±SD，n＝10)


與空白對照組相比，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001，△P＞0.05由以上實驗結(jié)果可得，小鼠經(jīng)二甲苯滴耳后，引起毛細(xì)血管的通透性增加，使炎性物質(zhì)滲出從而導(dǎo)致耳腫脹，本發(fā)明藥的抑制率分別為11.4％、33.8％、48.7％。其中本發(fā)明藥的中、高劑量組的腫脹度與同期空白對照相對，具有顯著性差異；陽性對照組的抑制率為41.1％，與同期空白組相比，具有顯著性差異；因此，初步認(rèn)為本發(fā)明藥具有一定的抗炎作用，但二甲苯致炎癥模型僅為抗炎藥理作用的初篩，需進一步進行其它抗炎實驗綜合評價藥的作用效果。
3.3本發(fā)明藥對化學(xué)剌激引起小鼠扭體反應(yīng)的鎮(zhèn)痛作用本發(fā)明藥對冰醋酸引起小鼠腹腔痛疼的鎮(zhèn)痛作用如表3所示。
表3本發(fā)明藥對化學(xué)剌激引起小鼠扭體的鎮(zhèn)痛作用(X±SD，n＝10)

與空白對照組相比，*P＜0.05，***P＜0.001。
由實驗結(jié)果可得，本發(fā)明藥的低、中、高劑量組鎮(zhèn)痛抑制率分別為30.3％、53.1％、56.5％；本發(fā)明藥的三個劑量組均能減少冰醋酸所致小鼠扭體次數(shù)，與同期空白對照組相比，均具有顯著性差異(*P＜0.05，***P＜0.01)；陽性對照組的鎮(zhèn)痛抑制率為41.6％，與同期空白對照組相比具有顯著性差異。
3.實驗結(jié)論綜合上述實驗結(jié)構(gòu)提示，本發(fā)明藥經(jīng)小鼠一次及一日多次口服給藥，其最大耐受量相當(dāng)于70千克的成年人每日服用劑量(1克/日)的155倍和388倍，均未出現(xiàn)毒性反應(yīng)；對小鼠二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹試驗，本發(fā)明藥的中、高劑量均具有顯著的消炎作用，抑制率分別為33.8％和48.7％；對化學(xué)剌激引致小鼠扭體試驗，本發(fā)明藥的三個劑量組均有顯著的鎮(zhèn)痛作用，抑制率分別為30.3％，53.1％和56.5％。以上試驗中，本發(fā)明藥的三個劑量之間有較好的量效關(guān)系。在以上試驗中，本發(fā)明藥高劑量組的給藥劑量(1.161克/千克)低于陽性對照藥萬通筋骨片的給藥劑量(1.190克/千克)，顯示本發(fā)明藥有較好的藥理活性。
具體實施例方式
實施例1本發(fā)明按重量比選取下列藥物成分桑枝2，當(dāng)歸 6，防風(fēng)1，川牛膝4將上述各組分制成本發(fā)明藥物的生產(chǎn)方法是1、按上述重量比取桑枝、當(dāng)歸、防風(fēng)、川牛膝藥材，分別經(jīng)凈選，去除雜質(zhì)，清水淋洗干凈，切碎，容置于提取罐內(nèi)，分別加各藥物質(zhì)量8倍量的水，煮沸0.8小時，各藥液經(jīng)200目篩網(wǎng)過濾，取濾液，在減壓條件下，各提取液濃縮至相對密度，為1.05(60℃熱測)的濃縮液，再經(jīng)120目篩過濾；
2、將濾后各藥材，按上述步驟、條件再分別提取濃縮過濾液兩次；3、把上述各藥材三次提取的濃縮液合并，進行噴霧干燥，分別制得桑枝提取物、當(dāng)歸提取物、防風(fēng)提取物、川牛膝提取物；4、將上述各藥材提取物經(jīng)60目篩網(wǎng)過濾，置混合機內(nèi)進行混合均勻，進行膠囊充填，即為本發(fā)明膠囊劑藥品。
5、將上述各藥材提取物經(jīng)60目篩網(wǎng)過濾，置混合機內(nèi)進行混合均勻，進行膠囊充填，即為本發(fā)明膠囊劑藥品。
實施例2本發(fā)明按重量比選取下列藥物成分桑枝6，當(dāng)歸 2，防風(fēng)4，川牛膝1；將上述各組分制成本發(fā)明藥物的生產(chǎn)方法是1、按上述重量比取桑枝、當(dāng)歸、防風(fēng)、川牛膝藥材，分別經(jīng)凈選，去除雜質(zhì)，清水淋洗干凈，切碎，容置于提取罐內(nèi)，分別加各藥物質(zhì)量16倍量的水，煮沸1.2小時，各藥液經(jīng)200目篩網(wǎng)過濾，取濾液，在減壓條件下，各提取液濃縮至相對密度，為1.08(60℃熱測)的濃縮液，再經(jīng)120目篩過濾；2、將濾后各藥材，按上述步驟、條件再分別提取濃縮過濾液兩次；3、把上述各藥材三次提取的濃縮液合并，進行噴霧干燥，分別制得桑枝提取物、當(dāng)歸提取物、防風(fēng)提取物、川牛膝提取物；4、將上述各藥材提取物經(jīng)60目篩網(wǎng)過濾，置混合機內(nèi)進行混合均勻，進行膠囊充填，即為本發(fā)明膠囊劑藥品。
5、將上述各藥材提取物經(jīng)60目篩網(wǎng)過濾，置混合機內(nèi)進行混合均勻，進行膠囊充填，即為本發(fā)明膠囊劑藥品。
實施例3本發(fā)明按重量比選取下列藥物成分桑枝3，當(dāng)歸 4，防風(fēng)2，川牛膝3；
將上述各組分制成本發(fā)明藥物的生產(chǎn)方法是1、按上述重量比取桑枝、當(dāng)歸、防風(fēng)、川牛膝藥材，分別經(jīng)凈選，去除雜質(zhì)，清水淋洗干凈，切碎，容置于提取罐內(nèi)，分別加各藥物質(zhì)量10倍量的水，煮沸1小時，各藥液經(jīng)200目篩網(wǎng)過濾，取濾液，在減壓條件下，各提取液濃縮至相對密度，為1.07(60℃熱測)的濃縮液，再經(jīng)120目篩過濾；2、將濾后各藥材，按上述步驟、條件再分別提取濃縮過濾液兩次；3、把上述各藥材三次提取的濃縮液合并，進行噴霧干燥，分別制得桑枝提取物、當(dāng)歸提取物、防風(fēng)提取物、川牛膝提取物；4、將上述各藥材提取物經(jīng)60目篩網(wǎng)過濾，置混合機內(nèi)進行混合均勻，進行膠囊充填，即為本發(fā)明膠囊劑藥品。
5、將上述各藥材提取物經(jīng)60目篩網(wǎng)過濾，置混合機內(nèi)進行混合均勻，進行膠囊充填，即為本發(fā)明膠囊劑藥品。
權(quán)利要求
1.一種治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物，其特征在于本發(fā)明藥物是由下述組分按重量比制成桑枝2-6，當(dāng)歸2-6，防風(fēng)1-4，川牛膝1-4。
2.如權(quán)利要求1所述的一種治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物的制備方法，其特征在于(1)、按重量比選取下列藥物成分桑枝2-6，當(dāng)歸2-6，防風(fēng)1-4，川牛膝1-4；(2)、將上述藥材分別經(jīng)凈選，去除雜質(zhì)，清水淋洗干凈，切碎，容置于提取罐內(nèi)，分別加各藥物質(zhì)量8-16倍量的水，煮沸0.8-1.2小時，各藥液經(jīng)200目篩網(wǎng)過篩，取濾液，在減壓條件下，各提取液濃縮至相對密度為1.05-1.08(60℃熱測)的濃縮液，再經(jīng)120目篩過篩；(3)、將濾后各藥材，按上述步驟、條件再分別提取濃縮過濾液兩次；(4)、把上述各藥材三次提取的濃縮液合并，進行噴霧干燥，分別制得桑枝提取物、當(dāng)歸提取物、防風(fēng)提取物、川牛膝提取物；(5)、將上述各藥材提取物經(jīng)60目篩網(wǎng)過濾，置混合機內(nèi)進行混合均勻，進行膠囊充填，即為本發(fā)明膠囊劑藥品。
全文摘要
一種治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物及其制備方法，其按重量比選用下述組分，桑枝(2－6)、當(dāng)歸(2－6)、防風(fēng)(1－4)、川牛膝(1－4)；其制備方法是，將上述藥材分別經(jīng)洗凈、切碎、置于提取罐內(nèi)，分別加各藥物質(zhì)量8－16倍量的水，煮沸0.8－1.2小時，各藥液經(jīng)200目篩網(wǎng)過篩，取濾液，在減壓條件下，各提取液濃縮至相對密度為1.05－1.08(60℃熱測)的濃縮液，再經(jīng)120目篩過篩；將濾后各藥材，按上述步驟、條件再分別提取濃縮過濾液兩次；再把上述各藥材三次提取的濃縮液合并，噴霧干燥，分別得各提取物；將上述各藥材提取物經(jīng)60目篩網(wǎng)過篩，置混合機內(nèi)混合均勻，進行膠囊充填，即為本發(fā)明膠囊劑藥品；本發(fā)明藥適用于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的治療及預(yù)防保健。
文檔編號A61P19/00GK1820772SQ20051000738
公開日2006年8月23日 申請日期2005年2月16日 優(yōu)先權(quán)日2005年2月16日
發(fā)明者何國強, 程新敏, 楊成安, 魏英偉, 陳志剛, 黃錦華, 游佩珊, 劉子蕓, 林壯大 申請人:香港生物科技研究院有限公司