專(zhuān)利名稱：：一種治療肩周炎的外用中藥制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種治療肩周炎的制劑及其制備方法，特別是涉及一種治療肩周炎的外用中藥制劑及其制備方法。技術(shù)背景肩關(guān)節(jié)周?chē)缀?jiǎn)稱肩周炎，是指肩關(guān)節(jié)及其周?chē)浗M織退行性改變所引起的肌肉、肌腱、滑囊、關(guān)節(jié)囊等肩關(guān)節(jié)周?chē)浗M織的廣泛慢性炎癥反應(yīng)。其主要特點(diǎn)為肩部疼痛和肩關(guān)節(jié)活動(dòng)愛(ài)限，是中老年人的常見(jiàn)病、多發(fā)病。本病好發(fā)于4050歲以上中、老年人。多為單側(cè)發(fā)病，左肩多于右肩，雙肩同時(shí)發(fā)病者約為8%。由于以50歲左右發(fā)病者居多，所以又稱五十肩。又因?yàn)榛疾『蠹珀P(guān)節(jié)僵硬，功能活動(dòng)受限，好像被凍結(jié)了一樣，故又稱之為凍結(jié)肩或肩凝癥。肩關(guān)節(jié)周?chē)椎闹饕l(fā)病原因是肩周?chē)浗M織退行性改變，感受風(fēng)寒濕邪的侵襲，肩關(guān)節(jié)周?chē)捻g帶、肌腱等長(zhǎng)期勞損，肩部外傷和肩部活動(dòng)減少等。以上原因可引起肩關(guān)節(jié)周?chē)浗M織的急、慢性無(wú)菌性炎癥反應(yīng)，滲出、水腫，日久則肌腱、關(guān)節(jié)囊粘連，影響到關(guān)節(jié)的功能活動(dòng)。肩關(guān)節(jié)周?chē)椎呐R床表現(xiàn)主要有肩部疼痛、壓痛，活動(dòng)不便，有時(shí)夜間痛醒，睡覺(jué)時(shí)不能壓迫肩部，后期則表現(xiàn)為肩關(guān)節(jié)粘連，活動(dòng)功能明顯受限。患者常不能背手、梳頭、穿衣、脫衣、洗臉等動(dòng)作。目前有很多治療肩周炎的藥物和方法，中醫(yī)認(rèn)為本病由肩部感受風(fēng)寒所致，其治療根本還是以活血化瘀、行氣止痛為主。專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)枮镃N02127922.5的專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)了一種肩周炎痛貼及其制備工藝，它是以木別子、威靈仙、乳香、沒(méi)藥、冰片為原料藥制備而成，但其療效并沒(méi)有得到驗(yàn)證。吳昊峰在2003年又申請(qǐng)了專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)枮閆L200310111099.4的肩周炎痛貼及其制備工藝的專(zhuān)利申請(qǐng)，并在2006年獲得了授權(quán)。正如該專(zhuān)利中所說(shuō)的那樣，中藥藥物對(duì)于一些人群來(lái)講有用，而對(duì)于另外一些人來(lái)講效果又不明顯，所以需要提供更多種類(lèi)的藥物以供患者選擇。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供了一種治療肩周炎的外用中藥制劑及其制備方法，該中藥制劑所用到的原料藥種類(lèi)少，產(chǎn)品質(zhì)量較易控制，原料藥經(jīng)提取得到其有效成分使其更易吸收而發(fā)揮藥效，更好的提高本發(fā)明藥物的治療效果，從而提供一種能更加有效的治療肩周炎的外用中藥制劑。為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用如下的技術(shù)方案按照重量份計(jì)算，本發(fā)明治療肩周炎的外用中藥制劑是由黃芩79份、威靈仙1113份、青風(fēng)藤79份、乳香1214份、沒(méi)藥1214份、木鱉子79份、蓖麻子79份和麻油2025份制備而成。優(yōu)選地，選用如下的重量份配比黃芩8份、威靈仙12份、青風(fēng)藤8份、乳香13份、沒(méi)藥13份、木鱉子8份、蓖麻子8份和麻油21份。上述治療肩周炎的外用中藥制劑的制備方法按比例稱取取乳香和沒(méi)藥粉碎成細(xì)粉，混合均勻，得A品備用；取黃芩加水煎煮三次，合并三次煎煮液，濾過(guò)，濾渣棄去不用，濾液減壓濃縮至8(TC相對(duì)密度為1.201.25的清膏，得B品備用；取威靈仙和青風(fēng)藤放入80IO(TC的麻油中，浸漬2.54小時(shí)后過(guò)濾，濾渣棄去不用，在濾液中加入木鱉子和蓖麻子于8010(TC浸漬2.54小時(shí)后再次過(guò)濾，濾渣打漿制成油質(zhì)漿狀物，得C品備用，濾液于80IO(TC條件下加入蜂蠟并使之熔化，然后加入A品、B品和C品攪拌均勻，冷至室溫后按常規(guī)制劑工藝制成各種外用劑型。本發(fā)明外用貼劑是這樣制備的取乳香和沒(méi)藥粉碎成粒度為100目的細(xì)粉，混合均勻，得A品備用；取黃芩斷為13厘米的小段，加水煎煮三次，第一次加10倍量水煎煮1小時(shí)，第二次加8倍量水煎煮1小時(shí)，第三次加6倍量水煎煮1小時(shí)，合并三次煎煮液，濾過(guò)，濾渣棄去不用，濾液減壓濃縮至8(TC相對(duì)密度為1.201.25的清膏，得B品備用；取威靈仙和青風(fēng)藤放入9(TC的麻油中，浸漬3小時(shí)后過(guò)濾，濾渣棄去不用，在濾液中加入木鱉子和蓖麻子于90"C浸漬3小時(shí)后再次過(guò)濾，濾渣打漿制成油質(zhì)漿狀物，得C品備用，濾液于9(TC條件下加入蜂蠟并使之熔化，然后加入A品、B品和C品攪拌均勻，冷至室溫后用制片機(jī)制成厚薄均勻的圓形膏片，置于醫(yī)用透氣膠帶內(nèi)，制得外用貼劑。本發(fā)明配方選用黃芩、威靈仙、青風(fēng)藤、乳香、沒(méi)藥、木鱉子、蓖麻子和麻油進(jìn)行組合，將這些藥物組合在一起使各藥物協(xié)同增效，共奏活血化瘀、行氣止痛之功效，從而有效治療肩關(guān)節(jié)周?chē)姿碌募绮刻弁?、壓痛、活?dòng)受限等癥。本發(fā)明選用黃芩是因?yàn)辄S芩味苦，性寒，歸肺、膽、脾、大腸、小腸經(jīng)，清熱燥濕，瀉火解毒，止血，安胎，用于濕溫、暑溫胸悶嘔惡，濕熱痞滿，瀉痢，黃疸，肺熱咳嗽，高熱煩渴，血熱吐衄，癰腫瘡毒，胎動(dòng)不安。威靈仙味辛、咸，性溫，歸膀胱經(jīng)，祛風(fēng)除濕，通絡(luò)止痛，用于風(fēng)濕痹痛，肢體麻木，筋脈拘攣，屈伸不利，骨哽咽喉。青風(fēng)藤味苦、辛，性平，歸肝、脾經(jīng)，祛風(fēng)濕，通經(jīng)絡(luò)，利小便，用于風(fēng)濕痹痛，關(guān)節(jié)腫脹，麻痹瘙癢。乳香味辛、苦，性溫，活血止痛，用于心腹諸痛，筋脈拘攣，跌打損傷，瘡癰腫痛；外用消腫生肌。沒(méi)藥味苦，辛，性平，入肝、脾、心、腎經(jīng)，散血去瘀，消腫定痛，用于治跌打損傷、金瘡、筋骨、心腹諸痛、癥瘕、經(jīng)閉、癰疽腫痛、痔漏、目障。木鱉子，味苦微甘，性溫，有毒，入肝、脾、胃經(jīng)，散結(jié)，祛毒，治癰腫、疔瘡、瘰疬、痔瘡、無(wú)名腫毒、癬瘡，風(fēng)濕痹痛，筋脈拘攣。蓖麻子味甘辛，性平，有小毒，入大腸經(jīng)，消腫拔毒，瀉下通滯，治癰疽腫毒，瘰疬，喉痹，疥癩癬瘡，水腫腹?jié)M，大便燥結(jié)。麻油性味甘、涼，具有潤(rùn)腸通便、解毒生肌之功效，臨床還用麻油來(lái)煎熬膏藥，有生肌肉、止疼痛、消癰腫、補(bǔ)皮裂的作用，外用作為軟膏及硬膏基質(zhì)。為了確保本發(fā)明藥物的有效性和用藥安全，申請(qǐng)人進(jìn)行了有效性、安全性等動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。一、主要藥效學(xué)研究1、材料來(lái)源1.1藥膏的制備取乳香和沒(méi)藥粉碎成粒度為100目的細(xì)粉，將其混合均勻，得A品備用；取黃芩斷為2厘米的小段，加水煎煮三次，第一次加10倍量水煎煮1小時(shí)，第二次加8倍量水煎煮1小時(shí)，第三次加6倍量水煎煮1小時(shí)，合并三次煎煮液，用300目濾布濾過(guò)，濾渣棄去不用，所得濾液減壓濃縮至8(TC相對(duì)密度為1.201.25的清膏，清膏為B品備用；取威靈仙和青風(fēng)藤粉碎為最粗粉，放入9(TC的麻油中，浸漬3小時(shí)后用100目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾，濾渣棄去不用，在濾液中加入搗碎的木鱉子和蓖麻子于9(TC浸漬3小時(shí)后再次過(guò)濾，濾渣(浸漬后的木鱉子和蓖麻子)送入打漿機(jī)內(nèi)打漿并經(jīng)100目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾制成油質(zhì)漿狀物，油質(zhì)漿狀物為C品備用，濾液即為藥油。稱取適量蜂蠟于9(TC條件下使之熔于藥油中，然后加入A品、B品和C品后攪拌均勻，冷至室溫后即得膏塊，通過(guò)壓片機(jī)壓制成圓形外用膏片。1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物來(lái)源Wister大鼠，雌雄各半，體重160士10g，購(gòu)自中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心，合格證號(hào)SCXK11-00-0006。昆明種小鼠，雌雄各半，體重21士lg，由北京維通利華試驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)研究所提供，許可證號(hào)SCXK(京)-2002-0003;家兔，雌雄各半，體重2.2士0.2kg，購(gòu)自北京市海淀通利實(shí)驗(yàn)動(dòng)物養(yǎng)殖場(chǎng)，動(dòng)物合格證號(hào)SCXK(京)2000-0018。2、劑量設(shè)計(jì)60kg人一日用量為2.3g藥膏，貝1」0.04g/kg/d，按人與動(dòng)物等效劑量折算，試驗(yàn)中大鼠用量為O.4、0.2、0.1g/kg/d、小鼠為O.8、0.4、0.2g/kg/d、兔為O.36、0.18、0.09g/kg/d，均分別相當(dāng)于人用量的2倍、等倍及l(fā)/2倍。各劑量組均采用藥膏按等體積不等濃度皮膚涂抹給藥。藥物用賦形劑(麻油)調(diào)制成同體積。賦形劑麻油的劑量采用調(diào)制小劑量時(shí)所采用的量。3、方法和結(jié)果3.1、對(duì)家兔肩周炎模型的影響實(shí)驗(yàn)方法取健康家兔，雌雄不拘，將動(dòng)物按體重隨機(jī)分成6組空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽(yáng)性藥組、本發(fā)明藥膏大劑量組、中劑量組和小劑量組，每組8只(空白對(duì)照組6只)，雌雄各半，置于籠中常規(guī)飼養(yǎng)3天。取兔右側(cè)肩部外側(cè)脫毛，脫毛面積約為7X7cm2。除正常對(duì)照組外，家兔仰臥，后肢及左前肢固定，右前肢上臂于振蕩器固定連接。以2cm振幅，頻率160次/分平行搖動(dòng)肩關(guān)節(jié)，每次連續(xù)l小時(shí)，然后用冰塊外敷家兔右肩部，當(dāng)冰塊化盡，及時(shí)更換，每次持續(xù)0.5小時(shí)。此操作連續(xù)14天。造模1周后，給藥組動(dòng)物右肩部皮膚開(kāi)始涂抹給藥，空白對(duì)照組涂抹賦形劑(麻油)，模型對(duì)照組涂抹水，連續(xù)1周。給藥l周后將家兔處死，取右側(cè)肱二頭長(zhǎng)肌腱，用組織剪剝離去附著的腱周組織，每條肌腱均在同一部位取材2小塊，稱濕重后，立即放入5倍體積的冰蒸餾水中孕洗12小時(shí)。一塊組織用于羥脯氨酸測(cè)定，另一塊用于DNA和蛋白質(zhì)測(cè)定，同時(shí)耳緣靜脈采血測(cè)血液流變學(xué)相關(guān)指標(biāo)。各項(xiàng)指標(biāo)采用組間比較T檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，結(jié)果見(jiàn)表l、表2。測(cè)定方法(1)羥脯氨酸含量測(cè)定方法參照羥脯氨酸測(cè)試盒(樣本堿水解法)說(shuō)明書(shū).(2)DNA含量測(cè)定方法將冰蒸餾水孕洗的肌腱組織置于組織勻漿器中，加入0.05M檸檬酸鈉O.5ml，再加O.l麗aCl調(diào)PH為7.0，勻漿后3000轉(zhuǎn)/分離心，再用蒸餾水洗滌沉淀3次。向沉淀物加50X三氯乙酸3ml，混勻離心后取沉淀加3ml氯仿一甲醇(3:1)，離心后再加入50X三氯乙酸3ml于沉淀物中，加溫至9(TC，離心15分鐘，取上清液按紫外吸收法測(cè)定，在260nm波下測(cè)光密度值。公式為(OD260/U04)X稀釋液倍數(shù)〔[Ig/ml)DNA〔[i由)=-肌腱組織濕重(mg/ml)(3)蛋白質(zhì)含量測(cè)定方法取DNA測(cè)定剩下的沉淀物，力叫.5NNaOH5ml，溶解后用紫外吸收法測(cè)定，波長(zhǎng)為280nm，標(biāo)準(zhǔn)管用結(jié)晶牛血清白蛋白，根據(jù)光密度值計(jì)算，公式為蛋白質(zhì)含量(yg/mg)=1.45O.D280—0.740.D260(4)血液流變學(xué)相關(guān)指標(biāo)采用LG-R-80系列血液黏度測(cè)試儀和LG-B-190型細(xì)胞流變學(xué)測(cè)定儀測(cè)定。表1本發(fā)明藥營(yíng)3撥兔肩周炎翻的^0向<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>與空白對(duì)照組比較抑P〈0.01ttP〈0.05單位ug/mg組織與模型對(duì)照組比較*P〈0.05**P〈0.01表l結(jié)果顯示本發(fā)明藥膏三個(gè)劑量組均可明顯降低家兔肩周炎模型肌腱組織中羥脯胺酸的含量；大劑量組可降低DNA含量；大、中劑量組可降低蛋白質(zhì)含量，與模型對(duì)照組比較有顯著性差異(P〈0.05P〈0.01)。表2本發(fā)朋藥敦l家兔肩周炎模型血液流變的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>表2結(jié)果顯示本發(fā)明藥膏所試三個(gè)劑量組對(duì)家兔肩周炎模型的全血黏度、血漿黏度、還原黏度無(wú)明顯影響。本發(fā)明藥膏大、中劑量組可明顯降低家兔肩周炎模型的血球壓積，與模型對(duì)照組比較有顯著性差異(P〈0.05)。本發(fā)明藥膏給藥三個(gè)劑量組聚集指數(shù)及聚集指數(shù)積分面積明顯降低，與模型對(duì)照組比較有顯著性差別(P〈0.01，P〈0.05)，說(shuō)明本發(fā)明藥膏對(duì)家兔肩周炎模型的血液聚集性有明顯的抑制作用。本發(fā)明藥膏所試三個(gè)劑量組對(duì)家兔肩周炎模型血液的變形指數(shù)、變形指數(shù)積分面積無(wú)明顯影響。3.2、本發(fā)明藥膏對(duì)正常小鼠耳廓微循環(huán)的影響取健康昆明種小鼠50只，隨機(jī)分為5組，空白對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組(通絡(luò)祛痛膏)、本發(fā)明藥膏大、中、小劑量組。各組動(dòng)物按2。/。戊巴比妥鈉4mg/kg腹腔注射麻醉后，顯微錄象系統(tǒng)下觀察右耳前面同一部位微循環(huán)情況。然后開(kāi)始給藥，右耳背面涂抹藥物，空白對(duì)照組涂抹賦性劑(麻油)，每日1次，連續(xù)3天。第4天用溫水輕輕洗去殘留的藥膏后，立即再觀察右耳同一部位微循環(huán)變化情況。在監(jiān)視器下放大150倍測(cè)量小動(dòng)脈、小靜脈口徑。各項(xiàng)指標(biāo)采用差值組間比較T檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，見(jiàn)表3。表3本都月藥1^小SI5廓微循環(huán)的影卩向(小血管口徑及變化值)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>與空白對(duì)照組比較*P〈0.05**P〈0.01單位cm表3結(jié)果顯示本發(fā)明藥膏三個(gè)劑量組可不同程度的擴(kuò)張小鼠耳廓小動(dòng)脈及小靜脈，其給藥前后動(dòng)、靜脈口徑的變化值與對(duì)照組比較有顯著性差別(P〈0.05P〈0.01)。3.3、對(duì)小鼠醋酸疼痛模型的影響取小鼠60只，背部皮膚脫毛(面積為243cm2)，然后按體重隨機(jī)分為6組模型對(duì)照組、賦形劑組、陽(yáng)性藥對(duì)照組、本發(fā)明藥膏大、中、小劑量組，各給藥組皮膚涂抹給藥，模型對(duì)照組涂抹水、賦形劑組涂抹賦形劑(麻油)，每日一次，連續(xù)4天，第4天涂抹后1小時(shí)，各動(dòng)物腹腔注射O.5%的醋酸0.2ml/只，觀察20分鐘內(nèi)各小鼠出現(xiàn)典型扭體的次數(shù)，結(jié)果采用組間比較t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，見(jiàn)表4。表4本發(fā)明藥膏對(duì)醋酸所致小鼠疼痛模型的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>與模型對(duì)照組比較*P〈0.05**P〈0.01表4結(jié)果顯示注射醋酸后本發(fā)明藥膏三個(gè)劑量組小鼠的扭體數(shù)明顯少于模型對(duì)照組，與模型對(duì)照組比較有顯著性差別(P〈0.05P〈0.01)，說(shuō)明本發(fā)明藥膏對(duì)醋酸所致小鼠疼痛有明顯的止痛作用。3.4、抗炎作用3.4.1、對(duì)大鼠棉球肉芽腫形成的影響取大鼠60只，背部脫毛(面積為4X5cm2)。乙醚淺麻醉后無(wú)菌條件下背部剪一小切口，然后向兩側(cè)皮下植入20mg的滅菌棉球。術(shù)后隨機(jī)分組為6組，模型對(duì)照組、賦形劑組、陽(yáng)性藥組、本發(fā)明藥膏大、中、小劑量組。手術(shù)當(dāng)天開(kāi)始背部脫毛處皮膚涂抹給藥，每天一次，連續(xù)7天，第8天先稱體重，藥后l小時(shí)將大鼠斷頭處死，剝離并取出棉球肉芽組織。于60'C烘箱內(nèi)干燥12小時(shí)后稱重，即為肉芽腫干重，比較各組肉芽腫重量，同時(shí)取出大鼠的胸腺和脾臟測(cè)定臟器指數(shù)，結(jié)果采用組間比較t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，見(jiàn)表5。表5本發(fā)朋藥敦3大鼠棉球肉芽腫形成的割向<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>表5結(jié)果顯示本發(fā)明藥膏三個(gè)劑量組可明顯抑制大鼠棉球肉芽腫的形成，與模型對(duì)照組比較有顯著性差異(P〈0.05P〈0.01)。本發(fā)明藥膏三個(gè)劑量組對(duì)大鼠棉球肉芽腫實(shí)驗(yàn)脾臟和胸腺臟器指數(shù)無(wú)明顯影響。3.4.2、對(duì)小鼠皮膚毛細(xì)血管通透性的影響取小鼠60只，背部皮膚脫毛(面積為243cm2)，然后按體重隨機(jī)分為6組模型對(duì)照組、賦形劑組、陽(yáng)性藥對(duì)照組、本發(fā)明藥膏大、中、小劑量組，各給藥組皮膚涂抹給藥，模型對(duì)照組涂抹水、賦形劑組涂抹賦形劑，每日一次，連續(xù)3天，第4天用溫水去除藥物后，各鼠尾靜脈注射O.5%伊文思蘭液體0.lml/10g，隨即皮膚上滴加二甲苯40ul，15分鐘后處死動(dòng)物，取蘭染皮膚剪碎，放于蒸餾水丙酮(3:7)溶液2ml中，3000rpm離心15分鐘，取上清液于波長(zhǎng)590nm處測(cè)定光密度值。結(jié)果采用組間比較t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，見(jiàn)表6。表6本發(fā)明藥膏對(duì)小鼠皮膚毛細(xì)血管通透性的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>與模型對(duì)照組比較**P〈0.01表6結(jié)果顯示本發(fā)明藥膏大、中二個(gè)劑量組能顯著抑制二甲苯引起的小鼠皮膚毛細(xì)血管通透性的增高，與對(duì)照組比較有顯著性差異(P〈0.01)。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)從肩周炎形成的機(jī)理、血液流變學(xué)、改善微循環(huán)、炎癥、止痛5個(gè)方面探討了本發(fā)明藥膏的藥效學(xué)作用，結(jié)果顯示本發(fā)明藥膏三個(gè)劑量組對(duì)家兔肩周炎模型肌腱組織中羥脯胺酸的含量、DNA含量及蛋白質(zhì)含量均有不同程度的降低作用；可明顯降低肩周炎模型家兔血液的聚集性；擴(kuò)張小鼠耳部小動(dòng)、靜脈；對(duì)醋酸引發(fā)的小鼠疼痛有明顯的止痛作用；對(duì)小鼠皮膚毛細(xì)血管通透性有明顯抑制；對(duì)大鼠棉球性肉芽腫形成明顯抑制作用且不影響胸腺和脾臟指數(shù)。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)為本發(fā)明藥膏在臨床的進(jìn)一步應(yīng)用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。二、急性毒性實(shí)驗(yàn)1、材料來(lái)源1.1藥膏的制備如實(shí)驗(yàn)一、主要藥效學(xué)研究中l(wèi).l藥膏的制備方法。1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物來(lái)源新西蘭家兔，體重2.02.5kg，一級(jí)，雌雄各半。由北京市海淀區(qū)通利實(shí)驗(yàn)動(dòng)物養(yǎng)殖場(chǎng)提供，合格證號(hào)為scxk(京)2000-0018。2、方法和結(jié)果2.1.動(dòng)物皮膚的準(zhǔn)備各動(dòng)物于給藥前24小時(shí)背部脊柱兩側(cè)去毛(先用剪刀，然后用脫毛劑)，去毛面積為身體的10%，24小時(shí)后檢査皮膚的情況是否正常。破損皮膚組用砂紙輕擦至滲血為度。2.2.將家兔按上述設(shè)計(jì)分組，各給藥組在脫毛部位均勻涂抹藥物，空白對(duì)照組涂抹水，賦形劑組涂抹賦形劑。6小時(shí)一次，共涂抹2次，涂藥部位用一次性膠布固定。給藥24小時(shí)后用溫水洗去殘留的藥物。連續(xù)觀察7天。觀察指標(biāo)①觀察記錄給藥后動(dòng)物一般活動(dòng)、皮膚毛發(fā)、眼和黏膜的變化，皮膚所產(chǎn)生的刺激反應(yīng)，按表7評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)來(lái)判斷其刺激強(qiáng)度。②每天觀察呼吸、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、四肢活動(dòng)等方面的中毒表現(xiàn)③每天記錄動(dòng)物的體重。表7皮膚刺激反應(yīng)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>2.3、試驗(yàn)結(jié)果1)接受本發(fā)明藥膏的家兔在觀察期間，一般活動(dòng)正常，皮毛有光澤，攝食、大小便正常。2)呼吸、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、四肢活動(dòng)未表現(xiàn)出明顯急性毒性反應(yīng)。3)觀察期內(nèi)未發(fā)現(xiàn)家兔死亡4)局部皮膚所見(jiàn)對(duì)照組動(dòng)物完整皮膚、破損皮膚均未見(jiàn)紅斑或水腫；本發(fā)明藥膏三個(gè)劑量組動(dòng)物完整皮膚、破損皮膚均未見(jiàn)紅斑或水腫，結(jié)果見(jiàn)表85)各給藥組體重增長(zhǎng)通過(guò)組間比較T檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理和空白對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異，結(jié)果見(jiàn)表9。結(jié)論將本發(fā)明藥膏l(xiāng)g、2g、4g分別涂抹于家兔背部去毛后完整皮膚或破損皮膚，一日內(nèi)2次給藥，動(dòng)物的一般狀態(tài)、體重、皮膚毛發(fā)、眼及粘膜、呼吸、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、四肢活動(dòng)未表現(xiàn)出明顯急性毒性反應(yīng)，對(duì)局部皮膚也無(wú)明顯刺激作用，因此認(rèn)為本發(fā)明藥膏皮膚用藥是安全的。表8本發(fā)朗藥家兔皮膚急性毒性試驗(yàn)(皮膚觀察)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>表9本發(fā)明藥膏對(duì)家兔皮膚急性毒性試驗(yàn)(體重觀察)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>三、長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn)1、材料來(lái)源1.1藥膏的制備如實(shí)驗(yàn)一、主要藥效學(xué)研究中l(wèi).l藥膏的制備方法。1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物來(lái)源健康新西蘭家兔，體重2.02.5kg，雌雄各半。雌雄分籠飼養(yǎng)，每籠2只，自由取食及攝水。飼育在室溫2022。C的環(huán)境下。由北京通力試驗(yàn)動(dòng)物養(yǎng)殖場(chǎng)提供，動(dòng)物合格證號(hào)SCXK(京)2000-0018。2、方法和結(jié)果2.1、試驗(yàn)周期根據(jù)臨床試驗(yàn)療程7天，長(zhǎng)期毒性取其3倍以上，故定為連續(xù)給藥4周，停藥后恢復(fù)期2周。2.2、劑量及分組:<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>4g藥膏10大劑量組大劑量組2g藥膏10中劑量組中劑量組1g藥膏10小劑量組小劑量組2.3、動(dòng)物皮膚的準(zhǔn)備各動(dòng)物于給藥前24小時(shí)背部脊柱兩側(cè)去毛(先用剪刀，然后用脫毛劑)，去毛面積為身體的10%，24小時(shí)后檢査皮膚的情況。破損皮膚組用砂紙輕擦至滲血為度。2.4、將家兔按上述設(shè)計(jì)分組，各組動(dòng)物雌性各半，給藥組在脫毛部位均勻涂抹藥物，空白對(duì)照組涂抹水，賦形劑組涂抹賦形劑。每日一次，涂藥部位用一次性膠布固定，每次涂抹24小時(shí)后用溫水洗去殘留的藥物后再涂抹。連續(xù)4周，分別于停藥后和恢復(fù)期2周解剖動(dòng)物2.5、觀察指標(biāo)1)一般情況給藥期間，觀察記錄動(dòng)物的精神、活動(dòng)、毛發(fā)、糞便等情況。2)每日觀察動(dòng)物皮膚、粘膜的反應(yīng)，按表7判斷皮膚的刺激反應(yīng)強(qiáng)度和過(guò)敏程度。3)每周稱體重。4)外周血象測(cè)外周血象，作白細(xì)胞分類(lèi)。5)生化指標(biāo)測(cè)血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶(ALT)、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶(AST)、尿素氮(BUN)、肌酐(Crea)、堿性磷酸酶(ALP)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、總膽固醇(T-CH0)、葡萄糖(GLU)、總膽紅素(T-BIL)。6)重要臟器重量指數(shù)。7)重要臟器病理組織學(xué)檢査。試驗(yàn)結(jié)果采用組間比較T檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理2.6、試驗(yàn)結(jié)果1)給藥期間，三個(gè)劑量組家兔一般活動(dòng)、精神狀態(tài)、毛發(fā)、糞便等均未見(jiàn)明顯異常。2)體重增長(zhǎng)與空白對(duì)照組比較無(wú)明顯差異(表IO);表10本發(fā)朋藥膏對(duì)家兔長(zhǎng)期毒注試驗(yàn)體重的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>3)外周血象，包括紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血紅蛋白、紅細(xì)胞壓積、血小板、白細(xì)胞分類(lèi)均在正常范圍內(nèi)波動(dòng)(表ll、12);表11本發(fā)明藥育對(duì)家兔長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)血象的影響(藥后1個(gè)月)<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>4)生化指標(biāo)包括ALT、AST、BUN、Crea、ALP、TP、ALB、T-CHO、GUJ、T-BIL均在正常范圍內(nèi)波動(dòng)(表13、14);表13本發(fā)明藥育對(duì)家兔長(zhǎng)期毒性生化指標(biāo)的影響(藥后l個(gè)月)<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>表14本發(fā)明藥育對(duì)家兔長(zhǎng)期差性生化指標(biāo)的影響(恢復(fù)期)<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>5)重要臟器包括心、肝、脾、肺、腎、胸腺、腎上腺、腦、子宮、卵巢、睪丸、副睪、前列腺的重量系數(shù)與空白對(duì)照組相比無(wú)顯著性差異(表15、16)。表15本發(fā)朗藥敦1家兔長(zhǎng)期毒注臟識(shí)旨數(shù)的影響(藥后l個(gè)月)<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>表1S本都月藥t^家兔長(zhǎng)期壽注臟謝旨數(shù)的影響(恢復(fù)期)<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>6)完整皮膚的對(duì)照組和本發(fā)明藥膏三個(gè)劑量組給藥期間皮膚無(wú)明顯紅腫、脫屑等表現(xiàn);破損皮膚的對(duì)照組和本發(fā)明藥膏三個(gè)劑量組給藥期間個(gè)別動(dòng)物的皮膚輕微發(fā)紅，無(wú)明顯水腫，主要發(fā)生在皮膚用砂紙摩擦后，通常在2—3天后好轉(zhuǎn)，并非藥物引起(見(jiàn)表17、18)。7)各主要臟器肉眼檢査未見(jiàn)明顯腫大、充血、粘連、壞死等病理變化。用藥部位皮膚光滑，無(wú)紅腫，無(wú)斑丘疹、脫屑、粗糙、無(wú)色素沉著；8)病理組織學(xué)檢査，未發(fā)現(xiàn)有由于藥物引起的病理形態(tài)學(xué)方面的改變。結(jié)論本發(fā)明藥膏三個(gè)劑量組涂抹家兔完整皮膚和破損皮膚，連續(xù)1個(gè)月，對(duì)家兔體重、外周血象、十項(xiàng)生化指標(biāo)、臟器指數(shù)及皮膚粘膜無(wú)明顯影響；家兔主要臟器無(wú)明顯由藥物引起的病理改變，說(shuō)明本發(fā)明藥膏在所試劑量范圍內(nèi)無(wú)明顯毒副反應(yīng)，是比較安全的。表IT本發(fā)明藥昔家兔長(zhǎng)期垂性試驗(yàn)皮膚瞎況(芫整皮膚組)<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>表18本發(fā)明藥昔家兔長(zhǎng)期垂性試驗(yàn)皮膚瞎況(破損皮膚組)<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>四、家兔皮膚刺激實(shí)驗(yàn)及豚鼠過(guò)敏實(shí)驗(yàn)1、材料來(lái)源1.1藥膏的制備如實(shí)驗(yàn)一、主要藥效學(xué)研究中l(wèi).l藥膏的制備方法。1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物來(lái)源新西蘭家兔，體重2.02.5kg，一級(jí)，雌雄各半。豚鼠，一級(jí)，體重250300g，均由北京市海淀區(qū)通利實(shí)驗(yàn)動(dòng)物養(yǎng)殖場(chǎng)提供，合格證號(hào)為scxk(京)2000-0018。2、方法和結(jié)果2.1、對(duì)家兔單次給藥皮膚刺激性試驗(yàn)試驗(yàn)方法動(dòng)物皮膚的準(zhǔn)備各動(dòng)物于給藥前24小時(shí)背部脊柱兩側(cè)去毛(先用剪刀，然后用脫毛劑)，去毛面積為身體的10%，24小時(shí)后檢査皮膚的情況。破損皮膚組用砂紙輕擦至滲血為度試驗(yàn)采用同體左右側(cè)自身對(duì)比，分完整皮膚組及破損皮膚組。每組家兔8只，去毛處左側(cè)涂本發(fā)明藥膏l(xiāng)g，右側(cè)涂賦性劑作為對(duì)照，涂抹部位用一次性膠布固定，每只動(dòng)物分籠飼養(yǎng)。涂抹24小時(shí)后用溫水洗去殘留藥物，分別記錄l、24、48、72小時(shí)涂抹部位皮膚情況。試驗(yàn)結(jié)果觀察期間完整皮膚組和破損皮膚組動(dòng)物對(duì)照側(cè)和給藥側(cè)均未見(jiàn)紅斑或水腫，結(jié)果見(jiàn)表19表19本發(fā)朋藥敦J家兔皮膚刺激試驗(yàn)(単改給藥)<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>2.2、對(duì)家兔多次給藥皮膚刺激性試驗(yàn)試驗(yàn)方法步驟同一次給藥。連續(xù)涂抹給藥7天，停藥后觀察一周，除觀察并記錄每日的紅斑及水腫情況進(jìn)行評(píng)分外，還觀察涂抹部位是否有色素沉著、出血點(diǎn)，皮膚粗糙等情況試驗(yàn)結(jié)果完整皮膚組接受本發(fā)明藥膏的家兔在整個(gè)觀察期間對(duì)照側(cè)和給藥側(cè)均未見(jiàn)紅斑或水腫；破損皮膚組動(dòng)物從給藥第5天開(kāi)始對(duì)照側(cè)和給藥側(cè)在劃痕處可見(jiàn)輕度的發(fā)紅，停藥后逐日減輕，至停藥第7天觀察結(jié)束時(shí)所有動(dòng)物均已恢復(fù)，提示此反應(yīng)為機(jī)械擦傷皮膚后所引起的反應(yīng)，與受試藥物無(wú)關(guān)；所有動(dòng)物涂抹部位皮膚未見(jiàn)色素沉著，出血點(diǎn)、皮膚粗糙等現(xiàn)象。結(jié)果見(jiàn)表20表20本都月藥敦t家被膚刺激試驗(yàn)(多l(xiāng)哈藥)<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>2.3、本發(fā)明藥膏對(duì)豚鼠皮膚過(guò)敏試驗(yàn)試驗(yàn)方法皮膚準(zhǔn)備各動(dòng)物于給藥前24小時(shí)背部脊柱兩側(cè)去毛(先用剪刀，然后用脫毛劑)，去毛面積為身體的10%，24小時(shí)后檢査皮膚的情況。分組將豚鼠按體重隨機(jī)分成3組，每組10只，雌雄各半，第一組為本發(fā)明藥膏組，第二組為賦形劑對(duì)照組，第三組為致敏劑對(duì)照組。致敏接觸取受試物0.2g涂抹在豚鼠左側(cè)脫毛區(qū)，一次性膠布固定保持6小時(shí)。第7天、第14天再涂抹一次，共計(jì)3次，陽(yáng)性致敏物組涂抹1%2，4一二硝基氯苯，賦形劑對(duì)照組在同等情況下涂抹賦形劑。激發(fā)接觸于末次給藥致敏后14天，將受試物0.2g涂抹豚鼠背部右側(cè)脫毛區(qū)，陽(yáng)性對(duì)照用O.1%2，4一二硝基氯苯，6小時(shí)后去除藥物即刻觀察，然后于24、48、72小時(shí)再次觀察皮膚過(guò)敏反應(yīng)情況，按表7評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)及致敏發(fā)生率推斷致敏性，致敏發(fā)生率的計(jì)算為將出現(xiàn)皮膚紅斑、水腫或全身性過(guò)敏反應(yīng)的動(dòng)物例數(shù)(不論程度輕重)，除以受試動(dòng)物總數(shù)，即致敏發(fā)生率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果1)實(shí)驗(yàn)期間動(dòng)物活動(dòng)自如，大小便正常，無(wú)站立不穩(wěn)，哮喘、休克等全身癥狀。2)局部皮膚所見(jiàn)本發(fā)明藥膏和水對(duì)照組豚鼠均無(wú)一例發(fā)生皮膚過(guò)敏反應(yīng)，而陽(yáng)性對(duì)照藥2，4-二硝基氯苯組的10只豚鼠出現(xiàn)不同程度的致敏，致敏率為100%，72小時(shí)基本恢復(fù)正常。結(jié)果見(jiàn)表21。3)對(duì)豚鼠皮膚過(guò)敏試驗(yàn)體重?zé)o明顯影響，結(jié)果見(jiàn)表22。表21本發(fā)朗藥敦t豚鼠皮膚的過(guò)敏，<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>表22本發(fā)朋藥敦t胨鼠皮膚的過(guò)敏，(體重)<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>結(jié)論1)將本發(fā)明藥膏1g—次涂抹或多次涂抹家兔完整皮膚和破損皮膚后均不弓1起明顯的刺激作用。2)本發(fā)明藥膏涂抹于豚鼠皮膚后不引起明顯的過(guò)敏反應(yīng)。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明是以常見(jiàn)的天然動(dòng)植物藥為原料組成，產(chǎn)品配方來(lái)源于苗醫(yī)世代相傳的秘方，經(jīng)苗家特殊工藝精心制成。產(chǎn)品配方構(gòu)成比較簡(jiǎn)單，產(chǎn)品質(zhì)量較易控制，原料藥經(jīng)提取得到其有效成分使其更易吸收而發(fā)揮藥效，更好的提高本發(fā)明藥物的治療效果，從而提供一種能更加有效的治療肩周炎的外用中藥制劑。本發(fā)明中藥制劑的制備方法簡(jiǎn)單，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，無(wú)毒副作用，無(wú)刺激性，非致敏性，臨床可長(zhǎng)期使用，為患者提供了一種用藥成本低、療效好的治療肩周炎的外用藥物。具體實(shí)施方式實(shí)施例l:本發(fā)明外用貼劑的制備方法取乳香260g和沒(méi)藥260g粉碎成粒度為100目的細(xì)粉，將其混合均勻，得A品備用；取黃芩160g斷為2厘米的小段，加水煎煮三次，第一次加10倍量水煎煮1小時(shí)，第二次加8倍量水煎煮1小時(shí)，第三次加6倍量水煎煮1小時(shí)，合并三次煎煮液，用300目濾布濾過(guò)，濾渣棄去不用，所得濾液減壓濃縮至8(TC相對(duì)密度為1.201.25的清膏，清膏為B品備用；取威靈仙240g和青風(fēng)藤160g粉碎為最粗粉，放入9(TC的麻油中，浸漬3小時(shí)后用100目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾，濾渣棄去不用，在濾液中加入搗碎的木鱉子160g和蓖麻子160g于9(TC浸漬3小時(shí)后再次過(guò)濾，濾渣(浸漬后的木鱉子和蓖麻子)送入打漿機(jī)內(nèi)打漿并經(jīng)100目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾制成油質(zhì)漿狀物，油質(zhì)漿狀物為C品備用，濾液即為藥油。稱取適量蜂蠟(蜂蠟、A品、B品、C品和藥油的總重量為2300g)于9(TC條件下使之熔于藥油中，然后加入A品、B品和C品后攪拌均勻，冷至室溫后用制片機(jī)制成厚薄均勻的圓形膏片，置于醫(yī)用透氣膠帶內(nèi)，分裝，即制得本發(fā)明的外用貼劑。性狀本品為黑色圓形膏片，油潤(rùn)細(xì)膩，無(wú)飛邊缺口，氣微香。功能主治活血化瘀、行氣止痛。用于肩關(guān)節(jié)周?chē)姿碌募绮刻弁础和?、活?dòng)受限等癥。用法用量外用，傷處洗凈擦干，將鐵膏與隔離紙分開(kāi)，然后對(duì)準(zhǔn)痛處貼牢，24小時(shí)換藥膏一次，7天為一療程。注意事項(xiàng)過(guò)敏者慎用，孕婦忌用，禁止內(nèi)服。規(guī)格2.3g/片。儲(chǔ)藏密封，置干燥處。有效期暫定24個(gè)月。實(shí)施例2:本發(fā)明外用膏藥的制備方法取乳香240g和沒(méi)藥240g粉碎成細(xì)粉，混合均勻，得A品備用；取黃芩140g斷為l厘米的小段，加水煎煮三次，每次煎煮l小時(shí)，加水量以沒(méi)過(guò)藥材為宜，合并三次煎煮液，濾過(guò)，濾渣棄去不用，濾液減壓濃縮至8(TC相對(duì)密度為1.201.25的清膏，得B品備用；取威靈仙260g和青風(fēng)藤180g放入8(TC的麻油500g中，浸漬4小時(shí)后過(guò)濾，濾渣棄去不用，在濾液中加入木鱉子和蓖麻子于8(TC浸漬4小時(shí)后再次過(guò)濾，濾渣打漿制成油質(zhì)漿狀物，得C品備用，濾液即為藥油。稱取適量蜂蠟(蜂蠟、A品、B品、C品和藥油的總重量為2300g)于8(TC條件下使之熔于藥油中，然后加入A品、B品和C品攪拌均勻，冷至室溫后按常規(guī)制劑工藝制成膏劑實(shí)施例3:本發(fā)明外用貼劑的制備方法取乳香280g和沒(méi)藥280g粉碎成粒度為100目的細(xì)粉，將其混合均勻，得A品備用；取黃芩180g斷為3厘米的小段，加水煎煮三次，第一次加10倍量水煎煮1小時(shí)，第二次加8倍量水煎煮1小時(shí)，第三次加6倍量水煎煮1小時(shí)，合并三次煎煮液，用300目濾布濾過(guò)，濾渣棄去不用，所得濾液減壓濃縮至8(TC相對(duì)密度為1.201.25的清膏，清膏為B品備用；取威靈仙220g和青風(fēng)藤140g粉碎為最粗粉，放入10(TC的麻油400g中，浸漬2.5小時(shí)后用100目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾，濾渣棄去不用，在濾液中加入搗碎的木鱉子140g和蓖麻子140g于10(TC浸漬2.5小時(shí)后再次過(guò)濾，濾渣(浸漬后的木鱉子和蓖麻子)送入打漿機(jī)內(nèi)打漿并經(jīng)100目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾制成油質(zhì)漿狀物，油質(zhì)漿狀物為C品備用，濾液即為藥油。稱取適量蜂蠟(蜂蠟、A品、B品、C品和藥油的總重量為2300g)于10(TC條件下使之熔于藥油中，然后加入A品、B品和C品后攪拌均勻，冷至室溫后用制片機(jī)制成厚薄均勻的圓形膏片，置于醫(yī)用透氣膠帶內(nèi)，分裝，即制得本發(fā)明的外用貼劑。權(quán)利要求1.一種治療肩周炎的外用中藥制劑，其特征在于按照重量份計(jì)算，它是由黃芩7～9份、威靈仙11～13份、青風(fēng)藤7～9份、乳香12～14份、沒(méi)藥12～14份、木鱉子7～9份、蓖麻子7～9份和麻油20～25份制備而成。全文摘要本發(fā)明提供了一種治療肩周炎的外用中藥制劑及其制備方法，它是由黃芩、威靈仙、青風(fēng)藤、乳香、沒(méi)藥、木鱉子、蓖麻子和麻油制備而成。將黃芩經(jīng)水煎煮提取濃縮得清膏。威靈仙和青風(fēng)藤用麻油先浸漬，所得的藥油再浸漬木鱉子和蓖麻子，浸漬后的木鱉子和蓖麻子打成漿狀物，而所得的藥油加入蜂蠟使之熔化。乳香和沒(méi)藥粉碎成細(xì)粉，然后將細(xì)粉、清膏、漿狀物和藥油混合均勻，按照常規(guī)制劑工藝制成各種劑型。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明以常見(jiàn)的中草藥為原料，且所用到的原料藥種類(lèi)少，產(chǎn)品質(zhì)量較易控制，原料藥經(jīng)提取得到其有效成分使其更易吸收而發(fā)揮藥效，為患者提供了一種用藥成本低、療效好的治療肩周炎的外用藥物。文檔編號(hào)A61K36/716GK101156903SQ20071020191公開(kāi)日2008年4月9日申請(qǐng)日期2007年9月29日優(yōu)先權(quán)日2007年9月29日發(fā)明者何宗祥,張和明申請(qǐng)人:貴州心意藥業(yè)有限責(zé)任公司