專利名稱：一種采用速凍與脈沖技術提高藤本豆總黃酮提取率的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種采用速凍與脈沖技術提高藤本豆總黃酮提取率的方法，屬于天然藥物化學提取技術領域。
背景技術：
藤本豆是利用野生“藤本豆”母本雄性不孕與大油豆雜交、粒性誘發(fā)、自交分離、風土馴化等科技手段，研發(fā)出的一種高效農(nóng)業(yè)蔬菜新物種，兼?zhèn)浼Z、油、菜、林、花、飲、藥等多樣型。研究表明，藤本豆營養(yǎng)極其豐富，富含全價優(yōu)質(zhì)蛋白和配比均衡的十八種氨基酸，其對人體所必需氨基酸含量高達50%以上，是一種比大豆蛋白更具營養(yǎng)價值的優(yōu)質(zhì)蛋白資源。另外，藤本豆含黃酮、多糖等多種活性成分，藥用和保健功能顯著，能明顯增強T淋巴細胞和B淋巴細胞的增殖，特別是對高膽固醇癥，具有調(diào)節(jié)血清膽固醇水平功能，對心腦血管有很好的保健功效。黃酮類化合物是一類在自然界廣泛分布的多酚類物質(zhì)，也是目前備受關注的天然活性產(chǎn)物之一。目前，黃酮的主要提取方法有:熱水提取法、有機溶劑萃取法、堿性水提法、超聲提取法、微波法、超臨界萃取法。其中，熱水提取法設備簡單，但提取率低；有機溶劑萃取法是目前國內(nèi)外使用最廣泛的提取方法，但存在排污量大、有效成分損失多、容積殘留及提取效率低等缺陷；堿性水提法具有簡單易行、經(jīng)濟方便等特點，但存在強堿污染環(huán)境問題；超聲提取法能耗低、不破壞有效成分，但大量提取時效率低；微波法提取時間短、提取率高，但其成品的組成不是非常穩(wěn)定；超臨界萃取法速度快、滲透能力強、溶解萃取效率高，但設備投資高，提取成本高。而本項目采用速凍與脈沖強光聯(lián)合處理提取藤本豆總黃酮，提取率高、成本低，且無環(huán)境污染。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種采用速凍與脈沖技術提高藤本豆總黃酮提取率的方法，該方法具有提取率高、無污染、過程易控制等特點。本發(fā)明的技術方案如下:
所述方法包括如下步驟:
(1)干燥:采收后的鮮藤本豆經(jīng)曬干、剝殼、整理后得到干燥后的藤本豆籽粒；
(2)粉碎:將干燥后的藤本豆籽粒進行粉碎，粒度為20 40目，得到藤本豆粉；
(3)速凍:將藤本豆粉放入-40 -18°C速凍設備中速凍1.5 2.5h ;
(4)脈沖強光輔助提取:以w/vl:15 25的固液比迅速將速凍后的藤本豆粉與體積比為50 60%乙醇混勻后，放入容器中即刻進行脈沖強光照射；然后在溫度40 60°C下提取I 2h，最后過濾并收集提取液，得到藤本豆黃酮粗品。其中w/v表示質(zhì)量體積比,單位為g/mL或kg/L。步驟(I)中曬干后的藤本豆的含水量為12 14%。步驟(4)中所述容器為正方形或長方形，照射時物料容器表面開口，且容器內(nèi)物料層厚度為4 8 cm。步驟(4)中所述脈沖強光的強度為3.2 4.9J/cm2,照射距離為6 12cm，照射時間為2 4s，每秒閃照3次。本發(fā)明的顯著優(yōu)點:
a)本發(fā)明采用速凍及脈沖強光聯(lián)合處理技術進行藤本豆總黃酮的制備，可以獲得提取率高、質(zhì)量優(yōu)且無污染的黃酮類產(chǎn)品。b)本發(fā)明采用速凍及脈沖強光聯(lián)合處理技術進行藤本豆總黃酮的制備，一方面利用速凍及脈沖強光聯(lián)合處理破壞了藤本豆細胞壁，有利于細胞內(nèi)黃酮的浸出，最大程度提高了提取率；另一方面利用脈沖強光瞬時、高強度的脈沖光能量，縮短了后續(xù)提取時間，大大提聞了提取效率。c)本發(fā)明采用速凍及脈沖強光聯(lián)合處理技術進行藤本豆總黃酮的制備，制備工藝簡單，操作方便，能滿足工業(yè)化生產(chǎn)的要求。
具體實施例方式以下是本發(fā)明的幾個具 體實施例，進一步說明本發(fā)明，但是本發(fā)明不僅限于此。實施例1
取IOOg鮮藤本豆經(jīng)曬干(含水率12.6%)、剝殼、整理后，粉碎至40目，放入-40°C速凍設備中速凍1.5h ;然后加入體積分數(shù)55%的乙醇(固液比1:20)混均，裝入容器后(物料層厚度4 cm)用脈沖強光照射4s (脈沖強光的強度為4.9J/cm2,照射距離為12cm);再在40°C下提取2h后過濾并收集提取液，制得藤本豆黃酮粗品。測定:采用紫外分光光度法，以蘆丁作為標準對照品，繪制蘆丁標準曲線，測定藤本豆中總黃酮的含量。(I)蘆丁標準曲線的繪制
準確稱取120°C下干燥恒重的蘆丁標準品12.5mg，用濃度為60%的微熱乙醇定容至50.0mL，搖勻，待用。準確吸取蘆丁標準品0、0.4,0.8,1.2,1.6,2.0,2.4mL于6支比色管中，分別加入濃度為60%的乙醇至2.4 mL，然后加入0.4 mL 5%亞硝酸鈉，搖勻，放置6min ;力口人0.4mL10%硝酸鋁溶液，搖勻，放置6 min;再加入4.0ml lmol/L氫氧化鈉，搖勻，放置l(Tl5min，測定吸光度。以蘆丁標準品濃度(C)為橫坐標，吸光度(y)為縱坐標繪制標準曲線。(2)藤本豆中總黃酮含量的測定
精密吸取樣品溶液2mL，置于IOmL帶塞玻璃管中，按標準曲線法測定總黃酮含量，根據(jù)下列公式計算總黃酮提取率?？傸S酮提取率Y(mg/g) =CV/M 式中:C為樣品溶液中黃酮濃度mg/mL ；
V為樣品溶液總體積mL ；
M為稱取的藤本豆質(zhì)量g。根據(jù)上述公式，藤本豆中總黃酮的提取率為5.32 mg/g ;不經(jīng)速凍與脈沖強光處理的藤本豆(其它條件一樣)總黃酮提取率為4.96 mg/g ;不經(jīng)脈沖強光處理而經(jīng)速凍處理的藤本豆(其它條件一樣)總黃酮提取率為5.07mg/g ;不經(jīng)速凍處理而經(jīng)脈沖強光處理的藤本豆(其它條件一樣)總黃酮提取率為5.12 mg/g。可見，采用速凍及脈沖強光聯(lián)合處理技術進行藤本豆總黃酮的制備，可以獲得提取率高、質(zhì)量優(yōu)且無污染的黃酮類產(chǎn)品。實施例2
取200g鮮藤本豆經(jīng)曬干(含水率13.1%)、剝殼、整理后，粉碎至20目，放入-18°C速凍設備中速凍2.5h ;然后加入體積分數(shù)60%的乙醇(固液比1:25)混均，裝入容器后(物料層厚度6cm)用脈沖強光照射2s (脈沖強光的強度為4.9J/cm2,照射距離為6cm);再在50°C下提取1.5h后過濾并收集提取液，制得藤本豆黃酮粗品。測定方法同實施例1:采用紫外分光光度法，以蘆丁作為標準對照品，繪制蘆丁標準曲線，測定藤本豆中總黃酮的含量為5.21 mg/g ;不經(jīng)速凍與脈沖強光處理的20目藤本豆(其它條件一樣)總黃酮提取率為4.85 mg/g ;不經(jīng)脈沖強光處理而經(jīng)速凍處理的藤本豆(其它條件一樣)總黃酮提取率為4.95mg/g ;不經(jīng)速凍處理而經(jīng)脈沖強光處理的藤本豆(其它條件一樣)總黃酮提取率為5.03 mg/g。實施例3
取180g鮮藤本豆經(jīng)曬干(含水率12.3%)、剝殼、整理后，粉碎至30目，放入_30°C速凍設備中速凍2h ;然后加入體積分數(shù)50%的乙醇(固液比1:15)混均，裝入容器后(物料層厚度8cm)用脈沖強光照射3s (脈沖強光的強度為3.2J/cm2，照射距離為8cm);再在60°C下提取Ih后過濾并收集提取液，制得藤本豆黃酮粗品。測定方法同實施例1:采用紫外分光光度法，以蘆丁作為標準對照品，繪制蘆丁標準曲線，測定藤本豆中總黃酮的含量為5.42 mg/g ;不經(jīng)速凍與脈沖強光處理的20目藤本豆(其它條件一樣)總黃酮提取率為5.01 mg/g ;不經(jīng)脈沖強光處理而經(jīng)速凍處理的藤本豆(其它條件一樣)總黃酮提取率為5 .12mg/g ;不經(jīng)速凍處理而經(jīng)脈沖強光處理的藤本豆(其它條件一樣)總黃酮提取率為5.17mg/g。
權利要求
1.一種采用速凍與脈沖技術提高藤本豆總黃酮提取率的方法，其特征在于所述方法包括如下步驟: (1)干燥:采收后的鮮藤本豆經(jīng)曬干、剝殼、整理后得到干燥后的藤本豆籽粒； (2)粉碎:將干燥后的藤本豆籽粒進行粉碎，粒度為20 40目，得到藤本豆粉； (3)速凍:將藤本豆粉放入-40 -18°C速凍設備中速凍1.5 2.5h ; (4)脈沖強光輔助提取:以w/vl:15 25的固液比迅速將速凍后的藤本豆粉與體積比為50 60%乙醇混勻后，放入容器中即刻進行脈沖強光照射；然后在溫度40 60°C下提取I 2h，最后過濾并收集提取液，得到藤本豆黃酮粗品。
2.根據(jù)權利要求1所述的一種采用速凍與脈沖技術提高藤本豆總黃酮提取率的方法，其特征在于:步驟(I)中曬干后的藤本豆的含水量為12 14%。
3.根據(jù)權利要求1所述的一種采用速凍與脈沖技術提高藤本豆總黃酮提取率的方法，其特征在于:步驟(4)中所述容器為正方形或長方形，照射時物料容器表面開口，且容器內(nèi)物料層厚度為4 8 cm。
4.根據(jù)權利要求1所述的一種采用速凍與脈沖技術提高藤本豆總黃酮提取率的方法，其特征在于:步驟(4)中所述脈沖強光的強度為3.2 4.9J/cm2，照射距離為6 12cm，照射時間為2 4s，每秒閃照3 次。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種采用速凍與脈沖技術提高藤本豆總黃酮提取率的方法，屬于天然藥物化學提取技術領域。該方法通過將干燥后的藤本豆籽粒進行粉碎、速凍，然后結合脈沖強光輔助提取，最后過濾并收集提取液，得到藤本豆黃酮粗品。通過速凍及脈沖強光聯(lián)合處理技術制備藤本豆總黃酮，工藝科學合理、操作簡單、步驟少、提取流程快、提取得率高、成品穩(wěn)定、成本低，適合工業(yè)化生產(chǎn)要求，且無環(huán)境污染。
文檔編號A61K36/48GK103191177SQ20131011735
公開日2013年7月10日 申請日期2013年4月7日 優(yōu)先權日2013年4月7日
發(fā)明者陳君琛, 沈恒勝, 賴譜富, 翁敏劼, 賴鋒連 申請人:福建省農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)業(yè)工程技術研究所