專利名稱：芋螺毒素so3的治療性應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及芋螺毒素SO3的治療性應(yīng)用。
背景技術(shù)：
缺血性腦損傷是一種嚴重危害健康的疾病。多年來人們對腦缺血造成的神經(jīng)元損傷的病理生理基礎(chǔ)進行了深入的研究，發(fā)現(xiàn)鈣離子在此過程中起著關(guān)鍵的作用。神經(jīng)元細胞膜上的電壓敏感型Ca2+通道(Voltage-Sensitive Calcium Channels，VSCCs)負責Ca2+的內(nèi)流。在生理情況下，神經(jīng)細胞外Ca2+濃度為1～2mmol/L，而胞內(nèi)則小于200nmol/L，相差10,000多倍，這種差別是細胞執(zhí)行正常生理功能必不可少的。腦缺血后，VSCCs開放延長，Ca2+內(nèi)流增加，胞內(nèi)Ca2+水平很快升高，而胞外則降至原來濃度1/10。體外海馬腦片CA1細胞實驗證實缺氧可誘導細胞內(nèi)Ca2+([Ca2+]i)的增加，是神經(jīng)元及突觸功能發(fā)生不可逆損傷的重要原因。胞內(nèi)Ca2+超載可觸發(fā)一系列損傷性病理生理改變，導致興奮性氨基酸(EAA)如谷氨酸等大量釋放，造成細胞持久過度興奮；激活磷脂酶A2(PLA2)和激活磷脂酶C(PLC)，引起花生四烯酸(AA)級聯(lián)反應(yīng)，破壞細胞正常膜結(jié)構(gòu)，促進氧自由基生成；異常激活Ca2+依賴性蛋白酶、核酸酶，破壞細胞骨架，降解DNA分子；胞內(nèi)Ca2+超載超過一定程度還可以引起線粒體Ca2+超載，破壞氧化磷酸化過程。因此缺血損傷進程中對VSCCS進行干預(yù)是一種重要的治療手段。研究表明，L型VSCCs拮抗劑DHPs在輕中度腦缺血中早期運用，可以起到一定程度的保護作用。這就提示作為N型VSCCs阻斷劑在缺血性腦損傷中的潛在保護作用。
N型VSCCs阻斷劑芋螺毒素MVIIA是一種含25個氨基酸殘基的短肽，其氨基酸序列為CKGKGAKCSRLMYDCCTGSCRSGKC(SEQ IDNO2)。在國外，動物模型實驗研究首先證明了芋螺毒素MVIIA有神經(jīng)保護作用。Valentino等(Proc Nalt Acad Sci USA.1993，907894-7897)首先運用大鼠全腦缺血模型對MVIIA的神經(jīng)保護作用進行了研究。大鼠全腦缺血模型(全腦缺血處理15min后恢復供血)建立后，立即經(jīng)靜脈注射MVIIA(15mg/kg)，5天后進行檢測。實驗結(jié)果表明海馬CA1區(qū)神經(jīng)元細胞損傷明顯低于對照組(P＜0.001)。在劑量效應(yīng)(0.2～15mg/kg)研究中，分別缺血后1、6hr給藥。6hr組損傷評分一致低于給予相應(yīng)劑量的1hr組，相對于對照組減少海馬CA1區(qū)神經(jīng)元損傷50％(ED50)前者需要的MVIIA劑量是12.5mg/kg，而后者為2.3mg/kg。根據(jù)此特點進一步的開展時間效應(yīng)研究，在缺血模型建立后6、12、24、48hr分別給予靜脈注射單劑量MVIIA(5mg/kg)。和對照組相比，在6、12及24hr時間點MVIIA均表現(xiàn)出顯著的神經(jīng)保護作用(P＜0.001)，但它們各自之間沒有明顯的區(qū)別。為證明MVIIA是阻止而不是簡單的延擱細胞損傷，在給藥后(5mg/kg)5和12天分別檢測損傷情況，和對照組相比均有顯著意義(P＜0.001)。同時，體內(nèi)微透析分析表明，MVIIA對高K+誘發(fā)的神經(jīng)元Glu釋放無明顯抑制作用，提示其神經(jīng)保護功能可能與興奮性氨基酸的作用無關(guān)。Zhao等(ActaPhysiol Scand.1994，150459-461)報道了缺血后15min使用MVIIA可顯著減少大鼠大腦中動脈阻斷(MCAO)2hr所致腦梗死面積，且在處理組中有3只動物未發(fā)現(xiàn)梗死灶。Yenari等(Brain Res.1996，73936-45)運用MRI在大鼠MCAO 30min模型也顯示，處理組腦梗死面積顯著小于對照組。Miguel等(Journal of NeurologicalSciences.1997，15325-31)通過兔局部腦缺血模型亦得到類似結(jié)果。Bowersox等(BrainRes.1997，747343-347)的實驗結(jié)論還證實，MVIIA在阻斷交感神經(jīng)釋放NE引起血壓下降的同時，仍表現(xiàn)顯著的腦保護作用。
在體外培養(yǎng)細胞的實驗中MVIIA也表現(xiàn)出神經(jīng)保護活性。Pringle等(Stroke.1996，272124-2130)利用大鼠海馬切片培養(yǎng)實驗?zāi)Ｐ蛯VIIA的神經(jīng)保護作用進行了研究。從10d年齡大鼠中取海馬切片培養(yǎng)到14d時開始實驗。在缺氧3hr而后復氧24hr的體外缺氧損傷實驗?zāi)Ｐ椭?，在缺氧前或缺?hr后加入MVIIA對海馬CA1、CA3區(qū)神經(jīng)細胞具有明顯保護作用(P＜0.01)。缺氧3hr后加入MVIIA的保護作用呈劑量效應(yīng)，EC50為50nmol/L。而L-型VSCCs拮抗劑DHPs及混合型鈣通道拮抗劑SB201823-A均無保護作用。
新的研究還表明，MVIIA可以改善鼠腦損傷后線粒體的呼吸功能，包括ATP合成(P/O值)、呼吸控制指數(shù)(RCI)、Ca2+轉(zhuǎn)運、電子傳遞活性(琥珀酸和NAD樣物質(zhì))均有明顯改善(Bowersox SS，etc.Toxicon，1998，361651-1658)。這在1例腦卒中和1例癲癇病人的腦組織的相關(guān)實驗中得到證實，為MVIIA臨床應(yīng)用治療重型顱腦損傷提供了一定的實驗依據(jù)。MVIIA現(xiàn)已成為第一個運用于臨床實驗治療中風所造成的缺血性腦損傷及改善外傷造成的腦損傷的多肽類鈣拮抗劑。
國內(nèi)目前尚無其他開展芋螺毒素的神經(jīng)保護功用的研究。芋螺毒素SO3是通過對我國南海的線紋芋螺(Conus striatus)毒管基因克隆(盧松柏等，科學通報，44(16)1737-1739，1999)并經(jīng)肽合成而得到的，其氨基酸序列為CKAAGKPCSRIAYNCCTGSCRSGKC(SEQ ID NO1，C端酰氨化)。該肽含25個氨基酸殘基，三對二硫鍵，屬于超O家族芋螺毒素。應(yīng)用熱板法、光熱輻射法及化學刺激法測定了其對小鼠的鎮(zhèn)痛活性的半數(shù)有效劑量(ED50)為0.75ug/kg，活性比嗎啡高千倍以上。然而，現(xiàn)有技術(shù)中并不清楚芋螺毒素SO3或其類似物或衍生物的其它治療性應(yīng)用。本發(fā)明首次公開了芋螺毒素SO3或其類似物肽或衍生物在治療或緩解因缺血或缺氧造成的神經(jīng)損傷中的應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
芋螺毒素SO3含25個氨基酸殘基，三對二硫鍵，屬于超O家族芋螺毒素，其序列如下CKAAGKPCSRIAYNCCTGSCRSGKC(SEQ ID NO1)。在本發(fā)明中出乎意料的發(fā)現(xiàn)，芋螺毒素SO3或其類似物或衍生物可以有效用于治療、緩解或預(yù)防因缺血或缺氧造成的神經(jīng)損傷，其副作用很低。
因此，在一個方面中，本發(fā)明提供了一種藥物組合物，其中含有芋螺毒素SO3或其類似物或衍生物作為活性成分以及藥學上可接受的載體。
在另一個方面中，本發(fā)明提供了一種試劑盒，其中上述藥物組合物以及使用說明書。
在又一個方面中，本發(fā)明涉及芋螺毒素SO3或其類似物或衍生物在制備可用于治療、緩解或預(yù)防缺血或缺氧造成的神經(jīng)損傷的藥物中的用途。
具體實施例方式
在本發(fā)明的上下文中，術(shù)語“類似物”被定義為因一或多個、優(yōu)選1-5個、更優(yōu)選1-3個、尤其優(yōu)選1-2個、最優(yōu)選1個氨基酸殘基的取代、插入、缺失和/或添加而與親本肽有所不同、但仍保留了與親本肽相同的生物學活性的肽，或者是親本肽與其它肽/多肽構(gòu)成的融合蛋白。所述其它肽/多肽可以是例如有助于親本肽的靶向性的肽，以便特異性給藥，或者可以是能夠提高親本肽的半壽期的肽，等等。
術(shù)語“衍生物”是親本肽中的一個或多個氨基酸殘基被非天然存在的氨基酸殘基所取代，或者在氨基酸殘基上連接了一或多個取代基或者綴合了其它聚合物后所衍生的肽，例如發(fā)生了烷基化，?；纬闪缩セ蝓０?。
本發(fā)明提供了一種藥物組合物，其中含有芋螺毒素SO3或其類似物或衍生物作為活性成分以及藥學上可接受的載體。
在一個實施方式中，本發(fā)明的藥物組合物中含有芋螺毒素SO3(SEQID NO1)。
在又一個實施方式中，本發(fā)明的藥物組合物中含有芋螺毒素SO3類似物。在本領(lǐng)域中眾所周知，可以對多肽/肽進行適當?shù)陌被嵝揎椂圆挥绊懫涔δ?。例如，可以用?cè)鏈性質(zhì)相似的氨基酸殘基取代親本肽中的相應(yīng)殘基，即進行保守性取代。或者，可以在肽的氨基末端添加甲硫氨酸或其它肽/多肽，以構(gòu)建融合蛋白，以促進其純化或延長其半壽期。在多肽/肽中引入氨基酸修飾的技術(shù)是普通技術(shù)人員所熟知的，包括定點誘變、丙氨酸掃描突變等，在這方面有眾多的現(xiàn)有技術(shù)可供參考。對于短肽而言，還可通過肽化學合成法而方便地制備。
還可以對應(yīng)用于本發(fā)明中的SO3肽進行各種修飾，包括對其中的氨基酸殘基的側(cè)鏈進行修飾，或綴合上其它的有機聚合分子，以提高其半壽期等。這樣的方法在現(xiàn)有技術(shù)中也是眾所周知的。這種經(jīng)過修飾的芋螺毒素SO3衍生物同樣可用于本發(fā)明中。
中國專利申請99106070.9(CN1237584A)和00128525.4(CN 1296012A)中公開了制備芋螺毒素SO3的方法。這兩篇文獻的公開內(nèi)容全文引入本文作為參考。
在本發(fā)明的藥物組合物中，還可以含有藥學上可接受的載體?！八帉W可接受的載體”是指無毒的固體、半固體或液體填充物、稀釋劑、膠囊材料等。
本發(fā)明的藥物組合物可以制備成適當?shù)膭┬?。適當劑型的實例包括用于口服給藥的片劑、膠囊、包衣片、顆粒劑、溶液和糖漿；用于注射給藥的無菌溶液和緩釋劑型。
這些劑型中也可以含有其他慣用成分，例如防腐劑、穩(wěn)定劑、表面活性劑、緩沖液、調(diào)節(jié)滲透壓的鹽、乳化劑、增甜劑、著色劑、調(diào)味劑等等。
如果特定治療需要，本發(fā)明的藥物組合物可含有同時給藥比較有效的其他藥理學活性成分。
在本發(fā)明的藥物組合物中，芋螺毒素SO3或其類似物或衍生物的量可以根據(jù)下列已知因素而在較寬的范圍內(nèi)變化，諸如欲治療疾病的類型、疾病的嚴重程度、病人的體重、劑型、所選用的給藥途徑以及每天的給藥次數(shù)等。不過，最佳量可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員容易而常規(guī)地確定。一般地，芋螺毒素SO3或其類似物或衍生物在本發(fā)明的藥物組合物中的量為能確保給藥水平達到0.01μg/kg/天至10mg/kg/天的量，優(yōu)選達到0.1μg/kg/天至1mg/kg/天的量，更優(yōu)選達到1μg/kg/天至0.1mg/kg/天的量。有關(guān)藥物制劑的內(nèi)容在現(xiàn)有技術(shù)中有諸多教導，參閱例如“Remington藥物科學”(1985)或Remington藥物科學與實踐，19版，1995。
可以用制藥工業(yè)的常規(guī)技術(shù)制備本發(fā)明芋螺毒素SO3或其類似物或衍生物的注射用組合物，這些技術(shù)包括適當?shù)厝芙夂突旌细鹘M分以得到所需的最終產(chǎn)物。
根據(jù)一種方法，將芋螺毒素SO3或其類似物或衍生物溶解于一定量的水中，其中水的量稍小于所制備的組合物的最終體積。按需要加入等滲劑、防腐劑和緩沖劑，并在需要時用酸如鹽酸、或堿如氫氧化鈉水溶液調(diào)節(jié)溶液的pH值。最后，用水調(diào)節(jié)溶液體積得到所需的組分濃度。
等滲劑例如有氯化鈉、甘露糖醇、甘油。
防腐劑例如有苯酚、間甲酚、甲基對羥基苯甲酸酯、芐醇。
適宜的緩沖劑如乙酸鈉和磷酸鈉。
本發(fā)明的藥物組合物的劑型可以利用藥劑師所熟知的技術(shù)進行制備，這些技術(shù)包括混合、制粒、壓縮、溶解、滅菌等。
作用對象術(shù)語“患者”是指可以施用芋螺毒素SO3或其類似物或衍生物的任何動物，優(yōu)選哺乳動物，尤其是人?？捎帽景l(fā)明方法進行治療的具體患者包括人以及非人靈長動物、綿羊、馬、牛、山羊、豬、狗、貓、兔、豚鼠、倉鼠、沙鼠、大鼠和小鼠等。
給藥途徑和試劑盒本發(fā)明的藥物組合物可以采用醫(yī)學上可接受的任何方式對患者給藥。包括通過腸胃外途徑注射，例如靜脈內(nèi)、血管內(nèi)、動脈內(nèi)、皮下、肌內(nèi)、腦內(nèi)、椎管內(nèi)(包括蛛網(wǎng)膜下腔內(nèi)和硬膜外腔內(nèi))或其它方式，以及經(jīng)口、鼻、眼、直腸或局部給藥。本發(fā)明還特別包括緩釋給藥方式(通過諸如儲存注射途徑)。
本發(fā)明的藥物組合物可以提供于容器中，從而適于在適當分裝和保存期間維持無菌狀態(tài)，保護活性成分的活性，并便于方便有效地將組合物施用于患者。對于可注射性劑型，組合物可以作為貯于適于利用針頭和注射器從中取出各成分的帶塞小瓶中的形式提供。這種小瓶可供一次性使用或多次使用。組合物也可作為預(yù)充滿的注射器的形式提供。在某些情形下，各組分可以作為液體制劑提供，而另一些情況下，它們可以干燥或凍干狀態(tài)提供，這樣就需要用標準或供給的稀釋劑重溶制劑，使之呈液態(tài)。若化合物作為靜脈內(nèi)給藥的液體形式提供，即可以將其貯于適合連接到靜脈內(nèi)給藥線或者導管的無菌包或容器內(nèi)。在以片劑或丸劑形式口服的情形下，化合物即可貯于帶可移動瓶蓋的瓶子中。容器上可以貼有信息單，如化合物類型，生產(chǎn)商或分裝者名稱，各指數(shù)，建議使用的劑量，恰當貯存的建議或者給藥建議。
下面的實驗研究將進一步闡述本發(fā)明，而不以任何方式限制本發(fā)明的內(nèi)容。
實施例實施例1芋螺毒素SO3的制備按照中國專利申請00128525.4(CN 1296012A)中公開的方法制備芋螺毒素SO3，獲得純度超過99％的凍干純品芋螺毒素SO3。
實施例2芋螺毒素SO3對沙鼠腦缺血后神經(jīng)元的保護作用為了研究芋螺毒素SO3對缺血性神經(jīng)損傷的保護作用，需要建立一個體外的神經(jīng)元缺氧損傷模型和一個體內(nèi)的動物腦缺血損傷模型來對它的藥理作用進行評估。
在哺乳動物的腦組織中，海馬區(qū)神經(jīng)元對于缺氧的損傷最為敏感。體外神經(jīng)元缺氧模型通常采用原代培養(yǎng)大鼠海馬神經(jīng)元缺氧模型及大鼠海馬腦片缺氧模型。原代培養(yǎng)大鼠海馬神經(jīng)元方法成熟，條件可控性高，并可進行較多指標的檢測，如對細胞內(nèi)游離鈣離子進行檢測。動物腦缺血損傷模型常用大鼠全腦缺血模型及沙土鼠全腦缺血模型。沙土鼠缺乏后交通動脈及完整的基底動脈環(huán)，因而結(jié)扎單側(cè)CCA即造成明顯腦缺血，被廣泛用于中風病理機制研究。手術(shù)操作簡單，創(chuàng)傷小，可用于篩選腦活性保護成分或缺血性保護劑的研究。我們選擇了原代培養(yǎng)大鼠海馬神經(jīng)元缺氧模型及沙土鼠全腦缺血模型作為芋螺毒素SO3的體外和體內(nèi)神經(jīng)損傷保護作用的初步評估模型。
將沙土鼠隨機分為4組，每組15只動物正常組、假手術(shù)組、SO3組及生理鹽水組。將沙土鼠經(jīng)2％戊巴比妥鈉溶液腹腔麻醉(65mg/kg)，游離雙側(cè)頸總動脈，用微動脈夾阻斷單側(cè)頸總動脈血流，檢查遠端血流情況以確保完全阻斷血流。30分鐘后，移去微動脈夾，觀察側(cè)頸總動脈血流恢復后，絲線縫合切口。假手術(shù)組不結(jié)扎頸總動脈。SO3組在松開微動脈夾后立即給予顱內(nèi)注射3.0μg/kg的芋螺毒素SO3。每組選取手術(shù)后有癥狀出現(xiàn)的沙土鼠5只，于術(shù)后第5天斷頭處死。迅速手術(shù)取腦，先用50mlPBS沖洗血液，然后浸入含4％多聚甲醛PBS中固定8小時。固定結(jié)束后，經(jīng)背側(cè)海馬冠狀切開，取約2mm腦組織塊，常規(guī)石蠟包埋，做病理切片厚度5μm，HE染色顯微鏡鏡檢。于光鏡10×40倍)下觀察海馬CA1、CA2、CA3區(qū)錐體神經(jīng)元的改變，核皺縮、核溶解者視為壞死神經(jīng)元。神經(jīng)元密度計數(shù)隨機觀察各區(qū)及計數(shù)，每區(qū)累積計數(shù)神經(jīng)元100個，同時計正常神經(jīng)元數(shù)。以每百個計數(shù)神經(jīng)元中的存活神經(jīng)元來表示海馬的損傷程度。結(jié)果見表1，與對照組相比，芋螺毒素SO3可顯著改善因局部缺血造成的神經(jīng)損傷。
表1芋螺毒素SO3對沙土鼠海馬神經(jīng)元密度的影響動物數(shù)海馬各區(qū)神經(jīng)元密度(X±S)組別(n) CA1區(qū) CA2區(qū) CA3區(qū)正常組 5 52.1±1.7 45.5±2.7 44.8±3.1假手術(shù)組5 48.7±1.9 43.7±2.1 45.2±2.5SO3組 5 29.2±2.9※35.2±1.9※37.2±2.2※NS對照組5 10.9±2.6 18.9±2.6 23.4±3.1※和NS對照組相比，P＜0.01
實施例3芋螺毒素SO3對原代培養(yǎng)大鼠海馬細胞缺氧的保護作用取新生Wistar大鼠，在無菌條件下分離出雙側(cè)海馬，用0.125％胰蛋白酶消化(37℃、30min)分散并制成5×108/L密度的細胞懸液，接種于涂有多聚-L-賴氨酸的直徑35mm塑料培養(yǎng)皿中，每皿2ml，置于36.4℃、含10％CO2和空氣混合氣的培養(yǎng)箱(美國FORMA)內(nèi)進行培養(yǎng)。培養(yǎng)液由93％Eagle，s MEM，5％馬血清，1％N3組合液和1％谷氨酰胺組成。于培養(yǎng)第3天，在培養(yǎng)液中加入細胞分裂抑制劑阿糖胞苷3mg/L，以抑制非神經(jīng)細胞的過度增殖，48h后更換新鮮培養(yǎng)液，以后每周換液2次，每次更換一半新鮮培養(yǎng)液。取培養(yǎng)12d的海馬神經(jīng)元，分為正常組、三個SO3劑量組(0.1μM、0.5μM及2.5μM)、及缺氧對照組4組。正常組仍置于36.4℃，10％CO2的二氧化碳培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。SO3組在缺氧前半小時或缺氧復氧后加入芋螺毒素SO3至終濃度(0.1μM、0.5μM及2.5μM)。將需要缺氧的細胞移至2000cm3的恒溫(36.4℃)密閉容器內(nèi)，連續(xù)充以無氧氣體(90％N2、10％CO2)，流速為0.20L/min，在缺氧條件下繼續(xù)培養(yǎng)4h后取出。以0.3％臺盼藍對細胞進行染色3min，4％多聚甲醛固定細胞。在倒置相差顯微鏡分下別觀察各組海馬神經(jīng)元細胞的形態(tài)變化，并隨機觀察并計數(shù)相鄰視野(0.16cm2)的存活神經(jīng)元(所計數(shù)神經(jīng)元必須有暈光，長有突起，經(jīng)0.3％臺盼藍浸染3min不著色)數(shù)及神經(jīng)元細胞總數(shù)。每皿細胞觀察25個視野，計算細胞存活率。結(jié)果見表2。和缺氧對照組相比，三個劑量組的芋螺毒素SO3都可以顯著降低因缺氧而造成原代培養(yǎng)大鼠神經(jīng)元損傷。這表明，在體外培養(yǎng)細胞的實驗中芋螺毒素SO3也具有神經(jīng)保護活性。
表2 細胞存活率結(jié)果細胞皿數(shù)平均存活率(％) (X±S)組別(N) 缺氧前給藥 缺氧后給藥正常細胞 6 94.6±2.795.2±2.9SO3(0.1μM) 6 61.7±54※55.4±4.7※SO3(0.5μM) 6 75.0±6.2※64.1±4.5※SO3(5.0μM) 6 79.2±4.7※71.0±5.1※缺氧對照 6 38.1±3.340.4±4.8※和缺氧對照組相比，P＜0.01實施例4芋螺毒素SO3對小鼠的急性毒性實驗昆明種成年小白鼠雌雄不限，體重20±2g，每組10只，分為7組。SO3生理鹽水配制，每次腦內(nèi)給藥20μl，各組給藥劑量為2.5mg/kg、5mg/kg、12.5mg/kg、15mg/kg、25mg/kg、62.5mg/kg及125mg/kg。從結(jié)果見表3。LD50結(jié)果表明，與ω-芋螺毒素MVIIA相比，芋螺毒素SO3的毒性更低。
表3 急性毒性實驗結(jié)果藥物 動物數(shù)(只)半數(shù)致死劑量(LD50)SO3 1013.5mg/kgMVIIA1010.7mg/kg上面以例示的方式對本發(fā)明進行了舉例說明，但本發(fā)明絕不限于此。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在閱讀了整篇說明書之后，完全清楚可對本發(fā)明作各種改動，而仍不偏離本發(fā)明的精神和范圍。
序列表<110>軍事醫(yī)學科學院<120>芋螺毒素SO3的治療性應(yīng)用<130>idc040143<160>2<170>PatentIn version 3.2<210>1<211>25<212>PRT<213>人工序列<220>
<223>芋螺毒素SO3<400>1Cys Lys Ala Ala Gly Lys Pro Cys Ser Arg Ile Ala Tyr Asn Cys Cys1 5 10 15Thr Gly Ser Cys Arg Ser Gly Lys Cys20 25<210>2<211>25<212>PRT<213>人工序列<220>
<223>芋螺毒素MVIIA<400>2Cys Lys Gly Lys Gly Ala Lys Cys Ser Arg Leu Met Tyr Asp Cys Cys1 5 10 15Thr Gly Ser Cys Arg Ser Gly Lys Cys20 2權(quán)利要求
1.一種可用于治療緩解或預(yù)防因缺血或缺氧造成的神經(jīng)損傷的藥物組合物，其中包含有效量的芋螺毒素SO3或其類似物或衍生物以及藥學上可接受的載體。
2.權(quán)利要求1的藥物組合物，其中包含有效量的芋螺毒素SO3，其氨基酸序列示于SEQ ID NO1中。
3.權(quán)利要求1的藥物組合物，其中包含有效量的芋螺毒素SO3衍生物，該衍生物的氨基酸序列與SEQ ID NO1所示序列因一或多個、優(yōu)選1-5個、更優(yōu)選1-3個、尤其優(yōu)選1-2個、最優(yōu)選1個氨基酸殘基的取代、插入、缺失和/或添加而有所不同，或者是包含芋螺毒素SO3的融合蛋白。
4.權(quán)利要求1的藥物組合物，其可以用于治療、緩解或預(yù)防中風，創(chuàng)傷或手術(shù)性神經(jīng)損傷。
5.芋螺毒素SO3或其類似物或衍生物在制備可用于治療、緩解或預(yù)防因缺血或缺氧造成的神經(jīng)損傷的藥物組合物中的應(yīng)用。
6.權(quán)利要求5的應(yīng)用，其中所述神經(jīng)損傷是因中風、創(chuàng)傷或手術(shù)造成的。
7.一種試劑盒，其中包含權(quán)利要求1-4中任一項的藥物組合物以及使用說明書。
全文摘要
本發(fā)明涉及芋螺毒素SO3或其類似物或衍生物在神經(jīng)損傷的治療或緩解中的應(yīng)用。
文檔編號A61P25/00GK1651075SQ200410102760
公開日2005年8月10日 申請日期2004年12月28日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月28日
發(fā)明者周曉巍, 黃培堂, 蔣世衛(wèi), 劉鳳云 申請人:中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院生物工程研究所