專利名稱：一種槲皮素納米膠束制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種槲皮素納米膠束制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
槲皮素(Quercetin，QT)屬于從植物中提取的黃酮醇類，具有多羥基結(jié)構(gòu)，廣泛存 在于瓜果蔬菜中，有抗炎、抗氧化、神經(jīng)保護(hù)等作用，對(duì)白血病、肝癌、乳腺癌等癌細(xì)胞有抑 制作用，其藥理作用明顯。但槲皮素幾乎不溶于水，水中的溶解度僅為0. 166μ g · πιΓ1 7. iyg^r1，脂溶性也很差，口服生物利用度低，極大地限制了其在體內(nèi)的吸收和利用。因 此，提高槲皮素水中的溶解度及體內(nèi)的吸收利用是該藥在應(yīng)用中亟待解決的問(wèn)題。聚合物膠束是由含親水部分和疏水部分的嵌段共聚物在水溶液中形成的一種自 組裝結(jié)構(gòu)，如普朗尼克類嵌段共聚物具有聚氧乙烯-聚氧丙烯-聚氧乙烯(ΡΕ0-ΡΡ0-ΡΕ0) 的結(jié)構(gòu)，在水溶液中，聚合物的疏水部分PPO自組裝形成疏水微環(huán)境，與難溶性藥物相互作 用可以增加其溶解度；聚乙二醇維生素E琥珀酸酯(TPGS)是維生素E的水溶性衍生物，最 早由美國(guó)Eastman公司生產(chǎn)并上市，在國(guó)外現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于制劑研究中，作為增溶劑、吸收 促進(jìn)劑、乳化劑、增塑劑以及水難溶性和脂溶性藥物傳遞系統(tǒng)的載體，與其他表面活性劑相 比，TPGS具有生育酚酯的結(jié)構(gòu)，從而有一定的抗氧化性，這有助于增加制劑的穩(wěn)定性。有報(bào) 道，TPGS對(duì)P-gp糖蛋白有抑制作用，轉(zhuǎn)運(yùn)受體P-gp糖蛋白阻滯的藥物(如阿霉素、紫杉醇、 長(zhǎng)春堿、秋水仙堿等)與TPGS合用后，其生物活性都明顯增加。因此，可以預(yù)期，將P123與 TPGS共同作為槲皮素的載體，可以增大槲皮素的水中溶解度及生物活性，但現(xiàn)有技術(shù)中并 沒(méi)有相關(guān)的報(bào)道，對(duì)其是否能夠起到預(yù)期的效果是不清楚的，因此，有必要對(duì)其效果進(jìn)行驗(yàn) 證，并篩選出適用于規(guī)?；a(chǎn)的制備工藝。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明提供了一種槲皮素納米膠束制劑，及其制備方法。本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的一種槲皮素納米膠束制劑，以槲皮素為原料藥，以普朗尼克類表面活性劑為藥物 載體，各組分的重量份數(shù)如下槲皮素20 40份，朗尼克類表面活性劑220 330份；所述普朗尼克類表面活性劑為P123或/和TPGS。優(yōu)選的，所述普朗尼克類表面活性劑為P123和TPGS，各組分的重量份數(shù)如下槲 皮素 20 40 份，P123200 300 份，TPGS 20 30 份。所述納米膠束制劑的粒徑在5 60nm，平均粒徑在18 35nm。一種槲皮素納米膠束制劑的制備方法將槲皮素與普朗尼克類表面活性劑混合溶 解于有機(jī)溶劑中，待充分溶解后，在15 60°C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，得到含藥物薄膜， 真空干燥后，加入水相，在15 60°C下水化得到膠束溶液，微孔濾膜過(guò)濾，得槲皮素納米膠 束制劑。 所述有機(jī)溶劑為無(wú)水乙醇。
所述水相為水。所述水相的加入量滿足以下條件當(dāng)加入IOmM普朗克類表面活性劑時(shí)，水相的體 積不少于3mL。所述微孔所述微孔濾膜為0. 22 μ m。所述制備方法，還包括以下步驟向槲皮素納米膠束制劑中加入凍干保護(hù)劑，冷凍 干燥，得槲皮素納米膠束凍干制劑。所述凍干保護(hù)劑為甘露醇，凍干保護(hù)劑的加入量占槲皮素納米膠束制劑總質(zhì)量的 4%以下。本法制備的槲皮素納米膠束制劑，槲皮素的溶解度為5. 56士0. 344mg · mL—1，是原 料藥的700倍以上，且制劑的包封率大于80%，載藥量大于10%，膠束粒徑在IOOnm以下。 體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)表明，對(duì)乳腺癌細(xì)胞株MCF-7的細(xì)胞毒性顯著增加。本發(fā)明針對(duì)槲皮素難溶于水的特性，使用非離子表面活性劑P123與TPGS共同作 為槲皮素的載體，經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，其可以增大槲皮素的水中溶解度及生物活性，且具有包封率 高、載藥量高、低毒等優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明經(jīng)過(guò)大量的實(shí)驗(yàn)，付出了創(chuàng)造性的勞動(dòng)，篩選出了制劑的 最佳配比、粒徑大小及制備工藝等，適合于規(guī)模化生產(chǎn)，并投入實(shí)際應(yīng)用。本發(fā)明的膠束制劑的粒徑在5 60nm，膠束的粒徑小，納米級(jí)的粒徑、疏水核芯加 上親水性的膠束外殼，保證了其在體內(nèi)不易被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬，可以起到靶向、長(zhǎng)循環(huán)等 作用，有利于其臨床應(yīng)用。


圖1為實(shí)施例1制備的槲皮素納米膠束制劑的電鏡照片，(X 19，000)。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明。實(shí)施例1 制備槲皮素納米膠束制劑精密稱取槲皮素24. Omg,非離子表面活性劑普朗尼克P123243. 6mg, TPGS 27. 2mg，用適量的乙醇攪拌溶解后，25°C水浴旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，真空干燥箱中干燥過(guò) 夜后，得干燥透明的藥膜骨架，加入4mL的去離子水，室溫條件下1，OOOrpm恒速攪拌5h， 微孔濾膜過(guò)濾，得透明的槲皮素膠束溶液。該膠束制劑的照片如圖1所示，其平均粒徑 為18. 43nm,分散系數(shù)0. 294，利用MTT方法測(cè)定槲皮素膠束對(duì)于MCF-7細(xì)胞株的IC5tl為 1. 64 μ g · mL—1，而原料藥DMSO溶液的IC50為16. 46 μ g · mL—1，說(shuō)明將藥物制備成膠束制劑 后顯著增加其體外的抗癌活性。實(shí)施例2 制備槲皮素納米膠束制劑精密稱取槲皮素24.01^，非離子表面活性劑普朗尼克？123232.011^，用適量的乙 醇攪拌溶解后，40°C水浴旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，真空干燥箱中干燥過(guò)夜后，得干燥透明的 藥膜骨架，加入4mL的去離子水，40°C，1，500rpm恒速攪拌5h，微孔濾膜過(guò)濾，得透明的槲皮 素膠束溶液。該膠束制劑含槲皮素5. 7mg · ml—1，平均粒徑29. 04nm,分散系數(shù)0. 347。加入 4%的甘露醇冷凍干燥即得其凍干粉，所得粉末冰箱保存3個(gè)月后水化所得膠束溶液粒徑 均小于40nm，說(shuō)明凍干制劑性質(zhì)穩(wěn)定。
實(shí)施例3 制備槲皮素納米膠束制劑精密稱取槲皮素36.01^，非離子表面活性劑普朗尼克？123250.011^，用適量的乙 醇攪拌溶解后，60°C水浴旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，真空干燥箱中干燥過(guò)夜后，得干燥透明的 藥膜骨架，加入6mL的去離子水，50°C、700rpm恒速攪拌5h，微孔濾膜過(guò)濾，即得槲皮素納米 膠束溶液。該膠束制劑含槲皮素5. 8mg ^r1，平均粒徑25. 20nm，分散系數(shù)0. 243。加入4% 的甘露醇冷凍干燥，所得粉末水化所得膠束溶液平均粒徑為30. 3nm，無(wú)藥物沉淀析出，說(shuō)明 凍干過(guò)程對(duì)制劑無(wú)顯著影響。實(shí)施例4 制備槲皮素納米膠束制劑精密稱取槲皮素24. Omg,非離子表面活性劑普朗尼克P123290. Omg, TPGS 30. Omg，用適量的乙醇攪拌溶解后，40°C水浴旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，真空干燥箱中干燥過(guò) 夜后，得干燥透明的藥膜骨架，加入4mL的去離子水，室溫條件下，1，OOOrpm恒速攪拌5h，微 孔濾膜過(guò)濾，得透明的槲皮素膠束溶液，加入4%的甘露醇作為凍干保護(hù)劑，溶解后凍干，制 備凍干劑。取凍干劑適量用0. 9%的NaCl復(fù)溶，取該溶液適量，滴加于銅網(wǎng)上，用2%磷鎢 酸溶液進(jìn)行負(fù)染，自然干燥后在透射電鏡下下觀察，為圓整的球形粒子，粒徑在5 60nm之 間。
權(quán)利要求
一種槲皮素納米膠束制劑，其特征在于以槲皮素為原料藥，以普朗尼克類表面活性劑為藥物載體，各組分的重量份數(shù)如下槲皮素20～40份，朗尼克類表面活性劑220～330份；所述普朗尼克類表面活性劑為P123，或P123和TPGS的混合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的種槲皮素納米膠束制劑，其特征在于所述普朗尼克類表面 活性劑為P123和TPGS的混合物，各組分的重量份數(shù)如下槲皮素20 40份，P123200 300 份，TPGS 20 30 份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的種槲皮素納米膠束制劑，其特征在于所述納米膠束制劑的 粒徑在5 60nm，平均粒徑在18 35nm。
4.權(quán)利要求1 3中任一項(xiàng)所述的一種槲皮素納米膠束制劑的制備方法，其特征在于 將槲皮素與普朗尼克類表面活性劑混合溶解于有機(jī)溶劑中，待充分溶解后，在15 60°C下 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，得到含藥物薄膜，真空干燥后，加入水相，在15 60°C下水化得到 膠束溶液，微孔濾膜過(guò)濾，得槲皮素納米膠束制劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于所述有機(jī)溶劑為無(wú)水乙醇。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于所述水相為水。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于所述水相的加入量滿足以下條件當(dāng) 加入IOmM普朗克類表面活性劑時(shí)，水相的體積不少于3mL。
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于所述微孔濾膜為0.22 μ m濾膜。
9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于向槲皮素納米膠束制劑中加入凍干 保護(hù)劑，冷凍干燥，得槲皮素納米膠束凍干制劑。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的制備方法，其特征在于所述凍干保護(hù)劑為甘露醇，凍干保 護(hù)劑的加入量占槲皮素納米膠束制劑總質(zhì)量的4%以下。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種槲皮素納米膠束制劑，以槲皮素為原料藥，以普朗尼克類表面活性劑為藥物載體，各組分的重量份數(shù)如下槲皮素20～40份，朗尼克類表面活性劑220～330份。其制備方法為將槲皮素與普朗尼克類表面活性劑混合溶解于有機(jī)溶劑中，待充分溶解后，在15～60℃下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，得到含藥物薄膜，真空干燥后，加入水相，在15～60℃下水化得到膠束溶液，微孔濾膜過(guò)濾，得槲皮素納米膠束制劑。本發(fā)明的膠束制劑的粒徑在20～60nm，膠束的粒徑小，納米級(jí)的粒徑、疏水核芯加上親水性的膠束外殼，保證了其在體內(nèi)不易被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬，可以起到靶向、長(zhǎng)循環(huán)等作用，有利于其臨床應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61P35/00GK101982168SQ20101052902
公開(kāi)日2011年3月2日 申請(qǐng)日期2010年11月2日 優(yōu)先權(quán)日2010年11月2日
發(fā)明者翟光喜, 趙麗艷 申請(qǐng)人:山東大學(xué)