專(zhuān)利名稱(chēng)：可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物及制造方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物及其制造方法，特別是涉及一種含有紅曲霉素(monascin)或紅曲黃素(ankafIavin),或是同時(shí)含有monascin及ankaflavin的具有降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的功能組合物及其制造方法。
背景技術(shù)：
血液中的膽固醇含量與心血管疾病的發(fā)生幾率息息相關(guān)，根據(jù)研究顯示，血脂肪異常在心臟血管疾病發(fā)展中扮演重要角色，因此血液中膽固醇濃度可作為一個(gè)很好的預(yù)測(cè)指標(biāo)。當(dāng)血清膽固醇濃度大于200mg/dL時(shí)，因冠狀動(dòng)脈心臟疾病死亡的幾率急遽上升。膽固醇值高者，冠狀動(dòng)脈心臟疾病的罹病率和死亡率亦高，但若經(jīng)過(guò)非藥物或藥物的治療降低膽固醇值，確實(shí)可以明顯降低冠狀動(dòng)脈硬化造成的心血管疾病的罹患率。 近年來(lái)保健食品蓬勃發(fā)展，具有多功效的機(jī)能性發(fā)酵制品紅曲逐漸受到重視。在亞洲地區(qū),紅曲菌(Monascus species)在飲食、醫(yī)藥上的應(yīng)用，已有千年的歷史。紅曲菌重要的二級(jí)代謝產(chǎn)物包含下列四種(1) 一群色素，包括紅色色素(rubropunctamine、monascorubramine)、黃色色素(ankaflavin、monascin)以及橘色色素(rubropunctanin、monascorubrin) ； (2)降膽固醇物質(zhì)，如莫納可林 K (monacolin K)(又被稱(chēng)為洛伐他汀(Iovastatin)、美維諾林(mevinolin)及美乏脂(mevacor)) ； (3)降血壓物質(zhì)，如Y-胺基丁酸(Y-aminobutyric acid, GABA);以及(4)抗氧化物質(zhì),包括第一抗氧化物質(zhì)(dimerumic acid)以及第二抗氧化物質(zhì)(3-hydoxy-4_methoxy-benzoic acid)。在紅曲菌重要的二級(jí)代謝產(chǎn)物中，由于monacolin K具有抑制膽固醇生物合成過(guò)程中關(guān)鍵酵素輕甲基戍二酸單酰輔酶A還原酶(hydroxy methylglutaryI-CoA reductase,HMG-CoA reductase)的活性，因此monacolin K具有非常顯著的降膽固醇效果。另一方面，血液中的膽固醇可根據(jù)密度而區(qū)分為兩大類(lèi)，包括高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)以及低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)。HDL-C經(jīng)研究指出是一種好的膽固醇，而LDL-C則被證實(shí)為不好的膽固醇。高濃度的HDL-C與低濃度的LDL-C，將有助于降低心血管疾病與動(dòng)脈粥狀硬化癥的發(fā)生幾率。由于總膽固醇(totalcholesterol, TC)是 HDL-C、LDL-C> 三酸甘油脂(triglyceride, TG)及其他脂蛋白膽固醇所組成，故HDL-C與LDL-C會(huì)隨著TC濃度顯著提升而大量增加。由于多數(shù)研究顯示降膽固醇藥物在降低TC濃度后往往也會(huì)造成HDL-C濃度大幅下降，如能維持或提升HDL-C濃度將有助于心血管疾病的預(yù)防。然而,前述的monacolin K雖然具有降低膽固醇的功效,但卻無(wú)法提高HDL-C的濃度，因此對(duì)于心血管疾病與動(dòng)脈粥狀硬化癥的預(yù)防效果是很有限的。有鑒于此，必須提出一種新穎的組合物及其制造方法，使該組合物同時(shí)具有降血脂及提升HDL-C濃度的功能，以更有效的降低心血管疾病與動(dòng)脈粥狀硬化癥的發(fā)生幾率。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于，克服現(xiàn)有的降膽固醇藥物存在的缺陷，而提供一種新的可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物，所要解決的技術(shù)問(wèn)題是有效降低血脂并提升高密度脂蛋白膽固醇的濃度，非常適于實(shí)用。為達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物，至少包含一 monascin，其為一種紅曲黃色素，并且是由一紅曲發(fā)酵產(chǎn)物中萃取得到。該紅曲發(fā)酵產(chǎn)物是由紅曲菌Monascus purpureus PAN 790 (此紅曲菌已保藏于美國(guó)農(nóng)業(yè)研究菌種保藏中心(Agricultural Research Culture Collection (NRRL)),其地址為International Depositary Authority 1815 N. University Street Peoria, Illinois61604 U. S. A.，保藏日期為2009年11月13日，保藏編號(hào)為NRRL 50337，菌種名稱(chēng)為Monascus purpureus PAN 790)所產(chǎn)生。本發(fā)明的另一目的是提供一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，由一系列的萃取步驟，可純化得到包含一 monascin的組合物，并且該組合物可 有效降低血脂及提升高密度脂蛋白膽固醇的濃度。為達(dá)上述目的，本發(fā)明提供一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，至少包含以下步驟(I)提供一紅曲發(fā)酵產(chǎn)物，該紅曲發(fā)酵產(chǎn)物是由紅曲菌Monascus purpureus PAN 790所產(chǎn)生；(2)以丙酮對(duì)該紅曲發(fā)酵產(chǎn)物反復(fù)進(jìn)行三次萃取的動(dòng)作；(3)將前一步驟的產(chǎn)物利用一減壓濃縮的方式提升其濃度；(4)將前一步驟的產(chǎn)物利用一娃膠管柱層析法(silica gel column chromatography)進(jìn)行第一次分離純化，并將色素區(qū)分液分離出來(lái)；(5)將前一步驟分離得到的色素區(qū)分液利用一葡聚糖凝膠管柱層析法(Sephadex LH-20 column chromatography)進(jìn)行第二次分離純化，并將黃色素區(qū)分液分離出來(lái)；(6)將前一步驟分離得到的黃色素區(qū)分液利用該硅膠管柱層析法進(jìn)行第三次分離純化，并將含有monascin與ankaflavin的區(qū)分液分離出來(lái)；以及(7)將前一步驟分離得到的該含有monascin與ankaflavin的區(qū)分液由一制備型高效能液相層析法(preparative high performance liquid chromatography,pre-HPLC)進(jìn)行第四次分離純化，并將monascin成分分離出來(lái)。本發(fā)明的再一目的是提供一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇之組合物，至少包含一 ankaflavin,而可有效降低血脂及提升高密度脂蛋白膽固醇的濃度。為達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物，至少包含一 ankaflavin，其為一種紅曲黃色素，并且是由一紅曲發(fā)酵產(chǎn)物中萃取得到。該紅曲發(fā)酵產(chǎn)物是由紅曲菌Monascus purpureus PAN 790所產(chǎn)生。本發(fā)明的再一目的是提供一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，由一系列的萃取步驟，可純化得到包含一 ankaflavin的組合物，并且該組合物可有效降低血脂并提升高密度脂蛋白膽固醇的濃度。為達(dá)上述目的，本發(fā)明提供一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，至少包含以下步驟(I)提供一紅曲發(fā)酵產(chǎn)物，該紅曲發(fā)酵產(chǎn)物是由紅曲菌Monascus purpureus PAN 790所產(chǎn)生；(2)以丙酮對(duì)該紅曲發(fā)酵產(chǎn)物反復(fù)進(jìn)行三次萃取的動(dòng)作；(3)將前一步驟的產(chǎn)物利用一減壓濃縮的方式提升其濃度；(4)將前一步驟的產(chǎn)物利用一硅膠管柱層析法進(jìn)行第一次分離純化，并將色素區(qū)分液分離出來(lái)；(5)將前一步驟分離得到的色素區(qū)分液利用一葡聚糖凝膠管柱層析法進(jìn)行第二次分離純化，并將黃色素區(qū)分液分離出來(lái)；(6)將前一步驟分離得到的黃色素區(qū)分液利用該硅膠管柱層析法進(jìn)行第三次分離純化，并將含有monascin與ankaflavin的區(qū)分液分離出來(lái)；及(7)將前一步驟分離得到的含有monascin與ankaflavin的區(qū)分液由一制備型高效能液相層析法進(jìn)行第四次分離純化，并將ankaflavin成分分離出來(lái)。本發(fā)明的再一目的是提供一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物，至少包含一 monascin以及一 ankaflavin,而可有效降低血脂及提升高密度脂蛋白膽固醇的濃度。為達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物，至少包含一 monascin及ankafIavin,其皆為一種紅曲黃色素，并且是由一紅曲發(fā)酵產(chǎn)物中萃取得到。該紅曲發(fā)酵產(chǎn)物是由紅曲菌Monascus purpureus PAN 790所產(chǎn)生。本發(fā)明的再一目的是提供一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，由一系列的萃取步驟，可純化得到包含一 monascin以及一 ankaflavin的組合 物，并且該組合物可有效降低血脂及提升高密度脂蛋白膽固醇之濃度。為達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，至少包含以下步驟(I)提供一紅曲發(fā)酵產(chǎn)物，該紅曲發(fā)酵產(chǎn)物是由紅曲菌Monascus purpureus PAN 790所產(chǎn)生；(2)以丙酮對(duì)該紅曲發(fā)酵產(chǎn)物反復(fù)進(jìn)行三次萃取的動(dòng)作；(3)將前一步驟的產(chǎn)物利用一減壓濃縮的方式提升其濃度；(4)將前一步驟的產(chǎn)物由一硅膠管柱層析法進(jìn)行第一次分離純化，并將色素區(qū)分液分離出來(lái)；(5)將前一步驟分離得到的色素區(qū)分液利用一葡聚糖凝膠管柱層析法進(jìn)行第二次分離純化，并將黃色素區(qū)分液分離出來(lái)；(6)將前一步驟分離得到的黃色素區(qū)分液由該硅膠管柱層析法進(jìn)行第三次分離純化，并將含有monascin與ankaflavin的區(qū)分液分離出來(lái)；(7)將前一步驟分離得到的含有monascin與ankaflavin的區(qū)分液由一制備型高效能液相層析法進(jìn)行第四次分離純化，并分別將monascin以及ankaflavin成分分離出來(lái)；及(8)將該monascin以及該ankaflavin成分混合。借由上述技術(shù)方案，本發(fā)明可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物至少具有下列優(yōu)點(diǎn)及有益效果①本發(fā)明所提供的每一種組合物皆具有有效降低血脂及提升高密度脂蛋白膽固醇的濃度的功效，因此對(duì)于心血管疾病與動(dòng)脈粥狀硬化癥的預(yù)防與治療皆具有很大的功效。②由本發(fā)明所提供的制造方法，可高純度的萃取出本發(fā)明的各種組合物成分，以便用于有效降低心血管疾病與動(dòng)脈粥狀硬化癥的發(fā)生幾率。③由于本發(fā)明所提供的各種組合物皆由紅曲發(fā)酵產(chǎn)物中萃取得到，并非人工合成的化合物，因此可作為天然的食物補(bǔ)給品而食用，不僅可降低心血管疾病與動(dòng)脈粥狀硬化癥的發(fā)生幾率，更可避免副作用的產(chǎn)生。綜上所述，本發(fā)明可有效降低血脂并提升高密度脂蛋白膽固醇的濃度。本發(fā)明在技術(shù)上有顯著的進(jìn)步，并具有明顯的積極效果，誠(chéng)為一新穎、進(jìn)步、實(shí)用的新設(shè)計(jì)。上述說(shuō)明僅是本發(fā)明技術(shù)方案的概述，為了能夠更清楚了解本發(fā)明的技術(shù)手段，而可依照說(shuō)明書(shū)的內(nèi)容予以實(shí)施，并且為了讓本發(fā)明的上述和其他目的、特征和優(yōu)點(diǎn)能夠更明顯易懂，以下特舉較佳實(shí)施例，并配合附圖，詳細(xì)說(shuō)明如下。



圖I是本發(fā)明的紅曲發(fā)酵產(chǎn)物的制造方法流程圖；圖2是本發(fā)明第一實(shí)施例的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法流程圖；圖3是本發(fā)明第一實(shí)施例的步驟104的詳細(xì)步驟流程圖；圖4是本發(fā)明第一實(shí)施例的步驟105的詳細(xì)步驟流程圖；圖5是本發(fā)明第一實(shí)施例的步驟106的詳細(xì)步驟流程圖；圖6是本發(fā)明第一實(shí)施例的步驟107的詳細(xì)步驟流程圖；圖7是本發(fā)明第二實(shí)施例的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法流程圖；圖8是本發(fā)明第二實(shí)施例的步驟207的詳細(xì)步驟流程圖；圖9是本發(fā)明第三實(shí)施例的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法流程圖；圖10是本發(fā)明第三實(shí)施例的步驟307的詳細(xì)步驟流程圖；圖11是脂質(zhì)斑塊染色的量化結(jié)果圖示；以及圖12是相同濃度的monascin、ankaflavin與monacolin K抑制膽固醇生成效果比較圖示。
具體實(shí)施例方式為達(dá)到前述的目的與功效，發(fā)明人以紅曲發(fā)酵產(chǎn)物作為萃取基質(zhì)，并以一連串特殊步驟對(duì)紅曲發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行萃取，在不斷的試驗(yàn)與調(diào)整之下，得到本發(fā)明的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物及其制造方法。下面結(jié)合附圖分別以本發(fā)明第一較佳實(shí)施例、第二較佳實(shí)施例以及第三較佳實(shí)施例的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物及其制造方法，對(duì)本發(fā)明的組合物成分及其制作方法作詳細(xì)介紹。在介紹本發(fā)明的較佳實(shí)施例之前，先對(duì)紅曲發(fā)酵產(chǎn)物的制造方法進(jìn)行介紹。圖I示出了本發(fā)明的紅曲發(fā)酵產(chǎn)物的制造方法流程圖，其包含以下步驟提供一培養(yǎng)基質(zhì)(步驟001)，其中，該培養(yǎng)基質(zhì)可以是米或干燥山藥，其水分含量須在15%以下，最佳水分含量為7% ;加水至培養(yǎng)基質(zhì)中(步驟002)，使培養(yǎng)基質(zhì)與水的比例為I : 0.5%-I 1.5%，最佳比例為I : O. 75% ;將培養(yǎng)基質(zhì)浸泡于水中(步驟003)，浸泡時(shí)間為0-60分鐘，最佳浸泡時(shí)間為30分鐘；將培養(yǎng)基質(zhì)進(jìn)行滅菌動(dòng)作(步驟004)，滅菌條件為121°C、10-60分鐘；將滅菌完成的培養(yǎng)基質(zhì)進(jìn)行冷卻動(dòng)作(步驟005);將特定紅曲菌種接菌至該培養(yǎng)基質(zhì)中(步驟006),該特定紅曲菌種可以是Monascus purpureus PAN 790 ;將接菌完成的培養(yǎng)基質(zhì)進(jìn)行培養(yǎng)動(dòng)作(步驟007)，培養(yǎng)條件為25-37°C、50-80%的濕度、培養(yǎng)8_20天，最佳培養(yǎng)條件為30°C、60%的濕度、培養(yǎng)10天；將培養(yǎng)完成所得到的紅曲發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行干燥動(dòng)作(步驟008)，使產(chǎn)物含有15%以下的水分，最佳為含有6%的水分，如此便完成紅曲發(fā)酵產(chǎn)物的制造流程。本發(fā)明所使用的紅曲菌Monascus purpureus PAN 790,其生長(zhǎng)特性為生長(zhǎng)速度較慢，可產(chǎn)生大量的monacolin K，并且此菌種是由紅曲米中突變并選殖而得到的。培養(yǎng)紅曲菌Monascus purpureus PAN 790的培養(yǎng)基含有2%的米粉末，培養(yǎng)溫度為30°C、培養(yǎng)時(shí)間為48小時(shí)、培養(yǎng)壓力為I大氣壓、滅菌方式為121°C之下20分鐘、滅菌前的酸堿值為5、需氧氣生長(zhǎng)、保存溫度為4°C。接著對(duì)本發(fā)明的第一較佳實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)的介紹。本發(fā)明第一較佳實(shí)施例的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物，其成份包含monascin，其為一種紅曲黃色素，并且是由前述的紅曲發(fā)酵產(chǎn)物中萃取得到，該紅曲發(fā)酵產(chǎn)物是由紅曲菌Monascuspurpureus PAN 790所產(chǎn)生。其中，該monascin的服用量為成人每日攝食2. 4mg以上，方可有效降低血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇在血液中的濃度。圖2是本發(fā)明第一較佳實(shí)施例的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法流程圖，包含以下步驟提供一紅曲發(fā)酵產(chǎn)物(步驟101)，該紅曲發(fā)酵產(chǎn)物是由紅曲菌Monascus purpureus PAN 790所產(chǎn)生；以丙酮對(duì)該紅曲發(fā)酵產(chǎn)物反復(fù)進(jìn)行三次萃取的動(dòng)作(步驟102)，其中，紅曲發(fā)酵產(chǎn)物與該丙酮的比例為I : 10-1 50;將前一步驟 的產(chǎn)物在一特定溫度范圍之下，利用一減壓濃縮的方式提升其濃度(步驟103)，其中，該特定溫度范圍為40°C-60°C;將前一步驟的產(chǎn)物利用一硅膠管柱層析法(silica gel columnchromatography)進(jìn)行第一次分離純化,并將色素區(qū)分液分離出來(lái)(步驟104);將前一步驟分離得到的色素區(qū)分液利用一葡聚糖凝膠管柱層析法(Sephadex LH-20 column chromatography)進(jìn)行第二次分離純化，并將黃色素區(qū)分液分離出來(lái)(步驟105);將前一步驟分離得到的黃色素區(qū)分液利用該硅膠管柱層析法進(jìn)行第三次分離純化，并將含有monascin與ankaflavin的區(qū)分液分離出來(lái)(步驟106);以及將前一步驟分離得到的含有monascin與ankaflavin的區(qū)分液由一制備型高效能液相層析法(preparative high performanceliquid chromatography, pre-HPLC)進(jìn)行第四次分離純化，并將monascin成分分離出來(lái)(步驟107)。圖3是本發(fā)明第一較佳實(shí)施例的步驟104的詳細(xì)步驟流程圖。在前述的步驟104中，可以細(xì)分為以下步驟將步驟103所得到的產(chǎn)物加入一硅膠管柱(silica gel column)中(步驟104a);將多種流洗液依序加入該硅膠管柱中(步驟104b)，其中，該多種流洗液依序?yàn)榧簾?Hexane)、Hexane :乙醇(Ethanol) = 9 : I、Hexane : Ethanol = 8 : 2、Hexane : Ethanol = 7 : 3>Hexane : Ethanol = I : I 以及 Ethanol ;每隔一特定時(shí)間收集由硅膠管柱流出的區(qū)分液，并且共收集12-15個(gè)區(qū)分液(步驟104c)，其中，該特定時(shí)間約為 5-10 分鐘；以一高效能液相層析儀(high performance liquid chromatography, HPLC)配合一光二極管偵測(cè)器(photodiode-array, PDA)對(duì)前一步驟所收集到的每一區(qū)分液進(jìn)行分析，以篩選出含有monascin與ankaflavin成分的區(qū)分液(步驟104d);及將前一步驟所篩選得到的區(qū)分液混合在一起，以得到該色素區(qū)分液(步驟104e)。圖4是本發(fā)明第一較佳實(shí)施例的步驟105的詳細(xì)步驟流程圖。在前述的步驟105中，可以細(xì)分為以下步驟將步驟104所得到的該色素區(qū)分液加入一葡聚糖凝膠管柱(Sephadex LH-20 column)中(步驟105a);將流洗液加入該葡聚糖凝膠管柱中(步驟105b),該流洗液為甲醇(Methanol)乙腈(Acetonitrile) =9 I ;每隔一特定時(shí)間收集由葡聚糖凝膠管柱流出的區(qū)分液，并且共收集3-5個(gè)區(qū)分液(步驟105c)，其中，該特定時(shí)間約為5-10分鐘；以一高效能液相層析儀配合一光二極管偵測(cè)器對(duì)前一步驟所收集到的每一區(qū)分液進(jìn)行分析，以篩選出含有monascin與ankaflavin成分的區(qū)分液(步驟105d)；以及將前一步驟所篩選得到的區(qū)分液混合在一起，以得到該黃色素區(qū)分液(步驟105e)。圖5是本發(fā)明第一較佳實(shí)施例的步驟106的詳細(xì)步驟流程圖。在前述的步驟106中，可以細(xì) 分為以下步驟將步驟105所得到的該黃色素區(qū)分液加入一硅膠管柱中(步驟106a);將多種流洗液依序加入該硅膠管柱中(步驟106b)，其中，該多種流洗液依序?yàn)槎燃谉?Dichloromethane) ； Ethanol =95 ； 5、Dichloromethane ； Ethanol = 9 ; I 以及Dichloromethane Ethanol = 4 I ;每隔一特定時(shí)間收集由娃膠管柱流出的區(qū)分液，并且共收集3-5個(gè)區(qū)分液(步驟106c)，其中，該特定時(shí)間約為5-10分鐘；以一高效能液相層析儀配合一光二極管偵測(cè)器對(duì)前一步驟所收集到的每一區(qū)分液進(jìn)行分析，以篩選出含有monascin與ankaf Iavin成分的區(qū)分液(步驟106d);及將前一步驟所篩選得到的區(qū)分液混合在一起，以得到該含有monascin與ankaflavin的區(qū)分液(步驟106e)。圖6是本發(fā)明第一較佳實(shí)施例的步驟107的詳細(xì)步驟流程圖。在前述的步驟107中，可以細(xì)分為以下步驟將步驟106所得到的該含有monascin與ankaflavin的區(qū)分液以一 C18管柱并配合HPLC以及一流洗液進(jìn)行流洗分離(步驟107a)，其中，該流洗液為Methanol :水=85 15 ;每隔一特定時(shí)間收集由C18管柱流出的區(qū)分液，并且共收集2個(gè)區(qū)分液(步驟107b)，其中，該特定時(shí)間約為5-10分鐘；以及以一高效能液相層析儀配合一光二極管偵測(cè)器對(duì)前一步驟所收集到的每一區(qū)分液進(jìn)行分析，以篩選出含有monascin成分的區(qū)分液(步驟107c)。前述步驟104d、105d以及106d中，HPLC分析法所使用的管柱(column)為C18column (25cmx4. 6mm, i. d. = 5 μ m),而移動(dòng)相為 Acetonitrile : water : trif luoroacetate = 62 : 38 : O. 05,流速為 lmL/min,并以多波長(zhǎng)偵測(cè)器(multiwavelength detector)偵測(cè)231nm的UV吸收波長(zhǎng)(因?yàn)閙onascin與ankaflavin可在231nm的UV吸收波長(zhǎng)下產(chǎn)生波峰)。另外，需利用monascin與ankaflavin的標(biāo)準(zhǔn)品作為比對(duì)組,將標(biāo)準(zhǔn)品的波峰時(shí)間與待測(cè)物的波峰作比對(duì)，以判斷待測(cè)物是否為monascin與ankaflavin。另外，在前述的步驟107c中，HPLC分析法所使用的條件與步驟104d、105d及106d大致相同，步驟107c較特別之處在于，monascin與ankaflavin是由極性差異的特性而彼此分離。由于C18 column可將較極性成分在較早的時(shí)間流洗出來(lái),而monascin相較于ankaflavin屬于較極性成分，因此monascin會(huì)先被流洗出來(lái),ankaflavin會(huì)較晚被流洗出來(lái)。由此特性，可收集較早流出的區(qū)分液，并且與monascin標(biāo)準(zhǔn)品做流洗時(shí)間與吸收波長(zhǎng)的比對(duì)，以確認(rèn)區(qū)分液中是否含有monascin。接著對(duì)本發(fā)明的第二較佳實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)介紹。本發(fā)明第二較佳實(shí)施例的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物，其成份是包含ankaflavin，其為一種紅曲黃色素，并且是由前述的紅曲發(fā)酵產(chǎn)物中萃取得到，該紅曲發(fā)酵產(chǎn)物是由紅曲菌Monascuspurpureus PAN 790所產(chǎn)生。其中，該ankaf Iavin的服用量為成人每日攝食O. 6mg以上，方可有效降低血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇在血液中的濃度。圖7是本發(fā)明第二較佳實(shí)施例的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法流程圖，其步驟201-206大致上與第一較佳實(shí)施例相同，因此不再贅述，不同之處在于第二較佳實(shí)施例的步驟207是利用pre-HPLC將ankaflavin成分分離出來(lái)。圖8是本發(fā)明第二較佳實(shí)施例的步驟207的詳細(xì)步驟流程圖。在前述的步驟207中，更可以細(xì)分為以下步驟將步驟206所得到的該含有monascin與ankaflavin的區(qū)分液以一 C18管柱并配合HPLC以及一流洗液進(jìn)行流洗分離(步驟207a)，其中，該流洗液為Methanol :水=85 15 ;每隔一特定時(shí)間收集由C18管柱流出的區(qū)分液，并且共收集2個(gè)區(qū)分液(步驟207b)，其中，該特定時(shí)間約為5-10分鐘；以及以一高效能液相層析儀配合一光二極管偵測(cè)器對(duì)前一步驟所收集到的每一區(qū)分液進(jìn)行分析，以篩選出含有ankaflavin成分的區(qū)分液(步驟207c)。在前述的步驟207c中,monascin與ankafIavin是由極性差異的特性而彼此分離。由于C18 column可將較極性成分在較早的時(shí)間流洗出來(lái),而monascin相較于ankaflavin屬于較極性成分，因此monascin會(huì)先被流洗出來(lái)，ankaflavin會(huì)較晚被流洗出來(lái)。由此特性，可收集較晚流出的區(qū)分液，并且與ankaflavin標(biāo)準(zhǔn)品做流洗時(shí)間與吸收波長(zhǎng)的比對(duì)，以確認(rèn)區(qū)分液中是否含有ankaflavin。接著對(duì)本發(fā)明的第三較佳實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)的介紹。本發(fā)明第三較佳實(shí)施例的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物，其成份包含monascin及ankaflavin,其皆為一種紅曲黃色素，并且是由前述的紅曲發(fā)酵產(chǎn)物中萃取得到，該紅曲發(fā)酵產(chǎn)物是由紅曲 菌 Monascus purpureus PAN 790 所產(chǎn)生。其中，該 monascin 以及該 ankaf Iavin 的含量比例范圍為I : 1-10 1，而最佳含量比例為3. 56 1，方可有效降低血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇在血液中的濃度。另外,該monascin的服用量為成人每日攝食2. 4mg以上,該ankaflavin的服用量為成人每日攝食0. 6mg以上，方可有效降低血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇在血液中的濃度。圖9是本發(fā)明第三較佳實(shí)施例的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法流程圖，其步驟301-306大致上與第一及第二較佳實(shí)施例相同，因此不再贅述，不同之處在于第三較佳實(shí)施例的步驟307是利用pre-HPLC分別將monascin以及ankaflavin成分分離出來(lái)，最后再依照步驟308所述,將該monascin以及該ankaflavin成分依照特定比例混合，而該特定比例的范圍值為I : 1-10 1，最佳值為3.56 I。圖10是本發(fā)明第三較佳實(shí)施例的步驟307的詳細(xì)步驟流程圖。在前述的步驟307中，更可以細(xì)分為以下步驟將步驟306所得到的該含有monascin與ankaflavin的區(qū)分液以一 C18管柱并配合HPLC以及一流洗液進(jìn)行流洗分離(步驟307a)，其中，該流洗液為Methanol :水=85 15 ;每隔一特定時(shí)間收集由C18管柱流出的區(qū)分液，并且共收集2個(gè)區(qū)分液(步驟307b)，其中，該特定時(shí)間約為5-10分鐘；以及以一高效能液相層析儀配合一光二極管偵測(cè)器對(duì)前一步驟所收集到的每一區(qū)分液進(jìn)行分析，以篩選出分別含有monascin以及ankaflavin成分的區(qū)分液(步驟307c)。在前述的步驟307c中,monascin與ankafIavin是由極性差異的特性而彼此分離。由于C18 column可將較極性成分在較早的時(shí)間流洗出來(lái),而monascin相較于ankaflavin屬于較極性成分，因此monascin會(huì)先被流洗出來(lái)，ankaflavin會(huì)較晚被流洗出來(lái)。由此特性，可分別收集較早及較晚流出的區(qū)分液，并且分別與monascin以及ankaflavin標(biāo)準(zhǔn)品做流洗時(shí)間與吸收波長(zhǎng)的比對(duì)，以確認(rèn)區(qū)分液中是否含有monascin或ankaflavin。為了證實(shí)本發(fā)明第一、第二及第三較佳實(shí)施例的組合物的確具有降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇濃度的功效，以下利用多種實(shí)驗(yàn)對(duì)其進(jìn)行分析及比較。在以下的分析內(nèi)容中，本發(fā)明第一較佳實(shí)施例的組合物為monascin(簡(jiǎn)稱(chēng)為MS)，其服用量相當(dāng)于成人每日攝食9. 82mg,第二較佳實(shí)施例的組合物為ankaflavin (簡(jiǎn)稱(chēng)為AF),其服用量相當(dāng)于成人每日攝食I. 43mg,第三較佳實(shí)施例的組合物為monascin加上ankaf Iavin (簡(jiǎn)稱(chēng)為MS+AF),其服用量分別相當(dāng)于成人每日攝食9. 82mg以及I. 43mg。另外,亦利用一含有monacolin K的組合物作為比較組，其簡(jiǎn)稱(chēng)為MK。首先，利用高膽固醇飲食的倉(cāng)鼠做為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，并分別服用八周的MS、AF、MS+AF以及MK以后，進(jìn)行血液中各項(xiàng)膽固醇參數(shù)的分析，包括血清中的總膽固醇(totalcholesterol, TC)含量、三酸甘油脂(triglyceride, TG)含量、高密度脂蛋白膽固醇(highdensity lipoprotein cholesterol, HDL-C)含量、低密度脂蛋白膽固醇(low densitylipoprotein cholesterol, LDL-C)含量、LDL-C與HDL-C的比例以及血清中脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物丙二醒(malondialdehyde, MDA)的含量。其中，MK的服用量相當(dāng)于成人每日攝食
14.46mg。另外，正常飲食組簡(jiǎn)稱(chēng)為NOR組，而高膽固醇飲食組簡(jiǎn)稱(chēng)為HC組。下列表一為上述動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，而表二為MS、AF、MS+AF以及MK組相對(duì)于HC組 的各項(xiàng)參數(shù)的降低或增加率。首先，在TC下降率的結(jié)果中，MS組與AF組皆可顯著降低血清中的TC含量，并且其效果高于MK組，而MS+AF組降低TC的效果又高于其他組別。在TG下降率的結(jié)果中，MS組、AF組以及MS+AF組皆可顯著下降血清中TG含量，并且效果高于MK組。在HDL-C上升率的結(jié)果中，MS組與AF組皆可顯著提升血清中HDL-C的含量，并且其效果皆高于MK組，而MS+AF組提升HDL-C的效果又高于其他組別。在HDL-C下降率的結(jié)果中，雖然MS組的效果與MK組差不多，但是AF組與MS+AF組對(duì)于血清中HDL-C的下降效果高于MK組。在LDL/HDL比值的下降率結(jié)果中，MS組的效果高于MK組，而AF組與MS+AF組的效果又高于其他組別，因此monascin、ankaflavin 與monascin+ankaflavin 相較于monacolinK更有助于改善心血管疾病與動(dòng)脈粥狀硬化癥的發(fā)生。在MDA下降率的結(jié)果中，MS組、AF組以及MS+AF組皆可顯著降低血清中MDA含量，并且其效果高于MK組。表一
權(quán)利要求
1.一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物，其特征在于至少包含一紅曲霉素，其為一種由一紅曲發(fā)酵產(chǎn)物中萃取得到的紅曲黃色素。
2.—種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于至少包含以下步驟 步驟I、提供一紅曲發(fā)酵產(chǎn)物； 步驟2、以丙酮對(duì)該紅曲發(fā)酵產(chǎn)物反復(fù)進(jìn)行三次萃取的動(dòng)作； 步驟3、將步驟2的產(chǎn)物利用一減壓濃縮的方式提升其濃度； 步驟4、將步驟3的產(chǎn)物利用一硅膠管柱層析法進(jìn)行第一次分離純化，并將色素區(qū)分液分離出來(lái)； 步驟5、將步驟4分離得到的色素區(qū)分液利用一葡聚糖凝膠管柱層析法進(jìn)行第二次分離純化，并將黃色素區(qū)分液分離出來(lái)； 步驟6、將步驟5分離得到的黃色素區(qū)分液利用該硅膠管柱層析法進(jìn)行第三次分離純化，并將含有紅曲霉素與紅曲黃素的區(qū)分液分離出來(lái)；以及 步驟7、將步驟6分離得到的該含有紅曲霉素與紅曲黃素的區(qū)分液由一制備型高效能液相層析法進(jìn)行第四次分離純化，并將紅曲霉素成分分離出來(lái)。
3.如權(quán)利要求2所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，在步驟2中，該紅曲發(fā)酵產(chǎn)物與該丙酮的比例為I : 10-1 50。
4.如權(quán)利要求2所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，在步驟3中，步驟2的產(chǎn)物在溫度范圍為40°C _60°C的情況下，利用一減壓濃縮的方式提升其濃度。
5.如權(quán)利要求2所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其中，步驟4包含以下步驟 步驟4. I、將步驟3所得到的產(chǎn)物加入一硅膠管柱中； 步驟4. 2、將多種流洗液依序加入該硅膠管柱中； 步驟4. 3、每隔一時(shí)間收集由硅膠管柱流出的區(qū)分液，并且共收集12 15個(gè)區(qū)分液；步驟4. 4、以一高效能液相層析儀配合一光二極管偵測(cè)器對(duì)步驟4. 3所收集到的每一區(qū)分液進(jìn)行篩選，以篩選出含有紅曲霉素與紅曲黃素成分的區(qū)分液；以及 步驟4. 5、將步驟4. 4所篩選得到的區(qū)分液混合在一起，以得到該色素區(qū)分液。
6.如權(quán)利要求5所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，步驟4.2所述的多種流洗液依序?yàn)榧和椤⒓和橐掖?9 I、己烷乙醇=8 2、己烷乙醇=7 3、己烷乙醇=I I以及乙醇。
7.如權(quán)利要求2所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，步驟5包含以下步驟 步驟5. I、將步驟4所得到的該色素區(qū)分液加入一葡聚糖凝膠管柱中； 步驟5. 2、將流洗液加入該葡聚糖凝膠管柱中； 步驟5. 3、每隔一時(shí)間收集由葡聚糖凝膠管柱流出的區(qū)分液，并且共收集3 5個(gè)區(qū)分液； 步驟5. 4、以一高效能液相層析儀-光二極管偵測(cè)器儀器對(duì)步驟5. 3所收集到的每一區(qū)分液進(jìn)行篩選，以篩選出含有紅曲霉素與紅曲黃素成分的區(qū)分液；以及步驟5. 5、將步驟5. 4所篩選得到的區(qū)分液混合在一起，以得到該黃色素區(qū)分液。
8.如權(quán)利要求7所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，步驟5.2所述的該流洗液為甲醇乙腈=9 I。
9.如權(quán)利要求2所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，步驟6包含以下步驟 步驟6. I、將步驟5所得到的該黃色素區(qū)分液加入一硅膠管柱中； 步驟6. 2、將多種流洗液依序加入該硅膠管柱中； 步驟6. 3、每隔一時(shí)間收集由硅膠管柱流出的區(qū)分液，并且共收集3 5個(gè)區(qū)分液；步驟6. 4、以一高效能液相層析儀-光二極管偵測(cè)器儀器對(duì)步驟6. 3所收集到的每一區(qū)分液進(jìn)行篩選，以篩選出含有紅曲霉素與紅曲黃素成分的區(qū)分液；以及 步驟6. 5、將步驟6. 4所篩選得到的區(qū)分液混合在一起，以得到該含有紅曲霉素與紅曲黃素的區(qū)分液。
10.如權(quán)利要求9所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，步驟6.2所述的該多種流洗液依序?yàn)槎燃淄橐掖?95 5、二氯甲燒乙醇=9 I以及二氯甲燒乙醇=4 I。
11.如權(quán)利要求2所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，步驟7包含以下步驟 步驟7. I、將步驟6所得到的該含有紅曲霉素與紅曲黃素的區(qū)分液以一 C18管柱并配合高效能液相層析儀以及一流洗液進(jìn)行流洗分離； 步驟7. 2、每隔一時(shí)間收集由C18管柱流出的區(qū)分液，并且共收集2個(gè)區(qū)分液；以及步驟7. 3、以一高效能液相層析儀-光二極管偵測(cè)器儀器對(duì)步驟7. 2所收集到的每一區(qū)分液進(jìn)行篩選，以篩選出含有紅曲霉素成分的區(qū)分液。
12.如權(quán)利要求11所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，步驟7. I所述的該流洗液為甲醇水=85 15。
13.一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物，其特征在于至少包含一紅曲黃素，其為一種由一紅曲發(fā)酵產(chǎn)物中萃取得到的紅曲黃色素。
14.一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于至少包含以下步驟 步驟I、提供一紅曲發(fā)酵產(chǎn)物； 步驟2、以丙酮對(duì)該紅曲發(fā)酵產(chǎn)物反復(fù)進(jìn)行三次萃取的動(dòng)作； 步驟3、將步驟2的產(chǎn)物利用一減壓濃縮的方式提升其濃度； 步驟4、將步驟3的產(chǎn)物利用一硅膠管柱層析法進(jìn)行第一次分離純化，并將色素區(qū)分液分離出來(lái)； 步驟5、將步驟4分離得到的色素區(qū)分液利用一葡聚糖凝膠管柱層析法進(jìn)行第二次分離純化，并將黃色素區(qū)分液分離出來(lái)； 步驟6、將步驟5分離得到的黃色素區(qū)分液利用該硅膠管柱層析法進(jìn)行第三次分離純化，并將含有紅曲霉素與紅曲黃素的區(qū)分液分離出來(lái)；以及 步驟7、將步驟6分離得到的含有紅曲霉素與紅曲黃素的區(qū)分液由一制備型高效能液相層析法進(jìn)行第四次分離純化，并將紅曲黃素成分分離出來(lái)。
15.如權(quán)利要求14所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，在步驟2中，該紅曲發(fā)酵產(chǎn)物與該丙酮的比例為I : 10- I : 50。
16.如權(quán)利要求14所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，在步驟3中，所述的步驟2的產(chǎn)物在溫度范圍為40°C -60°C的情況下，利用一減壓濃縮的方式提升其濃度。
17.如權(quán)利要求14所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，步驟4包含以下步驟 步驟4. I、將步驟3所得到的產(chǎn)物加入一硅膠管柱中； 步驟4. 2、將多種流洗液依序加入該硅膠管柱中； 步驟4. 3、每隔一時(shí)間收集由硅膠管柱流出的區(qū)分液，并且共收集12 15個(gè)區(qū)分液；步驟4. 4、以一高效能液相層析儀-光二極管偵測(cè)器儀器對(duì)步驟4. 3所收集到的每一區(qū)分液進(jìn)行篩選，以篩選出含有紅曲霉素與紅曲黃素成分的區(qū)分液；以及 步驟4. 5、將步驟4. 4所篩選得到的區(qū)分液混合在一起，以得到該色素區(qū)分液。
18.如權(quán)利要求17所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，步驟4.2所述的該多種流洗液依序?yàn)榧和?、己烷乙?9 I、己烷乙醇=8 2、己烷乙醇=7 3、己烷乙醇=I I以及乙醇。
19.如權(quán)利要求14項(xiàng)所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，步驟5包含以下步驟 步驟5. I、將步驟4所得到的該色素區(qū)分液加入一葡聚糖凝膠管柱中； 步驟5. 2、將流洗液加入該葡聚糖凝膠管柱中； 步驟5. 3、每隔一時(shí)間收集由葡聚糖凝膠管柱流出的區(qū)分液，并且共收集3 5個(gè)區(qū)分液； 步驟5. 4、以一高效能液相層析儀-光二極管偵測(cè)器儀器對(duì)步驟5. 3所收集到的每一區(qū)分液進(jìn)行篩選，以篩選出含有紅曲霉素與紅曲黃素成分的區(qū)分液；以及 步驟5. 5、將步驟5. 4所篩選得到的區(qū)分液混合在一起，以得到該黃色素區(qū)分液。
20.如權(quán)利要求19所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，步驟5. 2所述的該流洗液為甲醇乙腈=9 I。
21.如權(quán)利要求14所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，步驟6包含以下步驟 步驟6. I、將步驟5所得到的該黃色素區(qū)分液加入一硅膠管柱中； 步驟6. 2、將多種流洗液依序加入該硅膠管柱中； 步驟6. 3、每隔一時(shí)間收集由硅膠管柱流出的區(qū)分液，并且共收集3 5個(gè)區(qū)分液；步驟6. 4、以一高效能液相層析儀-光二極管偵測(cè)器儀器對(duì)步驟6. 3所收集到的每一區(qū)分液進(jìn)行篩選，以篩選出含有紅曲霉素與紅曲黃素成分的區(qū)分液；以及 步驟6. 5、將步驟6. 4所篩選得到的區(qū)分液混合在一起，以得到該含有紅曲霉素與紅曲黃素的區(qū)分液。
22.如權(quán)利要求21所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，步驟6. 2所述的該多種流洗液依序?yàn)槎燃淄橐掖?95 5、二氯甲烷乙醇=9 I以及二氯甲烷乙醇=4 I。
23.如權(quán)利要求14所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，步驟7包含以下步驟 步驟7. I將步驟6所得到的該含有紅曲霉素與紅曲黃素的區(qū)分液以一 C18管柱并配合高效能液相層析儀以及一流洗液進(jìn)行流洗分離； 步驟7. 2、每隔一時(shí)間收集由C18管柱流出的區(qū)分液，并且共收集2個(gè)區(qū)分液；以及步驟7. 3、以一高效能液相層析儀-光二極管偵測(cè)器儀器對(duì)步驟7. 2所收集到的每一區(qū)分液進(jìn)行篩選，以篩選出含有紅曲黃素成分的區(qū)分液。
24.如權(quán)利要求23所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，步驟7. I所述的該流洗液為甲醇水=85 15。
25.—種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物，其特征在于至少包含一紅曲霉素以及紅曲黃素，其皆為一種由一紅曲發(fā)酵產(chǎn)物中萃取得到的紅曲黃色素。
26.如權(quán)利要求25所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物，其特征在于其中，該紅曲霉素以及該紅曲黃素的含量比例范圍為I : I 10 : I。
27.如權(quán)利要求25所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物，其特征在于其中，該紅曲霉素以及該紅曲黃素的含量比例為3. 56 I。
28.—種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于至少包含以下步驟 步驟I、提供一紅曲發(fā)酵產(chǎn)物； 步驟2、以丙酮對(duì)該紅曲發(fā)酵產(chǎn)物反復(fù)進(jìn)行三次萃取的動(dòng)作； 步驟3、將步驟2的產(chǎn)物利用一減壓濃縮的方式提升其濃度； 步驟4、將步驟3的產(chǎn)物由一硅膠管柱層析法進(jìn)行第一次分離純化，并將色素區(qū)分液分離出來(lái)； 步驟5、將步驟4分離得到的色素區(qū)分液利用一葡聚糖凝膠管柱層析法進(jìn)行第二次分離純化，并將黃色素區(qū)分液分離出來(lái)； 步驟6、將步驟5分離得到的黃色素區(qū)分液由該硅膠管柱層析法進(jìn)行第三次分離純化，并將含有紅曲霉素與紅曲黃素的區(qū)分液分離出來(lái)； 步驟7、將步驟6分離得到的含有紅曲霉素與紅曲黃素的區(qū)分液由一制備型高效能液相層析法進(jìn)行第四次分離純化，并分別將紅曲霉素以及紅曲黃素成分分離出來(lái)；以及步驟8、將該紅曲霉素以及該紅曲黃素成分混合。
29.如權(quán)利要求28所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，在步驟2中，該紅曲發(fā)酵產(chǎn)物與該丙酮的比例為I : 10-1 50。
30.如權(quán)利要求28所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，在步驟3中，所述的步驟2中的產(chǎn)物在溫度范圍為40°C 60°C的情況下，利用一減壓濃縮的方式提升其濃度。
31.如權(quán)利要求28所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，步驟4包含以下步驟 步驟4. I、將步驟3所得到的產(chǎn)物加入一硅膠管柱中； 步驟4. 2、將多種流洗液依序加入該硅膠管柱中； 步驟4. 3、每隔一時(shí)間收集由硅膠管柱流出的區(qū)分液，并且共收集12-15個(gè)區(qū)分液；步驟4. 4、以一高效能液相層析儀-光二極管偵測(cè)器儀器對(duì)步驟4. 3所收集到的每一區(qū)分液進(jìn)行篩選，以篩選出含有紅曲霉素與紅曲黃素成分的區(qū)分液；以及 步驟4. 5、將步驟4. 4所篩選得到的區(qū)分液混合在一起，以得到該色素區(qū)分液。
32.如權(quán)利要求31所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，步驟4.2所述的該多種流洗液依序?yàn)榧和?、己烷乙?9 I、己烷乙醇=8 2、己烷乙醇=7 3、己烷乙醇=I I以及乙醇。
33.如權(quán)利要求28所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，步驟5包含以下步驟 步驟5. I、將步驟4所得到的該色素區(qū)分液加入一葡聚糖凝膠管柱中； 步驟5. 2、將流洗液加入該葡聚糖凝膠管柱中； 步驟5. 3、每隔一時(shí)間收集由葡聚糖凝膠管柱流出的區(qū)分液，并且共收集3-5個(gè)區(qū)分液； 步驟5. 4、以一高效能液相層析儀-光二極管偵測(cè)器儀器對(duì)步驟5. 3所收集到的每一區(qū)分液進(jìn)行篩選，以篩選出含有紅曲霉素與紅曲黃素成分的區(qū)分液；以及 步驟5. 5、將步驟5. 4所篩選得到的區(qū)分液混合在一起，以得到該黃色素區(qū)分液。
34.如權(quán)利要求33所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，步驟5. 2所述的該流洗液為甲醇乙腈=9 I。
35.如權(quán)利要求28所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，步驟6包含以下步驟 步驟6. I、將步驟5所得到的該黃色素區(qū)分液加入一硅膠管柱中； 步驟6. 2、將多種流洗液依序加入該硅膠管柱中； 步驟6. 3、每隔一時(shí)間收集由硅膠管柱流出的區(qū)分液，并且共收集3 5個(gè)區(qū)分液；步驟6. 4、以一高效能液相層析儀-光二極管偵測(cè)器儀器對(duì)步驟6. 3所收集到的每一區(qū)分液進(jìn)行篩選，以篩選出含有紅曲霉素與紅曲黃素成分的區(qū)分液；以及 步驟6. 5、將步驟6. 4所篩選得到的區(qū)分液混合在一起，以得到該含有紅曲霉素與紅曲黃素的區(qū)分液。
36.如權(quán)利要求35所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，步驟6.2所述的該多種流洗液依序?yàn)槎燃淄橐掖?95 5、二氯甲烷乙醇=9 I以及二氯甲烷乙醇=4 I。
37.如權(quán)利要求28所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，步驟7包含以下步驟 步驟7. I、將步驟6所得到的該含有紅曲霉素與紅曲黃素的區(qū)分液以一 C18管柱并配合高效能液相層析儀以及一流洗液進(jìn)行流洗分離； 步驟7. 2、每隔一時(shí)間收集由C18管柱流出的區(qū)分液，并且共收集2個(gè)區(qū)分液；以及步驟7. 3、以一高效能液相層析儀-光二極管偵測(cè)器儀器對(duì)步驟7. 2所收集到的每一區(qū)分液進(jìn)行篩選，以篩選出分別含有紅曲霉素以及紅曲黃素成分的區(qū)分液。
38.如權(quán)利要求37所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，步驟7. I所述的該流洗液為甲醇水=85 15。
39.如權(quán)利要求28所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，步驟8所述的紅曲霉素與紅曲黃素成分的混合比例的范圍值為I 1-10 I。
40.如權(quán)利要求28所述的一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物的制造方法，其特征在于其中，步驟8所述的紅曲霉素與紅曲黃素成分的混合比例為3.56 I。
全文摘要
本發(fā)明是有關(guān)于一種可降血脂且提升高密度脂蛋白膽固醇的組合物及其制造方法，本發(fā)明揭露的組合物包含monascin或是ankaflavin，亦可以同時(shí)含有monascin以及ankaflavin；該組合物的制造方法包含以下步驟利用丙酮對(duì)一紅曲發(fā)酵產(chǎn)物反復(fù)進(jìn)行三次萃取的動(dòng)作；利用一減壓濃縮的方式提升其濃度；依序利用一硅膠、一膠濾層析法、一硅膠以及一高效能制備型液相層析法進(jìn)行分離純化，便可萃取得到monascin以及ankaflavin成分。本發(fā)明提供的組合物可有效降低血脂并提升高密度脂蛋白膽固醇的濃度。
文檔編號(hào)A61P9/10GK102908343SQ201110226880
公開(kāi)日2013年2月6日 申請(qǐng)日期2011年8月2日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月2日
發(fā)明者潘子明, 李俊霖, 吳政倫 申請(qǐng)人:晨暉生物科技股份有限公司