專利名稱：一種治療春季過敏和過敏性哮喘的注射劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療春季過敏和過敏性哮喘的注射劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
長期以來治療春季過敏與過敏性哮喘就是醫(yī)學(xué)界的一個難題，目前多采用激素抗過敏與消炎治療，但療效較差，癥狀輕者可起到一定的治療作用，但對于反復(fù)發(fā)作者只能對癥治療，且效果很差。春季過敏與過敏性哮喘均屬于自身免疫性疾病，其發(fā)病機(jī)理在于春季過敏與過敏性哮喘是由多種細(xì)胞特別是肥大細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞參與的慢性氣道與皮膚炎癥，免疫病理學(xué)已經(jīng)證實在皮膚與呼吸道的慢性過敏性炎癥是相似的，均有 Th2細(xì)胞、肥大/嗜堿細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞以及IgE的參與，參與的細(xì)胞因子如IL-4等炎性化學(xué)介質(zhì)。在敏感個體，與IgE結(jié)合的組織肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞，在接觸變應(yīng)原后，遂被激活，釋放組織胺、白三烯和其他介質(zhì)。這種反應(yīng)輕者可引起春季過敏，重者可引起速發(fā)性的鼻部刺激癥狀，如由神經(jīng)介導(dǎo)的打噴嚏和流鼻涕，由血管充血引起的鼻塞等。在下呼吸道的速發(fā)癥狀是支氣管痙攣和黏液的高分泌，引起咳嗽，呼吸困難，胸悶和喘息。

發(fā)明內(nèi)容
為了克服上述治療春季過敏與過敏性哮喘的藥物的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種見效快、療效持久的治療春季過敏與過敏性哮喘的注射劑。本發(fā)明的另一個目的是提供這種注射劑的制備方法。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案一種治療春季過敏與過敏性哮喘的注射劑，該劑主要由細(xì)胞成分組成，每毫升注射用劑中細(xì)胞成分的含量為1000萬個至5000萬個；所述細(xì)胞成分是從人骨髓中提取、純化出的間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)體外低血清或無血清培養(yǎng)和擴(kuò)增后收集得到的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。本發(fā)明所述的注射劑除了細(xì)胞成分，還可以含有一些輔助成分，所述輔助成分可以是本領(lǐng)域常見的能夠做為細(xì)胞溶劑的成分，如維生素、葡萄糖、等滲生理鹽水等等。此外，本發(fā)明還提供了一種所述治療春季過敏與過敏性哮喘的注射劑的制備方法，該方法步驟為所述細(xì)胞成分是從人骨髓中提取、純化出的間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)體外低血清或無血清培養(yǎng)和擴(kuò)增后收集得到的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。本發(fā)明所采集的骨髓組織是從人的骨髓中抽取得到的。在本發(fā)明所提供的注射劑制備方法中，將來源于人骨髓的間充質(zhì)干細(xì)胞提取、純化，再經(jīng)體外低血清或無血清培養(yǎng)和擴(kuò)增后收集得到的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。取標(biāo)本與細(xì)胞培養(yǎng)過程采用通用的方法。注射劑配制將培養(yǎng)數(shù)量達(dá)到要求的細(xì)胞首先使用胰蛋白酶進(jìn)行消化處理，使其脫離培養(yǎng)皿底面，在使用無外源性蛋白的DMEM清洗數(shù)次，去除外源性生長因子和活性物質(zhì)。再將收集到的細(xì)胞直接加入到5%的含氨基酸、生理鹽水及維生素的葡萄糖注射液中， 混勻，配成注射劑，每150毫升注射劑中細(xì)胞成分的總個數(shù)為1000萬個至5000萬個。
治療步驟將注射劑進(jìn)行靜脈滴注，40分鐘內(nèi)輸完。與現(xiàn)有治療手段相比，本發(fā)明的注射劑具有治療簡便、無毒副作用、見效快，療效持久等特點。


圖1是培養(yǎng)成功的細(xì)胞在100倍光學(xué)顯微鏡下形態(tài)學(xué)照片；圖2是本發(fā)明的一個具體實施例的治療春季過敏與過敏性哮喘的注射劑在包裝袋中的照片。
具體實施例方式下面進(jìn)一步詳細(xì)說明本發(fā)明所提供的治療春季過敏與過敏性哮喘疾病的注射劑及其制備方法，但本發(fā)明并不因此而受到任何限制。實施例一種治療春季過敏和過敏性哮喘的注射劑的制備一.骨髓樣品的抽取常規(guī)手術(shù)消毒后抽取患者骨髓血，加抗凝劑后離心去脂肪層，加生理鹽水稀釋后三次離心，洗滌細(xì)胞后得到的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。二.細(xì)胞懸液的制備配制注射劑將培養(yǎng)數(shù)量達(dá)到要求的細(xì)胞首先使用胰蛋白酶進(jìn)行消化處理，使其脫離培養(yǎng)皿底面，再使用無外源性蛋白的DMEM清洗3次。將收集到的細(xì)胞加入到5%的含氨基酸的葡萄糖注射液中，混勻，配成注射劑，每毫升注射用劑中細(xì)胞成分的總個數(shù)為1000 萬至5000萬個。病毒檢測皮膚組織和培養(yǎng)4周后的細(xì)胞進(jìn)行HIV和肝炎病毒的檢驗，確定此為無病毒細(xì)胞。免疫反應(yīng)測試第4周將0. Iml細(xì)胞注射液對受術(shù)者進(jìn)行皮試(同青霉素皮試方法)，無免疫反應(yīng)。成品檢測1)外觀注射液為無色混懸液。2)本品中細(xì)胞分類檢定骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞采用細(xì)胞形態(tài)學(xué)方法觀察。3)無菌試驗按《中國生物制品規(guī)程》(2000版)通則《生物制品無菌試驗規(guī)程》 A/B項進(jìn)行，結(jié)果符合無菌要求。三.治療用于春季過敏和過敏性哮喘病例各1例。1.治療前檢查，各項指標(biāo)均正常，包括血尿便常規(guī)、心電圖、肝腎功能、HIV、 HbsAg02.將注射部位用常規(guī)消毒消毒。3.進(jìn)行靜脈點滴輸液。四、禁忌孕婦慎用。
五、效果描述輸液后三天癥狀減輕，一周后明顯減輕，兩周后癥狀基本消失。
權(quán)利要求
1.一種治療春季過敏和過敏性哮喘的注射劑，該注射劑主要由人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成分組成，每毫升注射劑中細(xì)胞成分的含量為1000萬至5000萬個；所述細(xì)胞成分是從人骨髓中提取、純化出的間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)體外低血清或無血清培養(yǎng)和擴(kuò)增后收集得到的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。
2.一種制備權(quán)利要求1所述的治療春季過敏和過敏性哮喘的注射劑的方法，包括以下步驟(1)采用人骨髓為來源分離、純化出的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行體外低血清或無血清培養(yǎng)和擴(kuò)增，收集所得到的大量骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞；(2)將收集到的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞制備成治療春季過敏或過敏性哮喘的注射劑；每毫升該注射劑中細(xì)胞成分的含量為1000萬個至5000萬個。
3.將收集到的細(xì)胞直接加入到5%的含氨基酸、生理鹽水及維生素的葡萄糖注射液中，混勻，配成注射劑150ml注射液。治療過程為每袋注射液150ml，經(jīng)靜脈滴注，每40天注射一次，三次注射為一個療程。
全文摘要
一種治療春季過敏和過敏性哮喘的注射劑，以細(xì)胞為主要成分，每毫升注射用填充劑中細(xì)胞成分的含量為1000萬個至5000萬個；所述細(xì)胞成分是用提取人的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)過體外低血清或無血清培養(yǎng)和擴(kuò)增，收集得到的人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞細(xì)胞，將收集到的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞制備成可以用做臨床靜脈滴注的注射劑，該注射劑用于治療春季過敏和過敏性哮喘疾病。本發(fā)明提供了這種注射劑的制備方法。本發(fā)明的優(yōu)點是注射后可七天內(nèi)出現(xiàn)明顯的臨床療效，且作用持久，治療程序簡便。
文檔編號A61K35/28GK102225073SQ20111015048
公開日2011年10月26日 申請日期2011年6月7日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月7日
發(fā)明者韓斌 申請人:北京賽爾泰和生物醫(yī)藥科技有限公司