專利名稱：一種曲克蘆丁腦蛋白水解物滴丸及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種曲克蘆丁腦蛋白水解物滴丸及其制備方法。
背景技術(shù)：
曲克蘆丁系蘆丁經(jīng)羥乙基化制成的半合成黃酮化合物，具有抑制紅細(xì)胞和血小板凝聚作用，防止血栓形成，同時(shí)能增加血中氧的含量，改善微循環(huán)，促進(jìn)新血管生成以增進(jìn)側(cè)支循環(huán)。它對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞有保護(hù)作用，能對(duì)抗5-羥色胺和緩激肽引起的血管損傷，增加毛細(xì)血管的抵抗力，降低毛細(xì)血管的通透性，有防止因血管通透性升高而引起的水腫的作用， 并有抗放射性損傷、抗炎癥、抗過敏、抗?jié)兊茸饔茫荒芤种蒲“宓哪?，有防止血栓形成的作?同時(shí)能對(duì)抗5-羥色胺、緩激肽引起的血管損傷，增加毛細(xì)血管抵抗力，降低毛細(xì)血管通透性，可防止血管通透性升高引起的水腫.對(duì)急性缺血性腦損傷有顯著的保護(hù)作用.曲克蘆丁適用于腦血栓形成和腦栓塞所致的偏癱、失語(yǔ)以及心肌梗塞前綜合征、 動(dòng)脈硬化、中心性視網(wǎng)膜炎、血栓性靜脈炎、靜脈曲張、血管通透性升高引起的水腫等.曲克蘆丁適用于腦血栓形成所致的偏癱、失語(yǔ)、動(dòng)脈硬化、梗死前綜合征、血栓性靜脈炎、靜脈曲張、慢性靜脈功能不全、中心性視網(wǎng)膜炎、糖尿病性視網(wǎng)膜炎及血管通透性升高引起的水腫等。本品經(jīng)臨床應(yīng)用表明，應(yīng)用范圍廣，療效好，尤其對(duì)治療閉塞性腦血管病較好。曲克蘆丁口服吸收良好，口服本品300mg后，達(dá)峰時(shí)間為2 9h，與血漿蛋白結(jié)合率小于30%。主要由膽汁排出，尿中排泄量?jī)H占3% 6%。目前臨床應(yīng)用的劑型主要為片劑和注射劑.由于曲克蘆丁有胃腸道障礙及過敏反應(yīng)，個(gè)別患者靜脈滴注本品可引起心血管系統(tǒng)及肝臟毒性反應(yīng)、急性腦水腫和心律失常等，嚴(yán)重者可產(chǎn)生暫時(shí)性精神失常.腦水解類藥物是健康動(dòng)物大腦經(jīng)酶解純化等方法得到的含有氨基酸和小分子肽等的混合物，能透過血腦屏障，改善腦代謝，可用于治療各種原因所致的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病。腦蛋白水解物是上述藥物中的一種，是以健康豬的新鮮大腦經(jīng)酶解純化得到的，含有多種氨基酸及磷脂類，能通過血腦屏障，提高耗氧量，增加腦活性，參與體內(nèi)氧化作用；可改善腎上腺皮質(zhì)機(jī)能，促進(jìn)全身代謝；參與α -酮酸的氧化脫羧和葡萄糖代謝，提高腦氧及葡萄糖利用度，供給腦細(xì)胞修復(fù)再生所需的作為神經(jīng)遞質(zhì)本身或神經(jīng)遞質(zhì)和生物胺類的前體的各種氨基酸，調(diào)節(jié)腦神經(jīng)活動(dòng)，促進(jìn)中樞遞質(zhì)氨基丁酸、多巴胺和5-羥色胺等生物合成；與游離氨結(jié)合成無毒的谷氨酰胺，降低血氨；同時(shí)改善腎上腺皮質(zhì)機(jī)能，促進(jìn)全身代謝，是一種腦功能不全輔助治療藥物。腦蛋白水解物是以豬腦為原料經(jīng)過酶解等步驟得到有效部位，因此，在研究新的制劑過程中，對(duì)其物質(zhì)基礎(chǔ)也應(yīng)該重新研究，中國(guó)專利94104516. I公開了腦蛋白水解物制備方法，采用制勻漿、脫脂、風(fēng)干、酶解、超濾、離子交換等步驟，該方法中風(fēng)干步驟會(huì)造成多肽等步驟的流失；中國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)枮?1130523. 1,200510064567. 6,200710055421. 4等專利公開了腦蛋白水解物的新的制備方法，上述方法中都存在使得氨基酸大量流失的步驟， 因此，上述方法值得商榷；中國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)枮?00610065169. O在制備過程腦蛋白水解物中，加入外源氨基酸，同樣目前臨床中使用的腦蛋白水解物制劑也是通過添加外源游離氨基酸制備的，說明現(xiàn)有技術(shù)的制備方法需要進(jìn)一步改進(jìn)。

發(fā)明內(nèi)容
基于上述原因，本申請(qǐng)人通過科學(xué)的試驗(yàn)研究，對(duì)腦蛋白水解物進(jìn)行研究，改進(jìn)了腦蛋白水解物制備方法，并對(duì)曲克蘆丁和腦蛋白水解物制劑進(jìn)行了研究，將其制備成滴丸制劑，能較好的克服目前臨床應(yīng)用的制劑的缺陷，并對(duì)滴丸基質(zhì)進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)水溶性基質(zhì)制備成滴丸，具有圓整率高、溶散時(shí)限好、丸重差異低等優(yōu)點(diǎn)。申請(qǐng)人:對(duì)腦蛋白水解物制備方法進(jìn)行研究，得到一種新的方法，該方法采用陽(yáng)離子交換方法及超濾方法等步驟，能較好的保留腦蛋白水解物中的游離氨基酸，而且所得到的腦蛋白水解物中游離氨基酸種類和含量與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)要求的一致，無需添加外源氨基酸.本發(fā)明制備方法得到的腦蛋白水解物有效成份為小分子多肽和16種天然游離氨基酸，全部為天然水解物，含有小分子多肽與16種游離氨基酸。不添加氨基酸，多肽分子量為5000 10000道爾頓，游離氨基酸為L(zhǎng)型氨基酸，pH值為6. O 8. 0，符合國(guó)標(biāo)要求，也更加適合人體上消化道的吸收。本發(fā)明通過下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的.一種曲克蘆丁腦蛋白水解物滴丸，其特征在于滴丸中含曲克蘆丁和腦蛋白水解物的制劑活性成分與基質(zhì)的重量比為I : 3-5，制劑活性成分中曲克蘆丁與腦蛋白水解物的重量比為1-5 I ；其中基質(zhì)為聚乙二醇1000、聚乙二醇1500、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、硬脂酸聚烴氧(40)酯、硬脂酸鈉和泊洛沙姆中的一種或幾種配合的混合基質(zhì)；其中腦蛋白水解物是通過以下方法制備的將健康豬腦組織加入純水，搗碎，勻漿，在65-90 0C保溫15-45分鐘，冷卻至 30-50°C，加入草酸溶液調(diào)pH值為2. 0-4.0 ;攪拌下加入豬腦重量I. 5 % -3. O %的胃蛋白酶，攪拌，30-50°C保溫2-6小時(shí)，收集上清液，沉淀離心，合并上清液；上清液減壓濃縮到豬腦重量的1/2-1/5，用堿溶液調(diào)pH值5. 0-8. 0,100°C _120°C滅活3_6小時(shí)，加水至豬腦重量，用氫氧化鈣溶液調(diào)PH值6. 5-7. 5，過濾，活性炭吸附，脫碳，得清液；加入豬腦重量1-3% 的胰蛋白酶，35-45°C保溫1-4小時(shí)，煮沸15-30分鐘，冷卻，靜置，過濾，得水解液；水解液上離子交換柱，用純水洗脫，洗脫液棄去，再用濃度為5% -15%的氨水洗脫，收集洗脫液， 濃縮，用堿溶液調(diào)PH值6. 9-7. 5，減壓濃縮，去除氨至盡，濃縮液靜置，過濾，去除沉淀，得原液；原液在-20°C以下凍結(jié)保存，解凍，過濾，去除沉淀，得清液；稀釋清液至每毫升含氮 5. 4-6. 8mg，含游離氨基酸25-50mg，并加入稀釋液重量的O. 03% -O. I %亞硫酸氫鈉，得到調(diào)配液；調(diào)配液用6000-10000分子量超濾膜超濾，收集濾液，O. 2 μ m膜除菌過濾，冷凍干燥，得到腦蛋白水解物。其中腦蛋白水解物制備中酸溶液為鹽酸、磷酸、甲酸、乙酸、草酸溶液中的一種。其中腦蛋白水解物制備中堿溶液為氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、氫氧化鈣溶液中的一種。
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其中腦蛋白水解物制備中離子交換柱是強(qiáng)酸型陽(yáng)離子交換柱。一種曲克蘆丁腦蛋白水解物滴丸的制備方法為按配比將曲克蘆丁和腦蛋白水解物充分混合均勻，得到制劑活性成分；調(diào)整滴丸機(jī)的溫度控制系統(tǒng)，使滴丸機(jī)的滴頭溫度加熱并保持在50°C -70°C，冷凝劑的溫度冷卻并保持在0°c至10°C ;待滴丸機(jī)滴頭和冷凝柱內(nèi)冷凝劑的溫度分別達(dá)到所述溫度狀態(tài)時(shí)，將制劑活性成分加入到熔融的基質(zhì)中，攪拌，保溫，將熔融液置于滴丸機(jī)的滴頭罐內(nèi)，通過滴頭滴入冷凝劑中收縮成形即得。一種曲克蘆丁腦蛋白水解物滴丸制備方法中的冷凝劑是甲基硅油、液體石蠟、植物油中的一種或幾種。一、制劑組方篩選試驗(yàn)將健康豬腦組織加入純水，搗碎，勻衆(zhòng)，在75°C保溫30分鐘，冷卻至40°C，加入草酸溶液調(diào)PH值為3. O ;攪拌下加入豬腦重量2%的胃蛋白酶，攪拌，40°C保溫4小時(shí)，收集上清液，沉淀離心，合并上清液；上清液減壓濃縮到豬腦重量的1/3，用氫氧化鈉溶液調(diào)pH值 5. 0-8. 0,110°C滅活4. 5小時(shí)，加水至豬腦重量，用氫氧化鈣溶液調(diào)pH值7. 0，過濾，活性炭吸附，脫碳，得清液；加入豬腦重量2%的胰蛋白酶，40°C保溫3小時(shí)，煮沸25分鐘，冷卻，靜置，過濾，得水解液；水解液上強(qiáng)酸型陽(yáng)離子交換柱，用純水洗脫，洗脫液棄去，再用濃度為 10 %的氨水洗脫，收集洗脫液，濃縮，用氫氧化鈉溶液調(diào)pH值7. 0，減壓濃縮，去除氨至盡， 濃縮液靜置，過濾，去除沉淀，得原液；原液在-20°C以下凍結(jié)保存，解凍，過濾，去除沉淀， 得清液；稀釋清液至每毫升含氮6. Omg,含游離氨基酸40mg，并加入稀釋液重量的O. 06 %亞硫酸氫鈉，得到調(diào)配液；調(diào)配液用8000-10000分子量超濾膜超濾，收集濾液，O. 2 μ m膜除菌過濾，冷凍干燥，得到腦蛋白水解物。按重量比=2 I的比例將曲克蘆丁和腦蛋白水解物充分混合均勻，得到制劑活性成分；將制劑活性成分分別與熔融的PEG1500、PEG4000、PEG6000、硬脂酸聚烴氧(40) 酯、硬脂酸鈉、泊洛沙姆、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纖維素、蟲蠟、單硬脂酸甘油酯、倍他環(huán)糊精、聚乙二醇4000 :聚乙二醇6000 = 3 I、聚乙二醇4000 :聚乙二醇6000 = 2 I、聚乙二醇4000 :聚乙二醇6000 = I I、聚乙二醇6000 :硬脂酸鈉=I I混合，65°C下攪拌，保溫；制劑活性成分與基質(zhì)的重量比為I : 4;使滴丸機(jī)的滴頭溫度加熱并保持65°C， 冷凝劑的溫度冷卻并保持在2-5°C ;待滴丸機(jī)滴頭和冷凝柱內(nèi)冷凝劑的溫度分別達(dá)到所述溫度狀態(tài)時(shí)，將含熔融液置于滴丸機(jī)的滴頭罐內(nèi)，通過滴頭滴入冷凝劑中收縮成形即得。試驗(yàn)結(jié)果見表I。表I試驗(yàn)結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種曲克蘆丁腦蛋白水解物滴丸，其特征在于滴丸中含曲克蘆丁和腦蛋白水解物的制劑活性成分與基質(zhì)的重量比為I : 3-5，制劑活性成分中曲克蘆丁與腦蛋白水解物的重量比為1-5:1;其中基質(zhì)為聚乙二醇1000、聚乙二醇1500、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、硬脂酸聚烴氧(40)酯、硬脂酸鈉和泊洛沙姆中的一種或幾種配合的混合基質(zhì)；其中腦蛋白水解物是通過以下方法制備的將健康豬腦組織加入適量純水，搗碎，勻漿，在65-90°C保溫15-45分鐘，冷卻至 30-50°C，加入草酸溶液調(diào)pH值為2. 0-4.0 ;攪拌下加入豬腦重量1.5% -3.0%的胃蛋白酶，攪拌，30-50°C保溫2-6小時(shí)，收集上清液，沉淀離心，合并上清液；上清液減壓濃縮到豬腦重量的1/2-1/5，用堿溶液調(diào)pH值5. 0-8. 0,100°C _120°C滅活3_6小時(shí)，加水至豬腦重量，用氫氧化鈣溶液調(diào)PH值6. 5-7. 5，過濾，活性炭吸附，脫碳，得清液；加入豬腦重量1-3% 的胰蛋白酶，35-45°C保溫1-4小時(shí)，煮沸15-30分鐘，冷卻，靜置，過濾，得水解液；水解液上離子交換柱，用純水洗脫，洗脫液棄去，再用濃度為5% -15%的氨水洗脫，收集洗脫液， 濃縮，用堿溶液調(diào)PH值6. 9-7. 5，減壓濃縮，去除氨至盡，濃縮液靜置，過濾，去除沉淀，得原液；原液在-20°C以下凍結(jié)保存，解凍，過濾，去除沉淀，得清液；稀釋清液至每毫升含氮5.4-6. 8mg，含游離氨基酸25-50mg，并加入稀釋液重量的O. 03% -O. I %亞硫酸氫鈉，得到調(diào)配液；調(diào)配液用6000-10000分子量超濾膜超濾，收集濾液，O. 2 μ m膜除菌過濾，冷凍干燥，得到腦蛋白水解物。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種曲克蘆丁腦蛋白水解物滴丸，其中制備方法中酸溶液為鹽酸、磷酸、甲酸、乙酸、草酸溶液中的一種。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種曲克蘆丁腦蛋白水解物滴丸，其中制備方法中堿溶液為氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、氫氧化鈣溶液中的一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種曲克蘆丁腦蛋白水解物滴丸，其中制備方法中離子交換柱是強(qiáng)酸型陽(yáng)離子交換柱。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種曲克蘆丁腦蛋白水解物滴丸，其中滴丸的制備方法為按配比將曲克蘆丁和腦蛋白水解物充分混合均勻，得到制劑活性成分；調(diào)整滴丸機(jī)的溫度控制系統(tǒng)，使滴丸機(jī)的滴頭溫度加熱并保持在50°C _70°C，冷凝劑的溫度冷卻并保持在0°C至10°C ;待滴丸機(jī)滴頭和冷凝柱內(nèi)冷凝劑的溫度分別達(dá)到所述溫度狀態(tài)時(shí)，將制劑活性成分加入到熔融的基質(zhì)中，攪拌，保溫，將熔融液置于滴丸機(jī)的滴頭罐內(nèi)，通過滴頭滴入冷凝劑中收縮成形即得。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種曲克蘆丁腦蛋白水解物滴丸，其制備方法中的冷凝劑是甲基硅油、液體石蠟、植物油中的一種或幾種。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，本發(fā)明公開了一種原料為曲克蘆丁和腦蛋白水解物的滴丸及其制備方法，其中滴丸包括曲克蘆丁、腦蛋白水解物和基質(zhì)。本發(fā)明滴丸制劑處方是通過科學(xué)的篩選試驗(yàn)確定的。藥理試驗(yàn)表明，本發(fā)明滴丸比市售曲克蘆丁腦蛋白水解物為原料的制劑具有更好的藥理作用。
文檔編號(hào)A61K47/12GK102580055SQ20121006166
公開日2012年7月18日 申請(qǐng)日期2012年3月9日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月9日
發(fā)明者張睿 申請(qǐng)人:張睿