專利名稱：一種地錢總黃酮的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬中藥制藥工程領(lǐng)域，涉及一種地錢總黃酮的制備方法，方法中包括堿水提取、調(diào)酸析出、醇溶精制等關(guān)鍵步驟。
背景技術(shù)：
在苔蘚植物世界中，地錢(Marchantia polymorpha L.)是分布最為廣泛的物種之一。地錢屬苔綱，地錢科，又名地浮萍、一團云，全年均可采收，以全草入藥，可用鮮品，亦可用干品。地錢的化學(xué)成分主要有揮發(fā)油、黃酮類、萜類、糖類、氨基酸等。從現(xiàn)有文獻分析，發(fā)明人所在的團隊研究最為活躍，對地錢總黃酮的提取、分離和含量測定撰寫了 I篇博士論文(拳卷地錢中黃酮類化合物的分離純化、結(jié)構(gòu)表征及生物活性研究，中南大學(xué),2004年)，以及5篇研究性論文(地錢總黃酮提取的研究，林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè)，2004年第6期；拳卷地錢總黃酮的提 取與純化，食品科學(xué)，2005年第10期；拳卷地錢中黃酮類化合物的含量測定，中南藥學(xué)，2005年第2期；反相高效液相色譜法用于地錢中黃酮類化合物的分離與測定，分析試驗室，2005年第4期)?，F(xiàn)有文獻中，從地錢中提取黃酮類物質(zhì)的方法，無一例外地采用60 80%的乙醇回流提取，并且只達到實驗室規(guī)模，生產(chǎn)量很小。在中藥新產(chǎn)品研發(fā)過程中，藥理藥效研究、制劑試制、長期毒性研究等，需要大量的地錢總黃酮，現(xiàn)有方法顯然難以滿足。截至目前，與地錢有關(guān)發(fā)明專利共有10個，其中涉及化學(xué)成分提取(分離)的有3個:一種利用超高壓技術(shù)制備地錢中金魚草素的方法(201210595621.X)、地錢提取物的制備工藝及其在制備治療肝癌和乙型肝炎藥物中的應(yīng)用(200610031324.7)、地錢揮發(fā)油及制劑的制法和在制備抗癌藥中的應(yīng)用(200710035277.8)。與本專利申請相近的，為第二個專利(地錢提取物的制備工藝及其在制備治療肝癌和乙型肝炎藥物中的應(yīng)用，200610031324.7)，但其提取物的制備方法并不明確，根據(jù)說明書的描述，可能是用70%的乙醇提取，所得成分主要為黃酮類。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的技術(shù)方案包括:藥材經(jīng)堿提，酸沉，不溶物用稀醇精制。技術(shù)方案中的堿提-酸沉，是利用地錢黃酮類化合物可溶于稀堿水，但不溶于稀酸水的特點而設(shè)計的；同樣，用稀醇精制，也是利用地錢總黃酮不溶于水，但溶于熱稀醇的特點而設(shè)計的。本發(fā)明所述的用堿性水加熱提取，是指用NaOH、Ca (OH) 2或KOH將水調(diào)節(jié)至pH9 11，然后用于提??；提取溫度范圍為50 100°C，提取時間為I 2小時；如提取過程中進行攪動，提取效果更佳。優(yōu)選用Ca(OH)2調(diào)節(jié)水的pH，煮沸I小時，提取2次。本發(fā)明所述的用酸調(diào)至酸性，是指趁熱用HCl或H2SO4將堿提液調(diào)節(jié)至pH3 5，靜置，使冷卻至室溫；靜置時間至少達48小時以上，否則難以過濾。優(yōu)選用HCl調(diào)節(jié)pH，靜置96小時。
本發(fā)明所述的用醇溶液加熱溶解，是指用60 85% (v/v)的乙醇或甲醇水溶液，對堿提酸沉所得的不溶物進行加熱溶解，醇溶液的用量一般為不溶物的10 30倍(v/w)，加熱至沸，回流時間I 2小時。優(yōu)選用20倍70%乙醇(v/w)回流溶解I小時。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明突出的實質(zhì)性特點和顯著性進步是:1.本發(fā)明用堿水替代現(xiàn)有技術(shù)中的稀醇，從地錢中提取黃酮類物質(zhì)，安全、環(huán)保、成本低。2.本發(fā)明生產(chǎn)工藝及工藝操作簡單，易于放大，適于工業(yè)化生產(chǎn)。
具體實施例方式下列實施例子用于舉例說明本發(fā)明，并不是對本發(fā)明保護范圍的任何限制。實施例一先制備提取用的石灰堿性水:將石灰乳與水充分混合，靜置96小時，取上清液，然后不斷用水稀釋，使PH9.5，備用。取鮮地錢1000克，亂刀砍碎，置不銹鋼鍋中，加入10升PH9.5石灰水，煮沸I小時，趁熱倒出提取液，如此提取3次。合并提取液，2層普通濾紙過濾，取濾液，趁熱用HCl調(diào)pH3.5，靜置，同時使料液自然冷卻，96小時后過濾，取濾餅，濕重102克，置平底燒瓶中，加入2500毫升75%乙醇水溶液，加熱回流I小時，放置，冷至室溫后過濾，取濾餅，80°C烘干，得地錢總黃酮20.3克。按文獻方法(拳卷地錢中黃酮類化合物的含量測定，中南藥學(xué)，2005年第2期)，以蘆丁為對照，分光光度法測定地錢總黃酮中的黃酮含量為75.82%。實施例二
配制KaOH水溶液，使pHIO，備用。取鮮地錢1000克，亂刀砍碎，置不銹鋼鍋中，力口入10升PHlO堿性水，煮沸2小時，趁熱倒出提取液，如此提取2次。合并提取液，2層普通濾紙過濾，取濾液，趁熱用H2SO4調(diào)pH3，靜置，同時使料液自然冷卻，100小時后過濾，取濾餅，濕重114克，置平底燒瓶中，加入3000毫升80%乙醇水溶液，加熱回流2小時，放置，冷至室溫后過濾，取濾餅，80°C烘干，得地錢總黃酮16.8克。按文獻方法(拳卷地錢中黃酮類化合物的含量測定， 中南藥學(xué)，2005年第2期)，以蘆丁為對照，分光光度法測定地錢總黃酮中的黃酮含量為65.74%。實施例三配制NaOH水溶液，使pH9.0,備用。取地錢干品500克，打成最粗粉，置不銹鋼鍋中，加入15升pH9.0堿性水，煮沸2小時，趁熱倒出提取液，如此提取2次。合并提取液，2層普通濾紙過濾，取濾液，趁熱用HCl調(diào)pH4.5，靜置，同時使料液自然冷卻，80小時后過濾，取濾餅，濕重317克，置平底燒瓶中，加入5000毫升75%乙醇水溶液，加熱回流2小時，放置，冷至室溫后過濾，取濾餅，80°C烘干，得地錢總黃酮53.2克。按文獻方法(拳卷地錢中黃酮類化合物的含量測定，中南藥學(xué)，2005年第2期)，以蘆丁為對照，分光光度法測定地錢總黃酮中的黃酮含量為71.59%。
權(quán)利要求
1.一種地錢總黃酮的制備方法，其特征在于:工藝流程如下:地錢一用堿性水加熱提取一濾取濾液一用酸調(diào)至酸性一沉淀一濾取濾餅一用醇溶液加熱溶解一濾取濾液一回收溶劑一沉淀一濾取濾餅一烘干一地錢總黃酮。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的堿性水，其特征在于:是指pH9 11的無機堿的水溶液，無機堿選用以下的任一種:NaOH、Ca (OH)2, Κ0Η。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的酸性水，其特征在于:是指pH3 5的無機酸的水溶液，無機酸選用以下的任一種:HC1、H2S04。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的醇溶液，其特征在于:醇的體積百分比為60 85%的水溶液，醇選用以下 的任一種:乙醇、甲醇。
全文摘要
本發(fā)明公開一種從地錢中提取總黃酮的方法，該方法以天然植物地錢為原料，用堿性水為溶劑，加熱提取，提取液用酸調(diào)節(jié)至pH3～5，析出總黃酮粗品，繼用60-85％乙醇溶解，回收乙醇后再次析出，得到地錢總黃酮，產(chǎn)品中黃酮類化合物的含量達60％以上。本發(fā)明工藝簡單，適于大量生產(chǎn)。
文檔編號A61K36/10GK103230420SQ20131015996
公開日2013年8月7日 申請日期2013年5月3日 優(yōu)先權(quán)日2013年5月3日
發(fā)明者朱華, 周春山, 肖建波, 鐘世安, 黃海濱, 鄒登峰 申請人:廣西中醫(yī)藥大學(xué)