專利名稱：一種促進肝細胞再生的中藥及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種中藥，具體地是涉及一種促進肝細胞再生的中藥及其制備方法。
背景技術：
肝臟在人體內(nèi)的作用十分重要，一旦損傷會影響代謝、解毒、免疫和抗微生物等功能。正常成人肝臟的肝細胞是一種長壽命細胞，平常極少見分裂增殖，但在肝受損害后，特別是肝部分切除術后，殘余的肝細胞迅速出現(xiàn)活躍的分裂增殖，動物實驗證明將正常肝臟切除70% 80%，仍可維持正常生理功能。但40歲以后，肝的再生能力減弱，這與機體的代謝能力是一致的。肝細胞再生是對病毒性、化學性、缺血性和免疫性損傷及部分肝切除術后的一種高度代償性反應，肝具有如此大的再生能力，其機制迄今還不完全清楚。目前已知，肝再生受肝內(nèi)外諸多因子的調(diào)控，在肝受損害或部分切除后，有關因子的量發(fā)生變化，它們通過肝細胞相應的受體作用于肝細胞，啟動和促進或者抑制肝細胞的增殖。肝損傷發(fā)生后，肝細胞再生活躍與否是肝臟功能維持的關鍵。因此，通過促進肝細胞的再生對病變肝臟進行修復，應是肝炎治療的重點之一。大量研究報道顯示許多中藥復方具有保護肝細胞、修復其損傷、促進其再生的作用。中藥復方抗肝損傷的治法治則大致有疏肝理氣、活血化瘀、補腎健脾益氣養(yǎng)血、清熱利濕解毒四大類，如疏肝理氣類小柴胡湯是治療慢性肝臟疾病臨床用方之一，大量臨床實踐已證實了它對慢性肝炎的有效性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種促進肝細胞再生的中藥及其制備方法。一種促進肝細胞再生的中藥，所述中藥由下述重量配比的原料制成:葛根10 50份丹參5 30份人參:Tl5份。
重量配比是:葛根2(Γ40份丹參15 20份人參5 12份。最佳地，所述原料的重量配比是:葛根30份丹參18份人參9份。所述中藥除了上述原料外，還可以包括輔料，所述輔料可以是蔗糖、淀粉、糊精、硬脂酸鎂、山梨醇、甘露醇、乳糖、微晶纖維素、微粉硅膠、羧甲基纖維素、水等這些藥物制劑中常規(guī)輔料的一種或多種的組合，具體選擇哪一種或哪幾種輔料應根據(jù)所需要制成的劑型來確定。所述中藥可以是適合于臨床使用的任何一種劑型，例如:湯劑、片劑、顆粒劑、膠囊齊U、丸劑、膏劑、合劑、糖漿劑等。所述原料可以粉碎后直接服用，也可以經(jīng)提取、精制、濃縮后再制成適當?shù)膭┬?，例如可以將原料熬成湯劑，也可以全部粉碎后加入適當?shù)妮o料制成片劑、散劑、顆粒劑、膠囊劑、丸劑，或者將原料全部提取后再加入適當?shù)妮o料制成片劑、顆粒劑、膠囊劑、膏劑、合劑、糖漿劑，還可以將原料部分粉碎、部分提取后再加入適當?shù)妮o料制成片劑、顆粒劑、膠囊劑等。提取方法可以采用中藥制備中常規(guī)的水煎提取或乙醇回流提取法。葛根的主要成分有異黃酮類(如葛根素)、葛根苷類、三萜皂苷類等，其中異黃酮類是其主要活性成分，文獻報道的葛根總黃酮的提取方法有三種:一種以水煎煮進行提取，一種以一定濃度乙醇進行回流提取，還有一種方法以乙醇滲漏法進行提取。丹參的主要成分有丹參酮(如丹參酮II A)、丹酚酸等，提取方法也有水提、醇提兩類。人參的主要成分是人參皂甙、人參二醇、人參多糖等，常用滲漏法和乙醇回流法進行提取。我們在大量試驗的基礎上，發(fā)現(xiàn)乙醇回流法提取的效果最好，不僅各指標成分如丹參酮II A、葛根素、人參皂甙Rg的提取轉(zhuǎn)移率(即提取物中的指標成分總量占提取藥材中的指標成分總量的比率)最高，說明提取的有效成分最多，而且提取物中的指標成分(丹參酮II A、葛根素、人參皂甙Rg)含量最聞，而含量越聞說明提取物中的有效成分更加富集，雜質(zhì)更少。本發(fā)明優(yōu)選的一種制備方法是:按重量配比取葛根、丹參、人參，按重量加入6 12倍質(zhì)量濃度為65 85%的乙醇，回流提取f 3次，每次f 3小時，合并提取液并濃縮至60°C時相對密度(相對于水的密度)為1.25^1.35的稠膏，再加入輔料制成適合臨床使用的劑型。最佳的制備方法是:按重量配比取葛根30份、丹參18份、人參9份，按重量加入8倍質(zhì)量濃度為75%的乙醇，回流提取2次，每次2小時，合并提取液并濃縮至60°C時相對密度為1.3的稠膏，再加入輔料制成適合臨床使用的劑型。采用該制備方法得到的稠膏中，丹參酮II A的平均含量達12.2mg/g、葛根素的平均含量達17.8mg/g、人參皂甙Rg的平均含量達5.6mg/g (均采用高效液相法測定)，通過測定藥材中的含量，計算出丹參酮II A的平均轉(zhuǎn)移率達27.8%、葛根素的平均轉(zhuǎn)移率達21.4%、人參皂甙Rg的平均轉(zhuǎn)移率達30.9%。綜合提取效果高于水煎煮法、滲漏法和其它提取方法。優(yōu)選地，所述劑型為膠囊劑。本發(fā)明具有疏肝理氣、活血化瘀的功效，可用于慢性肝炎、病毒性肝炎、酒精肝等引起的肝細胞損傷和肝纖維化的預防和治療。療效確切，副作用少，藥效試驗表明:I)對四氯化碳誘導的大鼠肝損傷模型，本發(fā)明能降低血清中AST、ALT的含量，提高血清中白蛋白(ALB)的含量，降低血清中的甘油三酯的含量，提高血清中總白蛋白(TP)的含量，能降低血清中膽紅素和堿性磷酸酶的含量，提示本發(fā)明具有明顯的保肝降酶的作用；2)對Con A致免疫性肝損傷小鼠模型，本發(fā)明能降低模型小鼠血清中ALT、AST和肝勻漿中MDA水平，增強肝勻漿中重要的抗氧化酶SOD的活性，減輕肝臟的病理性損傷，表明TPF對Con A誘導的小鼠免疫性肝損傷具有保護作用；3)本發(fā)明含藥血清能刺激WB-F344細胞的增殖，對大鼠肝干細胞具有增殖和誘導分化的作用。
具體實施例方式實施例1一種促進肝細胞再生的中藥，由下述重量配比的原料制成:葛根10份丹參5份人參3份。制備方法是:將葛根、丹參、人參粉碎成細 粉，滅菌后直接服用。用法用量是:每日三次，每次6g。
功能主治是:疏肝理氣、活血化瘀。用于慢性肝炎、病毒性肝炎、酒精肝等引起的肝細胞損傷和肝纖維化的預防和治療。實施例2一種促進肝細胞再生的中藥，由下述重量配比的原料制成:葛根50份丹參5份人參3份。制備方法是:將葛根、丹參、人參加3倍水煎煮2次，每次30min，過濾，制成湯劑。用法用量是:每日三次，每次一劑(相當于生藥材15g)。實施例3一種促進肝細胞再生的中藥，由下述重量配比的原料制成:葛根50份丹參30份人參15份。制備方法是:取葛根、丹參、人參，按重量加入6倍質(zhì)量濃度為85%的乙醇，回流提取3次，每次I小時，合并提取液并濃縮至60°C時相對密度為1.25的稠膏，再加入糖粉制成顆粒劑。用法用量是:每日三次，每次3粒(相當于生藥材12g)。實施例4一種促進肝細胞再生的中藥，所述中藥由下述重量配比的原料制成:葛根40份丹參15·份人參5份。制備方法是:取葛根、丹參、人參，按重量加入12倍質(zhì)量濃度為65的乙醇，回流提取I次，提取3小時，合并提取液并濃縮至60°C時相對密度為1.35的稠膏，再加入微晶纖維素、淀粉、硬脂酸鎂制成片劑。用法用量是:每日三次，每次3粒(相當于生藥材15g)。實施例5一種促進肝細胞再生的中藥，所述中藥由下述重量配比的原料制成:葛根20份丹參20份人參12份。制備方法是:取葛根、丹參、人參，按重量加入10倍質(zhì)量濃度為80%的乙醇，回流提取2次，每次I小時，合并提取液并濃縮至60°C時相對密度為1.3的稠膏，再加入適量微晶纖維素，淀粉，制粒，用膠囊填充，制成膠囊劑。用法用量是:每日三次，每次3粒(相當于生藥材16g)。實施例6一種促進肝細胞再生的中藥，所述中藥由下述重量配比的原料制成:葛根30份丹參18份人參9份。取葛根、丹參、人參，按重量加入8倍質(zhì)量濃度為75%的乙醇，回流提取2次，每次2小時，合并提取液并濃縮至60°C時相對密度為1.3的稠膏，再加入適量微晶纖維素，淀粉，制粒，用膠囊填充，制成膠囊劑。用法用量是:每日三次，每次3粒(相當于生藥材19g)。實施例7 本發(fā)明藥物對大鼠四氯化碳慢性肝損傷的藥理研究I試驗材料1.1實驗動物SD大鼠，清潔級，由武漢大學醫(yī)學院藥理研究室提供。1.2試劑及儀器
1.2.1實驗藥物本發(fā)明實施例4、5、6藥物；小柴胡顆粒，由廣州白云山藥業(yè)有
限責任公司生產(chǎn)。1.2.2主要試劑ALT(丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶)試劑盒、AST(天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶)試劑盒、ALB (白蛋白)試劑盒、總膽紅素試劑盒、TP (總蛋白)試劑盒，購自南京建成生物有限公司；甘油三酯試劑盒、總膽固醇試劑盒，北京北化康泰臨床試劑有限公司；生理鹽水。1.2.3主要儀器Rayto RT1904型半自動生化分析儀(深圳雷杜生命科學股份有限公司)；UV-9100分光光度計；電子分析天平(上海精密科學儀器有限公司)；TGL-16C高速臺式離心機(上海安亭科學儀器廠)。2實驗方法2.1造模與分組選取SD大鼠72只，體重140-180 g，雄性，按體重隨機分為6組，即空白組12只，四氯化碳肝損傷模型組60只，四氯化碳肝損傷模型組大鼠皮下注射40%四氯化碳色拉油溶液,第I次按0.5mL/100g,以后每次按0.3mL/100g給予,每周2次，連續(xù)8周。造模第4周時眼眶取血，測定血清AST，按體重和AST含量隨機分為5組:模型組、小柴胡顆粒組、實施例4、5、6組。2.2給藥方法造模4周后開始灌胃給藥:空白組和模型組均給予蒸餾水；其余各組分別給予小柴胡顆粒顆粒、實施例4、5、6藥液；灌胃容積為10ml/kg，每天給藥I次，連續(xù)給藥4周，實驗結束前動物稱重，禁食12h，測定各項指標。2.3統(tǒng)計方法SPSS 17.0軟件進行統(tǒng)計分析，描述指標采用(X 士 S )表示，多組
樣本均數(shù)間的比較采用單因素方差分析。3 結果我們采用四氯化碳誘導的大鼠肝損傷模型，研究時發(fā)現(xiàn)實施例4、5、6組與模型組比較，均能降低血清中AST、ALT的含量，提高血清中白蛋白(ALB)的含量，降低血清中的甘油三酯的含量，提高血清中總白蛋白(TP)的含量，提示本發(fā)明具有明顯的保肝降酶的作用；表3表明本發(fā)明均能降低血清中膽紅素和堿性磷酸酶的含量，提示有保肝作用，同時具有提高免疫作用。結果見表廣3。表I各組大鼠慢性肝損傷血液生化指標比較CX: S)
權利要求
1.一種促進肝細胞再生的中藥，其特征在于:所述中藥由下述重量配比的原料制成: 葛根10 50份丹參5 30份人參:Γ15份。
2.根據(jù)權利要求1所述的促進肝細胞再生的中藥，其特征在于:所述原料的重量配比是: 葛根2(Γ40份丹參15 20份人參5 12份。
3.根據(jù)權利要求1所述的促進肝細胞再生的中藥，其特征在于:所述原料的重量配比是: 葛根30份丹參18份人參9份。
4.一種促進肝細胞再生中藥的制備方法，其特征在于:按重量配比取葛根1(Γ50份、丹參5 30份、人參3 15份，按重量加入6 12倍質(zhì)量濃度為65 85%的乙醇，回流提取f 3次，每次f 3小時，合并提取液并濃縮至60°C時相對密度為1.25^1.35的稠膏，再加入輔料制成適合臨床使用的劑型。
5.根據(jù)權利要求4所述促進肝細胞再生中藥的制備方法，其特征在于:按重量配比取葛根30份、丹參18份、人參9份，按重量加入8倍質(zhì)量濃度為75%的乙醇，回流提取2次，每次2小時，合并提取液并濃縮至60°C時相對密度為1.3的稠膏，再加入輔料制成適合臨床使用的劑型。
6.根據(jù)權利要求 4或5所述促進肝細胞再生中藥的制備方法，其特征在于:所述劑型為膠囊劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種促進肝細胞再生的中藥，所述中藥由下述重量配比的原料制成葛根10~50份、丹參5~30份、人參3~15份。本發(fā)明還公開了所述中藥的制備方法取葛根、丹參、人參，加入6~12倍65~85%的乙醇，回流提取1~3次，每次1~3小時，合并提取液并濃縮至60℃時相對密度為1.25~1.35的稠膏，再加入輔料制成適合臨床使用的劑型。本發(fā)明具有疏肝理氣、活血化瘀的功效，可用于慢性肝炎、病毒性肝炎、酒精肝等引起的肝細胞損傷和肝纖維化的預防和治療。療效確切，副作用少。
文檔編號A61K36/537GK103230435SQ20131017818
公開日2013年8月7日 申請日期2013年5月15日 優(yōu)先權日2013年5月15日
發(fā)明者熊富良, 黃志軍, 李崇明 申請人:武漢健民藥業(yè)集團股份有限公司