專利名稱：作為抗癌劑的4,8－二氫苯并二噻吩－4,8－二酮的新穎親水性類似物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是關(guān)于4，8-二氫苯并二噻吩-4，8-二酮的親水性類似物，其可作為抗癌劑，以及關(guān)于含有該親水性類似物之醫(yī)藥調(diào)配物。
背景技術(shù)：
我們的先前研究中，已鑒別出萘并[2，3-b]噻吩-4，9-二酮類(A)、4，8-二氫苯并[1，2-b5，4-b’]二噻吩-4，8-二酮類(B)、以及4，8-二氫苯并[1，2-b4，5-b’]二噻吩-4，8-二酮類(C)為有效的抗癌劑[美國專利第6,174,913 B1；6,337,346B1號(hào)，其詳細(xì)內(nèi)容以參考數(shù)據(jù)合并于本文]。這些苯并噻吩類似物中，許多化合物對人類腫瘤細(xì)胞株具有非常有效的細(xì)胞毒殺活性。然而，多數(shù)的這些化合物為相當(dāng)親脂性的，因此，不利于活體及臨床研究。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明是進(jìn)行二氫苯并二噻吩二酮的新穎親水性類似物的合成以及評估其抗癌活性。
本發(fā)明的第一方面是關(guān)于選自由式(D)化合物及式(E)化合物所組成的群組的化合物
其中Y及Z獨(dú)立地為O、S、-NH-、或Se，以及Y及Z較佳為S；A1及A2獨(dú)立地為O、S、或NR5，其中R5為H或烷基；R1、R2、R3及R4獨(dú)立地為H、烷基、-CR5R6-X-C(O)-(CH2)nCOOH、-CR5R6-X-(CH2)nCOOH、-CR5R6-X-(CH2)nNR5R6、-C(O)-NR6-(CR5R6)nCOOH、-C(O)-NR6-(CR5R6)nNR5R6、-CR5R6-C(O)-(CH2)nCOOH、-CR5R6-X-C(O)-(CH2)nNR5R6、-C(O)-(CR5R6)nCOOH、-C(O)-(CR5R6)nNR5R6、-CR5＝N-(CH2)nCOOH、-CR5＝N-(CH2)nNR5R6、-CR5＝NOH、或 其中X為O、S、或NH；R5是如上述所界定；R6為H或烷基；以及n為1至5；惟R1、R2、R3及R4中的至少一者為除了氫及烷基外的基團(tuán)；或其醫(yī)藥可接受的鹽。
較佳地，R2、R3及R4為H，以及R1為-CR5R6-X-C(O)-(CH2)nCOOH、-CR5R6-X-(CH2)nCOOH、-CR5R6-X-(CH2)nNR5R6、-C(O)-NR6-(CR5R6)nCOOH、或-C(O)-NR6-(CR5R6)nNR5R6，其中X、R5、R6及n是如上述所界定。
較佳地，A1及A2為O。
較佳地，X為O。
較佳地，R5及R6獨(dú)立地為H或甲基。
較佳地，R2、R3及R4為H，以及R1為-CR5R6-X-C(O)-(CH2)nCOOH，其中X、R5、R6及n是如上述所界定。
較佳地，R2、R3及R4為H，以及R1為-CR5R6-X-(CH2)nCOOH，其中X、R5、R6及n是如上述所界定。
較佳地，R2、R3及R4為H，以及R1為-CR5R6-X-(CH2)nNR5R6，其中X、R5、R6及n是如上述所界定。
較佳地，R2、R3及R4為H，以及R1為-C(O)-NR6-(CR5R6)nCOOH，其中X、R5、R6及n是如上述所界定。
較佳地，R2、R3及R4為H，以及R1為-C(O)-NR6-(CR5R6)nNR5R6，其中X、R5、R6及n是如上述所界定。
較佳地，本發(fā)明的化合物具有式(D)的化學(xué)式。
較佳地，本發(fā)明的化合物具有式(E)的化學(xué)式。
較佳地，具有式(D)的本發(fā)明化合物為單-[1-(4，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b5，4-b’]二噻吩-2-基)-甲基]琥珀酸酯(IIa-1)、單-[1-(4，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b5，4-b’]二噻吩-2-基)-乙基]琥珀酸酯(IIb-1)、或單-[1-(4，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b5，4-b′]二噻吩-2-基)-乙基]戊烷二酸酯(IIb-2)；以及具有式(E)的本發(fā)明化合物為單-[1-(4，8-二酮基-4，8-二羥基苯并[1，2-b4，5-b’]二噻吩-2-基)-乙基]琥珀酸酯(VII-1)、單-[1-(4，8-二酮基-4，8-二羥基苯并[1，2-b4，5-b’]二噻吩-2-基)-乙基]戊烷二酸酯(VII-2)、或4，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b4，5-b’]二噻吩-2-羧酸-(2-二甲胺基-乙基)-酰胺(XV-2)。
本發(fā)明的第二方面是一種于醫(yī)藥可接受的載劑中包括有效抗癌量的上述式(D)或(E)化合物，或其醫(yī)藥可接受的鹽的抗癌醫(yī)藥組合物。
本發(fā)明的另一方面是一種治療腫瘤的方法，該方法包括對需要治療的對象投予上述式(D)或(E)的化合物，或其醫(yī)藥可接受的鹽，其投予量可有效治療該腫瘤。
本發(fā)明的又另一方面是利用上述式(D)或(E)的化合物，或其醫(yī)藥可接受的鹽以制備實(shí)行上述治療腫瘤方法的藥劑。
較佳地，該腫瘤是選自由非-小細(xì)胞肺癌、乳癌、鼻咽癌、前列腺癌、結(jié)腸癌、肝癌、回結(jié)腸癌、白血病以及中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌癥所組成的群組，以及更佳地該腫瘤為非-小細(xì)胞肺癌、乳癌、鼻咽癌及前列腺癌。
實(shí)施方式于苯并二噻吩二酮類系列化合物中持續(xù)尋找有效的抗癌藥候選物時(shí)，合成出新穎的親水性類似物且予以評估。衍生自羥烷基-4，8-二氫苯并[1，2-b5，4-b’]二噻吩-4，8-二酮(I)及羥烷基-4，8-二氫苯并[1，2-b4，5-b’]二噻吩-4，8-二酮(VI)的琥珀酸酯類(D、E)與酰胺類(XV)系列化合物是值得進(jìn)一步探討其抗癌活性。
本文中的「烷基」，單獨(dú)地或?yàn)槠渌〈?例如「烷氧基」)的部分，是指C1至C4烷基，其可為直鏈或支鏈，且為飽和或不飽和者。較佳地，該烷基為飽和者，以及較佳地該烷基為直鏈狀。
本文中的「鹵素」或「鹵基」分別是指氟、氯、溴、碘等，或指氟基、氯基、溴基、碘基等。
適用于合成本發(fā)明化合物的方法是詳述于下文中，且熟于此技藝者可參照下述實(shí)施例明了該方法的變異。
依照我們先前提出的方法[L.J.Huang，S.C.Kuo，C.Y.Perng，Y.H.Chao，T.S.Wu，A.T.Mcphail，A.Manger，H.Y.Cheng and K.H.Lee.Bioorg.Med.Chem.Lett 8，2763-2768(1998)；Y.H.Chao，S.C.Kuo，C.H.Wu，C.Y.Lee，A.Manger.I.C.Sun，S.L Morris-Natschke and K.H.Lee.J.Med.Chem.41，4658-4661(1998)；Y.H.Chao，S.C.Kuo，K.Ku，I.P.Chiu，C.H.Wu，A.Manger，H.K.Wang，and K.H.Lee.Bioorg.Med.Chem.7，1025-1031(1999)]制備為合成目標(biāo)化合物所需的關(guān)鍵中間產(chǎn)物(I、VI)。
如反應(yīng)流程1所示，單-(4，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b5，4-b’]二噻吩基-烷基)烷二酸酯類(II)是在有機(jī)或無機(jī)堿存在下，以酸酐處理該關(guān)鍵中間產(chǎn)物I，羥烷基-4，8-二氫苯并[1，2-b5，4-b’]二噻吩-4，8-二酮類，而得。
反應(yīng)流程1
當(dāng)該關(guān)鍵中間產(chǎn)物I在堿存在下與各種鹵烷酸酯類(haloalkanoates)[X(CH2)nCOOEt]反應(yīng)時(shí)，可得相對應(yīng)的烷氧基烷酸酯類(III)。將化合物III以TFA或NaOH水解，可得該相對應(yīng)的酸類(IV)，其可產(chǎn)生水溶性鹽類。將關(guān)鍵中間產(chǎn)物I與各種鹵烷胺類反應(yīng)可得相對應(yīng)的烷氧基烷胺類(V)，分別經(jīng)HCl處理，而得其水溶性鹽類。
另一方面，依照上述制備化合物II、IV、V的類似方法(反應(yīng)流程2)，使用該關(guān)鍵中間產(chǎn)物VI，羥烷基-4，8-二氫苯并[1，2-b4，5-b’]二噻吩-4，8-二酮類，作為起始物，而成功地將關(guān)鍵中間產(chǎn)物VI轉(zhuǎn)換為親水性的目標(biāo)化合物VII、IX、X。
反應(yīng)流程2
如反應(yīng)流程3所示，在偶合劑存在下，將4，8-二氫苯并[1，2-b5，4-b’]二噻吩-4，8-二酮-2-羧酸XI以胺基酸處理而形成酰胺類XII，然后將該酰胺類轉(zhuǎn)換為相對應(yīng)的酸類XIII。當(dāng)以NH3處理XI時(shí)，可得到相對應(yīng)的銨鹽類(XI-NH4)。
反應(yīng)流程3
當(dāng)使用4，8-二氫苯并[1，2-b4，5-b’]二噻吩-4，8-二酮-2-羧酸類(XIV)作為起始物時(shí)，依照上述制備化合物XIII及XI-NH4的類似方法(反應(yīng)流程4)，可成功地將起始物XIV轉(zhuǎn)換為目標(biāo)化合物XVI、XVI-Na及XIV-NH4。
反應(yīng)流程4 提供下列實(shí)施例以進(jìn)一步說明本發(fā)明，但不應(yīng)理解為以這些實(shí)施例限制本發(fā)明。所有的熔點(diǎn)是以Büchi MP-540儀器進(jìn)行測定且未矯正。IR光譜是以KBr壓片進(jìn)行且記錄于Nicolet Impact 440FT-IR分光光度計(jì)。NMR光譜是于DMSO-d6，CD3OD或CDCl3中由Varian Unity Inova-500光譜儀取得。該化學(xué)偏移値是以δ値表示(百萬分之一單位)。下列所使用的縮寫為s＝單峰，d＝雙峰，t＝三峰，q＝四峰，m＝多峰，以及br＝寬幅。質(zhì)譜(MS)是以JEOL SX102A GC-MS儀器測量。
實(shí)施例1單-[1-(4，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b5，4-b’]二噻吩-2-基)-甲基]琥珀酸酯IIa-1
在經(jīng)攪拌的Ia(30毫克，0.12毫摩爾)于CH2Cl2(10毫升)的溶液中加入琥珀酸酐(120毫克，1.2毫摩爾)、Et3N(25毫克，1.23毫摩爾)以及催化量的DMAP(二甲基胺基吡啶)。將反應(yīng)混合物于N2及室溫下攪拌3小時(shí)然后以H2O洗滌。有機(jī)層以NaHCO3水溶液萃取。于水層中加入CH2Cl2，以及利用6N HCl將pH調(diào)整至1。有機(jī)層以H2O洗滌且縮小其體積。將該固體沉淀物由乙醚再次形成漿液而純化，得黃色固體的IIa-1(13.2毫克，30％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.67(d，J＝5.0Hz，1H)，7.60(dd，J＝6.0，5.0Hz，1H)，7.55(d，J＝6.0Hz，1H)，5.32(s，2H)，2.70(s，4H)。
HRMS C15H10O6S2的計(jì)算値349.9919，實(shí)側(cè)値350.9995(MH+，F(xiàn)AB)。mp＝156℃(分解)實(shí)施例2單-[1-(4，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b5，4-b’]二噻吩-2-基)-甲基]琥珀酸酯鈉IIa-1-Na 在經(jīng)攪拌的IIa-1(100.7毫克，0.29毫摩爾)于EA的溶液中添加溶于EA的2-乙基己酸鈉(1.2～1.5當(dāng)量)且攪拌一整夜。過濾出沉淀物且以EA洗滌然后于真空中干燥。得到黃色固體的IIa-1-Na(100.6毫克，93％)。
1H NMR(500MHz，CD3OD)δ7.96-7.93(m，1H)，7.63-7.60(m，2H)，5.36(s，2H)，2.63(t，J＝7.0Hz，2H)，2.48(t，J＝7.0Hz，2H)。
mp＝213℃(分解)
實(shí)施例3單-[1-(4，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b5，4-b’]二噻吩-2-基)-乙基]琥珀酸酯IIb-1 在經(jīng)攪拌的Ib(45毫克，0.18毫摩爾)與CH2Cl2(10毫升)的溶液中加入琥珀酸酐(150毫克，1.5毫摩爾)、Et3N(150毫克，1.54毫摩爾)以及催化量的DMAP(二甲基胺基吡啶)。將反應(yīng)混合物于N2及室溫下攪拌3小時(shí)然后以H2O洗滌。有機(jī)層以NaHCO3水溶液萃取。于水層中加入CH2Cl2，以及利用6NHCl將pH調(diào)整至1。將經(jīng)分離的CH2Cl2層以H2O洗滌且縮小其體積。將該固體沉淀物由乙醚再次形成漿液而純化，得黃色固體的IIb-1(11.7毫克，17％)。
1HNMR(500MHz，CDCl3)δ7.66(d，J＝5.0Hz，1H)，7.59(d，J＝5.0Hz，1H)，7.50(s，1H)，6.15(q，J＝6.0Hz，1H)，2.71-2.65(m，4H)，1.67(d，J＝6.0Hz，3H)。
HRMS C16H12O6S2的計(jì)算値364.0075，實(shí)測値364.0074。
mp＝132～132.5℃實(shí)施例4單-[1-(4，8-二酮基-4，8-二羥基苯并[1，2-b5，4-b’]二噻吩-2-基)-乙基]琥珀酸酯鈉IIb-1-Na
在經(jīng)攪拌的IIb-1(100.8毫克，0.28毫摩爾)于EA的溶液中添加溶于EA的2-乙基己酸鈉(1.2～1.5當(dāng)量)且攪拌一整夜。過濾出沉淀物且以EA洗滌然后于真空中干燥。得到黃色固體的IIb-1-Na(96.5毫克，89％)。
1H NMR(500MHz，CD3OD)δ7.94(d，J＝5.0Hz，1H)，7.61(d，J＝5.0Hz，1H)，7.57(s，1H)，6.17(q，J＝6.5Hz，1H)，2.68-2.56(m，2H)，2.50-2.45(m，2H)，1.68(d，J＝6.5Hz，3H)。
mp＝219℃(分解)實(shí)施例5單-[1-(4，8-二酮基-4，8-二羥基苯并[1，2-b4，5-b’]二噻吩-2-基)-乙基]琥珀酸酯VII-1 在經(jīng)攪拌的VI(50.0毫克，0.19毫摩爾)與CH2Cl2(3毫升)的溶液中加入琥珀酸酐(44.8毫克，0.45毫摩爾)、Et3N(0.10毫升，0.43毫摩爾)以及DMAP(3.0毫克，0.02毫摩爾)。將反應(yīng)混合物于N2及室溫下攪拌1.5小時(shí)。添加H2O(1毫升)及6N HCl(1毫升)后，將反應(yīng)混合物以CH2Cl2(15毫升×3)萃取。有機(jī)層以Na2SO4脫水，過濾以及濃縮而得黃-綠色固體的VII-1(62.0毫克，90％)。
1H NMR(500MHz，d6-DMSO)δ8.15(d，J＝4.5Hz，1H)，7.63(s，2H)，6.14(q，J＝6.5Hz，1H)，2.59-2.56(m，4H)，1.61(d，J＝6.5Hz，3H)。
HRMS C16H12O6S2的計(jì)算値364.0075，實(shí)測値365.0156(MH+，F(xiàn)AB)。
mp＝163.5～164.6℃實(shí)施例6單-[1-(4，8-二酮基-4，8-二羥基苯并[1，2-b4，5-b’]二噻吩-2-基)-乙基]琥珀酸酯鈉VII-1-Na
在經(jīng)攪拌的VII-1(200.0毫克，0.55毫摩爾)于EA的溶液中添加溶于EA的2-乙基己酸鈉(1.2～1.5當(dāng)量)且攪拌一整夜。過濾出沉淀物且以EA洗滌然后于真空中干燥。得到黃-綠色固體的VII-1-Na(191.0毫克，90％)。
1H NMR(500MHz，CD3OD)δ7.93(d，J＝5.0Hz，1H)，7.62(d，J＝5.0Hz，1H)，7.57(s，1H)，6.17(q，J＝6.5Hz，1H)，2.68-2.56(m，2H)，2.49-2.45(m，2H)，1.67(d，J＝6.5Hz，3H)。
mp＝240℃(分解)實(shí)施例7單-[1-(4，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b5，4-b’]二噻吩-2-基)-甲基]戊烷二酸酯IIa-2 在經(jīng)攪拌的Ia(54.0毫克，0.22毫摩爾)與CH2Cl2(3毫升)的溶液中加入戊二酸酐(49.7毫克，0.44毫摩爾)、DMAP(3.0毫克，0.02毫摩爾)以及Et3N(0.06毫升，0.40毫摩爾)。將反應(yīng)混合物于N2及室溫下攪拌3.5小時(shí)。添加H2O(1毫升)及2N HCl(3毫升)后，將反應(yīng)混合物以CH2Cl2(15毫升×3)萃取。有機(jī)層以Na2SO4脫水，過濾以及濃縮而得粗產(chǎn)物。由硅膠管柱層析以CH3OH∶CH2Cl2(1∶40)洗提進(jìn)行純化，得化合物IIa-2(45.9毫克，58％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.67(d，J＝5.0Hz，1H)，7.61(dd，J＝5.5，5.0Hz，1H)，7.55(d，J＝5.5Hz，1H)，5.29(s，2H)，2.48(t，J＝7.5Hz，2H)，2.44(t，J＝7.5Hz，2H)，2.02-1.95(m，2H)。
HRMS C16H12O6S2之計(jì)算値364.0075，實(shí)測値364.0086。
mp＝220℃(分解)實(shí)施例8單-[1-(4，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b5，4-b’]二噻吩-2-基)-甲基]戊烷二酸酯鈉IIa-2-Na 在經(jīng)攪拌的IIa-2(67.1毫克，0.18毫摩爾)于EA的溶液中添加溶于EA的2-乙基己酸鈉(1.2～1.5當(dāng)量)且攪拌一整夜。過濾出沉淀物且以EA洗滌然后于真空中干燥。得到黃棕色固體的IIa-2-Na(65.0毫克，94％)。
1H NMR(500MHz，CD3OD)δ7.97-7.92(m，1H)，7.65-7.58(m，2H)，5.36(s，2H)，2.45(t，J＝7.8Hz，2H)，2.21(t，J＝7.8Hz，2H)，1.94-1.88(m，2H)。
mp＝203℃(分解)實(shí)施例9單-[1-(4，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b5，4-b’]二噻吩-2-基)-乙基]戊烷二酸酯IIb-2
在經(jīng)攪拌的Ib(100.0毫克，0.4毫摩爾)與CH2Cl2(3毫升)的溶液中加入戊二酸酐(136.9毫克，1.2毫摩爾)、DMAP(5.0毫克，0.04毫摩爾)以及Et3N(121毫克，1.19毫摩爾)。將反應(yīng)混合物于N2及室溫下攪拌一整夜。添加H2O(1毫升)及2N HCl(3毫升)后，將反應(yīng)混合物以CH2Cl2(15毫升×3)萃取。CH2Cl2層以Na2SO4脫水，過濾以及濃縮而得粗產(chǎn)物。由硅膠管柱層析以CH3OH∶CH2Cl2(1∶40)洗提進(jìn)行純化，得化合物IIb-2(128.0毫克，88％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.65(d，J＝5.0Hz，1H)，7.59(d，J＝5.0Hz，1H)，7.49(s，1H)，6.13(q，J＝6.5Hz，1H)，2.47-2.40(m，4H)，2.00-1.93(m，2H)，1.66(d，J＝6.5Hz，3H)。
HRMS C17H14O6S2的計(jì)算値378.0232，實(shí)測値378.0229。
mp＝100.5～101.0℃。
實(shí)施例10單-[1-(4，8-二酮基-4，8-二羥基苯并[1，2-b；5，4-b’]二噻吩-2-基)-乙基]戊烷二酸酯鈉IIb-2-Na 在經(jīng)攪拌的IIb-2(83.0毫克，0.22毫摩爾)于EA的溶液中添加溶于EA的2-乙基己酸鈉(1.2～1.5當(dāng)量)且攪拌一整夜。過濾出沉淀物且以EA洗滌然后于真空中干燥。得到黃棕色固體的IIb-2-Na(83.1毫克，94％)。
1H NMR(500MHz，CD3OD)δ7.94(d，J＝5.0Hz，1H)，7.62(d，J＝5.0Hz，1H)，7.57(d，J＝1.0Hz，1H)，6.18(dd，J＝6.5，1.0Hz，1H)，2.43(td，J＝7.5，2.5Hz，2H)，2.21(t，J＝7.5Hz，2H)，1.94-1.88(m，2H)，1.67(d，J＝6.5Hz，3H)。
mp＝228℃(分解)
實(shí)施例11單-[1-(4，8-二酮基-4，8-二羥基苯并[1，2-b4，5-b’]二噻吩-2-基)-乙基]戊烷二酸酯VII-2 在經(jīng)攪拌的VI(50.0毫克，0.19毫摩爾)與CH2Cl2(3毫升)的溶液中加入戊二酸酐(45.2毫克，0.4毫摩爾)、DMAP(3.0毫克，0.02毫摩爾)以及Et3N(0.05毫升，0.4毫摩爾)。將反應(yīng)混合物于N2及室溫下攪拌15小時(shí)。添加H2O(1毫升)及2NHCl(3毫升)后，將反應(yīng)混合物以CH2Cl2(15毫升×3)萃取。CH2Cl2層以Na2SO4脫水，過濾以及濃縮而得粗產(chǎn)物。由硅膠管柱層析以CH3OH∶CH2Cl2(1∶50)洗提進(jìn)行純化，得化合物VII-2(32.7毫克，46％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.65(d，J＝5.0Hz，1H)，7.61(d，J＝5.0Hz，1H)，7.51(s，1H)，6.13(q，J＝6.5Hz，1H)，2.47-2.41(m，4H)，2.00-1.94(m，2H)，1.66(d，J＝6.5Hz，3H)。
HRMS C17H14O6S2的計(jì)算値378.0232，實(shí)測値379.0313(MH+，F(xiàn)AB)。
mp＝141.6～142.4℃實(shí)施例12單-[1-(4，8-二酮基-4，8-二羥基苯并[1，2-b4，5-b’]二噻吩-2-基)-乙基]戊烷二酸酯鈉VII-2-Na 在經(jīng)攪拌的VII-2(109.4毫克，0.29毫摩爾)于EA的溶液中添加溶于EA的2-乙基己酸鈉(1.2～1.5當(dāng)量)且攪拌一整夜。過濾出沉淀物且以EA洗滌然后于真空中干燥。得到黃-綠色固體的VII-2-Na(79.0毫克，68％)。
1H NMR(500MHz，CD3OD)δ7.93(d，J＝5.0Hz，1H)，7.62(d，J＝5.0Hz，1H)，7.57(s，1H)，6.17(q，J＝6.5Hz，1H)，2.44(td，J＝7.5，2.5Hz，2H)，2.22(t，J＝7.5Hz，2H)，1.95-1.88(m，2H)，1.68(d，J＝6.5Hz，3H)。
mp＝230℃(分解)實(shí)施例134，8-二酮基-4，8-二羥基苯并[1，2-b5，4-b’]-二噻吩-2-基-甲氧基乙酸第三-丁酯IIIa-1 在經(jīng)攪拌的化合物Ia(9.4毫克，0.04毫摩爾)與甲苯(2毫升)的溶液中加入四正丁基硫酸氫銨(4.0毫克，0.01毫摩爾)、50％NaOH(aq)(1毫升)以及溴乙酸第三-丁酯(0.02毫升，0.1毫摩爾)。將混合物于室溫下攪拌2小時(shí)。添加H2O后，將反應(yīng)混合物以CH2Cl2(15毫升×3)萃取。CH2Cl2層以Na2SO4脫水，過濾以及濃縮而得粗產(chǎn)物。將其由薄板液相層析法以乙酸乙酯∶己烷(1∶8)洗提進(jìn)行純化而得黃色固體的IIIa-1(2.7毫克，20％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.65(d，J＝5.0Hz，1H)，7.60(dd，J＝5.5，5.0Hz，1H)，7.49(d，J＝5.5Hz，1H)，4.83(s，2H)，4.05(s，2H)，1.48(s，9H)。
HRMS C17H16O5S2之計(jì)算値364.0439，實(shí)測值364.0425。
mp＝97.2～97.8℃實(shí)施例144，8-二酮基-4，8-二羥基苯并[1，2-b5，4-b’]-二噻吩-2-基-甲氧基乙酸乙酯IIIa
在經(jīng)攪拌的化合物Ia(40毫克，0.17毫摩爾)與甲苯(10毫升)的溶液中加入四正丁基硫酸氫銨(20毫克，0.06毫摩爾)、50％NaOH(aq)(1毫升)以及溴乙酸乙酯(0.1毫升，0.9毫摩爾)。將混合物于室溫下攪拌2小時(shí)。添加H2O后，將反應(yīng)混合物以CH2Cl2(25毫升×3)萃取。CH2Cl2層以Na2SO4脫水，過濾以及濃縮而得粗產(chǎn)物。將其由薄板液相層析法以CH2Cl2洗提進(jìn)行純化而得黃色固體的IIIa(18毫克，33％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.65(d，J＝5.0Hz，1H)，7.62-7.59(m，1H)，7.51-7.49(m，1H)，4.85(s，2H)，4.24(q，J＝7.0Hz，2H)，4.16(s，2H)，1.29(t，J＝7.0Hz，3H)。
HRMS C15H12O5S2的計(jì)算値336.0126，實(shí)測值336.0125。
mp＝113.3～113.5℃實(shí)施例154，8-二酮基-4，8-二羥基苯并[1，2-b5，4-b’]-二噻吩-2-基-甲氧基乙酸IVa◆方法A 在經(jīng)攪拌的化合物IIIa-1(2.7毫克，0.007毫摩爾)與CH2Cl2(1毫升)的溶液中加入三氟乙酸(0.1毫升)且于N2及室溫下攪拌1.5小時(shí)。濃縮后，得到黃色固體的IVa。
◆方法B 在25毫升的燒瓶中置入化合物IIIa(15毫克，0.05毫摩爾)以及MeOH(10毫升)。然后加入存在于H2O(8毫升)中的LiOH(10毫克)以及于室溫下攪拌該混合物直到完全水解。滴加HOAc(～0.4毫升)予以中和。于真空下移除MeOH以及將殘質(zhì)以Na2CO3水溶液處理然后以CH2Cl2萃取。將水層以稀釋的HCl溶液酸化直到pH～4以及以CH2Cl2萃取。將CH2Cl2層以Na2SO4脫水，過濾以及濃縮而得黃色固體的IVa(12.5毫克，91％)。
1H NMR(500MHz，d6-DMSO)δ8.15(d，J＝5.0Hz，1H)，7.62(dd，J＝5.0，4.5Hz，1H)，7.57(d，J＝4.5Hz，1H)，6.47(s，1H)，4.85(s，2H)，4.16(s，2H)。
HRMS C13H8O5S2的計(jì)算値307.9813，實(shí)測值307.9847。
mp＝218.0～218.2℃實(shí)施例164，8-二酮基-4，8-二羥基苯并[1，2-b5，4-b’]-二噻吩-2-基-甲氧基乙酸鈉IVa-Na 在經(jīng)攪拌的IVa(47.8毫克，0.16毫摩爾)于EA的溶液中添加溶于EA的2-乙基己酸鈉(1.2～1.5當(dāng)量)且攪拌一整夜。過濾出沉淀物且以EA洗滌然后于真空中干燥。得到黃-綠色固體的IVa-Na(35.4毫克，70％)。
1H NMR(500MHz，CD3OD)δ7.93(br，1H)，7.62(br，1H)，7.54(s，1H)，4.88(s，2H)，3.97(s，2H)。
mp＝232.7℃(分解)
實(shí)施例171-(4，8-二酮基-4，8-二羥基苯并[1，2-b5，4-b’]-二噻吩-2-基-乙氧基)-乙酸第三-丁酯IIIb-1 在經(jīng)攪拌的化合物Ib(9.4毫克，0.04毫摩爾)與甲苯(2毫升)的溶液中加入四正丁基硫酸氫銨(4.0毫克，0.01毫摩爾)、50％NaOH(aq)(1毫升)以及溴乙酸第三-丁酯(0.02毫升，0.1毫摩爾)。將混合物于室溫下攪拌2小時(shí)。添加H2O后，將反應(yīng)混合物以CH2Cl2(15毫升×3)萃取，以及將有機(jī)層以Na2SO4脫水，過濾及濃縮而得粗產(chǎn)物。將其由薄板液相層析以乙酸乙酯∶己烷(1∶15)洗提進(jìn)行純化而得黃色固體的IIIb-1(6.9毫克，51％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.60(d，J＝5.0Hz，1H)，7.595(d，J＝5.0Hz，1H)，7.45(s，1H)，4.88(q，J＝6.5Hz，1H)，4.02，3.91(ABq，J＝16.5Hz，2H)，1.62(d，J＝6.5Hz，3H)，1.46(s，9H)。
HRMS C18H18O5S2的計(jì)算值378.0596，實(shí)測值378.0587。
mp＝108.0～108.7℃實(shí)施例181-(4，8-二酮基-4，8-二羥基苯并[1，2-b5，4-b’]-二噻吩-2-基-乙氧基)-乙酸乙酯IIIb 在經(jīng)攪拌的化合物Ib(100毫克，0.4毫摩爾)與甲苯(20毫升)的溶液中加入四正丁基硫酸氫銨(40毫克，0.11毫摩爾)、50％NaOH(aq)(1毫升)以及溴乙酸乙酯(0.2毫升，1.8毫摩爾)。將混合物于室溫下攪拌2小時(shí)。添加H2O后，將反應(yīng)混合物以CH2Cl2(20毫升×3)萃取。CH2Cl2層以Na2SO4脫水，過濾以及濃縮而得粗產(chǎn)物。將其由薄板液相層析法以CH2Cl2洗提進(jìn)行純化而得黃色固體的IIIb(65毫克，48％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.65(d，J＝5.0Hz，1H)，7.60(d，J＝5.0Hz，1H)，7.46(s，1H)，4.89(q，J＝6.5Hz，1H)，4.21(q，J＝7.0Hz，2H)，4.12，4.02(ABq，J＝16.5Hz，2H)，1.63(d，J＝6.5Hz，3H)，1.27(t，J＝7.0Hz，3H)。
HRMS C16H14O5S2之計(jì)算值350.0283，實(shí)測值350.0271。
mp＝122.7～122.9℃實(shí)施例191-(4，8-二酮基-4，8-二羥基苯并[1，2-b5，4-b’]-二噻吩-2-基-乙氧基)-乙酸IVb 在100毫升的燒瓶中置入化合物IIIb(65毫克，0.19毫摩爾)以及MeOH(15毫升)。然后加入存在于H2O(12毫升)中的LiOH(25.0毫克)以及于室溫下攪拌該反應(yīng)混合物直到完全水解。滴加HOAc(～1.4毫升)予以中和。于真空下移除MeOH以及將殘質(zhì)以Na2CO3水溶液處理然后以CH2Cl2萃取。將水層以稀釋的HCl溶液酸化直到pH～4以及以CH2Cl2萃取。將CH2Cl2層以Na2SO4脫水，過濾以及濃縮而得黃色固體的IVb(54毫克，90％)。
1H NMR(500MHz，CD3OD)δ7.95(d，J＝5.0Hz，1H)，7.62(d，J＝5.0Hz，1H)，7.53(s，1H)，4.98(q，J＝6.5Hz，1H)，4.15，4.09(ABq，J＝16.5Hz，2H)，1.61(d，J＝6.5Hz，3H)。
HRMS C14H10O5S2的計(jì)算值321.9970，實(shí)測值321.9994。
mp＝172.6～173.0℃
實(shí)施例201-(4，8-二酮基-4，8-二羥基苯并[1，2-b5，4-b’]-二噻吩-2-基-乙氧基)-乙酸鈉IVb-Na 在經(jīng)攪拌的IVb(53.0毫克，0.16毫摩爾)于EA的溶液中添加溶于EA的2-乙基己酸鈉(1.2～1.5當(dāng)量)且攪拌一整夜。過濾出沉淀物且以EA洗滌然后于真空中干燥。得到黃-綠色固體的IVb-Na(33.1毫克，58％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ7.87(d，J＝5.0Hz，1H)，7.32(d，J＝5.0Hz，1H)，7.27(s，1H)，4.98(q，J＝6.5Hz，1H)，4.02，3.94(ABq，J＝16.0Hz，2H)，1.64(d，J＝6.5Hz，3H)。
mp＝243.8～244.2℃。
實(shí)施例211-(4，8-二酮基-4，8-二羥基苯并[1，2-b4，5-b’]-二噻吩-2-基-乙氧基)-乙酸第三-丁酯VIII-1 在經(jīng)攪拌的化合物VI(9.0毫克，0.03毫摩爾)與甲苯(2毫升)的溶液中加入四正丁基硫酸氫銨(4.0毫克，0.01毫摩爾)、50％NaOH(aq)(1毫升)以及溴乙酸第三-丁酯(0.02毫升，0.1毫摩爾)。將混合物于室溫下攪拌2小時(shí)。添加H2O后，將反應(yīng)混合物以CH2Cl2(15毫升×3)萃取，以及將有機(jī)層以Na2SO4脫水，過濾及濃縮而得粗產(chǎn)物。將其由薄板液相層析以乙酸乙酯∶己烷(1∶15)洗提進(jìn)行純化而得黃色油的VIII-1(5.0毫克，39％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.65(d，J＝5.0Hz，1H)，7.61(d，J＝5.0Hz，1H)，7.46(s，1H)，4.87(q，J＝6.5Hz，1H)，4.01，3.90(ABq，J＝16.5Hz，2H)，1.62(d，J＝6.5Hz，3H)，1.46(s，9H)。
HRMS C18H18O5S2的計(jì)算值378.0596，實(shí)測值378.0573。
實(shí)施例221-(4，8-二酮基-4，8-二羥基苯并[1，2-b4，5-b’]-二噻吩-2-基-乙氧基)-乙酸乙酯VIII 在經(jīng)攪拌的化合物VI(9.7毫克，0.04毫摩爾)與甲苯(2毫升)的溶液中加入四正丁基硫酸氫銨(4.0毫克，0.01毫摩爾)、50％NaOH(aq)(1毫升)以及溴乙酸乙酯(0.1毫摩爾)。將混合物于室溫下攪拌2小時(shí)。添加H2O后，將反應(yīng)混合物以CH2Cl2(15毫升×3)萃取。CH2Cl2層以Na2SO4脫水，過濾以及濃縮而得粗產(chǎn)物。將其由薄板液相層析法以CH2Cl2洗提進(jìn)行純化而得黃色固體的VIII(2.5毫克，19％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.65(d，J＝5.0Hz，1H)，7.61(d，J＝5.0Hz，1H)，7.47(s，1H)，4.89(q，J＝6.5Hz，1H)，4.21(q，J＝7.0Hz，2H)，4.12，4.02(ABq，J＝16.5Hz，2H)，1.63(d，J＝6.5Hz，3H)，1.27(t，J＝7.0Hz，3H)。
HRMS C16H14O5S2的計(jì)算值350.0283，實(shí)測值350.0284。
mp＝106.2～107.1℃實(shí)施例231-(4，8-二酮基-4，8-二羥基苯并[1，2-b4，5-b’]-二噻吩-2-基-乙氧基)-乙酸IX
在25毫升的燒瓶中置入化合物VIII(192.7毫克，0.55毫摩爾)以及MeOH(30毫升)。然后加入存在于H2O(30毫升)中的LiOH(0.36克)以及于室溫下攪拌該反應(yīng)混合物直到完全水解。滴加HOAc(～1.1毫升)予以中和。于真空下移除MeOH以及將殘質(zhì)以Na2CO3水溶液處理然后以EA萃取。將水層以稀釋的HCl溶液酸化直到pH～4以及以EA萃取。將EA層以Na2SO4脫水，過濾以及濃縮而得黃色固體的IX(160.0毫克，90％)。
1H NMR(500MHz，CD3OD)δ7.90(d，J＝5.0Hz，1H)，7.60(d，J＝5.0Hz，1H)，7.51(s，1H)，4.96(q，J＝6.5Hz，1H)，4.15，4.09(ABq，J＝16.5Hz，2H)，1.61(d，J＝6.5Hz，3H)。
HRMS C14H10O5S2的計(jì)算值321.9970，實(shí)測值323.0054(MH+，F(xiàn)AB)。
mp＝172.1～172.8℃實(shí)施例241-(4，8-二酮基-4，8-二羥基苯并[1，2-b4，5-b’]-二噻吩-2-基-乙氧基)-乙酸鈉IX-Na 在經(jīng)攪拌的IX(85.0毫克，0.28毫摩爾)于EA的溶液中添加溶于EA的2-乙基己酸鈉(1.2～1.5當(dāng)量)且攪拌一整夜。過濾出沉淀物且以EA洗滌然后于真空中干燥。得到黃色固體的IX-Na(83.0毫克，92％)。
1H NMR(500MHz，CD3OD)δ7.92(d，J＝5.0Hz，1H)，7.62(d，J＝5.0Hz，1H)，7.52(s，1H)，4.96(q，J＝6.5Hz，1H)，3.92，3.83(ABq，J＝15.5Hz，2H)，1.60(d，J＝6.5Hz，3H)。
mp＝223℃(分解)實(shí)施例252-[1-(2-吡咯-1-基-丙氧基)-乙基苯并[1，2-b4，5-b’]二噻吩-4，8-二酮X 在經(jīng)攪拌的化合物VI(10.5毫克，0.04毫摩爾)與甲苯(2毫升)的溶液中加入四正丁基硫酸氫銨(4.0毫克，0.01毫摩爾)、50％NaOH(aq)(2毫升)以及1-(3-溴丙基)吡咯(0.1毫摩爾)。將混合物于室溫下攪拌3小時(shí)。添加H2O后，將反應(yīng)混合物以CH2Cl2(15毫升×3)萃取。CH2Cl2層以Na2SO4脫水，過濾以及濃縮而得粗產(chǎn)物。將其由薄板液相層析法以CH2Cl2洗提進(jìn)行純化而得黃色油的X(5.0毫克，34％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.65(d，J＝5.0Hz，1H)，7.61(d，J＝5.0Hz，1H)，7.41(s，1H)，6.61(s，2H)，6.10(s，2H)，4.64(q，J＝6.5Hz，1H)，4.06-3.94(m，2H)，3.38(t，J＝5.5Hz，2H)，2.04-1.99(m，2H)，1.56(d，J＝6.5Hz，3H)。
HRMS C19H17NO3S2的計(jì)算值371.0650，實(shí)測值371.0663。
實(shí)施例264，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b5，4-b’]二噻吩-2-羧酸-(2-二甲基胺基-乙基)-酰胺XVII
將溶于SOCl2(5毫升)的化合物XI(60毫克，0.23毫摩爾)加熱回流2小時(shí)。移除過量的SOCl2以產(chǎn)生粗酸氯化物。所得的酸氯化物可直接使用而不需純化。將其以CH2Cl2(4毫升)稀釋且加入至含有N，N-二甲基乙二胺(1.5毫升)、Et3N(2毫升)以及CH2Cl2(4毫升)的混合物中以及于室溫下攪拌1.5～2小時(shí)。加入水以及將反應(yīng)混合物以CH2Cl2萃取。將CH2Cl2層濃縮以及使用MeOH∶CH2Cl2＝1∶8作為洗提液經(jīng)由管柱以純化該粗產(chǎn)物。得到黃色固體的XVII(50.0毫克，67％)。
1H NMR(500MHz，CD3OD)δ8.14(d，J＝2.0Hz，1H)，7.97～8.00(m，1H)，7.65(d，J＝5.0Hz，1H)，3.54(t，J＝6.5Hz，2H)，2.59(t，J＝6.5Hz，2H)，2.33(s，6H)。
HRMS C15H14N2O3S2的計(jì)算值334.0446，實(shí)測值334.0435mp＝197.5～198.0℃實(shí)施例274，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b5，4-b’]二噻吩-2-羧酸-(2-二甲基-胺基乙基)-酰胺磷酸鹽XVII-H3PO4 對被攪拌的溶于THF的XVII(31毫克，0.093毫摩爾)溶液中加入85％的H3PO4(1.2～1.5當(dāng)量)且攪拌一整夜。過濾出沉淀物且以THF洗滌然后于真空中干燥。得到黃色固體的XVII-H3PO4(39毫克，97％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ8.16(s，1H)，8.02(d，J＝5.0Hz，1H)，7.66(d，J＝5.0Hz，1H)，3.78(t，J＝6.0Hz，2H)，3.37(t，J＝6.0Hz，2H)，2.97(s，6H)。
實(shí)施例28(a)4，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b5，4-b’]二噻吩-2-羧酸銨XI-NH-4
在含有化合物XI(230毫克，0.87毫摩爾)的IPA(40毫升)溶液中加入氫氧化銨水溶液(29.5％)直到呈堿性。攪拌后，移除所有揮發(fā)性溶劑，得綠-黃色固體的XI-NH4(200毫克，82％)。
1H NMR(500MHz，CD3OD)δ7.94(d，J＝5.0Hz，1H)，7.91(s，1H)，7.62(d，J＝5.0Hz，1H)。
mp＝257～259℃。
(b)4，8-二酮基-4，8-二氫苯并-[1，2-b5，4-b’]二噻吩-2-羧酸鈉XI-Na 在經(jīng)攪拌的XI(206.7毫克，0.83毫摩爾)于EA的溶液中添加溶于EA的2-乙基己酸鈉(1.2～1.5當(dāng)量)且攪拌一整夜。過濾出沉淀物且以EA洗滌然后于真空中干燥。得到黃色固體的XI-Na(202.5毫克，90％)。
1H NMR(500MHz，CD3OD)δ7.93(dd，J＝5.0，2.0Hz，1H)，7.90(d，J＝2.0Hz，1H)，7.62(d，J＝5.0Hz，1H).
mp＝＞275℃(分解)實(shí)施例29(2S)-[(4，8-二酮基-4，8-二羥基苯并[1，2-b5，4-b’]二噻吩-2-羰基)-胺基]-苯基-乙酸甲酯XII-1
在經(jīng)攪拌的XI(40.0毫克，0.15毫摩爾)與THF(2毫升)的溶液中加入(S)-苯基甘胺酸甲酯HCl鹽(31毫克，0.15毫摩爾)、EDC(30.5毫克，0.16毫摩爾)、HOBt(21毫克，0.15毫摩爾)以及4-乙基嗎啉(0.02毫升，0.15毫摩爾)。于N2及室溫下攪拌一整夜后，于減壓下移除溶劑。于該殘質(zhì)中加入CH2Cl2(3毫升)以及移除不溶的固體。然后將CH2Cl2層以飽和的NaHCO3溶液、1M KHSO4、飽和的NaHCO3溶液及H2O洗滌。有機(jī)層以Na2SO4脫水，過濾以及濃縮而得粗產(chǎn)物。由硅膠管柱層析以EA∶己烷(1∶3)洗提進(jìn)行純化，得黃色固體的XII-1(21.1毫克，34％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.95(s，1H)，7.71(d，J＝4.3Hz，1H)，7.64(d，J＝4.3Hz，1H)，7.41-7.30(m，5H)，7.16(d，J＝6.5Hz，1H)，5.71(d，J＝6.5Hz，1H)，3.78(s，3H)。
HRMS C20H13NO5S2的計(jì)算値411.0235，實(shí)測値411.0229。
mp＝211.1～211.9℃實(shí)施例30[(4，8-二酮基-4，8-二羥基苯并[1，2-b5，4-b’]二噻吩-2-羰基)-胺基]-乙酸異丙酯XII-2 在經(jīng)攪拌的XI(52.6毫克，0.20毫摩爾)與THF(2毫升)的溶液中加入甘胺酸異丙酯HCl鹽(30.4毫克，0.21毫摩爾)、EDC(40.1毫克，0.21毫摩爾)、HOBt(27.0毫克，0.21毫摩爾)以及4-乙基嗎啉(0.03毫升，0.21毫摩爾)。于N2及室溫下攪拌一整夜后，于減壓下移除溶劑。于該殘質(zhì)中加入CH2Cl2(3毫升)以及移除不溶的固體。然后將CH2Cl2層以飽和的NaHCO3溶液、1M KHSO4、飽和的NaHCO3溶液及H2O洗滌。有機(jī)層以Na2SO4脫水，過濾以及濃縮而得粗產(chǎn)物。由硅膠管柱層析以EA∶CH2Cl2(1∶20)洗提進(jìn)行純化，得黃色固體的XII-2(31.7毫克，44％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.94(s，1H)，7.71(d，J＝4.5Hz，1H)，7.63(d，J＝4.5Hz，1H)，6.73(s，1H)，5.12(septet，J＝6.5Hz，1H)，4.18(d，J＝4.5Hz，2H)，1.29(d，J＝6.5Hz，6H)。
HRMS C16H13NO5S2的計(jì)算値363.0235，實(shí)測値363.0226。
mp＝240.2～240.5℃實(shí)施例31(2S)-[(4，8-二酮基-4，8-二羥基苯并[1，2-b4，5-b’]二噻吩-2-羰基)-胺基]-丙酸甲酯XII 在經(jīng)攪拌的XI(40.0毫克，0.15毫摩爾)與THF(2毫升)的溶液中加入(S)-丙胺酸甲酯HCl鹽(21毫克，0.15毫摩爾)、EDC(30.5毫克，0.16毫摩爾)、HOBt(21毫克，0.15毫摩爾)以及4-乙基嗎啉(0.02毫升，0.15毫摩爾)。于N2及室溫下攪拌一整夜后，于減壓下移除溶劑。于該殘質(zhì)中加入CH2Cl2(3毫升)以及移除不溶的固體。然后將CH2Cl2層以飽和的NaHCO3溶液、1MKHSO4、飽和的NaHCO3溶液及H2O洗滌。有機(jī)層以Na2SO4脫水，過濾以及濃縮而得粗產(chǎn)物。由硅膠管柱層析以EA∶己烷(1∶2)洗提進(jìn)行純化，得黃色固體的XII(27.5毫克，52％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.92(s，1H)，7.72(d，J＝5.0Hz，1H)，7.64(d，J＝5.0Hz，1H)，6.75(d，J＝6.5Hz，1H)，4.78-4.72(m，1H)，3.80(s，3H)，1.54(d，J＝7.0Hz，3H)。
HRMS C15H11NO5S2的計(jì)算値349.0079，實(shí)測値349.0061。
mp＝188.1～188.6℃。
實(shí)施例32(L)-2-{(4，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b5，4-b’]二噻吩-2-羰基)-胺基}-丙酸XIII 在25毫升的燒瓶中置入化合物XII(130毫克，0.37毫摩爾)以及MeOH(37毫升)。然后加入存在于H2O(30毫升)中的LiOH(322.5毫克)以及于室溫下攪拌該反應(yīng)混合物直到完全水解。滴加HOAc(～1.0毫升)予以中和。于真空下移除MeOH以及將殘質(zhì)以Na2CO3水溶液處理然后以EA萃取。將水層以稀釋的HCl溶液酸化直到pH～4以及以EA萃取。將EA層以Na2SO4脫水，過濾以及濃縮而得黃色固體的XIII(120毫克，96％)。
1H NMR(500MHz，CD3OD)δ8.25(s，1H)，8.00(d，J＝5.0Hz，1H)，7.66(d，J＝5.0Hz，1H)，4.58(q，J＝7.5Hz，1H)，1.53(d，J＝7.5Hz，3H)。
HRMS C14H9NO5S2的計(jì)算値334.9922，實(shí)測値334.9931。
mp＝239℃(分解)實(shí)施例33(L)-2-{(4，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b5，4-b’]二噻吩-2-羰基)-胺基}-丙酸鈉XIII-Na
在經(jīng)攪拌的XIII(50.5毫克，0.15毫摩爾)于EA的溶液中添加溶于EA的2-乙基己酸鈉(1.2～1.5當(dāng)量)且攪拌一整夜。過濾出沉淀物且以EA洗滌然后于真空中干燥。得到黃色固體的XIII-Na(27.8毫克，52％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ7.93(br，1H)，7.80(d，J＝5.0Hz，1H)，7.44(d，J＝5.0Hz，1H)，4.31(q，J＝6.5Hz，1H)，1.50(d，J＝6.5Hz，3H)。
mp＝200.5℃(分解)實(shí)施例344，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b4，5-b’]二噻吩-2-羧酸銨XIV-NH-4 在IPA(20毫升)中加入化合物XIV(140毫克，0.53毫摩爾)且于60℃攪拌30分鐘。過濾出不溶于IPA的固體。于該濾液中加入氫氧化銨水溶液(29.5％)直到呈堿性。攪拌后，使溶劑蒸發(fā)，得綠-黃色固體的XIV-NH4(68.5毫克，46％)。
1H NMR(500MHz，CD3OD)δ7.97(s，1H)，7.94(d，J＝5.0Hz，1H)，7.64(d，J＝5.0Hz，1H)。
mp＞300℃實(shí)施例35[(4，8-二酮基-4，8-二羥基苯并[1，2-b4，5-b’]二噻吩-2-羰基)-胺基]-乙酸異丙酯XV
在經(jīng)攪拌的XIV(244.6毫克，0.90毫摩爾)與THF(8毫升)的溶液中加入甘胺酸異丙酯HCl鹽(140.0毫克，0.92毫摩爾)、EDC(190.0毫克，0.99毫摩爾)、HOBt(125.0毫克，0.93毫摩爾)以及4-乙基嗎啉(0.12毫升，0.80毫摩爾)。于N2及室溫下攪拌一整夜后，于減壓下移除溶劑。于該殘質(zhì)中加入CH2Cl2(12毫升)以及移除不溶的固體。然后將CH2Cl2層以飽和的NaHCO3溶液、1M KHSO4、飽和的NaHCO3溶液及H2O洗滌。有機(jī)層以Na2SO4脫水，過濾以及濃縮而得粗產(chǎn)物。由硅膠管柱層析以EA∶CH2Cl2(1∶30)洗提進(jìn)行純化，得黃色固體的XV(75.1毫克，21％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.95(s，1H)，7.70(d，J＝5.0Hz，1H)，7.65(d，J＝5.0Hz，1H)，6.73(t，J＝4.5Hz，1H)，5.12(septet，J＝6.5Hz，1H)，4.18(d，J＝4.5Hz，2H)，1.29(d，J＝6.5Hz，6H)。
HRMS C16H13NO5S2的計(jì)算値363.0235，實(shí)測値363.0228。
mp＝231.8～233.0℃實(shí)施例36(L)-2-{(4，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b4，5-b’]二噻吩-2-羰基)-胺基}-丙酸甲酯XV-1 在經(jīng)攪拌的XIV(79.8毫克，0.30毫摩爾)與THF(10毫升)的溶液中加入(S)-丙胺酸甲酯HCl鹽(42.0毫克，0.30毫摩爾)、EDC(61.0毫克，0.32毫摩爾)、HOBt(42毫克，0.30毫摩爾)以及4-乙基嗎啉(0.04毫升，0.30毫摩爾)。于N2及室溫下攪拌一整夜后，于減壓下移除溶劑。于該殘質(zhì)中加入CH2Cl2(3毫升)以及移除不溶的固體。然后將CH2Cl2層以飽和的NaHCO3溶液、1M KHSO4、飽和的NaHCO3溶液及H2O洗滌。有機(jī)層以Na2SO4脫水，過濾以及濃縮而得粗產(chǎn)物。由硅膠管柱層析以EA∶己烷(1∶2)洗提進(jìn)行純化，得黃色固體的XV-1(38.1毫克，36％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.94(s，1H)，7.71(d，J＝5.0Hz，1H)，7.65(d，J＝5.0Hz，1H)，6.80(d，J＝6.5Hz，1H)，4.75(qd，J＝7.5，6.5Hz，1H)，3.80(s，3H)，1.53(d，J＝7.5Hz，3H)。
HRMS C15H11NO5S2的計(jì)算値349.0079，實(shí)測値350.0159(MH+，F(xiàn)AB)。
mp＝216.8～217.7℃實(shí)施例37(L)-2-{(4，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b4，5-b’]二噻吩-2-羰基)-胺基}-丙酸XVI 在25毫升的燒瓶中置入化合物XV-1(17.6毫克，0.05毫摩爾)以及MeOH(5毫升)。然后加入存在于H2O(4毫升)中的LiOH(45.0毫克)以及于室溫下攪拌該反應(yīng)混合物直到完全水解。滴加HOAc(～0.14毫升)予以中和。于真空下移除MeOH以及將殘質(zhì)以Na2CO3水溶液處理然后以EA萃取。將水層以稀釋的HCl溶液酸化直到pH～4以及以EA萃取。將EA層以Na2SO4脫水，過濾以及濃縮而得黃色固體的XVI(16.8毫克，99％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.96(s，1H)，7.62(d，J＝5.0Hz，1H)，7.47(d，J＝5.0Hz，1H)，4.47(q，J＝7.5Hz，1H)，1.36(d，J＝7.5Hz，3H)。
mp＝227.4～228.3℃實(shí)施例38(L)-2-{(4，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b4，5-b’]二噻吩-2-羰基)-胺基}-丙酸鈉XVI-Na
在經(jīng)攪拌的XVI(73.8毫克，0.22毫摩爾)于EA的溶液中添加溶于EA的2-乙基己酸鈉(1.2～1.5當(dāng)量)且攪拌一整夜。過濾出沉淀物且以EA洗滌然后于真空中干燥。得到黃-綠色固體的XVI-Na(47.5毫克，60％)。
1H NMR(500MHz，CD3OD)δ8.25(s，1H)，7.96(d，J＝5.0Hz，1H)，7.65(d，J＝5.0Hz，1H)，4.43(q，J＝7.0Hz，1H)，1.48(d，J＝7.0Hz，3H)。
mp＞275℃。
實(shí)施例394，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b4，5-b’]二噻吩-2-羧酸-(2-二甲胺基-乙基)-酰胺XV-2 將化合物XIV(0.6086克，2.0毫摩爾)、SOCl2(50毫升)與少量的NaCl加熱至回流2小時(shí)。移除過量的SOCl2以及于該殘質(zhì)中加入CH2Cl2。過濾出NaCl以及將濾液濃縮，而產(chǎn)生粗酸氯化物(0.5453克)。所得的酸氯化物可直接使用而不需純化。將其以CH2Cl2(40毫升)稀釋且加入至含有N，N-二甲基乙二胺(16毫升)、Et3N(20毫升)以及CH2Cl2(40毫升)的混合物中以及于室溫下攪拌12小時(shí)。加入水以及將反應(yīng)混合物以CH2Cl2萃取。將CH2Cl2層濃縮以及使用MeOH∶CH2Cl2＝1∶10作為洗提液經(jīng)由管柱以純化該粗產(chǎn)物。得到黃色固體的XV-2(255.2毫克，33％)。
1H NMR(500MHz，CD3OD)δ8.13(s，1H)，7.97(d，J＝5.0Hz，1H)，7.65(d，J＝5.0Hz，1H)，3.55(t，J＝6.5Hz，2H)，2.65(t，J＝6.5Hz，2H)，2.37(s，6H)。
HRMS C15H14N2O3S2的計(jì)算値334.0446，實(shí)測値334.0641。
mp＝235.5～236.2℃
實(shí)施例404，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b4，5-b’]二噻吩-2-羧酸-(2-二甲基-胺基乙基)-酰胺磷酸鹽XV-2-H3PO4 在溶于THF的經(jīng)攪拌的XV-2(100毫克，0.30毫摩爾)溶液中加入85％的H3PO4(1.2～1.5當(dāng)量)且攪拌一整夜。過濾出沉淀物且以THF洗滌然后于真空中干燥。得到黃色固體的XV-2-H3PO4(120毫克，93％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ8.02(br，1H)，7.82(br，1H)，7.54(br，1H)，3.88(br，2H)，3.52(br，2H)，3.08(br，6H)。
mp＝233℃(分解)細(xì)胞毒性試驗(yàn)方法A(HUVEC、MCF-7、HT-29、Hep 3B以及NCI-H460)[S.A.Ahmed，R.M.Gogal Jr.及J.E.Walsh，Journal of ImmunologicalMethods170211～224，(1994)；M.R.Boyd，Status of the NCI preclinicalantitumor drug discovery screen.(Published by J.B.Lippincott Company，Philadelphia，PA 19105，USA)Principles & Practices of Oncology Updates3#101～12，(1989)；M.R.Boyd等人Data disply and analysis strategies for theNCI disease-oriented in vitro antitumor drug screen.InCytotoxic anti-cancerdrugsmodels and concepts for drug discovery and development.BostonKluwer Academic，Pages11～34，(1992)]1.材料及設(shè)備(1)測試物及投藥模式(dosing pattern)將測試化合物溶解于100％DMSO中然后以無菌蒸餾水稀釋，得到溶于80％DMSO的20000、2000、200、20以及2μM的起始操作溶液(initial workingsolution)。進(jìn)一步于培養(yǎng)基中制造200倍的稀釋液會(huì)產(chǎn)生溶于0.4％DMSO的100、10、1、0.1以及0.01μM的最終試驗(yàn)濃度。
(2)細(xì)胞培養(yǎng)基

所有培養(yǎng)基皆補(bǔ)充1％的抗生素-抗霉劑。
(3)細(xì)胞株

所有的人類腫瘤細(xì)胞株及HUVEC是得自美國菌種中心(American TypeCulture Collection，ATCC)。該細(xì)胞系培養(yǎng)于37℃、5％CO2的大氣環(huán)境下。
(4)化學(xué)物質(zhì)AlamarBlue(Biosource，USA)、抗生素-抗霉劑(GIBCO BRL，USA)、二甲亞砜(Merck，Germany)、內(nèi)皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基(CELL APPLICATIONS，INC.，USA)、胎牛血清(HyClone，USA)、McCoy’s 5A培養(yǎng)基(GIBCO BRL，USA)、最低必需培養(yǎng)基(GIBCO BRL，USA)、絲裂霉素(Mitomycin)(Kyowa，Japan)以及RPMI 1640(HyClone，USA)。
(5)設(shè)備CO2培養(yǎng)箱(Forma Scientific Inc.，USA)、離心機(jī)5810R(Eppendorf，Germany)、血球計(jì)數(shù)器(Hausser Scientific Horsham，USA)、倒立顯微鏡CK-40(Olympus，Japan)、系統(tǒng)顯微鏡(System Microscope)E-400(Nikon，Japan)、Spectrafluor Plus(Tecan，Austin)以及垂直式無塵操作臺(tái)(Tsao Hsin，R.O.C.)。
2.方法(1)評估測試物質(zhì)的抗-增生活性在5％CO2，37℃的大氣環(huán)境下，將各個(gè)100微升等分的細(xì)胞懸浮液(約1.5～3.0×103/孔)置于96-孔微滴定盤。24小時(shí)后，分別于各孔中加入100微升的生長培養(yǎng)基及1微升的測試溶液或載劑(80％DMSO)，又于培養(yǎng)72小時(shí)后再添加一次。因此，DMSO的最終濃度為0.4％。測試化合物，IIa-1、IIb-1及VII-1是以100、10、0.1及0.01μM的濃度進(jìn)行評估。培養(yǎng)結(jié)束時(shí)，借助熒光強(qiáng)度以檢測細(xì)胞存活力前，于各孔中加入20微升的alamarBlue90％試劑然后再培養(yǎng)6小時(shí)。利用Spectraflour Plus微孔盤讀取器以530nm激發(fā)及590nm發(fā)射能測量熒光強(qiáng)度。
(2)測定IC50、TGI及LC50測量結(jié)果由下列公式計(jì)算PG(％)＝100×(Mean Ftest-Mean Ftime0)/(Mean Fctrl-Mean Ftime0)]若(Mean Ftest-Mean Ftime0)＜0，則PG(％)＝100×(Mean Ftest-Mean Ftime0)/(Mean Ftime0-Mean Fblank)其中PG代表生長百分比；Mean Ftime0＝當(dāng)細(xì)胞暴露于測試物質(zhì)前，2次測量alamarBlue熒光強(qiáng)度減少的平均值；Mean Ftime＝細(xì)胞暴露于測試物質(zhì)下72小時(shí)后，2次測量alamarBlue熒光強(qiáng)度的平均值；Mean Fctrl＝細(xì)胞于不含測試物質(zhì)下培養(yǎng)72小時(shí)后，2次測量alamarBlue熒光強(qiáng)度的平均值；Mean Fblank＝于培養(yǎng)基中不含細(xì)胞下培養(yǎng)72小時(shí)后，2次測量alamarBlue熒光強(qiáng)度的平均值。
相對于經(jīng)載劑處理的對照組，當(dāng)熒光強(qiáng)度減少50％或以上(≥50％)時(shí)，表示顯著的細(xì)胞生長抑制(cytostatic)或細(xì)胞毒性，以及利用GraphPad Prism(GraphPad Software，USA)由非線性回歸測定IC50、TGI及LC50的半-定量値。
IC50(50％受抑制時(shí)的濃度)time0時(shí)增加的經(jīng)處理的細(xì)胞數(shù)或細(xì)胞量僅為實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)載劑-對照組的相對增加量的50％時(shí)該測試化合物的濃度。
TGI(Total Growth Inhibition，總生長抑制)實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)經(jīng)處理的細(xì)胞數(shù)或細(xì)胞量等于time0的細(xì)胞數(shù)或細(xì)胞量時(shí)該測試化合物的濃度。
LC50(50％致死時(shí)的濃度)實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)經(jīng)處理的細(xì)胞數(shù)或細(xì)胞量為time0時(shí)的一半時(shí)該測試化合物的濃度。
細(xì)胞毒性試驗(yàn)方法B(HL-60)[H.M.Chen et al.Chin.Pharm.J.53，157-167(2001)]細(xì)胞及培養(yǎng)人類早樣狀白血病(Human promyeloid leukemia)HL-60細(xì)胞是得自美國菌種中心(Manassas，VA，USA)以及食品工業(yè)發(fā)展研究所的菌種中心(Culture Collection and Research Center，CCRC)(Taiwan，ROC)。于37℃及含有5％CO2的潮濕環(huán)境下將人類早樣狀白血病HL-60細(xì)胞培養(yǎng)于RPMI-1640培養(yǎng)基(GIBCO，Grand Is land，USA)的懸浮液，該懸浮液包含10％的胎牛血清(GIBCO，Grand Is land，USA)、100單位/毫升的盤尼西林、100毫升/毫升的鏈霉素以及1％的L-麩酰胺。每天分離該細(xì)胞會(huì)使細(xì)胞數(shù)維持在2-5×105/毫升。細(xì)胞數(shù)是利用血球計(jì)數(shù)器以計(jì)算白血球的標(biāo)準(zhǔn)方法予以估計(jì)以及由細(xì)胞排除錐藍(lán)(Trypan blue)的能力確認(rèn)細(xì)胞存活力。
MTT增生作用試驗(yàn)細(xì)胞增生作用是由MTT[3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基溴化四唑]試驗(yàn)進(jìn)行測定。簡言之，經(jīng)不同濃度的樣本處理4天后，于含有1×105細(xì)胞的96-孔盤的各孔中加入10毫升的MTT(5毫克/毫升)。2小時(shí)后，添加100毫升的含有0.04N HCl的異丙醇以停止反應(yīng)，并由迷你色度讀取器(minicolorimetric reader)以O(shè)D570nm進(jìn)行測定。各濃度的處理是進(jìn)行三次。
細(xì)胞毒性試驗(yàn)方法C(KB，KB-VIN，AS49，HCT-8，PC-3)[K.H.Lee等人，Planta Med.54，308-312(1998)，Monk A等人，J.Natl.Cancer Inst.83，757～766(1991).]該細(xì)胞株包含鼻咽癌的表皮樣癌(KB)、鼻咽癌的p-gp-表現(xiàn)的表皮樣癌(KB-VIN)、肺癌(A-549)、回結(jié)腸癌(HCT-8)以及前列腺癌(PC-3)細(xì)胞株。每毫升微克的各化合物的細(xì)胞毒性效果是以IC50表示，連續(xù)暴露72小時(shí)后，可抑制50％的細(xì)胞生長的濃度于重復(fù)實(shí)驗(yàn)間的差異是小于5％。
抗癌活性此試驗(yàn)是用于檢測細(xì)胞增生作用的改變，其是根據(jù)存活細(xì)胞使alamarBlue自氧化形式改變?yōu)檫€原形式的能力。依照alamarBlue反應(yīng)所得的結(jié)果，可定量該細(xì)胞增生作用以及檢驗(yàn)存活細(xì)胞的代謝活性。
測試化合物IIa-1、IIb-1及VII-1的琥珀酸酯衍生物對四種人類腫瘤細(xì)胞株～MCF-7(乳癌)、HT-29(結(jié)腸癌)、Hep3B(肝癌)、以及NCI-H 460(肺癌)以及一種人類臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)的增生作用可能產(chǎn)生的效果，各化合物的試驗(yàn)濃度是經(jīng)由10-倍系列稀釋自0.01至100μM。
該三種經(jīng)測試的化合物的IC50(50％受抑制時(shí)的濃度)、TGI(總生長抑制)及LC50(50％致死時(shí)的濃度)是摘述于表1。
如表1所示，該三種經(jīng)測試的化合物于試管內(nèi)對NCI-H 460細(xì)胞株顯示出有效的細(xì)胞毒性?；衔颕Ia-1及IIb-1對MCF-7及Hep3B細(xì)胞株亦具有顯著活性。此兩種化合物對HT-29細(xì)胞株展現(xiàn)出一般且少量的活性?；衔颲II-1對MCF-7及Hep3B顯示出顯著的細(xì)胞毒性而對HT-29細(xì)胞株顯示出一般活性。另一方面，所有經(jīng)測試的三種化合物于HUVEC試驗(yàn)中實(shí)質(zhì)上是不具活性或顯示出少量活性。
于試管內(nèi)評估化合物IIa-1、IIa-2、IIb-1、IIb-2、VII-1、VII-2、IX以及XV-2-H3PO4對人類早樣狀白血病(HL-60)細(xì)胞株的細(xì)胞毒性。如表2所示，所有測試化合物皆顯示出顯著的細(xì)胞毒性。其中，XV-2-H3PO4是最具效果者。因此挑選此化合物進(jìn)行進(jìn)一步評估。
評估單-[1-(4，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b5，4-b’]二噻吩-2-基)-甲基]琥珀酸酯(IIa-1)、單-[1-(4，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b5，4-b’]二噻吩-2-基)-甲基]戊烷二酸酯(IIa-2)、單-[1-(4，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b5，4-b’]二噻吩-2-基)-乙基]琥珀酸酯(IIb-1)、單-[1-(4，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b5，4-b′]二噻吩-2-基)-乙基]戊烷二酸酯(IIb-2)、4，8-二酮基-4，8-二羥基苯并[1，2-b5，4-b’]-二噻吩-2-基-甲氧基乙酸乙酯(IVa)、單-[1-(4，8-二酮基-4，8-二羥基苯并[1，2-b4，5-b’]二噻吩-2-基)-乙基]琥珀酸酯(VII-1)、單-[1-(4，8-二酮基-4，8-二羥基苯并[1，2-b4，5-b’]二噻吩-2-基)-乙基]戊烷二酸酯(VII-2)、1-(4，8-二酮基-4，8-二羥基苯并[1，2-b4，5-b’]-二噻吩-2-基-乙氧基)乙酸(IX)、4，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b5，4-b’]二噻吩-2-羧酸(XI)、4，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b4，5-b’]二噻吩-2-羧酸(XIV)、4，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b4，5-b’]二噻吩-2-羧酸-(2-二甲胺基-乙基)-酰胺磷酸鹽(XV-2-H3PO4)、(L)-2-{(4，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b4，5-b’]二噻吩-2-羰基)-胺基}-丙酸(XVI)，及其鹽類于試管中對鼻咽癌的表皮癌(KB)、鼻咽癌的p-gp-表現(xiàn)的表皮樣癌(KB-VIN)、肺癌(A-549)、回結(jié)腸癌(HCT-8)及前列腺癌(PC-3)的細(xì)胞毒性。如表3所示，大部分經(jīng)測試的化合物可顯示出顯著的細(xì)胞毒性。其中，XV-2-H3PO4是最有可能的藥劑。此外，化合物IIb-1、IIb-2、VII-1及VII-2對MDR細(xì)胞株(KB-VIN)及雄性素-不敏感性前列腺癌細(xì)胞株(PC-3)展現(xiàn)出有效的活性。因此，挑選化合物XV-2-H3PO4、IIb-1、IIb-2、VII-1及VII-2進(jìn)行進(jìn)一步的藥理研究。簡言之，本發(fā)明證實(shí)苯并二噻吩類似物于治療癌癥上的卓越的治療潛能。
本發(fā)明亦揭示一種具有下列結(jié)構(gòu)(F)或(G)的親水性化合物，或其醫(yī)藥可接受的鹽 其中A3及A4獨(dú)立地為-U-C(O)-(CH2)nCOOH、-U-(CH2)n-COOH、-U(CH2)n-NR5R6、 或 其中U為O、S、或NH，R5為H或烷基；R6為H或烷基；以及n為1至5；以及Z、R1、R2、R3以及R4是如上述所界定。
本發(fā)明亦揭示一種治療腫瘤的方法，該方法包括對需要治療的對象投予具有上述界定的式(F)或(G)的化合物，或其醫(yī)藥可接受的鹽，其投予量可有效治療該腫瘤。
表1.化合物IIa-1、IIb-1、及VII-1對MCF7、HT-29、Hep-3B、NCI-H460及HUVEC細(xì)胞株的細(xì)胞毒性

IIa-1，R＝CH2-OCO(CH2)2COOH VII-1，R＝CH(CH3)-OCO(CH2)2COOHIIb-1，R＝CH(CH3)-OCO(CH2)2COOH

aIC50(50％受抑制時(shí)的濃度)time0時(shí)增加的經(jīng)處理的細(xì)胞數(shù)或細(xì)胞量僅為實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)載劑-對照組的相對增加量的50％時(shí)該測試化合物的濃度μM。
bTGI(總生長抑制)實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)經(jīng)處理的細(xì)胞數(shù)或細(xì)胞量等于time0的細(xì)胞數(shù)或細(xì)胞量時(shí)該測試化合物的濃度μM。cLC50(50％致死時(shí)的濃度)實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)經(jīng)處理的細(xì)胞數(shù)或細(xì)胞量為time0時(shí)的一半時(shí)該測試化合物的濃度μM。
表2.化合物IIa-1、IIa-2、IIb-1、IIb-2、VII-1、VII-2、IX及XV-2-H3PO4對HL-60細(xì)胞株a的細(xì)胞毒性

IIa-1，IIa-2 VII-1，VII-2IIb-1，IIb-2 IX，XV-2-H3PO4

a人類早樣狀白血病(HL-60)。
bIC50値是可抑制50％的細(xì)胞生長的濃度。
表3.化合物IIa-1、IIa-2、IIb-1、IIb-2、IVa、VII-1、VII-2、IX、XI、IV、XV、XVI及其鹽類對KB、KB-VIN、A-549、HCF-8及PC-3細(xì)胞株的細(xì)胞毒性

(IIb-1，IIb-1-Na，IIb-2，IIb-2-Na，IIa-1， (VII-1，VII-1-Na，VII-2，VII-2-Na，XIV，IIa-1-Na，IIa-2，IIa-2-Na，IVa，XI，XI-NH4) XIV-NH4，XV-2-H3PO4，XVI-Na，IX，IX-Na)


aIC50是當(dāng)細(xì)胞培養(yǎng)72小時(shí)后，使細(xì)胞數(shù)減少50％的化合物的濃度。
b鼻咽癌的表皮樣癌(KB)。
c鼻咽癌的p-gp-表現(xiàn)的表皮樣癌(KB-VIN)。
d肺癌(A-549)。
e回結(jié)腸癌(HCT-8)。
f前列腺癌(PC-3)。
gND＝于20mcq/mL下未活化。
以上所合成的一部份本發(fā)明化合物的水溶解度被量測被列于下表


權(quán)利要求
1.一種具有式(D)或(E)的4，8-二氫苯并二噻吩-4，8-二酮衍生物 其中Y及Z獨(dú)立地為O、S、-NH-、或Se；A1及A2獨(dú)立地為O、S、或NR5，其中R5為H或烷基；R1、R2、R3及R4獨(dú)立地為H、烷基、-CR5R6-X-C(O)-(CH2)nCOOH、-CR5R6-X-(CH2)nCOOH、-CR5R6-X-(CH2)nNR5R6、-C(O)-NR6-(CR5R6)nCOOH、-C(O)-NR6-(CR5R6)nNR5R6、-CR5R6-C(O)-(CH2)nCOOH、-CR5R6-X-C(O)-(CH2)nNR5R6、-C(O)-(CR5R6)nCOOH、-C(O)-(CR5R6)nNR5R6、-CR5＝N-(CH2)nCOOH、-CR5＝N-(CH2)nNR5R6、-CR5＝NOH、或 其中X為O、S、或NH；R5是如上述所界定；R6為H或烷基；以及n為1至5；惟R1、R2、R3及R4中的至少一者為除了氫及烷基外的基團(tuán)；或其醫(yī)藥可接受的鹽。
2.如權(quán)利要求1所述的衍生物，其中R2、R3及R4為H，以及R1為-CR5R6-X-C(O)-(CH2)nCOOH、-CR5R6-X-(CH2)nCOOH、-CR5R6-X-(CH2)nNR5R6、-CO-NR6-(CR5R6)nCOOH、或-C(O)-NR6-(CR5R6)nNR5R6，其中X、R5、R6及n是如權(quán)利要求1所界定。
3.如權(quán)利要求1所述的衍生物，其中Y及Z為S。
4.如權(quán)利要求2所述的衍生物，其中Y及Z為S。
5.如權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)所述的衍生物，其中A1及A2為O。
6.如權(quán)利要求5所述的衍生物，其中X為O。
7.如權(quán)利要求6所述的衍生物，其中R5及R6獨(dú)立地為H或甲基。
8.如權(quán)利要求7所述的衍生物，其中R1為-CR5R6-X-C(O)-(CH2)nCOOH。
9.如權(quán)利要求7所述的衍生物，其中R1為-CR5R6-X-(CH2)nCOOH。
10.如權(quán)利要求7所述的衍生物，其中R1為-CR5R6-X-(CH2)nNR5R6。
11.如權(quán)利要求7所述的衍生物，其中R1為-C(O)-NR6-(CR5R6)nCOOH。
12.如權(quán)利要求7所述的衍生物，其中R1為-C(O)-NR6-(CR5R6)nNR5R6。
13.如權(quán)利要求7所述的衍生物，是具有式(D)者。
14.如權(quán)利要求7所述的衍生物，是具有式(E)者。
15.如權(quán)利要求7所述的衍生物，其為單-[1-(4，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b5，4-b’]二噻吩-2-基)-甲基]琥珀酸酯(IIa-1)、單-[1-(4，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b5，4-b’]二噻吩-2-基)-乙基]琥珀酸酯(IIb-1)、或單-[1-(4，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b5，4-b′]二噻吩-2-基)-乙基]戊烷二酸酯(IIb-2)；單-[1-(4，8-二酮基-4，8-二羥基苯并[1，2-b4，5-b’]二噻吩-2-基)-乙基]琥珀酸酯(VII-1)、單-[1-(4，8-二酮基-4，8-二羥基苯并[1，2-b4，5-b’]二噻吩-2-基)-乙基]戊烷二酸酯(VII-2)、或4，8-二酮基-4，8-二氫苯并[1，2-b4，5-b’]二噻吩-2-羧酸-(2-二甲胺基-乙基)-酰胺(XV-2)。
16.一種如權(quán)利要求1至15任一項(xiàng)所述的式(D)或(E)的4，8-二氫苯并二噻吩-4，8-二酮的衍生物或其醫(yī)藥可接受的鹽作為活性成分在制備治療腫瘤的藥劑的應(yīng)用。
17.如權(quán)利要求16所述的應(yīng)用，其中該腫瘤是選自非-小細(xì)胞肺癌、乳癌、鼻咽癌、前列腺癌、結(jié)腸癌、肝癌、回結(jié)腸癌、白血病及中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌癥所組成的群組。
18.如權(quán)利要求16所述的應(yīng)用，其中該腫瘤是選自非-小細(xì)胞肺癌、乳癌、鼻咽癌及前列腺癌所組成的群組。
全文摘要
本發(fā)明揭示一種4，8－二氫苯并二噻吩－4，8－二酮的親水性衍生物，其可作為抗癌劑，以及揭示含有該親水性物的醫(yī)藥調(diào)配物。
文檔編號(hào)A61P35/00GK1769281SQ20051010525
公開日2006年5月10日 申請日期2005年9月28日 優(yōu)先權(quán)日2004年9月28日
發(fā)明者黃必燦, 溫巖芳, 辛武謙, 陳美惠, 郭盛助, 李國雄 申請人:財(cái)團(tuán)法人工業(yè)技術(shù)研究院, 永信藥品工業(yè)股份有限公司