專利名稱：連接有聚乙二醇的氨基酸及其制法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及連接了聚乙二醇長鏈的氨基酸、其制備方法及其用于多肽的合成，用于制備帶有聚乙二醇長鏈的多肽。
背景技術(shù)：
隨著生物技術(shù)的發(fā)展，越來越多的具有生物活性的小肽被研究者發(fā)現(xiàn)具有治療作用，如胸腺肽、生長抑素、血管緊張素、阿基瑞林等等。但小肽應(yīng)用于臨床也有許多不利之處，例如易產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)、穩(wěn)定性較差、在體內(nèi)被清除速率較快等。因此，人們采用了各種方法消除上述不利因素，其中手段之一是采用聚乙二醇化技術(shù)。聚乙二醇化技術(shù)(PEGylation PEG化)又稱為化學(xué)修飾，是目前分子變構(gòu)化學(xué)(molecule altering structure chemistry,MASC)中最重要的技術(shù)之一。PEG化技術(shù)的研 究始于20世紀(jì)80年代，Abuchowski等第一次將聚乙二醇共價(jià)結(jié)合到蛋白質(zhì)上，以保護(hù)蛋白質(zhì)免遭破壞，結(jié)果發(fā)現(xiàn)聚乙二醇修飾不僅可以增加蛋白質(zhì)的水溶性，還能減緩腎臟的清除，改變了蛋白質(zhì)的藥代動(dòng)力學(xué)和藥效學(xué)性質(zhì)。經(jīng)過近幾十年的發(fā)展，PEG化技術(shù)不僅在蛋白質(zhì)類藥物的開發(fā)中得到普遍的應(yīng)用，而且已擴(kuò)展到新型藥物載體、控釋制劑等各個(gè)領(lǐng)域。許多制備聚乙二醇化小肽的方法已被報(bào)道，潘和平等在中國專利200310117356. 5中報(bào)道了胸腺五肽的聚乙二醇化衍生物，含有它們的藥物組合物及用途；中國專利200410066897. 4中報(bào)道了一種人胰高血糖素樣肽-I的復(fù)合物及其制備方法，連接了 PEG的人胰高血糖素樣肽-I生物穩(wěn)定性高，體內(nèi)半衰期長，生物利用度高。在傳統(tǒng)的聚乙二醇化技術(shù)中，需要對聚乙二醇的端基進(jìn)行活化，引入適當(dāng)?shù)幕钚曰鶊F(tuán)，此活性基團(tuán)對要結(jié)合的藥物分子中的至少一個(gè)官能團(tuán)具有活性，能與之形成穩(wěn)定的化學(xué)鍵。但這種方法在用于小肽的PEG化時(shí)存在著許多的局限性其一是小肽的氨基酸中可能不具有能與活化的PEG結(jié)合的側(cè)鏈基團(tuán)。另外，小肽的分子量較小，PEG化的位點(diǎn)可能覆蓋了活性部位。本發(fā)明提供的帶有PEG的氨基酸用于多肽的合成，可以在設(shè)定好的位點(diǎn)引入PEG，避免了傳統(tǒng)PEG化方法的局限性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種新型的，帶有聚乙二醇的氨基酸，能用于多肽的化學(xué)合成。本發(fā)明的技術(shù)方案如下一種連接有聚乙二醇的氨基酸，它具有以下結(jié)構(gòu)通式R — PEG — CO-X-氨基酸或R — PEG — X-氨基酸其中PEG為聚乙二醇鏈，R為PEG的羥基或烴氧基，烴氧基可以選自C廣C12烷氧基、環(huán)烷氧基或芳烷氧基，X為氨基酸中除a-羧基和a-氨基外的脫去活性氫的雜原子。
本發(fā)明的連接有聚乙二醇的氨基酸，其中的氨基酸優(yōu)選的是側(cè)鏈含雜原子的天然氨基酸。它們中最優(yōu)選的天然氨基酸是賴氨酸、組胺酸、半胱氨酸、酪氨酸或精氨酸，烴氧基為甲氧基，它們有如下幾種結(jié)構(gòu)
權(quán)利要求
1.一種連接有聚乙二醇的氨基酸，其特征是它具有以下結(jié)構(gòu)通式 R-PEG-X-氨基酸 其中PEG為聚乙二醇鏈，R為PEG的羥基或烴氧基，烴氧基選自C廣C12烷氧基、環(huán)烷氧基或芳烷氧基，X為氨基酸中除a-羧基和a-氨基外的脫去活性氫的雜原子。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的連接有聚乙二醇的氨基酸，其特征是其中的氨基酸是側(cè)鏈含雜原子的天然氨基酸。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的連接有聚乙二醇的氨基酸，其特征是它們中的天然氨基酸是賴氨酸、組胺酸、半胱氨酸、酪氨酸或精氨酸，烴氧基為甲氧基。
4.一種制備權(quán)利要求I所述的連接有聚乙二醇的氨基酸的方法，其特征是它包括以下步驟 取單烴氧基聚乙二醇酸，a -叔丁氧羰基氨基酸和二環(huán)己基碳二亞胺溶于二氯甲烷中，所述的氨基酸是除a-羧基和a-氨基外還具有帶活性氫的氮原子的氨基酸，在室溫下攪拌回流4 16小時(shí)，將混合物過濾，濾液減壓蒸干并真空干燥，即得連接有聚乙二醇的a-叔丁氧羰基氨基酸，將所得的連接有聚乙二醇的a-叔丁氧羰基氨基酸溶于二氯甲烷中，并加入三氟乙酸，攪拌，然后蒸發(fā)濃縮并真空干燥，所得固體物質(zhì)用二氯甲烷溶解并用干燥劑干燥，過濾后再加入冷卻乙醚至濾液中，將所得沉淀物過濾后真空干燥，即得連接有聚乙二醇的氨基酸。
5.一種制備權(quán)利要求I所述的連接有聚乙二醇的氨基酸的方法，其特征是它包括以下步驟 取單烴氧基聚乙二醇酰氯溶于二氯甲烷中，再加入a-叔丁氧羰基氨基酸和三乙胺，所述的氨基酸是除a-羧基和a-氨基外還具有帶活性氫的雜原子的氨基酸，室溫下攪拌過夜，將反應(yīng)混合物過濾，濾液蒸發(fā)濃縮并真空干燥，即得連接有聚乙二醇的a -叔丁氧羰基氨基酸，將所得的連接有聚乙二醇的a-叔丁氧羰基氨基酸溶于二氯甲烷中，并加入三氟乙酸，攪拌，然后蒸發(fā)濃縮并真空干燥，所得固體物質(zhì)用二氯甲烷溶解并用干燥劑干燥，過濾后再加入冷卻乙醚至濾液中，將所得沉淀物過濾后真空干燥，即得連接有聚乙二醇的氨基酸。
6.一種制備權(quán)利要求I所述的連接有聚乙二醇的氨基酸的方法，其特征是它包括以下步驟 取單烴氧基聚乙二醇溶于二氯亞砜中，室溫?cái)嚢?小時(shí)，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去剩余的二氯亞砜，將所得固體物質(zhì)溶于二氯甲烷中，再加入a-叔丁氧羰基氨基酸和三乙胺，所述的氨基酸是除a-羧基和a-氨基外還具有帶活性氫的雜原子的氨基酸，室溫下攪拌過夜，過濾反應(yīng)混合物，濾液蒸發(fā)濃縮并真空干燥，即得連接有聚乙二醇的a -叔丁氧羰基氨基酸，將所得的連接有聚乙二醇的a-叔丁氧羰基氨基酸溶于二氯甲烷中，并加入三氟乙酸，攪拌，然后蒸發(fā)濃縮并真空干燥，所得固體物質(zhì)用二氯甲烷溶解并用干燥劑干燥，過濾后再加入冷卻乙醚至濾液中，將所得沉淀物過濾后真空干燥，即得連接有聚乙二醇的氨基酸。
7.一種制備權(quán)利要求I所述的連接有聚乙二醇的氨基酸的方法，其特征是它包括以下步驟 取單烴氧基聚乙二醇胺，a-叔丁氧羰基氨基酸和二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)溶于二氯甲烷中，所述的氨基酸是除a-羧基和a-氨基外還具有其它羧基的氨基酸，在室溫下攪拌回流4 16小時(shí)，將混合物過濾，濾液減壓蒸干并真空干燥，即得連接有聚乙二醇的a-叔丁氧羰基氨基酸，將所得的連接有聚乙二醇的a-叔丁氧羰基氨基酸溶于二氯甲烷中，并加入三氟乙酸，攪拌，然后蒸發(fā)濃縮并真空干燥，所得固體物質(zhì)用二氯甲烷溶解并用干燥劑干燥，過濾后再加入冷卻乙醚至濾液中，將所得沉淀物過濾后真空干燥，即得連接有聚乙二醇的氨基酸。
8.—種權(quán)利要求I所述的連接有聚乙二醇的氨基酸的用途，其特征是將其用于多肽的合成，或?qū)⑵溥B接到藥物上。
全文摘要
一種連接有聚乙二醇的氨基酸，它具有以下結(jié)構(gòu)通式R—PEG—X-氨基酸其中PEG為聚乙二醇鏈，R為PEG的羥基或烴氧基，烴氧基可以選自C1~C12烷氧基、環(huán)烷氧基或芳烷氧基，X為氨基酸中除α-羧基和α-氨基外的脫去活性氫的雜原子。用本發(fā)明的連接有聚乙二醇的氨基酸合成多肽，可以得到聚乙二醇鏈在特定位置的多肽，如此的多肽不但改善了它們的藥代動(dòng)力學(xué)，而且不影響多肽原有的治療作用。本發(fā)明公開了其制法。
文檔編號(hào)A61K47/48GK102827365SQ20121032168
公開日2012年12月19日 申請日期2006年11月7日 優(yōu)先權(quán)日2006年11月7日
發(fā)明者姚文兵, 田浤, 高向東, 陳陽建, 宋瀟達(dá) 申請人:中國藥科大學(xué)