專利名稱：：殼聚糖在制備防治家蠶細(xì)菌性敗血病藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種防治家蠶病害藥物
技術(shù)領(lǐng)域：
，尤其涉及殼聚糖在制備防治家蠶細(xì)菌性敗血病藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：蠶絲業(yè)是中國(guó)一項(xiàng)頗具資源優(yōu)勢(shì)的傳統(tǒng)產(chǎn)業(yè)，已具有5000多年歷史，作為農(nóng)民的一項(xiàng)傳統(tǒng)副業(yè)，是農(nóng)民增收的重要途徑之一。家蠶是當(dāng)今飼養(yǎng)規(guī)模最大、技術(shù)最成熟的經(jīng)濟(jì)昆蟲；由于其自身的特點(diǎn)，對(duì)病原細(xì)菌的抵御能力有限，極易感染細(xì)菌導(dǎo)致死亡。由靈菌(Sem^/awarcascms)引起的細(xì)菌性敗血病是蠶業(yè)生產(chǎn)上的常見病，對(duì)蠶繭的高產(chǎn)和穩(wěn)產(chǎn)影響極大。目前的防治方法主要有在蠶體撒上體外消毒粉劑與通過(guò)添食抗菌藥殺死侵入體內(nèi)的細(xì)菌兩種，但前者費(fèi)時(shí)費(fèi)力且對(duì)侵入體內(nèi)的病菌防效不明顯，后者防效不錯(cuò)但易誘發(fā)家蠶的抗藥性，且成本較高。另外，由于蠶蛹已成為餐桌上的美味佳肴，由這些化學(xué)藥劑處理過(guò)的家蠶得到的蠶蛹供人們食用后，殘留藥劑將對(duì)人的身體健康產(chǎn)生不良影響。殼聚糖是由甲殼素經(jīng)脫乙?；幚砗蟮漠a(chǎn)物，通常將脫乙酰度大于55%的甲殼素稱作殼聚糖，其學(xué)名為聚氨基葡萄糖，化學(xué)名(1,4)-2-氨基-2-脫氧-13-D-葡萄糖，廣泛存在于蝦、蟹等動(dòng)物外殼和藻類、真菌的細(xì)胞壁中。殼聚糖是一種抗菌譜較廣的天然物質(zhì)，對(duì)細(xì)菌、酵母菌和真菌等均有不同程度的抑制作用。殼聚糖具有良好的生物相溶性，可生物降解性以及無(wú)毒副作用，其分子內(nèi)含有-OH和-NHr活性基團(tuán)，易與多種有機(jī)物發(fā)生反應(yīng)，目前廣泛應(yīng)用在工業(yè)、農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥、化工、環(huán)境保護(hù)和水處理等領(lǐng)域。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供了一種殼聚糖在制備防治家蠶細(xì)菌性敗血病藥物中的應(yīng)3用，該藥物防治效果好，而且在蠶體無(wú)毒性和副作用,食用不影響人身體健康。本發(fā)明防治家蠶細(xì)菌性敗血病藥物以殼聚糖為主要成份，添加常規(guī)的藥用賦形劑，如水等，制成水劑、粉劑等劑型。所述的殼聚糖的脫乙酰度優(yōu)選大于85%,易獲得，成本低。本發(fā)明還提供了一種上述藥物的制備方法，包括以下步驟:將殼聚糖粉末溶于體積百分比為1%的冰醋酸溶液中，然后添加水配制成濃度為0.01~0.1mg/mL的殼聚糖溶液。冰醋酸主要是用于調(diào)節(jié)pH值，使得殼聚糖溶解，其用量和濃度可以根據(jù)需要進(jìn)行調(diào)整。采用上述制備的濃度為0,10mg/mL的殼聚糖溶液浸泡過(guò)的桑葉喂食家蠶，接種了靈菌的家蠶死亡率從95.0%下降到48.3%。該藥物能顯著降^u家蠶細(xì)菌性敗血病菌的感染風(fēng)險(xiǎn)，治療效果顯著。采用該藥物防治家蠶細(xì)菌性敗血病簡(jiǎn)單易行，成本較低；更重要的是防治環(huán)節(jié)不會(huì)對(duì)防治人員的健康產(chǎn)生任何威脅。具體實(shí)施例方式實(shí)施例1將脫乙酰度大于85%的殼聚糖粉末溶解于體積百分比為1%的冰醋酸中，添加蒸餾水配制成濃度分別為O.(H、0.05和0.10mg/mL的殼聚糖溶液，取各種濃度的殼聚糖溶液5mL，每份里面加入相同濃度的靈菌敗血病菌懸浮液，使混合溶液中的病菌濃度一致(l.Oxio7CFU/mL);以蒸餾水代替殼聚糖粉作為對(duì)照，室溫下振蕩2小時(shí)后查驗(yàn)病菌數(shù)量，結(jié)果如下表l不同濃度殼聚糖溶液對(duì)靈菌病原生長(zhǎng)的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>從表i可以看出，在離體條件下，0.01mg/mL與0.05mg/mL的殼聚糖溶液能完全抑制病原菌的增殖，0,10mg/mL的殼聚糖溶液甚至能殺死已有的病原菌。實(shí)施例2取濃度為0.1Qmg/mL的殼聚糖溶液，加入一定濃度的靈菌敗血病菌懸浮液，使病菌在溶液中濃度約為107CFU/mL(7.00log10CFU/mL)，對(duì)混合后0.5、1.0、2.0和4.0小時(shí)的混合溶液取樣記數(shù)，記錄其中的靈菌敗血病菌數(shù)量。以蒸餾水代替殼聚糖作為對(duì)照。結(jié)果顯示，在病菌懸浮液中加入殼聚糖后，病菌數(shù)量急劇減少，顯示出較好的殺菌作用。表2不同培養(yǎng)時(shí)間對(duì)殼聚糖溶液((UOmg/mL)抑菌活性的影響培養(yǎng)時(shí)間(小時(shí))病原菌數(shù)量(bg1QCFU/mL)對(duì)照殼聚糖0.07.777.770.57.185.991.07.405.972.07,325.654.07,295.00實(shí)施例3用濃度為0.10mg/mL的殼聚糖溶液浸泡桑葉，喂食家蠶24小時(shí)后，對(duì)蠶體接種靈菌敗血病菌，以下五個(gè)處理作為對(duì)照(D以沒有經(jīng)過(guò)殼聚糖溶液處理的普通桑葉喂食家蠶，對(duì)家蠶接種病菌；②以沒有經(jīng)過(guò)殼聚糖處理的桑葉喂食家蠶，對(duì)家蠶接種蒸餾水；③以經(jīng)過(guò)殼聚糖處理的桑葉喂食家蠶，對(duì)家蠶接種蒸餾水；④以沒有經(jīng)過(guò)殼聚糖處理的桑葉喂食家蠶，對(duì)家蠶不接種；⑤以經(jīng)過(guò)殼聚糖處理的桑葉喂食家蠶，對(duì)家蠶不接種。分別于接種后24、48和72小時(shí)統(tǒng)計(jì)家蠶死亡率。表3殼聚糖溶液處理桑葉防治家蠶靈菌敗血病的效果處理家蠶死亡率<24小時(shí)48小時(shí):%)72小時(shí)普通桑葉喂食+接種病原菌83.391.795.0殼聚糖處理桑葉喂食+接種病原菌43.348.348.3普通桑葉喂食+接種蒸餾水0.00.00.0殼聚糖處理桑葉喂食+接種蒸餾水0.00.00.0普通桑葉喂食+不接種0,00.00.0殼聚糖處理桑葉喂食+不接種0.00.00.0從表3可以看出，以殼聚糖溶液浸泡過(guò)的桑葉喂食不會(huì)影響家蠶的生長(zhǎng)；接種病原菌后,家蠶在72小時(shí)內(nèi)的死亡率分別達(dá)到83.3%、91.7%和95.0%,但是以本發(fā)明所述方法處理后，死亡率迅速下降到43.3%、48.3%和48.3%，防病效果明顯。權(quán)利要求1、殼聚糖在制備防治家蠶細(xì)菌性敗血病藥物中的應(yīng)用。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述的殼聚糖脫乙酰度大于85%。3、根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于所述的藥物為濃度為0.01~0.1mg/ml的殼聚糖水溶液。全文摘要本發(fā)明公開了一種殼聚糖在制備防治家蠶細(xì)菌性敗血病中的應(yīng)用。本發(fā)明藥物能顯著降低家蠶細(xì)菌性敗血病菌的感染風(fēng)險(xiǎn)，治療效果顯著。采用本發(fā)明藥物防治家蠶細(xì)菌性敗血病簡(jiǎn)單易行，成本較低；更重要的是防治環(huán)節(jié)不會(huì)對(duì)防治人員的健康產(chǎn)生任何威脅。文檔編號(hào)A61K31/722GK101579354SQ20091009904公開日2009年11月18日申請(qǐng)日期2009年6月4日優(yōu)先權(quán)日2009年6月4日發(fā)明者余山紅,斌李,婷蘇,謝關(guān)林申請(qǐng)人:浙江大學(xué)