專利名稱：一種以吐溫-80為增溶劑的注射液的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種以吐溫-80為增溶劑的注射液的制備方法。
(二)
背景技術(shù)：
吐溫-80,即聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯，分子式為C64H124026,結(jié)構(gòu)式如下
々(OCH2CH2) xOH
HO (CH2CH20) w
CH (OCH2CH2) vOH 0
I — II
CH20 (CH2CH20) z-iCHzCHjO-C-CHs (CH2) 5CH2CH=CHCH2 (CH2) 6CH3
其中x+y+z+w=20
吐溫-80為 一種非離子型表面活性劑，為淡黃色至橙黃色的粘稠液體。易溶于水、曱醇、乙醇和醋酸乙酯，在礦物油中極微溶解，具有較強的親
水性，為藥物制劑中常用的輔料之一。由于其結(jié)構(gòu)中具有較長的碳鏈結(jié)構(gòu)，對親脂性藥物有較好的增溶作用，在制備難溶性藥物制劑時，常用作增溶劑、乳化劑和穩(wěn)定劑，也常用于注射劑的生產(chǎn)。國內(nèi)目前有多種藥物的注射劑中使用該輔料作為增溶劑，涉及化學(xué)藥品和中藥注射劑，劑型包括粉針劑、小針和大輸液。該輔料靜脈用于人體具有一定的安全性，可因為生產(chǎn)廠家的工藝條件有所不同而導(dǎo)致其產(chǎn)品的LDso的不同。如從多家生產(chǎn)吐溫廠家獲得的樣品的實驗表明小鼠靜脈注射的LDw在5.5~7.8g/kg之間。
在動物的藥理實驗中也發(fā)現(xiàn)吐溫-80可能對心血管系統(tǒng)有一定的影響。在一些來自臨床的不良反應(yīng)才艮告中，在輸注含吐溫-80的注射劑時出現(xiàn)類似過敏反應(yīng)，血壓降低，心率加快等癥狀。因此，在使用吐溫-80時，
4了解該輔料的生產(chǎn)工藝，加強質(zhì)量控制，非常關(guān)鍵。
吐溫-80的生產(chǎn)工藝將加熱后的司盤和催化劑(溶液)按配比量加入到不銹鋼反應(yīng)釜中，然后升溫至80 120。C開始真空減壓脫水，水分脫凈后，用0.2 0.4MPa以氮氣置換2 3次，然后繼續(xù)升溫至150~170°C,通入環(huán)氧乙烷，并維持反應(yīng)釜內(nèi)壓力不再下降，即可排空，置換，然后降溫至80。C左右，用水醋酸中和至pH6 8,必要時脫色，取樣分析，出料，包裝。在合成過程中，工藝條件控制的不同會產(chǎn)生不同的雜質(zhì)，如環(huán)氧乙烷的副產(chǎn)物2-氯乙醇、乙二醇、二甘醇、二氧六環(huán)和環(huán)氧乙烷本身，上述雜質(zhì)具有一定的毒性。高純度的吐溫-80合成所采用的原料油酸需要控制其它脂肪酸，如肉豆蔻酸、棕櫚酸、棕櫚油酸、^J旨酸、亞油酸、亞麻酸， -使主要脂肪酸油酸達到58.0%~85.0%。在各國的藥典中其標(biāo)準(zhǔn)控制有所不同，中國藥典和美國藥典基本一致，歐洲藥典和英國藥典較中國藥典更為嚴(yán)格，日本藥房方劑更為嚴(yán)格。具體體現(xiàn)在對上述雜質(zhì)的控制項目與限量值有所不同。對靜脈制劑所用的吐溫-80,歐洲藥典明確M^定了應(yīng)增加斗企查熱原項，而其他藥典則無此項身見定。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是提供一種以吐溫-80為增溶劑的注射液的制備方法。通過吐溫-80在使用前進行精制后，再用于藥品的配制，降低靜脈注射劑在臨床使用后不良反應(yīng)率，大大提高注射液的安全系數(shù)。
本發(fā)明采用的技術(shù)方案是
一種以吐溫-80為增溶劑的注射液的制備方法，所述方法包括將純化后的人體可接受的注射用藥液與精制后的吐溫-80混合，并添加注射用水至吐溫-80終濃度為l~5g/L,得到所述注射液；所述吐溫-80精制方法如下取吐溫-80加注射用水配制成質(zhì)量濃度10 30%的溶液，煮沸后保持微沸5 10分鐘后，冷卻至70 80。C加入1 5g/L的活性炭(即每升溶液加入l 5g活性炭)，攪拌降溫至50 60°C,過濾，得精制后的吐溫-80水溶液。本發(fā)明方法關(guān)鍵是在注射液配制之前對吐溫-80進行精制處理，可適用于所有以吐溫-80為增溶劑的中西藥注射液的制備，所述純化后的人體可接受的注射用藥液為按照本領(lǐng)域常規(guī)方法獲得的中藥提取液經(jīng)純化后的清液或者藥物化合物的溶解液，其中還可添加必要的助劑，如等滲調(diào)
節(jié)劑、pH調(diào)節(jié)劑、穩(wěn)定劑等，其中藥提取液及藥物化合物用量為常規(guī)用量，可根據(jù)實際需要在合理范圍內(nèi)進行調(diào)整。所述等滲調(diào)節(jié)劑可為NaCl或葡萄糖。優(yōu)選的，所述等滲調(diào)節(jié)劑為NaCl,在注射液中終濃度為9g/L。
具體的，本發(fā)明方法可用于下列注射液的配制野木瓜注射液、熱可平注射液、桑姜感冒注射液、骨癆敵注射液、復(fù)方蒲公英注射液、復(fù)方蛤青注射液、復(fù)方當(dāng)歸注射液、苦木注射液、抗腮腺炎注射液、當(dāng)歸寄生注射液、丁公藤注射液、穿心蓮注射液、白花蛇舌草注射液、伊痛舒注射液、補骨脂注射液、魚金注射液、魚腥草注射液、香丹注射液、柴胡注射液雪蓮注射液、醒腦靜注射液、健骨注射液、去感熱注射液、莪術(shù)注射液、新魚腥草素鈉注射液、胺石典達隆、參麥注射液、川芎注射液、燈盞細辛注射液、雙黃連注射液、苦參注射液等中西藥注射液。
具體的，所述吐溫-80精制方法如下取吐溫-80加注射用水配制成
質(zhì)量濃度20%的溶液，煮沸后保持微沸5分鐘后，冷卻至8(TC加入2g/L
的活性炭，攪拌降溫至5CTC,過濾，以注射用水稀釋至一定濃度，得精
制后的吐溫-80水溶液。
藥品生產(chǎn)廠在使用符合中國藥典標(biāo)準(zhǔn)的吐溫-80時，并不能非常有效
地清楚該產(chǎn)品的安全性，因此，除對吐溫生產(chǎn)廠家的工藝、質(zhì)量考察顯得
非常重要外，對吐溫-80增加精制工藝必不可少。事實證明精制工藝可以
除色、除熱原等雜質(zhì)，小鼠急性半數(shù)致死量試驗、體外細胞毒性試驗證明
精制工藝有明顯的降低毒性作用；大大提高吐溫的安全系數(shù)。優(yōu)選的，所述注射液中還添加有等滲調(diào)節(jié)劑，所述等滲調(diào)節(jié)劑為NaCl 或葡萄糖。更為優(yōu)選的，所述等滲調(diào)節(jié)劑為NaCl,在注射液中終濃度為 9g/L。
優(yōu)選的，所述注射液為^爭月永注射液或月幾肉注射'液。 以注射液為參麥注射液為例，所述參麥注射液每1000mL按如下方法 制備
(1)取吐溫-80加注射用水配制成質(zhì)量濃度20%的溶液，煮沸后保持 微沸5分鐘后，冷卻至8(TC加入2g/L的活性炭，攪拌降溫至 50°C,過濾，補加注射用水至吐溫-80質(zhì)量濃度為20%,得精制 后的吐溫-80水溶液；
(2 )紅參提取液制備取紅參1000g加乙醇2000mL浸漬后，回流 提取6次.每次2小時，濾過，合并濾液，減壓回收乙醇， 冷藏、濾過，濾液加入400mL注射用水，冷藏備用；
(3 )麥冬提取液制備取麥冬1000g加乙醇2500mL浸漬后，回流 提耳又2次，濾過，合并濾液，減壓回收乙醇，冷藏、濾過， 濾液入400mL的注射用水，冷藏備用；
(4)取上述紅參、麥冬提取冷藏液分別過濾，合并濾液，加入精 制后的20%吐溫-80水溶液25g，邊加邊攪拌直至完全均勻， 用注射用水補足至1000mL混勻，濾過，灌封，滅菌，即得參 麥注射液。
所述注射液為魚腥草注射液時，所述魚腥草注射液每1000mL按如下 方法制備
(1 )取吐溫-80加注射用水配制成質(zhì)量濃度20%的溶液，煮沸后保持孩i 沸5分鐘后，冷卻至8(TC加入2g/L的活性炭，攪拌降溫至50°C ,
7過濾，補加注射用水至吐溫-80質(zhì)量濃度為20%,得精制后的吐溫 -80水溶液；
(2 )取新鮮魚腥草2000g進行水蒸氣蒸餾，收集初餾液再次進行重蒸餾， 收集重蒸餾液，加入7g氯化鈉及步驟(1 )精制后的吐溫-80水溶 液25g，混勻，加注射用水補足至1000mL,得到所述魚腥草注射液。 本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)在按照本發(fā)明精制方法，精制后的吐溫 -80相對于未經(jīng)精制的吐溫-80，毒性明顯降低，大大提高了吐溫-80的安 全系數(shù)，利用精制后的吐溫-80制備注射劑尤其是靜脈注射劑，得到注射 劑在臨床使用后不良反應(yīng)率下降，增加了臨床用藥的安全性。 具體實施例方式
下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明進行進一步描述，但本發(fā)明的保護范圍 并不僅限于此
實施例1:吐溫-80的精制
耳又吐溫-80加注射用水配制成質(zhì)量濃度20%的溶液，煮沸后保持樣l沸 5分鐘后，冷卻至80。C加入2g/L的活性炭，攪拌降溫至50。C,過濾，濾 液補加注射用水至吐溫-80質(zhì)量濃度為20%,得精制后的吐溫-80水溶液。
實施例2:吐溫-80的精制
取吐溫-80加注射用水配制成質(zhì)量濃度15%的溶液，煮沸后保持纟鼓沸 8分鐘后，冷卻至85。C加入3g/L的活性炭，攪拌降溫至55。C,過濾，濾 液補加注射用水至吐溫-80質(zhì)量濃度為15%,得精制后的吐溫-80水溶液。
實施例3:安全性試-瞼一、 小鼠急性半數(shù)致死量試驗
試驗方法
根據(jù)國家食品藥品監(jiān)督管理局《藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范》和《化 學(xué)藥物急性毒性試驗技術(shù)指導(dǎo)原則》的方法要求及"小鼠急性半數(shù)致死量 試驗SOP-ZJGLP-CZ04-1/3 、 小鼠經(jīng)靜脈注射給予受試物 SOP-ZJGLP-DW04-17/3"標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，分別對精制前(1# )和精制后(2#, 實施例1精制產(chǎn)物)的"吐溫-80，，進《亍急性LD5o只于比試-瞼。
實驗結(jié)果
清潔級ICR小鼠分別尾靜脈注射(iv)給予編號為1#、 2#的"吐溫-80" 各8.35、 6.68、 5.34、 4.28 g/kg (以吐溫-80純量計)劑量,對小鼠的急性 毒副反應(yīng)主要為給藥后出現(xiàn)活動減少、俯臥、閉眼、嗜睡、全身無力、 呼吸急促、精神萎靡、反應(yīng)遲鈍、抽搐等。
小鼠經(jīng)尾靜脈注射給予1#吐溫-80僅8.35g/kg劑量組出現(xiàn)60%動物死 亡，給予2# "吐溫-80"8.35、 6.68g/kg劑量組分別出現(xiàn)20Q/Q、 10%動物死 亡，其余劑量均未引起死亡；小鼠經(jīng)尾靜脈注射給予1# "吐溫-80"的急 性半數(shù)致死劑量(LD50)約為8.0g/kg;給予2#"吐溫-80"的急性半數(shù)致 死劑量(LD5Q)大于8.35g/kg;在本試驗條件下，小鼠尾靜脈注射(iv ) 給予1# 2#"吐溫-80，，急性毒副反應(yīng)基本相似，毒性大小依次為2#<1#。根 據(jù)半數(shù)致死劑量(LD5。)的大小，證明了精制工藝有明顯的降低毒性作用。
二、 吐溫-80體外細胞毒性試驗 觀察精制前后的吐溫-80對體外培養(yǎng)的豬髖動脈內(nèi)皮細胞(P正C)所
產(chǎn)生的毒性反應(yīng)，通過細胞相對增殖率(RGR)來判定細胞毒性程度。
PIEC細胞在體外給予精制前(編號1#)、精制后(編號為2#,實施 例2精制產(chǎn)物)不同質(zhì)量濃度(注射用水分別稀釋至1:100、 1:500、 1:2500
9和1:12500 )的"吐溫-80",給予1#吐溫-80的PIEC細胞在給藥后2 d和4 d的RGR分別為4.9% 88.8%和0.4~72.6%;給予2#吐溫-80的PIEC細 胞在給藥后2 d和4 d的RGR分別為8.7 110.0%和1.3~82.6%,以上試驗 結(jié)果顯示，在本試驗劑量條件下，對PIEC細胞的毒性為1#吐溫-80給 藥后2 d時為4~1級；給藥后4 d時為5-2級；2#的吐溫-80給藥后2 d時 為4~0級，給藥后4 d時為4-1級，結(jié)果顯示2個批次的吐溫-80對PIEC 細胞均有一定的細胞毒性，并呈明顯的濃度和暴露時間關(guān)系，濃度低毒 性低，濃度高則毒性高，但2#的吐溫-80的毒性明顯低于1#吐溫-80,證 明了該精制工藝能有效減少細胞毒性。
實施例4:參麥注射液制備
紅參提取液制備取紅參(切片或粗粉)1000g加乙醇2000mL浸 漬后，回流提耳又6次.每次2小時，濾過，合并濾液，減壓回收乙醇， 冷藏、濾過，濾液約100mL,加入400mL注射用水，冷藏備用；
麥冬提取液制備取麥冬1 OOOg加乙醇2500mL浸漬后，回流提取 2次，濾過，合并濾液，減壓回收乙醇，冷藏、濾過，濾液約100mL, 加入400mL的注射用水，冷藏備用；
取上述紅參、麥冬提取冷藏液分別過濾，合并濾液，加入精制后 的20。/o吐溫-80水溶液25g，邊加邊攪拌直至完全均勻，用注射用水補 足至1000mL混勻，濾過，灌封，滅菌，即得參麥注射液。
由精制后吐溫配制的參麥注射液經(jīng)質(zhì)量^^驗(質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)號 WS3-B-3428-98-2004 ),其所有的項目性狀、鑒別、pH值、可見異物， 有關(guān)物質(zhì)蛋白質(zhì)、鞣質(zhì)、樹脂、草酸鹽、鉀離子檢查；異常毒性、熱 原、溶血與凝集檢查及含量測定全部指標(biāo)均合格。
10實施例5:魚腥草注射液制備
取鮮魚腥草2000g進行水蒸氣蒸餾，收集初餾液2000ml ，再進行重 蒸餾，收集重蒸餾液約950ml,加入7g氯化鈉及精制后的25克20%的吐 溫-80水溶液，混勻，加注射用水補足至lOOOml，濾過，灌封，滅菌，即 得魚腥草注射液。
由精制后吐溫配制的魚腥草注射液經(jīng)質(zhì)量檢驗，其所有的項目 性狀、鑒別、pH值、可見異物，有關(guān)物質(zhì)蛋白質(zhì)、鞣質(zhì)、樹脂、草酸 鹽、鉀離子檢查；異常毒性、熱原、溶血與凝集檢查及含量測定全部 指標(biāo)均合格。
實施例6:香丹注射液制備
降香1000g加水浸潤，進行水蒸氣蒸餾，收集蒸餾液約500ml,冷藏 24小時，分去油層，水溶液另器收集(約500mL )。丹參1000g加水煎煮 三次，第一次加8倍量水，煎煮2小時；第二、三次各加6倍、5倍量水， 每次煎煮1.5小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至670 ~ 760ml,加入乙 醇使含醇量(v/v)達75%,靜置40小時，濾過，濾液回收乙醇，濃縮至 約330ml，再加入乙醇使含醇量(v/v)達85%,靜置40小時，于溶液中 按體積加入1%的活性炭，攪拌1小時，濾過，濾液回收乙醇，濃縮至200 300ml,加入注射用水1000 ~ 1650ml,靜置16小時，濾過，濾液濃縮至 約330ml，加乙醇使含醇量(v/v)達80%,靜置24小時，濾過，濾液濃 縮至約330ml，加注射用水至約500ml,用10%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值 至6.5 ~ 6.0,煮沸1小時，于溶液中按體積加入1%的活性炭，煮沸15分 鐘，濾過，濾液再用10%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至6.8~7.0,加注射用水至約500ml,加入降香蒸餾液和精制后的25克的20%吐溫-80水溶液， 混勾，加注射用水-使成1000ml，濾過，灌封，滅菌，即得香丹注射液。 由精制后吐溫配制的魚腥草注射液經(jīng)質(zhì)量^r—險，其所有的項目 性狀、鑒別、pH值、可見異物，有關(guān)物質(zhì)蛋白質(zhì)、鞣質(zhì)、樹脂、草酸 鹽、鉀離子檢查；異常毒性、熱原、溶血與凝集檢查及含量測定全部 指標(biāo)均合格。
權(quán)利要求
1.一種以吐溫-80為增溶劑的注射液的制備方法，所述方法包括將純化后的人體可接受的注射用藥液與精制后的吐溫-80混合，并添加注射用水至吐溫-80終濃度為1～5g/L，得到所述注射液；所述吐溫-80精制方法如下取吐溫-80加注射用水配制成質(zhì)量濃度10～30％的溶液，煮沸后保持微沸5～10分鐘后，冷卻至70～80℃加入1～5g/L的活性炭，攪拌降溫至50～60℃，過濾，得精制后的吐溫-80水溶液。
2. 如權(quán)利要求l所述的方法，其特征在于吐溫-80精制方法如下取吐溫 -80加注射用水配制成質(zhì)量濃度20%的溶液，煮沸后保持樣i沸5分鐘后， 冷卻至80。C加入2g/L的活性炭，攪拌降溫至50。C,過濾，以注射用水 稀釋，得精制后的吐溫-80水溶液。
3. 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述注射液中還添加有等滲調(diào) 節(jié)劑，所述等滲調(diào)節(jié)劑為NaCl或葡萄糖。
4. 如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于所述等滲調(diào)節(jié)劑為NaCl,在注 射液中終濃度為9g/L。
5. 如權(quán)利要求1~4之一所述的方法，其特征在于所述注射用藥液為中藥 提取液經(jīng)純化除雜后的清液。
6. 如權(quán)利要求1~4之一所述的方法，其特征在于所述注射液為靜脈注射 '液或月幾肉注射液。
7. 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述注射液為參麥注射液，所 述參麥注射液每1000mL按如下方法制備(1)取吐溫-80加注射用水配制成質(zhì)量濃度20%的溶液，煮沸后保持 微沸5分鐘后，冷卻至8(TC加入2g/L的活性炭，攪拌降溫至50 。C,過濾，補加注射用水至吐溫-80質(zhì)量濃度為20%,得精制后的吐溫-80水溶液；(2) 紅參提取液制備取紅參1000g力卩乙醇2000mL浸漬后，回流 提耳又6次.每次2小時，濾過，合并濾液，減壓回收乙醇，冷 藏、濾過，濾液加入400mL注射用水，冷藏備用；(3) 麥冬提取液制備取麥冬1000g加乙醇2500mL浸潰后，回流 才是耳又2次，濾過，合并濾液，減壓回收乙醇，冷藏、濾過，濾 液入400mL的注射用水，冷藏備用；(4) 取上述紅參、麥冬提取冷藏液分別過濾，合并濾液，加入精制 后的20°/。吐溫-80水溶液25g，邊加邊攪4半直至完全均勻，用注 射用水補足至1000mL混勻，濾過，灌封，滅菌，即得參麥注 射液。
8.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述注射液為魚腥草注射液， 所述魚腥草注射液每1000mL按如下方法制備(1) 取吐溫-80加注射用水配制成質(zhì)量濃度20%的溶液，煮沸后保持 微沸5分鐘后，冷卻至8(TC加入2g/L的活性炭，攪拌降溫至50 。C,過濾，補加注射用水至吐溫-80質(zhì)量濃度為20%,得精制后 的吐溫-80水;容液；(2) 取新鮮魚腥草2000g進行水蒸氣蒸餾，收集初餾液再次進行重蒸 餾，收集重蒸餾液，加入7g氯化鈉及步驟(1 )精制后的吐溫-80 水溶液25g，混勻，加注射用水補足至1000mL,得到所述魚腥草 注射液。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種注射液的制備方法，所述方法包括將純化后的人體可接受的注射用藥液與精制后的吐溫-80混合，并添加注射用水至吐溫-80終濃度為1～5g/L，得到所述注射液；所述吐溫-80精制方法如下取吐溫-80加注射用水配制成質(zhì)量濃度10～30％的溶液，煮沸后保持微沸5～10分鐘后，冷卻至70～80℃加入1～5g/L的活性炭，攪拌降溫至50～60℃，過濾，得精制后的吐溫-80水溶液。本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)在按照本發(fā)明精制方法，精制后的吐溫-80相對于未經(jīng)精制的吐溫-80，毒性明顯降低，大大提高了吐溫-80的安全系數(shù)，利用精制后的吐溫-80制備注射劑尤其是靜脈注射劑，得到注射劑在臨床使用后不良反應(yīng)率下降，增加了臨床用藥的安全性。
文檔編號A61K47/34GK101491678SQ20091009595
公開日2009年7月29日 申請日期2009年2月25日 優(yōu)先權(quán)日2009年2月25日
發(fā)明者娟 李, 李元瑞, 治 王, 馬珠鳳 申請人:正大青春寶藥業(yè)有限公司