專利名稱：山藥糖蛋白在制備治療腎炎及腎性高血壓的藥物中的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種山藥糖蛋白在制備治療腎炎及腎性高血壓的藥物中的用途。
背景技術(shù)：
腎小球腎炎和腎性高血壓是比較常見的一種腎臟疾病，一般認(rèn)為，腎小球腎炎是因免疫病理?yè)p傷反應(yīng)而致的腎臟疾病。本病多見于成人，病程較長(zhǎng)，往往一年以上，有蛋白尿、鏡下血尿，高血壓，水腫，腎功能損害等。目前臨床上所使用的藥物主要為；糖皮質(zhì)激素，細(xì)胞毒性免疫抑制劑，非類固醇抗炎藥。腎性高血壓的治療，主要以卡托普利為代表的血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑類藥物為主，并配合其它種類降壓藥治療，毫無(wú)疑問(wèn)，毒副作用少，而作用顯著和廣泛，能同時(shí)治療腎小球腎炎和腎性高血壓的新的藥物，是臨床治療腎小球腎炎和腎性高血壓所迫切需要的。
山藥糖蛋白為薯蕷科薯蕷屬植物山藥中所含有的一種天然活性成份，此前公開的研究中證明該物質(zhì)可以有效治療睡眠呼吸暫停綜合征并且有抗缺氧、抗疲勞作用(專利 201010171536. I和2010101715337)。本發(fā)明在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步研究表明山藥糖蛋白能有效地同時(shí)治療腎小球腎炎和腎性高血壓，無(wú)毒副作用，相比現(xiàn)有臨床所使用的藥物安全性很高，但到目前為止，尚未見相關(guān)報(bào)道。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于，提供一種山藥糖蛋白在制備治療腎炎及腎性高血壓的藥物中的用途，本發(fā)明通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)進(jìn)行篩選和驗(yàn)證，證明了山藥糖蛋白具有治療腎小球腎炎和腎性高血壓的作用和很高的安全性，所述山藥糖蛋白來(lái)源于天然植物，藥源充足，提取制備方法簡(jiǎn)便易行，可將其制成膠囊、片劑、顆粒劑、口服液等多種劑型。
本發(fā)明所述的一種山藥糖蛋在制備治療腎炎及腎性高血壓的藥物中的用途，其中所述的山藥糖蛋白來(lái)自薯蕷科薯蕷屬植物山藥或薯蕷科其它屬植物的干燥根莖，所述的山藥糖蛋白的制備按下列步驟進(jìn)行
a、將山藥干燥根莖粉碎成細(xì)粉后，加入2-5倍量的水加熱，溫度50-100°C，提取兩次，每次2-3小時(shí)，過(guò)濾后合并兩次提取液，將提取液減壓濃縮；
b、將步驟a所得的濃縮液中加入濃度為95%的乙醇，使其含醇量達(dá)到60_75%靜置，出現(xiàn)白色沉淀物，靜置了 3-6小時(shí)，將白色沉淀物與上清液分離；
C、將步驟b所得的上清液中繼續(xù)加入濃度為95-98%的乙醇，使其乙醇含量達(dá)到 90-95%，出現(xiàn)棕色粘膠狀沉淀，靜置3-6小時(shí)后除去上清液，收集沉淀物，干燥后即可得到棕色或深棕色結(jié)晶狀或粘膠狀固體的山藥糖蛋白。
所述的藥物是以山藥糖蛋白為活性成分，加上藥學(xué)上可接受的載體或輔助性成分制備而成的藥物制劑。
所述的藥物制劑是膠囊劑、顆粒劑、片劑、散劑、口服液或糖漿劑。
本發(fā)明所述的山藥糖蛋白及其制劑，具有良好的治療腎小球腎炎和腎性高血壓的作用和很高的安全性，其來(lái)源于天然植物，藥源充足，提取制備方法簡(jiǎn)便易行，可將其制成膠囊、片劑、顆粒劑、口服液等多種劑型。
根據(jù)本發(fā)明所述的內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)和慣用手段，在不脫離本發(fā)明上述基本思想的前提下，還可以作出其它多種形式的修改、替換、與變更。以下通過(guò)實(shí)施例形式的具體實(shí)施方式
，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容再做進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明，但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下實(shí)例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例I :山藥糖蛋白的制備
取山藥原生藥IOOOg粉碎成細(xì)粉，加入2倍量水加熱，溫度50°C，提取兩次，每次2 小時(shí)，過(guò)濾后合并兩次提取液，將提取液濃縮至50%，將濃度為95%乙醇加入濃縮液中使其含醇量達(dá)到60%，出現(xiàn)白色沉淀物后靜置了 3-6小時(shí)，將沉淀物與上清液分離，在上清液中繼續(xù)加入濃度為95%乙醇使其含醇量達(dá)到90%，出現(xiàn)棕色沉淀，靜置3-6小時(shí)后除去上清液收集沉淀物，烘干干燥，即可得到棕色或深棕色粘膠狀固體粗山藥糖蛋白。
實(shí)施例2 :山藥糖蛋白的制備
取山藥原生藥IOOOg粉碎成粗粉，加入3倍量水加熱，溫度70°C，提取2次，每次時(shí)間3小時(shí)，過(guò)濾后合并兩次提取液，濃縮50%，將濃度為95%乙醇加入濃縮液中使其含醇量達(dá)到70%，出現(xiàn)白色沉淀，靜置3-6小時(shí)，將沉淀物與上清液分離，向上清液中繼續(xù)加入濃度為 95%乙醇，使其含醇達(dá)到90%，出現(xiàn)棕色粘膠狀沉淀，除去上清液，收集沉淀物，真空干燥，即可得到棕色或深棕色固體狀較純的山藥糖蛋白。
實(shí)施例3 :山藥糖蛋白的制備
取山藥原生藥IOOOg粉碎為大顆粒狀，加入5倍量水加熱，溫度100°C，提取3次， 每次2小時(shí)，過(guò)濾后合并兩次提取液，濃縮至50%，將濃度為95%乙醇加入濃縮液中，使其含醇量達(dá)到75%，出現(xiàn)白色沉淀后，抽取上清液，上清液中繼續(xù)加入濃度為98%乙醇，使其含醇量達(dá)到95%，出現(xiàn)黃棕色粘膠狀沉淀，除去上清液，收集沉淀物進(jìn)行真空冷凍干燥，即可得到棕色結(jié)晶狀較純的山藥糖蛋白。
實(shí)施例4 :山藥糖蛋白治療C-BSA誘導(dǎo)的慢性腎小球腎炎的實(shí)驗(yàn)研究
材料
實(shí)驗(yàn)藥物山藥糖蛋白粉末，雷公藤多苷片浙江得恩德制藥有限公司，批號(hào) 0411105 ;醋酸潑尼松片新疆華康藥業(yè)有限責(zé)任公司，批號(hào)050710弗氏不完全佐劑來(lái)自 Sigma公司，批號(hào)104K8926 ;小牛血清白蛋白(BSA) Sigma公司，無(wú)水乙二胺(EDA)、碳化二亞胺(EDC由Sigma)提供，均為分析純?cè)噭?br> 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物=Wistar大鼠是由新疆醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供；
儀器全自動(dòng)生化測(cè)定儀；
方法山藥糖蛋白對(duì)C-BSA腎炎大鼠模型的治療作用
陽(yáng)離子化小牛血清蛋白(C-BSA)的制備參考Border方法，用67ml EDA加500ml 雙蒸水，然后緩慢加入6mol/L鹽酸350ml，調(diào)ph至4. 75，保持溶液在溫度25 V ;將5gBSA 溶解于25ml雙蒸水，再將此溶液緩慢加入EDA溶液，不斷攪拌，使液溫恒定溫度25°C ;加入4I.8EDC ；2h后用pH為4. 75的醋酸緩沖液30ml終止反應(yīng)，即得等電點(diǎn)提高的C-BSA溶液； 用溫度4°C雙蒸水透析72h (每3至5h換水)C-BSA溶液，冷凍干燥，得等電點(diǎn)(PI)為8. 4 以上的C-BSA粉劑，保存于溫度_30°C備用；
計(jì)量設(shè)置山藥糖蛋白成人日用量，按動(dòng)物系數(shù)折算，指定大鼠3個(gè)給藥劑量，分別為低劑量O. lg/kg、中劑量O. 2g/kg、高劑量O. 4g/kg ；
C-BSA腎炎大鼠模型的復(fù)制及實(shí)驗(yàn)分組參考Border方法進(jìn)行模型復(fù)制，選取雄性SD大鼠70只，體重150-200g，隨機(jī)分為7組，除正常對(duì)照組10只，不做任何處理，正常飼養(yǎng)外，其余各組大鼠均分別取C-BSA1. Omg與弗氏不完全佐劑O. Iml混均，大鼠皮下多點(diǎn)注射預(yù)免疫；每只大鼠預(yù)免疫I周后，每只注射C-BSA，先腹腔注射I周，第I天至第7天的劑量依次為I. 0mg、l. 0mg、l. 0mg、l. 5mg、l. 5mg、2mg、2mg ;第2周起,每次在滅菌條件下尾靜脈注射2. 5mgC-BSA,同時(shí)灌胃給藥，中藥陽(yáng)性藥組給予雷公藤多苷混懸液，西藥陽(yáng)性藥組給予醋酸潑尼松溶液，山藥糖蛋白組給予高、中、低計(jì)量的山藥糖蛋白溶液，正常組與模型組給予等容量20ml/kg的生理鹽水；
觀察項(xiàng)目(I)生化指標(biāo)分別在給藥第14天和第32天收集大鼠24h尿液，進(jìn)行尿蛋白定量實(shí)驗(yàn)；藥后42天，從眼眶靜脈取血，檢測(cè)血清總蛋白、白蛋白、白蛋白/球蛋白(A/ G)、膽固醇及血清肌酐和尿素氮含量；
統(tǒng)計(jì)方法所有結(jié)果用均數(shù)土SD來(lái)表示，組間差異用SPSS 11. 55統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行 one-way ANOVA分析，若方差不齊，則進(jìn)行變量變換后再進(jìn)行ANOVA或秩和檢驗(yàn)；
結(jié)果
山藥糖蛋白對(duì)C-BSA腎炎大鼠模型的治療作用
給藥35天后，山藥糖蛋白大、中、小劑量組均降低大鼠尿蛋白，與模型組比較有顯著性差異(p〈0. 01)，并且呈劑量依賴性，表明山藥糖蛋白口服35天對(duì)24h尿蛋白排出有一定的減少作用，結(jié)果見表I :
表I山藥糖蛋白對(duì)C-BSA腎炎模型尿蛋白的影響(X土sd)
權(quán)利要求
1.一種山藥糖蛋白在制備治療腎炎及腎性高血壓中藥物的用途，其中所述的山藥糖蛋白來(lái)自薯蕷科薯蕷屬植物山藥或薯蕷科其它屬植物的干燥根莖，所述的山藥糖蛋白的制備按下列步驟進(jìn)行 a、將山藥干燥根莖粉碎成細(xì)粉后，加入2-5倍量的水加熱，溫度50-100°C，提取兩次，每次2-3小時(shí)，過(guò)濾后合并兩次提取液，將提取液減壓濃縮； b、將步驟a所得的濃縮液中加入濃度為95%的乙醇，使其含醇量達(dá)到60-75%靜置，出現(xiàn)白色沉淀物，靜置了 3-6小時(shí)，將白色沉淀物與上清液分離； C、將步驟b所得的上清液中繼續(xù)加入濃度為95-98%的乙醇，使其乙醇含量達(dá)到90-95%，出現(xiàn)棕色粘膠狀沉淀，靜置3-6小時(shí)后除去上清液，收集沉淀物，干燥后即可得到棕色或深棕色結(jié)晶狀或粘膠狀固體的山藥糖蛋白。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用途，其特征在于所述的藥物是以山藥糖蛋白為活性成分，加上藥學(xué)上可接受的載體或輔助性成分制備而成的藥物制劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用途，其特征在于所述的藥物制劑是膠囊劑、顆粒劑、片劑、散劑、口服液或糖漿劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種山藥糖蛋白在制備治療腎炎及腎性高血壓的藥物中的用途，本發(fā)明通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)進(jìn)行篩選和驗(yàn)證，證明了山藥糖蛋白具有治療腎小球腎炎和腎性高血壓的作用和很高的安全性，所述山藥糖蛋白來(lái)源于天然植物，藥源充足，提取制備方法簡(jiǎn)便易行，可將其制成膠囊、片劑、顆粒劑、口服液等多種劑型。
文檔編號(hào)A61P13/12GK102920999SQ20121051386
公開日2013年2月13日 申請(qǐng)日期2012年12月5日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月5日
發(fā)明者多力坤·馬木特 申請(qǐng)人:多力坤·馬木特