專利名稱：三環(huán)酰胺類用于抑制g－蛋白功能及治療增生疾病的制作方法
背景Ras致癌基因的生物學(xué)意義、及Ras以及稱之為法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的酶在正常細胞轉(zhuǎn)化成癌細胞過程中的作用，在PCT國際公開號Nos.WO95/00497和WO95/10516上作了描述。這些專利中的每個也描述了一類獨特的化合物，它們抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的活性，從而抑制Ras蛋白的法呢基化。
PCT國際公開號No.WO95/10516涉及通式(1.0)的三環(huán)酰胺和脲類化合物，及它們在抑制Ras功能和細胞異常生長方法中的應(yīng)用。也描述了通式(1.0)的一些亞類化合物，
它們包括式(5.0c)、(5.1c)和(5.2a)以及化合物(5.0c)和(5.1c)的11-R-異構(gòu)體和11-S-異構(gòu)體。本發(fā)明也描述了該通式各亞類中的一些具體化合物，以及這些化合物的生物活性。
發(fā)明摘要本發(fā)明給出了選自下組化合物中的新穎三環(huán)酰胺化合物，該組化合物包括
(-)-對映體； (+)-對映體；
(-)-對映體； (-)-對映體；
(+)-對映體； (-)-對映體；
(+)-對映體； (+)-對映體；
(-)-對映體； (+)-對映體；
(-)-對映體； (+)-對映體；
(+)-對映體； (-)-對映體；
(+)-對映體；(-)-對映體；
(+)-對映體；
或其可供藥用的鹽。
于25℃在甲醇或乙醇中測定化合物的旋光度((+)-或(-)-)。
本發(fā)明包括以上化合物的無定形態(tài)或結(jié)晶態(tài)。
因此，本發(fā)明的化合物包括選自下組化合物化合物1.0，2.0，3.0，5.0，6.0，7.0，7.0A，8.0，8.0A，9.0，10.0，11.0，12.0，13.0，14.0，15.0，16.0和17.0，或其可藥用的鹽，其中所說的化合物如上所定義。
本發(fā)明的化合物也包括選自下組的化合物化合物18.0，19.0，20.0，21.0，22.0，23.0，24.0，25.0，26.0，27.0，28.0，29.0，30.0，31.0，32.0，33.0，34.0，35.0，36.0，37.0，38.0，39.0，40.0和41.0，或其可藥用的鹽，其中所說的化合物如上所定義。
本發(fā)明的化合物也包括選自下組的化合物“(+)-對映體化合物70.0，71.0，72.0，73.0，74.0，75.0，76.0，77.0，78.0，79.0和80.0，或其可藥用的鹽，其中所說的化合物如上所定義。
本發(fā)明的化合物還包括選自下組的化合物化合物42.0，43.0，44.0，45.0，46.0，47.0，48.0，49.0，50.0，51.0，52.0，53.0，54.0，55.0，56.0，57.0，58.0，59.0，60.0，61.0，62.0，63.0，64.0，65.0，66.0，67.0，68.0和69.0，或其可藥用的鹽，其中所說的化合物如上所定義。
優(yōu)選化合物包括有(-)-旋光度的3，7，8-三鹵代化合物。例如，化合物22.0，23.0，25.0和27.0。
優(yōu)選化合物也包括有(+)-旋光度的3，8，10-三鹵代化合物。例如，化合物29.0，31.0，32.0，34.0，36.0，37.0，39.0和41.0。
優(yōu)選化合物也包括有(+)-旋光度的3，10-二鹵代化合物。例如，化合物20.0。
優(yōu)選化合物也包括在C-11-位上有S-立體化學(xué)的3，7-二溴-8-氯化合物。例如，化合物50.0，53.0，55.0和57.0。
優(yōu)選的化合物也包括在C-11-位上有R-立體化學(xué)的3，10-二溴-8-氯化合物。例如，化合物62.0，64.0，66.0和68.0。
優(yōu)選的化合物也包括化合物16.0，17.0，39.0，40.0，41.0，68.0和69.0。
更優(yōu)選的化合物是化合物16.0，39.0，40.0，68.0和69.0。最優(yōu)選的化合物是化合物16.0，39.0和68.0。甚至更優(yōu)選的化合物是化合物39.0和68.0。
本領(lǐng)域的技術(shù)人員明白三環(huán)體系如下編排位號
本領(lǐng)域的技術(shù)人員也知道在C-11-位的S-和R立體化學(xué)是
本發(fā)明的三環(huán)化合物對法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的抑制作用以前未曾有報道。因此，本發(fā)明提供了用本發(fā)明的三環(huán)化合物抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的方法它們，(i)在體外，有效地抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶，但不抑制牻牛兒基牻牛兒基蛋白轉(zhuǎn)移酶I；(ii)阻斷由作為法呢基受體的轉(zhuǎn)化Ras形式誘導(dǎo)的表型變化，但該表型變化不是由基因工程的牻牛兒基牻牛兒基受體的轉(zhuǎn)化Ras形式誘導(dǎo)；(iii)阻斷Ras的胞內(nèi)過程，該Ras是一種法呢基受體，但不是Ras基因工程改造的牻牛兒基牻牛兒基受體；及(iv)阻斷由轉(zhuǎn)化Ras誘導(dǎo)的在培養(yǎng)基中異常的細胞生長。本發(fā)明的化合物已表明在動物模型中具有抗腫瘤活性。
本發(fā)明提供了一種抑制細胞異常生長的方法，包括轉(zhuǎn)化了的細胞，該方法是通過給以有效量的本發(fā)明的化合物。細胞的異常生長指的是不依賴于正常調(diào)節(jié)機制的細胞生長(例如，喪失接觸抑制)。這包括如下的異常生長(1)腫瘤細胞(腫瘤)表達的一種激活的Ras致癌基因；(2)腫瘤細胞，其中Ras蛋白作為在另一種基因中的致癌基因突變的結(jié)果而被激活；和(3)其他增生疾病的良性和惡性的細胞，其中發(fā)生了異常的Ras激活。
本發(fā)明也提供了一種抑制腫瘤生長的方法，該方法是通過給需要這種治療的哺乳動物(例如，人)以有效量的這里所描述的三環(huán)化合物。特別是，本發(fā)明通過給以有效量的上述化合物，提供了一種抑制表達一種激活了的Ras致癌基因的腫瘤生長的方法。這些可被抑制的腫瘤包括，但不局限于，肺癌(肺腺癌)，胰腺腫瘤(例如，胰腺癌，如外分泌的胰腺癌)，結(jié)腸癌(例如，直腸癌，如結(jié)腸腺癌和結(jié)腸腺瘤)，髓樣白血病〔例如，急性髓樣白血病(AML)〕，甲狀腺濾泡癌，脊髓發(fā)育不良綜合征(MDS)，膀胱癌，表皮癌，乳腺癌和前列腺癌。
據(jù)信，本發(fā)明也提供了一種抑制良性和惡性增生疾病的方法，其中Ras蛋白作為其他基因中的致癌基因突變的結(jié)果被異常地激活了，即，Ras基因本身不會被突變激活成一種致癌基因的形式，而這是通過給需要該種治療的哺乳動物(例如人)以有效量的這里所述的三環(huán)化合物來實現(xiàn)所說的抑制作用。例如，良性增生疾病多發(fā)性神經(jīng)纖維癌，或腫瘤，其中Ras由于酪氨酸激酶致癌基因(例如，neu，src，abl，lck和fyn)突變或過度表達而被激活。
本發(fā)明的化合物抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶和致癌基因蛋白Ras的法呢基化作用。本發(fā)明還進一步提供了一種抑制哺乳動物，特別是人的Ras法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的方法，該方法通過給以上述有效量的三環(huán)化合物而實現(xiàn)抑制作用。將本發(fā)明的化合物給藥于病人，來抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶，可用于治療上述腫瘤。
用于本發(fā)明方法的三環(huán)化合物可抑制細胞的異常生長。由于不希望被理論所束縛，據(jù)信這些化合物可以通過抑制G-蛋白功能而發(fā)揮作用，例如抑制ras p21，通過阻斷G-蛋白的異戊二烯化，這樣使其可用于治療增生疾病，例如腫瘤生長和癌。由于不希望被理論所束縛，據(jù)信這些化合物抑制ras法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶，因此對ras轉(zhuǎn)化細胞顯示抗增生活性。發(fā)明詳述這里所使用的下列術(shù)語定義如下，除非另有注明。
M+代表質(zhì)譜圖中分子的分子離子峰；MH+代表質(zhì)譜圖中分子的分子離子加上氫；吡啶-N-氧化物在這里代表基因
下列溶劑和試劑在文中用縮寫表示四氫呋喃(THF)；乙醇(EtOH)；甲醇(MeOH)；乙酸(HOAc或AcOH)；乙酸乙酯(EtOAc)；N，N-二甲基甲酰胺(DMF)；三氟乙酸(TFA)；三氟乙酸酐(TFAA)；1-羥基苯并三唑(HOBT)；間氯過氧苯甲酸(MCPBA)；三乙胺(Et3N)；乙醚(Et2O)；氯甲酸乙酯(ClCO2Et)；1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(DEC)；二并丁基氫化鋁(DIBAL)；異丙醇(i-PrOH)；二甲亞砜(DMSO)。
本發(fā)明的一些化合物可以以不同的異構(gòu)體形式存在(例如，對映體或非對映體)，包括阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體(即其中七員環(huán)是在固定構(gòu)象中存在的化合物，由于10-溴取代基的存在，致使11-碳原子位于稠合的苯環(huán)的平面上或平面下)。本發(fā)明期望所有的異構(gòu)體，或是純的形式或是混合物，包括外消旋混合物，烯醇式也包括在內(nèi)。
一些堿性三環(huán)化合物也形成可藥用的鹽，例如，酸加成鹽。譬如，吡啶并-氮原子可以和強酸形成鹽。適合形成鹽的酸的例子有鹽酸，硫酸，磷酸，乙酸，檸檬酸，草酸，丙二酸，水楊酸，蘋果酸，富馬酸，肉桂酸，抗壞血酸，馬來酸，甲磺酸及其他本領(lǐng)域常見的無機酸和羧酸。鹽的制備方法是，用常規(guī)的方法使游離堿和足夠量的所要的酸接觸以生成鹽。游離的堿形式可通過合適的稀堿水溶液處理鹽而再生，這些堿例如，為稀NaOH水溶液，碳酸鉀，氨和碳酸氫鈉水溶液。游離堿形式不同于它們各自的鹽形式在于一些物理性質(zhì)，例如在極性溶劑中的溶解度，但是從發(fā)明的目的來說，酸和堿的鹽和各自的游離堿形式是等價的。
所有的鹽在發(fā)明范圍內(nèi)為可藥用的鹽，而且，從發(fā)明的目的來說，全都被認為與相應(yīng)的化合物的游離堿形式是等價的。
本發(fā)明的化合物可通過下述方法制備。
實施例10的化合物是以晶體狀態(tài)得到的。本領(lǐng)域的技術(shù)人員知道，以無定形狀態(tài)得到的化合物可以得到其晶體形式，方法是按照本領(lǐng)域中熟知的方法，以溶劑或混合溶劑中，如丙酮，乙醚，乙酸乙酯，乙醇，2-丙醇，叔丁醚，水，等等結(jié)晶該無定形的原料。
本領(lǐng)域的技術(shù)人員也知道化合物7.0A外消旋混合物可以按照下述方法制備。例如，制備實例6的中間體可以用來制備化合物7.0A。
制備實例1
步驟A
于-20℃混合10g(60.5mmol)4-吡啶乙酸乙酯和120ml無水二氯甲烷，加入10.45g(60.5mmol)MCPBA，于-20℃攪拌1小時，然后于25℃攪拌67小時。再加另外的3.48g(20.2mmol)MCPBA，25℃攪拌24小時。用CH2Cl2稀釋，飽和NaHCO3水溶液洗滌，然后水洗。MgSO4干燥，真空濃縮得殘余物，色譜分離〔硅膠，2％-5.5％(10％NH4OH的MeOH溶液)/CH2Cl2〕得8.12g產(chǎn)物。質(zhì)譜MH+＝182.15。步驟B
混合3.5g(19.3mmol)步驟A的產(chǎn)物。17.5ml EtOH和96.6ml10％的NaOH水溶液，并于67℃加熱2小時。加入2N HCl水溶液調(diào)節(jié)pH＝2.37，真空濃縮得殘余物。加200ml無水EtOH，硅藻土過濾，用無水EtOH(2×50ml)洗滌濾餅。真空濃縮合并的濾液，得2.43g標題化合物。
制備實例2
通過公開于PCT國際公開號WO 95/10516中的方法制備標題化合物。
制備實例3
步驟A
混合14.95g(39mmol)的8-氯-11-(1-乙氧基羰基-4-哌啶基)-11H-苯并[5，6]環(huán)庚并[1，2-b]吡啶和150ml CH2Cl2，然后加入13.07g(42.9mmol)的(n-Bu)4NNO3，并冷卻混合物至0℃。于1.5小時內(nèi)慢慢加入(逐滴)6.09ml(42.9mmol)的TFAA在20ml二氯甲烷的溶液。于0℃保持混合物過夜，然后依次用飽和NaHCO3(水溶液)，水和飽和食鹽水洗滌。Na2SO4干燥有機相，真空濃縮得殘余物，色譜分離(硅膠，乙酸乙酯/己烷梯度洗脫)分別得到4.32g 3A(i)和1.903A(ii)兩種產(chǎn)物。
化合物3A(i)的質(zhì)譜MH+＝428.2。
化合物3A(ii)的質(zhì)譜MH+＝428.3。步驟B
混合22.0g(51.4mmol)步驟A的產(chǎn)物3A(i)，150ml 85％EtOH(水溶液)，25.85g(0.463mol)Fe粉和2.42g(21.8mmol)CaCl2并加熱回流過夜。加入12.4g(0.222mol)的Fe粉和1.2g(10.8mmol)Call2，加熱回流2小時。再加入12.4g(0.222mol)Fe粉和1.2g(10.8mmol)CaCl2，再加熱回流2小時。通過硅藻土過濾熱溶液，用50ml熱EtOH洗滌硅藻土，真空濃縮濾液得殘余物，加入100ml無水EtOH，濃縮得殘余物，色譜分離殘余物(硅膠，MeOH/CH2Cl2梯度洗脫)得16.47g產(chǎn)品化合物。MH+＝398。步驟C
混合16.47g(41.4mmol)步驟B的產(chǎn)物，和150ml 48％NBr(水溶液)并冷卻至-3℃。慢慢加入(逐滴)18ml溴，然后慢慢加入(逐滴)8.55g(0.124mol)NaNO2的85ml水溶液。于-3℃～0℃攪拌45分鐘，然后加入50％NaOH(水溶液)調(diào)節(jié)pH＝10。用EtOAc萃取，用飽和食鹽水洗滌萃取液并用Na2SO4干燥萃取液。濃縮得殘余物并色譜分離(硅膠，EtOAc/己烷梯度洗脫)，分別得到10.6g 3C(i)和3.28g 3C(ii)兩個產(chǎn)品化合物。
化合物3C(i)的質(zhì)譜MH+＝461.2。
化合物3C(ii)的質(zhì)譜MH+＝539。步驟D
將步驟C的產(chǎn)物3C(i)溶于濃HCl并于約100℃加熱16小時水解，冷卻混合物，用1M NaOH(水溶液)中和。用CH2Cl2萃取，MgSO4干燥萃取液，過濾并真空濃縮，得標題化合物。
質(zhì)譜MH+＝466.9。
制備實例4
步驟A
于-5℃混合25.86g(55.9mmol)4-(8-氯-3-溴-5，6-二氫-11H-苯并[5，6]環(huán)庚并[1，2-b]吡啶-11-亞基)-1-哌啶-1-羧酸乙酯和250ml濃H2SO4，然后加入4.8g(56.4mmol)NaNO3并攪拌2小時。將反應(yīng)混合物傾入至600g冰中，用濃NH4OH(水溶液)堿化。過濾混合物，用300ml水洗，然后用500ml CH2Cl2萃取。用200ml水洗滌萃取液，MgSO4干燥，然后過濾并真空濃縮得到殘余物。色譜分離殘余物(硅膠，10％EtOAc/CH2Cl2)得24.4g(86％產(chǎn)率)產(chǎn)物。m.p.＝165～167℃，質(zhì)譜MH+＝506(CI)。元素分析計算值，C，52.13；H，4.17；N，8.29。
實測值，C，52.18；H，4.51；N，8.16。步驟B
于20℃混合20g(40.5mmol)步驟A的產(chǎn)物和200ml濃H2SO4，然后冷卻至0℃。加入7.12g(24.89mmol)1，3-二溴-5，5-二甲基乙內(nèi)酰脲至混合物中并于20℃攪拌3小時。冷卻至0℃，加入另外1.0g(3.5mmol)二溴乙內(nèi)酰脲并于20℃攪拌2小時。將混合物傾入至400g冰中，用濃NH4OH(水溶液)于0℃時堿化，過濾收集析出的固體。用300ml水洗滌固體，放入200ml丙酮中形成淤漿，過濾，得19.79g(85.6％產(chǎn)率)產(chǎn)物。m.p.＝236～237℃，質(zhì)譜MH+＝584(CI)。元素分析計算值，C，45.11；H，3.44；N，7.17。
實測值，C，44.95；H，3.57；N，7.16。步驟C
于50℃混合25g(447mmol)Fe屑，l0g(90mmol)CaCl2和20g(34.19mmol)步驟B的產(chǎn)物在700ml 90∶10 EtOH/H2O中的懸浮液。加熱混合物回流過夜，通過硅藻土過濾并用2×200ml熱EtOH洗滌濾餅。合并濾液和洗滌液并真空濃縮得殘余物。用600ml CH2Cl2萃取殘余物，用300ml水洗滌，MgSO4干燥。過濾，真空濃縮得殘余物，色譜分離(硅膠，30％EtOAc/CH2Cl2)得11.4g(60％產(chǎn)率)產(chǎn)物。m.p.＝211～212℃，質(zhì)譜MH+＝554(CI)。元素分析計算值，C，47.55；H，3.99；N，7.56。
實測值，C，47.45；H，4.31；N，7.49。步驟D
于-10℃向8g(116mmol)NaNO2的120ml濃HCl(水溶液)溶液中，慢慢加入(分批)20g(35.9mmol)步驟C的產(chǎn)物。將所得混合物于0℃攪拌2小時，然后在0℃于1小時內(nèi)慢慢加入(逐滴)150ml(1.44mol)50％H3PO2。于0℃攪拌3小時，然后傾入至600g冰中并用濃NH4OH(水溶液)堿化。用2×300ml CH2Cl2萃取。MgSO4干燥，然后過濾，真空濃縮得殘余物。色譜分離殘余物(硅膠，25％EtOAc/己烷)得13.67g(70％產(chǎn)率)產(chǎn)物。m.p.＝163～165℃，質(zhì)譜MH+＝539(CI)。元素分析計算值，C，48.97；H，4.05；N，5.22。
實測值，C，48.86；H，3.91；N，5.18。步驟E
混合6.8g(12.59mmol)步驟D的產(chǎn)物和100ml濃HCl(水溶液)并于85℃攪拌過夜。將混合液冷卻，傾入至300g冰中并用濃NH4OH(水溶液)堿化。用2×300ml CH2Cl2萃取，MgSO4干燥。過濾，真空濃縮得殘余物，色譜分離(硅膠，10％ MeOH/EtOAc+2％NH4OH(水溶液))得5.4g(92％產(chǎn)率)標題化合物。m.p.＝172～174℃，質(zhì)譜MH+＝467。元素分析計算值，C，48.69；H，3.65；N，5.97。
實測值，C，48.83；H，3.80；N，5.97。
制備實例5
步驟A
通過基本上如制備實例3、步驟D所描述的相同方法，水解2.42g的4-(8-氯-3-溴-5，6-二氫-11H-苯并[5，6]環(huán)庚并[1，2，-b]吡啶-11-亞基)-1-哌啶-1-羧酸乙酯，得1.39g(69％產(chǎn)率)產(chǎn)物。MH+＝389。步驟B
混合1g(2.48mmol)步驟A的產(chǎn)物和25ml無水甲苯，加入2.5ml1M DIBAL的甲苯溶液并加熱回流混合物。0.5小時后，加入另一份2.5ml 1M DIBAL的甲苯溶液并加熱回流1小時。(TLC檢測反應(yīng)，用50％MeOH/CH2Cl2+NH4OH(水溶液))。冷卻混合物至室溫，加入50ml 1N HCl(水溶液)并攪拌5分鐘，加入100ml 1N NaOH(水溶液)，然后用EtOAc(3×150ml)萃取。用MgSO4干燥萃取液，過濾，真空濃縮得1.1g標題化合物。MH+＝391。
制備實例6 步驟A
混合16.6g(0.03mol)制備實例4、步驟D的產(chǎn)物和CH3CN/H2O的3∶1溶液(212.65ml CH3CN+70.8ml H2O)并于室溫攪拌該淤漿狀混合物過夜。加入32.833g(0.153mol)NaIO4，然后加入0.31g(2.30mmol)RuO2并于室溫攪拌(加入RuO2時伴隨著放熱反應(yīng)，溫度從20℃上升到30℃)。攪拌混合物1.3hrs。(約30分鐘后溫度下降至25℃)，然后過濾除去固體并用CH2Cl2洗滌固體。真空濃縮濾液得殘余物，用CH2Cl2溶解殘余物。過濾除去不溶物并用CH2Cl2洗滌固體。水洗濾液，濃縮至體積約為200ml，用漂白劑洗滌，然后用水洗。用6NHCl(水溶液)萃取。將水萃取液冷至0℃，慢慢加50％NaOH(水溶液)以調(diào)節(jié)pH＝4，同時保持溫度＜30℃。用CH2Cl2萃取兩次，MgSO4干燥，真空濃縮得殘余物。將殘余物于20ml乙醇中形成淤漿并冷至0℃。過濾收集生成的固體，真空干燥得7.95g產(chǎn)物。
1H NMR(CDCl3，200MHz)8.7(s，1H)；7.85(m，6H)；7.5(d，2H)；3.45(m，2H)；3.15(m，2H)。步驟B
混合21.58g(53.75mmol)步驟A的產(chǎn)物和500ml EtOH和甲苯的1∶1無水混合物，加入1.43g(37.8mmol)NaBH4并加熱回流混合物10分鐘。冷卻混合物至0℃，加入100ml水，然后用1M HCl(水溶液)調(diào)節(jié)pH≈4～5并同時保持溫度＜10℃。加250ml EtOAc，分離水層和有機層。有機層用飽和食鹽水(3×50ml)洗滌，然后用Na2SO4干燥。真空濃縮得殘余物(24.01g)，色譜分離殘余物(硅膠，30％己烷/CH2Cl2)，得產(chǎn)物。不純的分離組份再次分離純化，共得18.57g產(chǎn)物。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.5(s，1H)；7.9(s，1H)；7.5(d of d，2H)；6.2(s，1H)；6.1(s，1H)；3.5(m，1H)；3.4(m，1H)；3.2(m，2H)。步驟C
混合18.57g(46.02mmol)步驟B的產(chǎn)物和500ml CHCl3，然后加入6.70ml(91.2mmol)SOCl2并于室溫攪拌4hrs。于5分鐘內(nèi)加入35.6g(0.413mol)哌嗪的800ml THF溶液并于室溫攪拌1小時。加熱混合物回流過夜。然后冷至室溫并用1L CH2Cl2稀釋混合物。用水(5×200ml)洗滌，用CHCl3(3×100ml)萃取水洗滌液。合并所有的有機溶液，用飽和食鹽水(3×200ml)洗滌，MgSO4干燥。真空濃縮得殘余物，色譜分離(硅膠，5％，7.5％，10％MeOH/CH2Cl2/+NH4OH梯度洗脫)得18.49g標題化合物的外消旋混合物。步驟D-對映體的分離
步驟C的外消旋標題產(chǎn)物的分離，是用制備的手性色譜(ChiralpackAD，5cm×50cm柱，流速100ml/分.，20％i-PrOH/己烷+0.2％二乙胺)，得9.14g(+)-對映體和9.30(-)-對映體。
(+)-對映體的物理化學(xué)數(shù)據(jù)m.p.74.5°～77.5℃；質(zhì)譜MH+＝471.9；[α]D25＝+97.4°(8.48mg/2ml MeOH)。
(-)-對映體的物理化學(xué)數(shù)據(jù)m.p.82.9°～84.5℃；質(zhì)譜MH+＝471.8；[α]D25＝-97.4°(8.32mg/2ml MeOH)。
制備實例7
步驟A
于-5℃混合15g(38.5mmol)4-(8-氯-3-溴-5，6-二氫-11H-苯并[5，6]環(huán)庚并[1，2-b]吡啶-11-亞基)-1-哌啶-1-羧酸乙酯和150ml濃H2SO4，然后加入3.89g(38.5mmol)KNO3并攪拌4小時。將混合物傾入至3L冰中并用50％NaOH(水溶液)堿化。用CH2Cl2萃取，MgSO4干燥，然后過濾并真空濃縮得殘余物。自丙酮重結(jié)晶殘余物得6.69g產(chǎn)物。
1H NMR(CDCl3，200MHz)8.5(s，1H)；7.75(s，1H)；7.6(s，1H)；7.35(s，1H)；4.15(q，2H)；3.8(m，2H)；3.5-3.1(m，4H)；3.0-2.8(m，2H)；2.6-2.2(m，4H)；1.25(t，3H)。MH+＝506。步驟B
混合6.69g(13.1mmol)步驟A的產(chǎn)物和100ml 85％EtOH/H2O，然后加入0.66g(5.9mmol)CaCl2和6.56g(117.9mmol)Fe并加熱混合物回流過夜。通過硅藻土過濾熱反應(yīng)混合物，用熱EtOH洗滌濾餅。真空濃縮濾液得7.72g產(chǎn)物。質(zhì)譜MH+＝476.0。步驟C
混合7.70g步驟B的產(chǎn)物和35ml HOAc，然后加入45ml Br2的HOAc溶液并于室溫攪拌過夜。加入300ml 1N NaOH(水溶液)，然后再加入75ml 50％NaOH(水溶液)，用EtOAc萃取。MgOS4干燥并真空濃縮得殘余物。色譜分離殘余物(硅膠，20％～30％EtOAc/己烷)得3.47g產(chǎn)物(同時得到另外的1.28g部分純化的產(chǎn)物)。質(zhì)譜MH+＝554。1H NMR(CDCl3，300MHz)8.5(s，1H)；7.5(s，1H)；7.15(s，1H)；4.5(s，2H)；4.15(m，3H)；3.8(br s，2H)；3.4-3.1(m，4H)；9-2.75(m，1H)；2.7-2.5(m，2H)；2.4-2.2(m，2H)；1.25(m，3H).步驟D
混合0.557g(5.4mmol)亞硝酸叔丁酯和3ml DMF，并于60°～70℃加熱混合物。慢慢加入(逐滴)2.00g(3.6mmol)步驟C的產(chǎn)物和4ml DMF的混合物，然后冷至室溫。于40℃時加入0.64ml亞硝酸叔丁酯并重新加熱混合物至60°～70℃0.5小時。冷至室溫并傾入至150ml水中。用CH2Cl2萃取，MgSO4干燥，真空濃縮得殘余物。色譜分離殘余物(硅膠，10％～20％EtOAc/己烷)得0.74g產(chǎn)物。質(zhì)譜MH+＝539.0。1H NMR(CDCl3，200MHz)8.52(s，1H)；7.5(d，2H)；7.2(s，1H)；4.15(q，2H)；3.9-3.7(m，2H)；3.5-3.1(m，4H)；3.0-2.5(m，2H)；2.4-2.2(m，2H)；2.1-1.9(m，2H)；1.26(t，3H).步驟E
混合0.70g(1.4mmol)步驟D的產(chǎn)物和8ml濃HCl(水溶液)并加熱混合物回流過夜。加入30ml 1N NaOH(水溶液)，然后再加入5ml 50％NaOH(水溶液)并用CH2Cl2萃取。MgSO4干燥，真空濃縮得0.59g標題化合物。質(zhì)譜MH+＝467。m.p.＝123.9°～124.2℃。
制備實例8
(+)-和(-)-對映體及外消旋體步驟A
制備從制備實例7的8.1g標題化合物在甲苯中的溶液，并加入17.3ml1M的DIBAL的甲苯溶液。加熱混合物至回流，并于40分鐘內(nèi)慢慢加入(逐滴)21ml 1M DIBAL/甲苯溶液。冷卻反應(yīng)混合液至大約0℃并加入700ml HCl(水溶液)。分離并棄去有機相。用CH2Cl2洗滌水相，棄去萃取液，然后通過加入50％NaOH(水溶液)堿化水相。用CH2Cl2萃取，MgSO4干燥萃取液，真空濃縮得7.30g標題化合物，為對映體的外消旋混合物。MH+=469。步驟B-對映體的分離
將步驟A的外消旋標題混合物用制備手性色譜分離(ChiralpackAD，5cm×50cm柱，用20％i-PrOH/己烷+0.2％二乙胺)，得標題化合物的(+)-對映體和(-)-對映體。
(+)-對映體的物理化學(xué)數(shù)據(jù)m.p.＝148.8℃；質(zhì)譜MH+＝469；[α]D25＝+65.6°(12.93mg/2ml MeOH)。
(-)-對映體的物理化學(xué)數(shù)據(jù)m.p.＝112℃；質(zhì)譜MH+＝469；[α]D25＝-65.2°(3.65mg/2ml MeOH)。
制備實例9
(+)-和(-)-對映體及外消旋體步驟A
混合40.0g(0.124mol)的起始原料酮和200ml H2SO4并冷卻至0℃。于1.5小時內(nèi)慢慢加入13.78g(0.136mol)的KNO3，然后溫熱至室溫并攪拌過夜。通過基本上如制備實例4、步驟A所描述的相同方法對反應(yīng)進行后處理。色譜分離(硅膠，20％、30％、40％、50％EtOAc/己烷，然后100％EtOAc)得28g 9-硝基產(chǎn)物，及少量的7-硝基產(chǎn)物和19g 7-硝基和9-硝基化合物的混合物。MH+(9-硝基)＝367。步驟B
通過基本上如制備實例4、步驟C所描述的相同方法，將28g(76.2mmol)步驟A的9-硝基產(chǎn)物，400ml 85％EtOH/H2O，3.8g(34.3mmol)的CaCl2和38.28g(0.685mol)的Fe反應(yīng)，得24g產(chǎn)物。MH+＝337。步驟C
混合13g(38.5mmol)步驟B的產(chǎn)物，140ml HOAc并于20分鐘內(nèi)慢慢加入2.95ml(57.8mmol)Br2的10ml HOAc溶液。室溫攪拌反應(yīng)混合物，然后真空濃縮得殘余物。加入CH2Cl2和水，然后用50％NaOH(水溶液)調(diào)節(jié)pH＝8～9。用水洗滌有機相，然后用飽和食鹽水并用Na2SO4干燥。真空濃縮得11.3g產(chǎn)物。
1H NMR(200MHZ，CDCl3)8.73(d，1H)；7.74(d，1H)；7.14(s，1H)；4.63(s，2H)；3.23-3.15(m，2H)；and 3.07-2.98(m，2H).步驟D
冷卻100ml濃HCl(水溶液)至0℃，然后加入5.61g(81.4mmol)的NaNO2并攪拌10分鐘。慢慢加入(分批)11.3g(27.1mmol)步驟C的產(chǎn)物并于0～3℃攪拌混合物2.25小時。慢慢加入(逐滴)180ml50％H3PO2(水溶液)并讓混合物于0℃靜置過夜。于30分鐘內(nèi)慢慢加入(逐滴)150ml 50％NaOH，以調(diào)節(jié)pH＝9，然后用CH2Cl2萃取。用水、然后用飽和食鹽水洗滌萃取液，并用Na2SO4干燥。真空濃縮得殘余物并色譜分離(硅膠，2％EtOAc/CH2Cl2)得8.6g產(chǎn)物。MH+＝399.9。
1H NMR(200MHZ，CDCl3)8.75(d，1H)；7.77(d，1H)；7.56(d，1H)；7.21(d，1H)；and 3.3-3.0(m，4H).步驟E
混合8.6g(21.4mmol)步驟D的產(chǎn)物和300ml MeOH并冷卻至0°～2℃。加入1.21g(32.1mmol)的NaBH4并于～0℃攪拌混合物1小時。加入另一份0.121g(3.21mmol)的NaBH4，于0℃攪拌2小時，然后于0℃靜置過夜。真空濃縮得殘余物，然后在CH2Cl2和水之間分配殘余物。分離有機相并真空濃縮(50℃)得8.2g產(chǎn)物。
1H NMR(200MHZ，CDCl3)8.44(d，1H)；7.63(d，1H)；7.47(d，1H)；7.17(d，1H)；6.56(d，1H)；4.17-4.0(m，1H)；7.39(d，1H)；3.46-3.3(m，1H)；3.05-2.74(m，2H).步驟F
混合8.2g(20.3mmol)步驟E的產(chǎn)物和160ml CH2Cl2，冷卻至0℃，然后于30分鐘內(nèi)慢慢加入(逐滴)14.8ml(203mmol)的SOCl2。使混合物溫熱至室溫并攪拌4.5小時，然后真空濃縮得殘余物，加入CH2Cl2并用1N NaOH(水溶液)然后用飽和食鹽水洗滌，并用Na2SO4干燥。真空濃縮得殘余物，然后加無水THF和8.7g(101mmol)的哌嗪并于室溫攪拌過夜。真空濃縮得殘余物，加CH2Cl2，并用0.25N NaOH(水溶液)，水，然后用飽和食鹽水洗滌。MgSO4干燥并真空濃縮得9.46g粗產(chǎn)物。色譜分離(硅膠，5％MeOH/CH2Cl2+NH3)得3.59g標題化合物，為外消旋物。
1H NMR(CDCl3，200MHz)8.43(d，1H)；7.55(d，1H)；7.45(d，1H)；7.11(d，1H)；5.31(s，1H)；4.86-4.65(m，1H)；3.57-3.40(m，1H)；2.98-2 55(m，6H)；2.45-2.20(m，5H)。MH+＝470。步驟G-對映體的分離
用30％i-PrOH/己烷+0.2％二乙胺，如制備實例6、步驟D所述色譜分離步驟F的外消旋標題化合物(5.7g)，得標題化合物的2.88g R-(+)-對映體和2.77g S-(-)-對映體。
R-(+)-對映體的物理化學(xué)數(shù)據(jù)質(zhì)譜MH+＝470；[α]D25＝+12.1°(10.9mg/2ml MeOH)。
S-(-)-對映體的物理化學(xué)數(shù)據(jù)質(zhì)譜MH+＝470；[α]D25＝-13.2°(11.51mg/2ml MeOH)。
制備實例10 步驟A
于20℃混合13g(33.3mmol)制備實例4、步驟D的標題化合物，和300ml甲苯，然后加入32.5ml(32.5mmol)的1M DIBAL的甲苯溶液。加熱混合物回流1小時，冷至20℃，加入另一份32.5ml的1M DIBAL溶液并加熱回流1小時。冷卻混合物至20℃并把它傾入到400g冰、500ml EtOAc和300ml 10％NaOH(水溶液)的混合物中。用CH2Cl2(3×200ml)萃取水層，用MgSO4干燥有機層，然后真空濃縮得殘余物。色譜分離(硅膠，12％MeOH/CH2Cl2+4％NH4OH)得10.4g標題化合物的外消旋物。質(zhì)譜MH+＝469(FAB)。部分的1H NMR(CDCl3，400MHz)8.38(s，1H)；7.57(s，1H)；7.27(d，1H)；7.06(d，1H)；3.95(d，1H)。步驟B-對映體的分離
用制備手性色譜分離(Chiralpack AD，5cm×50cm柱，用5％i-PrOH/己烷+0.2％二乙胺)步驟A的外消旋標題化合物，得標題化合物的(+)-對映體和(-)-對映體。
(+)-對映體的物理化學(xué)數(shù)據(jù)質(zhì)譜MH+＝469(FABS)；[α]D25＝+43.5°(c＝0.402 EtOH)；部分的1H NMR(CDCl3，400MHz)8.38(s，1H)；7.57(s，1H)；7.27(d，1H)；7.05(d，1H)；3.95(d，1H)。
(-)-對映體的物理化學(xué)數(shù)據(jù)質(zhì)譜MH+＝469(FAB)；[α]D25＝-41.8°(c＝0.328 EtOH)；部分的1H NMR(CDCl3，400MHz)8.38(s，1H)；7.57(s，1H)；7.27(d，1H)；7.05(d，1H)；3.95(d，1H)。
制備實例11
通過基本上如制備實例6、步驟A～D所描述的同樣方法處理4-(8-氯-3-溴-5，6-二氫-11H-苯并[5，6]環(huán)庚并[1，2-b]吡啶-11-亞基)-1-哌啶-2-羧酸乙酯，得到如步驟C的產(chǎn)物，外消旋的標題化合物，及如步驟D的產(chǎn)物，標題化合物的R-(+)-對映體和S-(-)-對映體。
R-(+)-對映體的物理化學(xué)數(shù)據(jù)13C NMR(CDCl3)；155.8(C)；146.4(CH)；140.5(CH)；140.2(C)；136.2(C)；135.3(C)；133.4(C)；132.0(CH)；129.9(CH)；125.6(CH)；119.3(C)；79.1(CH)；52.3(CH2)；52.3(CH2)；45.6(CH2)；45.6(CH2)；30.0(CH2)；29.8(CH2)。[α]D25＝+25.8°(8.46mg/2ml MeOH)。
S-(-)-對映體的物理化學(xué)數(shù)據(jù)13C NMR(CDCl3)155.9(C)；146.4(CH)；140.5(CH)；140.2(C)；136.2(C)；135.3(C)；133.3(C)；132.0(CH)；129.9(CH)；125.5(CH)；119.2(C)；79.1(CH)；52.5(CH2)；52.5(CH2)；45.7(CH2)；45.7(CH2)；30.0(CH2)；29.8(CH2)。[α]D25＝-27.9°(8.90mg/2ml MeOH)。
實例1
步驟A
在20ml DMF中溶解1.160g(2.98mmol)制備實例3的標題化合物，室溫攪拌，并加入0.3914g(3.87mmol)的4-甲基嗎啉，0.7418g(3.87mmol)的DEC，0.5229g(3.87mmol)的HOBT，及0.8795g(3.87mmol)的1-N-叔丁氧羰基哌啶基-4-乙酸。室溫攪拌混合物兩天，然后真空濃縮得殘余物并在CH2Cl2和水之間分配殘余物。依次用飽和NaHCO3(水溶液)，10％NaH2PO4(水溶液)和飽和食鹽水洗滌有機相。用MgSO4干燥有機相，過濾并真空濃縮得殘余物。色譜分離殘余物(硅膠，2％MeOH/CH2Cl2+NH3)得1.72g產(chǎn)物。m.p.94.0～94.5℃，質(zhì)譜MH+＝614。元素分析計算值，C，60.54；H，6.06；N，6.83，實測值，C，59.93；H，6 62；N，7.45。步驟B
混合1.67g(2.7mmol)步驟A的產(chǎn)物和20ml CH2Cl2并于0℃攪拌。加入20ml TFA，攪拌混合物2小時然后用1N NaOH(水溶液)堿化混合物。用CH2Cl2萃取。用MgSO4干燥有機相，過濾并真空濃縮得1.16g產(chǎn)物。m.p.＝140.2～140.8℃，質(zhì)譜MH+＝514。步驟C
混合0.50g步驟B的產(chǎn)物，20ml CH2Cl2和4.5當量的(CH3)3SiNCO并于室溫攪拌3小時。用飽和NaHCO3(水溶液)萃取混合物并用MgSO4干燥有機相。過濾并真空濃縮得0.8g粗產(chǎn)物。色譜分離粗產(chǎn)物(硅膠，5％MeOH/CH2Cl2+NH3)得0.26g產(chǎn)物。m.p.＝170.2～170.5℃，質(zhì)譜MH+＝557。
實例2
于0℃混合0.5g(1.06mmol)制備實例4的標題化合物，0.4g(2.61mmol)制備實例1的標題化合物，5ml無水DMF，及0.5ml(4.53mmol)的4-甲基嗎啉，然后加入0.6g(3.12mmol)的DEC和0.4g(2.96mmol)的HOBT并于20℃攪拌混合物過夜。真空濃縮得殘余物并用CH2Cl2(2×50ml)萃取殘余物。用25ml水洗滌萃取液，MgSO4干燥，然后真空濃縮得殘余物并色譜分離(硅膠，10％MeOH/EtOAc+2％NH4OH(水溶液))得0.6g(93.7％產(chǎn)率)的標題化合物。質(zhì)譜MH+＝602(FABS)；部分的1H NMR(CDCl3，300MHz)8.48(s，1H)；8.16(d，2H)；7.61(s，1H)；7.29(m，1H)；7.18(d，2H)；7.04(d，1H)；3.71(s，2H)。元素分析計算值，C，48.81；H，4.10；N，6.57，實測值，C，49.10；H，3.79；N，6.74。
實例3
于0℃在300ml 1∶5的CH2Cl2/EtOAc中溶解5.9g(9.78mmol)實例2的標題化合物。慢慢加入(逐滴)3ml 4N HCl(水溶液)并于0℃攪拌混合物5分鐘。加入200ml Et2O，過濾收集生成的固體并用50ml Et2O洗滌固體。于20℃，0.2mmHg時干燥固體得5.9g(96％產(chǎn)率)的標題化合物。質(zhì)譜MH+＝602(FAB)。部分的1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ8.66(d，2H)；8.51(s，1H)；7.95(s，1H)；7.67(d，2H)；7.47(m，1H)；7.15(m，1H)；3.99(s，2H)。元素分析計算值，C，48.77；H，3.62；N，6.56，實測值，C，48.34；H，3.95；N，6.84。
實例4
步驟A
混合0.501g(1.28mmol)制備實例5的標題化合物和20ml無水DMF，然后加入0.405g(1.664mmol)的1-N-叔丁氧羰基哌啶基-4-乙酸，0.319g(1.664mmol)的DEC，0.225g(1.664mmol)的HOBT，及0.168g(1.664mmol)的4-甲基嗎啉并室溫攪拌混合物過夜。真空濃縮混合物得殘余物，然后在150ml CH2Cl2和150ml飽和NaHCO3(水溶液)之間分配殘余物。用另一份150ml CH2Cl2萃取水相。用MgSO4干燥有機相，并真空濃縮得殘余物。色譜分離殘余物(硅膠，500ml己烷，1L 1％MeOH/CH2Cl2+0.1％NH4OH(水溶液)，然后1L 2％MeOH/CH2Cl2+0.1％NH4OH(水溶液))得到0.575g產(chǎn)物。m.p.＝115°～125℃；質(zhì)譜MH+＝616。步驟B
混合0.555g(0.9mmol)步驟A的產(chǎn)物和15ml CH2Cl2并冷卻混合物至0℃。加入15ml TFA并于0℃攪拌2小時。于40～45℃真空濃縮得殘余物，然后在150ml CH2Cl2和100ml飽和NaHCO3(水溶液)之間分配殘余物。用100ml CH2Cl2萃取水層，合并萃取液并用MgSO4干燥。真空濃縮得0.47g產(chǎn)物。m.p.＝140°～150℃；質(zhì)譜MH+＝516。步驟C
混合0.449g(0.87mmol)步驟B的產(chǎn)物，20ml CH2Cl2和0.501g(0.59mmol)的(CH3)3SiNCO并室溫攪拌過夜。加入50～75ml飽和NaHCO3(水溶液)并攪拌0.5小時。用CH2Cl2稀釋，分離兩層并用2×100ml的CH2Cl2萃取水層。用MgSO4干燥合并的CH2Cl2萃取液并真空濃縮得殘余物。色譜分離殘余物(硅膠，500ml CH2Cl2；1L 1％的MeOH/CH2Cl2+0.1％NH4OH；1L 2％的MeOH/CH2Cl2+0.2％NH4OH；然后用3％的MeOH/CH2Cl2+0.3％的NH4OH)得0.33g標題化合物。m.p.＝145°～155℃；質(zhì)譜MH+＝559。
實例5
(-)-對映體混合3.0g(6.36mmol)制備實例6、步驟D的標題化合物的(-)-對映體，和70ml無水DMF。加入3.84ml(34.94mmol)N-甲基嗎啉，3.28g(17.11mmol)的DEC，2.23g(16.52mmol)的HOBT和2.09g(13.55mmol)制備實例1的4-吡啶乙酸N-氧化物并室溫攪拌混合物過夜。真空濃縮除去DMF，加入100ml飽和NaHCO3(水溶液)和10ml CH2Cl2并攪拌15分鐘。用CH2Cl2(2×500ml)萃取混合物，用MgSO4干燥萃取液并真空濃縮得殘余物。色譜分離殘余物(500g反相C18硅膠，75％、80％，然后85％MeOH/水+0.1％HOAc梯度洗脫)。真空濃縮所要的組分以除去MeOH并加入50ml 1M NaOH(水溶液)。攪拌15分鐘，然后用CH2Cl2(2×500ml)萃取。用MgSO4干燥萃取液并真空濃縮得3.4g標題化合物。m.p＝148.9°～150.5℃；[α]D25＝-56.37°(9.4mg/2ml MeOH)；質(zhì)譜MH+＝605。
通過室溫處理產(chǎn)物在HCl和CH2Cl2中的溶液，接著真空濃縮可以分離得到實例5標題化合物的HCl鹽。[α]D25＝-31.9°(4.80mg/2mlMeOH+1ml水)。
用制備實例6產(chǎn)物的(+)-對映體并接著用基本上如上實例5所描述的同樣方法，制得類似物(+)-對映體(實例5A)，即，實例5標題化合物的對映體。m.p.＝149.0°～150.5℃；質(zhì)譜MH+＝605；[α]D25＝+67.1°(7.0mg/2ml MeOH)。
如上實例5所描述的，實例5A的標題化合物也能以HCl鹽分離得到。m.p.＝152.9℃(分解)；[α]D25＝+41.7°(2ml MeOH+1ml水)。
用制備實例6、步驟C的外消旋的標題化合物，并接著用基本上如上述實例5所描述的同樣方法，制備了外消旋物(實例5B)。m.p.＝84.3°～85.6℃；質(zhì)譜MH+＝607。
實例6
(-)-對映體步驟A
混合3.21g(6.80mmol)制備實例6的(-)-對映體產(chǎn)物和150ml無水DMF。加入2.15g(8.8mmol)的1-N-叔丁氧羰基哌啶基-4-乙酸，1.69g(8.8mmol)DEC，1.19g(8.8mmol)的HOBT和0.97ml(8.8mmol)的N-甲基嗎啉并于室溫攪拌混合物過夜。真空濃縮除去DMF并加入50ml飽和碳酸氫鈉(水溶液)。用CH2Cl2(2×250ml)萃取，用50ml飽和食鹽水洗滌萃取液并用MgSO4干燥。真空濃縮得殘余物并色譜分離(硅膠，2％MeOH/CH2Cl2+10％NH4OH)得4.75g產(chǎn)物。m.p.＝75.7°～78.5℃；質(zhì)譜MH+＝695；[α]D25＝-5.5°(6.6mg/2ml MeOH)。步驟B
混合4.70g(6.74mmol)步驟A的產(chǎn)物和30ml MeOH，然后于1小時內(nèi)加入10ml一份的50ml 10％H2SO4/二氧六環(huán)溶液。將混合物傾入至50ml水中并加入15ml 50％的NaOH(水溶液)以調(diào)節(jié)pH≈10～11。過濾除去生成的固體并用CH2Cl2(2×250ml)萃取濾液。真空濃縮水層除去MeOH并再用250ml CH2Cl2萃取。用MgSO4干燥合并的萃取液并真空濃縮得產(chǎn)物。m.p.＝128.1°～131.5℃；質(zhì)譜MH+＝595；[α]D25＝-6.02°(9.3mg/2ml MeOH)。步驟C
混合3.64g(5.58mmol)步驟B的產(chǎn)物和30ml CH2Cl2，然后加入6.29ml(44.64mmol)的(CH3)3SiNCO并室溫攪拌混合物2天。加入25ml NaHCO3(水溶液)，然后用CH2Cl2(2×250ml)萃取。用25ml飽和食鹽水洗滌萃取液并用MgSO4干燥。真空濃縮得殘余物并色譜分離(硅膠，2.5％、5.0％，然后用7.5％MeOH/CH2Cl2+10％NH4OH梯度洗脫)得標題化合物m.p.＝150.5°～153.0℃；質(zhì)譜MH+＝638；[α]D25＝-61.4°(8.18mg/2ml MeOH)。
實例7
用基本上如實例2所述的同樣方法，使制備實例7的標題化合物和制備實例1的標題化合物反應(yīng)，得0.25g標題化合物，它是阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體的外消旋混合物。質(zhì)譜MH+＝602，m.p.＝167.2°～167.8℃。
通過和HCl/CH2Cl2攪拌1小時，然后真空濃縮，制得實例7標題化合物的HCl鹽。
實例7A和7B
實例7A實例7B實例7的標題化合物是阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體的外消旋混合物。通過制備手性色譜(HPLC)，用Chiralpack AD柱(5cm×50cm)和40％i-PrOH/己烷+0.2％二乙胺作流動相，分離那些阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體，分別得(+)-和(-)-對映體，實例7B和7A。
(-)-對映體，實例7A的物理化學(xué)數(shù)據(jù)m.p.＝114.2°～114.8℃，[α]D25＝-154.6°(8.73mg/2ml MeOH)。
(+)-對映體，實例7B的物理化學(xué)數(shù)據(jù)m.p.＝112.6°～113.5℃，[α]D25＝+159.7°(10.33mg/2ml MeOH)。
實例8
步驟A
將6.0g(12.8mmol)制備實例7的標題化合物和3.78g(16.6mmol)1-氮-叔丁氧羰基哌啶基-4-乙酸反應(yīng)，使用和實例6步驟A所述基本上相同的方法，得到8.52g產(chǎn)品。質(zhì)譜MH+＝692(FAB)。1H NMR(CDCl3，200MHz)8.5(d，1H)；7.5(d，2H)；7.2(d，1H)；4.15-3.9(m，3H)；3.8-3.6(m，1H)；3.5-3.15(m，3H)；2.9(d，2H)；2.8-2.5(m，4H)；2.4-1.8(m，6H)；1.8-1.6(br d，2H)；1.4(s，9H)；1.25-1.0(m，2H).步驟B
混合8.50g步驟A的產(chǎn)物和60ml CH2Cl2，然后冷卻至0℃并加入55ml TFA。將混合物在0℃攪拌3小時，然后加入500ml 1N NaOH(水溶液)，接著加入30ml 50％NaOH(水溶液)。用CH2Cl2萃取，MgSO4干燥，減壓濃縮得到7.86g產(chǎn)品。
質(zhì)譜MH+＝592(FAB)。1H NMR(CDCl3，200MHz)8.51(d，1H)；7.52(d of d，2H)；7.20(d，1H)；4.1-3.95(m，2H)；3.8-3.65(m，2H)；3.5-3.05(m，5H)；3.0-2.5(m，6H)；2.45-1.6(m，6H)；1.4-1.1(m，2H).步驟C
將7.80g(13.1mmol)步驟B的產(chǎn)物用12.1g(105mmol)(CH3)3SiNCO處理，使用和實例6步驟C所述的基本上相同的方法，得到5.50g標題化合物，它是一種阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體的外消旋混合物。m.p.＝163.6°～164.0℃。質(zhì)譜MH+＝635(FAB)。1H NMR(CDCl3，200MHz)8.5(d，1H)；7.52(d，1H)；7.48(d，1H)；7.21(d，1H)；4.54(s，2H)；4.1-3.6(m，4H)；3.45-3.15(m，4H)；3.0-2.5(m，5H)；2.45-1.6(m，7H)；1.4-1.0(m，2H)。
實例8A和8B
實例8A 實例8B實例8的標題化合物是阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體的外消旋混合物。那些阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體是通過制備性色譜(HPLC)分離的，使用一種Chiralpack AD柱(5cm×50cm)，20％異丙醇/己烷+0.2％二乙胺作為流動相，流速100ml/分鐘，得到(+)-和(-)-對映體，分別為實例8B和8A。
(-)-對映體，即實例8A的理化數(shù)據(jù)m.p.＝142.9°～143.5℃，[α]D25＝-151.7°(11.06mg/2ml，MeOH)。
(+)-對映體，即實例8B的理化數(shù)據(jù)m.p.＝126.5°～127.0℃，[α]D25＝+145.6°(8.38mg/2ml MeOH)。
實例9
混合3.32g制備實例8中步驟B的標題化合物的(+)-對映體，2.38g制備實例1的標題化合物，1.92g HOBT，2.70g DEC，1.56mlN-甲基嗎啉和50ml干燥的DMF并在25℃攪拌24小時。在真空下濃縮，然后將殘余物用CH2Cl2稀釋。先用1N NaOH(水溶液)，然后用飽和NaH2PO4(水溶液)洗滌，用MgSO4干燥。真空下濃縮得到的剩余物色譜分離(硅膠，2％MeOH/CH2Cl2+NH4OH)，得到3.82g標題化合物。質(zhì)譜MH+＝604(FAB)。
該化合物的鹽酸鹽是通過將實例9的標題化合物溶解在用氯化氫飽和的二氯甲烷中制得的。真空濃縮得到實例9標題化合物的鹽酸鹽。m.p.＝166.5℃，[α]D22＝+70.8°(9.9mg/2ml MeOH)。
實例9A和9B
實例9A 實例9B
將制備實例8、步驟B的標題化合物的(-)-對映體(3.38g)與2.20g制備實例1的標題化合物反應(yīng)，經(jīng)由和實例9所述基本上相同的方法得到3.58g實例9A的標題化合物。
實例9A標題化合物的HCl鹽的制備，包括將標題化合物溶解于CH2Cl2，加入6M HCl(g)在CH2Cl2中的溶液，然后真空濃縮得到該鹽。m.p.＝129℃，[α]D25＝-72.3°(3.32mg/2ml MeOH)。
將制備實例8，步驟A的外消旋的標題化合物，與制備實例1的標題化合物反應(yīng)，經(jīng)由和實例9所述基本上相同的方法得到了實例9B的標題化合物。m.p.＝145.0℃。
實例10
步驟A
將1.33g制備實例8中步驟B的標題化合物的(+)-對映體，與1.37g 1-氮-叔丁氧基-羰基哌啶基-4-乙酸反應(yīng)，使用和實例6、步驟A所述基本上相同的方法，得到2.78g產(chǎn)品。質(zhì)譜MH+＝694.0(FAB)；[α]D25＝+34.1°(5.45mg/2ml，MeOH)。步驟B
將2.78g步驟A的產(chǎn)物，經(jīng)由與實例8、步驟B所述基本上相同的方法處理，得到1.72g產(chǎn)物。m.p.＝104.1℃；質(zhì)譜MH+＝594；[α]D25＝+53.4°(11.42mg/2ml，MeOH)。步驟C
以和實例6、步驟C所述的基本上相同的方法，用6ml(CH3)3SiNCO處理1.58g步驟B的產(chǎn)物，得到1.40g標題化合物。m.p.＝140℃；質(zhì)譜MH+＝637；[α]D25＝+49.1°(4.24mg/2ml，MeOH)。
用丙酮重結(jié)晶制得標題化合物，為固體。m.p.＝214.5-215.9℃。
實例10A和10B
實例10A 實例10B經(jīng)由和實例10、步驟A-C所述基本上相同的方法，將制備實例8、步驟B標題化合物的(-)-對映體(3.38g)轉(zhuǎn)化成(實例10A)標題化合物，得到實例10A的標題化合物。m.p.＝152℃；質(zhì)譜MH+＝637；[α]D25＝-62.5°(1.12mg/2ml，MeOH)。
經(jīng)由和實例10、步驟A-C所述基本上相同的方法，將制備實例8、步驟A的外消旋標題化合物轉(zhuǎn)化成(實例9B)標題化合物，得到實例10B的標題化合物。m.p.＝111.2℃(分解)。
實例11
標題化合物是用制備實例9、步驟F的外消旋標題化合物，經(jīng)過和實例2所述基本上相同的方法制得的。1H NMR(CDCl3，400MHz)8.44(d，1H)；8.14(d，2H)7.58(d，1H)；7.47(d，1H)；7.14(m，3H)；5.32(s，1H)；4.65-4.57(m，1H)；3.68(s，2H)；3.65-3.39(m，4H)；2.91-2.87(m，1H)；2.69-2.63(m，1H)；2.45-2.33(m，.4H).MH+＝605.
實例11A和11B
實例11A 實例11B該R-(+)-對映體(實例11A)或S-(-)-對映體(實例11B)是用制備實例9中步驟G標題化合物的R-(+)-或S-(-)-對映體，用與實例2所述基本上相同的方法制得的。
R-(+)-對映體，實例11A的理化數(shù)據(jù)m.p.＝167.0°-167.8℃；
＝+32.6°(c＝1，MeOH)；1H NMR(CDCl3，400MHz)8.44(d，1H)；8.14(d，2H)7.58(d，1H)；7.47(d，1H)；7.14(m，3H)；5.32(s，1H)；4.65-4.57(m，1H)；3.68(s，2H)；3.65-3.39(m，4H)；2.91-2.87(m，1H)；2.69-2.63(m，1H)；2.45-2.33(m，4H).MH+＝605.
S-(-)-對映體，實例11B的理化數(shù)據(jù)
＝-38.2°(14.67mg/2mL，MeOH)；1H NMR(CDCl3，400MHz)8.44(d，1H)；8.14(d，2H)7.58(d，1H)；7.47(d，1H)；7.14(m，3H)；5.32(s，1H)；4.64-4.57(m，1H)；3.67(s，2H)；3.70-3.34(m，4H)；2.95-2.87(m，1H)；2.69-2.63(m，1H)；2.45-2.31(m，4H).MH+＝605.
實例12
本實例的標題化合物是使用制備實例9、步驟F的外消旋標題化合物，經(jīng)過與實例8中步驟A-C所述基本上相同的方法制得的。該化合物是一種外消旋物。
實例12A和12B
實例12A 實例12B實例12的標題化合物是一種外消旋混合物。色譜分離2.45g實例12的化合物，使用一種Chiralpack AD柱和20％異丙醇/己烷+0.2％二乙胺作為流動相，流速100ml/分，得到0.970g(+)-對映體和0.982g(-)-對映體，分別為實例12B和12A。
(-)-對映體，實例12A的理化數(shù)據(jù)1H NMR(CDCl3，200MHz)8.43(d，1H)；7.58(d，1H)；7.48(d，1H)；7.14(d，1H)；5.32(s，1H)；4.5-4.75(m，1H)；4.4(s，2H)；3.9(d，2H)；3.2-3.7(m，5H)；2.52-3.05(m，4H)；1.85-2.5(m，6H)；1.5-1.85(m，4H)；1.0-1.4(m，1H).
＝-31.2°(c＝0.453，MeOH).
(+)-對映體，實例12B的理化數(shù)據(jù)1H NMR(CDCl3，200MHz)8.43(d，1H)；7.58(d，1H)；7.48(d，1H)；7.14(d，1H)；5.32(s，1H)；4.5-4.75(m，1H)；4.4(s，2H)；3.9(d，2H)；3.2-3.7(m，5H)；2.52-3.05(m，4H)；1.85-2.5(m，6H)；1.5-1.85(m，4H)；1.0-1.4(m，1H).
＝+29.8°(c＝0.414，MeOH).
實例13
步驟A
將1.35g制備實例10步驟B的標題化合物的(-)-對映體和1.4g1-N-叔丁氧基-羰基哌啶基-4-乙酸反應(yīng)，按照與實例6中步驟A所述基本上相同的方法，得到2.0g產(chǎn)物。質(zhì)譜MH+＝694(FAB)。部分的1H NMR(CDCl3，300MHz)8.38(s，1H)；7.60(s，1H)；7.25(d，1H)；7.05(m，1H)；1.45(s，9H)。步驟B
將1.95g步驟A的產(chǎn)物經(jīng)由與實例8、步驟B所述基本上相同的方法處理，得到1.63g產(chǎn)物。質(zhì)譜MH+＝594(FAB)。部分的1H NMR(CDCl3，300MHz)8.38(s，1H)；7.60(s，1H)；7.25(d，1H)；7.03(m，1H)；4.64(d，1H)；3.90(m，2H)。步驟C
(-)-異構(gòu)體將1.6g步驟B的產(chǎn)物用1.3ml(CH3)3SiNCO處理，使用與實例6步驟C所述基本上相同的方法，得到1.27g標題化合物。質(zhì)譜MH+＝637(FABS)；[α]D25＝-33.1°(c＝0.58，EtOH)。部分的1H NMR(CDCl3，400MHz)8.38(s，1H)；7.59(s，1H)；7.25(d，1H)；7.04(m，1H)；4.60(d，1H)；4.41(s，2H)。
實例13A和13B
實例13A 實例13B經(jīng)由與實例10中步驟A-C所述基本上相同的方法，將制備實例10步驟B標題化合物的(+)-對映體(2.1g)轉(zhuǎn)化成本標題化合物，得到標題化合物實例13A。質(zhì)譜MH+＝637(FABS)；[α]D25＝+32.4°(c＝0.57，EtOH)。部分的1H NMR(CDCl3，400MHz)8.39(s，1H)；7.59(s，1H)；7.25(d，1H)；7.04(m，1H)；4.60(d，1H)；4.41(s，2H)。部分的1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.42(s，1H)；7.88(s，1H)；7.41(d，1H)；7.29(m，1H)；5.85(s，2H)；4.20(d，1H)。
用類似的方法，將制備實例10中步驟A的外消旋標題化合物轉(zhuǎn)化成為外消旋的標題化合物實例13B。部分的1H NMR(CDCl3，400MHz)8.38(s，1H)；7.59(s，1H)；7.25(d，1H)；7.04(m，1H)；4.60(d，1H)；4.41(s，2H)。部分的1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.42(s，1H)；7.88(s，1H)；7.41(d，1H)；7.29(d，1H)；5.85(s，2H)；4.20(d，1H)。
實例14
按照與實例9所述基本上相同的方法，使2.6g制備實例10中步驟B標題化合物的(+)-對映體和1.68g制備實例1的標題化合物反應(yīng)，得到2.10g標題化合物。質(zhì)譜MH+＝604(FAB)；[α]D25＝+34.1°(10.98mg/2ml，EtOH)。部分的1H NMR(CDCl3，400MHz)8.38(s，1H)；8.15(d，2H)；7.58(s，1H)；7.26(d，1H)；7.15(d，2H)；7.03(d，1H)；4.57(d，1H)。
為制備實例14標題化合物的HCl鹽，將700mg標題化合物溶解在4ml CH2Cl4中，加入4ml Et2O，冷至0℃并慢慢加入(逐滴)1ml的HCl(g)二噁烷溶液。加入2ml Et2O并在0℃攪拌7分鐘。用30mlEt2O稀釋，過濾收集固體產(chǎn)物并用30ml Et2O洗滌。將固體真空干燥得到0.836g實例14的HCl鹽。[α]D25＝+64.8°(9.94mg/2ml，EtOH)。
實例14A和14B
實例14A 實例14B經(jīng)由與實例9所述基本上相同的方法，使制備實例10中步驟B標題化合物的(-)-對映體(0.60g)和0.39g制備實例1的標題化合物反應(yīng)，得到0.705g標題化合物。質(zhì)譜MH+＝604(FABS)；[α]D25＝-41.8°(EtOH)。部分的1H NMR(CDCl3，300MHz)8.38(s，1H)；8.15(d，2H)；7.58(s，1H)；7.26(d，1H)；7.15(d，2H)；7.03(d，1H)；4.57(d，1H)。
實例14A標題化合物的HCl鹽是經(jīng)由與實例14所述基本上相同的方法制得的。[α]D25＝-63.2°(EtOH)。
將制備實例10中步驟A的外消旋標題化合物，通過與實例9所述基本上相同的方法，轉(zhuǎn)化成實例14B的外消旋標題化合物。部分的1HNMR(CDCl3，400MHz)8.38(s，1H)；8.15(d，2H)；7.58(s，1H)；7.26(d，1H)；7.15(d，2H)；7.03(d，1H)；4.57(d，1H)。部分的1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.77(d，2H)；8.47(s，1H)；7.95(s，1H)；7.74(d，2H)；7.43(m，1H)；7.27(d，1H)；4.35(d，1H)。
實例15
將制備實例4的標題化合物，經(jīng)由與實例8中步驟A-C所述基本上相同的方法反應(yīng)，得到標題化合物，它是一種外消旋物。質(zhì)譜MH+＝635(FAB)。部分的1H NMR(CDCl3)8.45(s，1H)；7.60(s，1H)；7.35(d，1H)；7.05(d，1H)；4.45(s，1H)。
實例16A和16B
實例16A 實例16B將制備實例11標題化合物的R-(+)-對映體或S-(-)-對映體，經(jīng)由與實例2所述基本上相同的方法處理，得到標題化合物的R-(+)-對映體或標題化合物的S-(-)-對映體，分別為實例16A和16B。
R-(+)-對映體的理化數(shù)據(jù)13C NMR(CDCl3)166.5(C)；154.8(C)；146.6(CH)；140.8(CH)；140.4(C)；138.5(CH)；138.5(CH)；136.3(C)；134.6(C)；133.8(C)；133.6(C)；132.0(CH)；130.0(CH)；126.3(CH)；126.3(CH)；125.8(CH)；119.6(C)；78.4(CH)；51.1(CH2)；50.6(CH2)；45.4(CH2)；41.5(CH2)；38.0(CH2)；30.1(CH2)；30.0(CH2).
＝+30.7°(10.35mg/2mL MeOH).
S-(-)-對映體的理化數(shù)據(jù)13C NMR(CDCl3)166.5(C)；154.8(C)；146.6(CH)；140.8(CH)；140.4(C)；138.5(CH)；138.5(CH)；136.3(C)；134.6(C)；133.8(C)；133.6(C)；132.0(CH)；130.0(CH)；126.3(CH)；126.3(CH)；125.8(CH)；119.6(C)；78.4(CH)；51.1(CH2)；50.6(CH2)；45.4(CH2)；41.5(CH2)；38.0(CH2)；30.1(CH2)；29.9(CH2).
＝-30.9°(9.70mg/2mL MeOH).
實例17和17A
實例17實例17A將制備實例11標題化合物的(+)-對映體或(-)-對映體，經(jīng)由與實例1中步驟A-C所述基本上相同的方法處理，得到標題化合物的R-(+)-對映體或標題化合物的S-(-)-對映體，分別為實例17和17A。
R-(+)-對映體的理化數(shù)據(jù)13C NMR(CDCl3)169.3(C)；157.5(C)；155.0(C)；146.6(CH)；140.8(CH)；140.4(C)；136.3(C)；134.8(C)；133.7(C)；132.0(CH)；130.0(CH)；125.8(CH)；119.6(C)；78.5(CH)；51.4(CH2)；50.9(CH2)；45.2(CH2)；43.9(CH2)；43.9(CH2)；41.1(CH2)；38.8(CH2)；32.5(CH)；31.5(CH2)；31.5(CH2)；30.1(CH2)；30.0(CH2).
＝+28.7°(10.1mg/2mL MeOH).
S-(-)-對映體的理化數(shù)據(jù)13C NMR(CDCl3)169.3(C)；157.6(C)；155.0(C)；146.6(CH)；140.8(CH)；140.4(C)；136.3(C)；134.8(C)；133.7(C)；132.0(CH)；130.0(CH)；125.8(CH)；119.6(C)；78.5(CH)；51.4(CH2)；50.9(CH2)；45.2(CH2)；43.9(CH2)；43.9(CH2)；41.1(CH2)；38.8(CH2)；32.5(CH)；31.5(CH2)；31.5(CH2)；30.1(CH2)；30.0(CH2).
＝-28.5°(10.1mg/2 mL MeOH).
實例18
步驟A
將制備實例7中步驟B的產(chǎn)物9.90g(18.9mmol)溶解在150mlCH2Cl2和200ml CH3CN中并加熱至60℃。加入2.77g(20.8mmol)N-氯代琥珀酰亞胺并加熱回流3小時，用TLC(30％EtOAc/H2O)監(jiān)測反應(yīng)。加入另外的2.35g(10.4mmol)N-氯代琥珀酰亞胺并再回流45分鐘。將反應(yīng)混合物冷至室溫并用1N NaOH和CH2Cl2萃取。CH2Cl2層用MgSO4干燥，過濾并用閃式色譜(1200ml正常態(tài)硅膠，用30％EtOAc/H2O洗脫)純化，得到6.24g期望的產(chǎn)物。M.p.193-195.4℃。MH+＝510。步驟B
于-10℃下將2.07g(30.1mmol)NaNO2加入至160ml濃HCl中并攪拌10分鐘。加入步驟A的產(chǎn)物5.18g(10.1mmol)并將反應(yīng)混合物從-10℃溫熱至0℃2小時。將反應(yīng)冷至-10℃，加入100ml H3PO2并放置過夜。萃取反應(yīng)混合物，將其傾入至碎冰中并用50％NaOH/CH2Cl2堿化。有機層用MgSO4干燥，過濾并濃縮至干。用閃式色譜(600ml正常態(tài)硅膠，用20％EtOAc/己烷洗脫)純化，得到3.98g產(chǎn)物。質(zhì)譜MH+＝495。步驟C
將步驟B的產(chǎn)物3.9g溶解在100ml濃HCl中并回流過夜。冷卻混合物，用50％w/w NaOH堿化并用CH2Cl2萃取所得混合物。用MgSO4干燥CH2Cl2層，蒸發(fā)走溶劑并真空干燥，得到3.09g期望的產(chǎn)物。質(zhì)譜MH+＝423。步驟D
使用與制備實例8所述類似的方法，得到1.73g目的產(chǎn)物。m.p.169.6-170.1℃；[α]D25＝+48.2°(c＝1，MeOH)。MH+＝425。步驟E以步驟D的產(chǎn)物為起始原料，使用與實例4相似的方法，得到標題化合物。M.p.152.3-153.3℃；[α]D25＝+53.0°(c＝1，MeOH)。MH+＝593。
實例19
步驟A
用6.52g(48.9mmol)N-氯代琥珀酰亞胺處理15.0g(44.4mmol)制備實例9中步驟B的產(chǎn)物，使用與實例18中步驟A相似的方法，并如所述萃取，得到16.56g目的產(chǎn)物，m.p.234.7-235.0℃。MH+＝370。步驟B
將16.95g(45.6mmol)步驟A的產(chǎn)物用實例18中步驟B所述的方法處理，得到13.07g目的產(chǎn)物，m.p.191.7-192.1℃。MH+＝356。步驟C
使用基本上如制備實例9中步驟E所述的方法，將10.0g(28.0mmol)步驟B的產(chǎn)物用NaBH4處理，得到目的產(chǎn)物，它沒經(jīng)進一步純化就用于下一步反應(yīng)。步驟D
在N2保護并于室溫攪拌下，將10.0g(27.9mmol)步驟C的產(chǎn)物溶解在200ml CH2Cl2中。將反應(yīng)混合物冷至0℃并加入2.63g三乙胺和4.80g(41.9mmol)甲磺酰氯。在0℃下將16.84g(19.6mmol)哌嗪和100ml THF的溶液加入至生成的溶液中，隨后立即加入100mlDMF。室溫攪拌過夜。蒸發(fā)溶劑并用CH2Cl2和飽和NaHCO3萃取所得殘余物。用MgSO4干燥CH2Cl2層，過濾并濃縮得到粗產(chǎn)物。于1200ml硅膠上用色譜法分離粗制品，用5％CH3OH(用NH3飽和)的CH2Cl2溶液洗脫得到一種外消旋混合物。用手性色譜層析分離該外消旋化合物，應(yīng)用一種Chiralpack AD柱(5cm×50cm)，用30％的異丙醇/己烷和0.2％二乙胺洗脫。質(zhì)譜MH+＝426。目的異構(gòu)體是(+)-對映體。步驟E在N2保護下將步驟D的產(chǎn)物2.0g(4.7mmol)在40ml DMF中攪拌，將混合物冷至0℃，加入0.615g(6.1mmol)N-甲基嗎啉、1.1668g(6.1mmol)DEC、0.8225g(6.1mmol)HOBT和1.6042g(6.1mmol)制備實例1的產(chǎn)物。室溫攪拌過夜。蒸發(fā)溶劑，用CH2Cl2/H2O、飽和NaHCO3、10％NaH2PO4和鹽水萃取所得殘余物。分離出CH2Cl2層，用MgSO4干燥，過濾并濃縮至干。于400ml標準態(tài)硅膠上用閃式色譜純化所得殘余物，用5％CH3OH/NH3-CH2Cl2洗脫，得到2.43g標題化合物，m.p.145.3-146.1℃；[α]D25＝+33.6°(c＝1，MeOH)。MH+＝561。
實例20
(+)-對映體步驟A
將200mg氰基起始原料在17g多磷酸中于190-200℃加熱45分鐘。把總的混合物傾入至冰中，加入30％HCl并攪拌30分鐘。用CH2Cl2萃取，鹽水洗滌，Na2SO4干燥，過濾并濃縮。用制備性TLC純化，用EtOAc/己烷洗脫得到21mg目的產(chǎn)物(也得到59mg 10-氯代產(chǎn)物)。步驟B
使用基本上如制備實例9中步驟E所述的方法，將1.75g(5.425mmol)步驟A的產(chǎn)物用NaBH4處理得到目的產(chǎn)物。步驟C
將步驟B中所得的殘余物在室溫下溶解于50ml CH2Cl2中，加入3.95ml(5.425mmol)SOCl2并于室溫攪拌過夜。在真空下除去過量的SOCl2和溶劑。將殘余物溶解在CH2Cl2中，用飽和NaHCO3和鹽水洗滌，Na2SO4干燥，過濾并濃縮。將25ml THF加入至生成的殘余物中，加入2.33g(27.125mmol)哌嗪并在室溫下攪拌過夜。蒸走溶劑，加入CH2Cl2并用飽和NaHCO3和鹽水洗滌，用Na2SO4干燥，過濾并濃縮。將所得殘余物用手性色譜分離，使用Chiralpack AD柱并用20％異丙醇/己烷和0.2％二乙胺洗脫。質(zhì)譜MH+＝392。目的異構(gòu)體是(+)-對映體。步驟D將770mg(1.960mmol)步驟C的產(chǎn)物，與323μl(2.548mmol)N-甲基嗎啉、344mg(2.548mmol)HOBT、487mg(2.548mmol)DEC和390mg(2.548mmol)制備實例1的化合物在8ml DMF中混合，并在室溫下攪拌過夜。蒸走溶劑，加入EtOAc并用飽和NaHCO3、水和鹽水洗滌，用Na2SO4干燥。于硅膠上用閃式色譜純化，用EtOAc在10、12％(10％NH4OH/CH3OH)/EtOAc的梯度洗脫。用制備性TLC(1000μ硅膠)進一步純化得到750mg標題化合物，[α]D25＝+23.3°(c＝0.322，MeOH)。
實例21
外消旋的步驟A
于室溫下將制備實例9中步驟B的產(chǎn)物10.0g(29.6mmol)溶解在150ml CH2Cl2和200ml CH3CN中。將混合物加熱至60℃，加入10.45g(32.6mmol)1-氟-4-羥基-1，4-二氮鎓(diazonia)二環(huán)[2，2，2]辛烷雙-(四氟硼酸鹽)并加熱回流4小時。將混合物冷至室溫，用CH2Cl2和1N NaOH萃取。CH2Cl2層用MgSO4干燥，過濾并濃縮至干。所得殘余物用閃式色譜純化，使用1400ml標準態(tài)硅膠，用10％EtAOc-CH2Cl2+2滴NH4OH洗脫得到2.00g產(chǎn)物，m.p.103.2-103.5℃。MH+＝355。步驟B
應(yīng)用基本上如制備實例9中步驟D所述的方法，處理1.80g(5.1mmol)步驟A的產(chǎn)物。粗產(chǎn)物用閃式色譜純化，使用200ml標準態(tài)硅膠，用20％EtOAc/己烷洗脫。質(zhì)譜MH+＝339。步驟C
使用基本上如制備實例9中步驟E所述的方法，用NaBH4處理0.47g(1.4mmol)步驟B的產(chǎn)物，得到目的產(chǎn)物。質(zhì)譜MH+＝342。步驟D
在N2保護下將0.37g(1.1mmol)步驟C的產(chǎn)物溶解在20ml甲苯中并從室溫冷卻至0℃。加入0.3855g(3.2mmol)SOCl2并在室溫攪拌，然后加入10ml CHCl3并攪拌3小時。蒸發(fā)溶劑，用1N NaOH-CH2Cl2萃取所得殘余物，CH2Cl2層用MgSO4干燥，過濾并濃縮至干。在N2保護下將殘余物溶解在10ml THF中，加入0.465g(5.4mmol)哌嗪、10ml THF并在室溫攪拌過夜。重復(fù)萃取步驟得到目的產(chǎn)物。質(zhì)譜MH+＝410。步驟E將步驟D的產(chǎn)物0.44g(1.1mmol)，與N-甲基嗎啉、4-吡啶基乙酸N-氧化物、DEC和HOBT的DMF溶液，用實例5所述方法處理。蒸發(fā)溶劑，所得殘余物用CH2Cl2-H2O、飽和NaHCO3、10％NaH2PO4和鹽水萃取。CH2Cl2層用MgSO4干燥，過濾并濃縮至干。所得殘余物用閃式色譜純化，使用150ml標準態(tài)硅膠，用5％CH3OH/NH3-CH2Cl2洗脫得到0.41g標題化合物，m.p.155.0-155.6℃；質(zhì)譜MH+＝545。
使用合適的起始原料和上述方法，可制得以下化合物
測定1.體外酶測定對法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶和牻牛兒基牻牛兒基蛋白轉(zhuǎn)移酶的抑制作用。
用硫酸銨分級分離并隨之用Q-瓊脂糖凝膠(Pharmacia Inc.)陰離子交換色譜、基本上如Yokoyama等所述〔Yokoyama，K.，等，(1991)〕方法，將來自大鼠腦的法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶(FPT)和牻牛兒基牻牛兒基蛋白轉(zhuǎn)移酶(GGPT)I進行部分純化。來自小牛腦的蛋白牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶是有蛋白異戊二烯基化特異性，Proc.Natl.Acad.Sci USA885302-5306，它的公開也在此作為參考文獻列入本文中。人的法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶也通過用編碼a和b亞單位的cDNA克隆，表達在E.coli中。使用的方法類似于已出版的那些方法〔Omer.C.等，(1993)〕，重組的人法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的鑒別，克隆，表達，法呢基二磷酸酯結(jié)合，和用酵母異戊二烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶的功能同系物。Biochemistry 325167-5176〕。人的法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶是如上述E.coli的可溶的蛋白組分進行部分純化的。在此公開的三環(huán)法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑均以相同強度抑制人類和大鼠的酶。作為這些酶的底物制備了兩種形式的Val12-Ha-Ras蛋白，其不同處在于它們的羧基末端序列。一種形式末端為半胱氨酸-纈氨酸-亮氨酸-絲氨酸(Ras-CVLS)，另一種為半胱氨酸-纈氨酸-亮氨酸-亮氨酸(Ras-CVLL)。Ras-CVLS是法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的底物，而Ras-CVLL是牻牛兒基牻牛兒基蛋白轉(zhuǎn)移酶I的底物。組建了編碼這些蛋白的cDNAs，以使這些蛋白質(zhì)包含有6個組氨酸殘基的氨基末端突出。兩種蛋白質(zhì)均在Escherichiacoli中表達并用金屬絡(luò)合親合色譜純化。放射標記的異戊二烯基焦磷酸酯底物，〔3H〕法呢基焦磷酸酯和〔3H〕牻牛兒基牻牛兒基焦磷酸酯，是從DuPont/New England Nuclear購得的。
一些測量法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶活性的方法已有描述(Reiss等1990，Cell6281；Schaber等1990。J.Biol.Chem.26514701；Manne等1990，PNAS.877541；和Barbacid & Manne 1993，U.SPatent No 5,185,248)。通過測量從〔3H〕法呢基焦磷酸酯到Ras-CVLS的〔3H〕法呢基的轉(zhuǎn)移，用類似于Reiss等1990(Cell6281)所述條件，來鑒定活性?？傮w積100ml反應(yīng)混合物包含40mM Hepes，pH 7.5；20mM氯化鎂；5mM二硫蘇糖醇；0.25μM[3H]法呢基焦磷酸酯；10ml Q-瓊脂糖凝膠純化的法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶；指定濃度的三環(huán)化合物或二甲基亞砜(DMSO)載體對照(5％DMSO最終濃度)；和5mM Ras-CVLS。將反應(yīng)在室溫下進行30分鐘，然后用0.5ml 4％十二烷基硫酸鈉(SDS)，隨之用0.5ml冷的30％TCA終止反應(yīng)。將樣品置于冰上45分鐘然后在GF/C過濾紙墊上用Brandel細胞收獲器收集沉淀的Ras蛋白。濾紙墊用6％TCA，2％SDS洗滌一次，并于Wallac1204 Betaplate BS液體閃爍計數(shù)器測定其放射活性。百分抑制率是按相對于DMSO載體對照計算的。
牻牛兒基牻牛兒基蛋白轉(zhuǎn)移酶I的測定基本上是如上述法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶相同的測定方法，但有兩處例外〔3H〕牻牛兒基牻牛兒基焦磷酸酯代替了法呢基焦磷酸酯作為異戊二烯類供體并且Ras-CVLL是蛋白受體。這類似于Casey等報道的測定試驗〔Casey.P.J.，等，(1991)〕，用牻牛兒基牻牛兒基異戊二烯進行蛋白的酶修飾，Proc.Natl.Acad.Sci.USA888631-8635，它的公開內(nèi)容在此作為參考文獻列于本文中。
2.基于細胞的測定在COS猴的腎細胞中Val12-Ha-Ras-CVLS和Val12-Ha-Ras-CVLL的瞬時表達法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑對Ras過程和對由轉(zhuǎn)化的Ras所誘導(dǎo)的無序細胞生長的作用。
用含有一種插入的編碼Ras-CVLS或Ras-CVLL的CDNA的質(zhì)粒pSV-SPORT(Gibco/BRL)通過電穿孔來轉(zhuǎn)染COS猴的腎細胞，這導(dǎo)致分別對法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶或牻牛兒基牻牛兒基蛋白轉(zhuǎn)移酶I的Ras底物瞬間超量表達(見上述)。
在電穿孔之后，將細胞涂敷于含有1.5ml的Dulbecco′s-改良的Eagle′s培養(yǎng)基(GIBCO，Inc.)，并補充有10％胎牛血清和適宜的法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑的6-孔組織培養(yǎng)皿中。24小時后，除去培養(yǎng)基并重新加入含有適宜藥物的新鮮培養(yǎng)基。
電穿孔后48小時，在顯微鏡下檢查細胞以監(jiān)測由轉(zhuǎn)化的Ras誘導(dǎo)的無序細胞生長。表達轉(zhuǎn)化的Ras的細胞變得更圓且更可折，同時過度生長單層細胞，像是轉(zhuǎn)化的表型。然后拍攝細胞，用1ml冷的磷酸緩沖鹽水(PBS)洗滌兩次，并用橡膠細胞刮棒從碟中刮下并移入至1ml含有25mM Tris，pH 8.0，1mM乙二胺四乙酸；1mM苯基甲基磺?；?；50mM亮抑蛋白酶肽；和0.1mM的胃酶抑素的緩沖液中。通過均漿化溶解細胞并在2000xg離心10分鐘以除去細胞碎片。
通過加入冰冷的三氯乙酸沉淀細胞蛋白并重新溶解于100ml SDS-電泳樣品緩沖液中。將樣品(5-10ml)裝至14％聚酰胺微型凝膠(Novex，Inc.)上并進行電泳直到接近凝膠的底部有示蹤染料。將溶解在凝膠上的蛋白電印跡在硝化纖維素膜上以進行免疫監(jiān)測。
在4℃于含有2.5％干燥牛奶和0.5％吐溫-20的PBS中孵育過夜將膜封閉，然后用Ras特異的單克隆抗體，Y13-259[Furth，M.E.，等(1982)，Harvey鼠肉瘤病毒的轉(zhuǎn)化基因和細胞的ras基因族p21產(chǎn)物的單克隆抗體J.Virol，43294-304]，在含1％胎牛血清的PBS中于室溫下孵育1小時。洗滌之后，將膜于室溫下用1∶5000稀釋的二級抗體，即兔抗大鼠IgG綴合至辣根過氧化物酶，在含有1％胎牛血清的PBS中孵育1小時。用比色的過氧化物酶試劑(4-氯-1-萘酚)如制造商(Bio-Rad)所述檢測被加工的或未被加工的Ras-CVLS或Ras-CVLL的存在。
3.細胞簇分析將正常人HEPM成纖維細胞以5×104細胞/皿的密度在2ml生長培養(yǎng)基中植入3.5cm皿中，并孵育3-5天以達到融合。從每個皿中吸取培養(yǎng)基并將指示的腫瘤細胞，表達活化的H-ras基因的T24-BAG4人膀胱癌細胞，在2ml生長培養(yǎng)基中以2×103細胞/皿的密度植入到成纖維細胞單層的頂部，并允許附著過夜。在腫瘤細胞植入24小時后，通過直接加入系列稀釋的化合物至生長培養(yǎng)基中，并且另外再孵育細胞14天以允許集落形成以測定化合物誘導(dǎo)的集落抑制作用。用磷酸緩沖鹽水(PBS)漂洗單層細胞兩次終止檢驗，并用在PBS中的1％戊二醛溶液固定單層細胞，然后通過用X-Gal染色使腫瘤細胞顯影[Price，J.，等，用逆病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)染對脊椎動物神經(jīng)系統(tǒng)的線性分析，Proc，Natl.Acad.Sci.84156-160(1987)]。在集落抑制測定中，化合物是基于兩個IC50數(shù)值來評價的阻止腫瘤細胞數(shù)目增加50％所需的藥物濃度(tIC50)和降低含有細胞簇的細胞密度50％所需的藥物濃度(mIC50)。兩種IC50值均是通過在顯微鏡下進行視覺觀察和對每集落細胞以及集落的數(shù)目計數(shù)來測定腫瘤細胞和簇細胞的密度獲得的?；衔锏闹委熤笖?shù)是由mIC50/tIC50比值定量表示的，當數(shù)值大于1時表明對腫瘤靶有特異性。
按上述基本相同的方法進行另外的測定，但用另外的指示腫瘤細胞系來代替T24-BAG細胞。用表達為活化的K-ras基因的DLD-1-BAG人結(jié)腸癌細胞或者表達為活化的K-ras基因的SW620-BAG人結(jié)腸癌細胞進行測定。使用本領(lǐng)域已知的其他腫瘤細胞系，可以證明本發(fā)明的化合物對其它類型癌細胞(例如本文前述的那些)的活性。
4.軟瓊脂測定無貼壁依賴性生長是致癌性細胞系的一種特征。將人腫瘤細胞懸浮于含有0.3％瓊脂糖和指明濃度的法呢基轉(zhuǎn)移酶抑制劑的生長培養(yǎng)基中。將溶液覆蓋至用0.6％瓊脂糖固化的，含有與頂層相同濃度的法呢基轉(zhuǎn)移酶抑制劑的生長培養(yǎng)基上。頂層固化后，將平板于37℃在5％CO2中孵育10-16天以使集落過度生長。孵育后，用MTT(3-[4，5-二甲基噻唑-2-基]-2，5-二苯基四唑鎓溴化物，噻唑基藍)(1mg/ml在PBS中)溶液覆蓋瓊脂將集落染色。計數(shù)集落并測定IC50′s。
表1-FPT抑制作用
<p>表2FPT抑制和GGPT抑制的對比
表3在COS細胞中的活性
表4抑制腫瘤細胞生長-簇測定
人腫瘤細胞生長的抑制作用——軟瓊脂測定軟瓊脂測定是用實例10化合物和以下腫瘤細胞系進行的K rasNIH 3T3；H ras NIH 3T3；HTB 177(NBCLC)K ras突變； HTB173(NCI H146)(SCLC)ras突變未被檢測；A549(肺)K ras突變；HTB 175(SCLC)ras突變未被檢測；HTB 119(NCI H69)(SCLC)；HTB 183(NCI H661)(NSCLC)ras突變未被檢測；HPAF II(胰腺)K ras突變；MCF-7(乳腺)ras突變未被檢測；HBL 100(乳腺)ras突變未被檢測；Du 4475(乳腺)ras突變未被檢測；MDA MB468(乳腺)ras突變未被檢測；DU 145(前列腺)ras突變未被檢測；MDA MB453(乳腺)；BT 474(乳腺)；PC3(前列腺)；DLD1(結(jié)腸)K ras突變；和AsPc-1(胰腺)K ras突變。Ras突變情況通過ELISA(Oncogene Science)測定。對各細胞系的IC50(μM)是在0.04至3.0的范圍內(nèi)。
軟瓊脂測定是以實例18化合物和以下腫瘤細胞系進行的K rasNIH 3T3；H ras NIH 3T3；HTB 177(NSCLC)K ras突變，A549(肺)K ras突變；和HTB 175(SCLC)ras突變未被檢測。對Ras突變情況通過ELISA(Oncogene Science)測定。各細胞系的IC50(μM)是在0.175和3.8的范圍內(nèi)。結(jié)果1.酶學(xué)數(shù)據(jù)表明，用部分純化的大鼠腦的法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶(FPD)，本發(fā)明化合物是Ras-CVLC法呢基化的抑制劑。數(shù)據(jù)也表明，用部分純化的大鼠腦FPT，本發(fā)明中的一些化合物可被認為是非常強(IC50＜＜0.1μM)的Ras-CVLS法呢基化抑制劑。
數(shù)據(jù)也表明，在用Ras-CVLL作為異戊二烯類受體來測定時，本發(fā)明的化合物是弱的牻牛兒基牻牛兒基蛋白轉(zhuǎn)移酶(GGPT)抑制劑。這種選擇性對本發(fā)明方法中使用的化合物的治療潛力是很重要的，并且當化合物對Ras-轉(zhuǎn)化的細胞具有選擇性的生長抑制性質(zhì)時，將增加其治療潛力。
2.以細胞為基礎(chǔ)的COS細胞測定對在Ras轉(zhuǎn)染的COS細胞中表達的Ras蛋白的Western印跡分析并隨之用本發(fā)明的三環(huán)法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑處理，表明它們抑制Ras-CVLS的加工，導(dǎo)致未加工的Ras的聚積(見表3)。實例2的化合物，例如，抑制Ras-CVLS的加工，IC50值為0.025μM，但在濃度高達33μM卻不阻斷Ras-CVLL的牻牛兒基牻牛兒基化。
這些結(jié)果提供了本發(fā)明化合物在完整的細胞中特異性地抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶，但不抑制牻牛兒基牻牛兒基蛋白轉(zhuǎn)移酶I的證據(jù)，并且表明它們阻斷由活化的Ras致癌基因引起的細胞轉(zhuǎn)化的潛力。
3.以細胞為基礎(chǔ)的細胞簇測定本發(fā)明三環(huán)的法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑在簇測定中也抑制了Ras-轉(zhuǎn)化的腫瘤細胞的生長，而沒有表現(xiàn)出對正常單層細胞的毒性活性。體內(nèi)抗腫瘤研究皮下接種DLD-1(人結(jié)腸癌細胞ATCC#CCL 221)腫瘤細胞(5×105至8×106)至5-6周齡無胸腺nu/nu雌性小鼠的脅腹。當腫瘤形成時，選擇帶有腫瘤的動物并隨機分組。只用載體(腹腔注射β-環(huán)糊精或口服玉米油)或用溶于在載體中的本發(fā)明化合物，每日四次(QID)，每周7天處理動物4周。通過對腫瘤的測量來測定對于載體對照組腫瘤生長的百分抑制。
對實例1、2、4、5、6、7、7A、8B、9、10、11A、11B、12B、13、14A、16B和18的每個化合物的平均％腫瘤抑制率，劑量為10mg/kg口服時是7至50％，和劑量為50mg/kg口服時是35.4-83。
為從本發(fā)明所述的化合物制備藥物組合物，惰性的，可藥用的載體可以是固體或液體。固體形式制劑包括粉劑，片劑，可分散的顆粒劑，膠囊劑，扁囊劑和栓劑。粉劑和片劑可包含有從約5-70％的活性成分。適宜的固體載體在本領(lǐng)域中是已知的，例如碳酸鎂，硬脂酸鎂，滑石粉，糖，乳糖。片劑，粉劑，扁囊劑和膠囊劑可用作適宜口服給藥的固體劑型。
為制備栓劑，低熔點的蠟例如脂肪酸甘油酯的混合物或可可奶油可先熔化，并通過攪拌將活性成分在其中均勻地分散。然后將熔化均勻的混合物傾入至大小適宜的模具中，使其冷卻固化。
液體形式制劑包括溶液，懸浮劑及乳劑。做為實例可提及的是水或水-丙二醇溶液供腸道外注射。
液體形式制劑也可包括鼻內(nèi)給藥的溶液。
適宜于吸入的氣霧劑可以包括溶液或粉末劑式的固體，它可以與可藥用的載體，例如與惰性壓縮氣體組合。
也包括固體形式制劑，該制劑可在使用前很快轉(zhuǎn)變成液體形式制劑以供口服或非腸道給藥。這樣的液體形式包括溶液，懸浮劑及乳劑。
本發(fā)明的化合物也可以經(jīng)皮輸送。經(jīng)皮的組合物可以采用乳膏，洗劑，氣霧劑和/或乳劑并且可以包括在基質(zhì)的經(jīng)皮膏藥或以此為目的在本領(lǐng)域中常見貯備形式。
優(yōu)選的化合物是口服給藥。
優(yōu)選地，藥物制劑是單位劑量形式。在這樣的形式中，制劑分為含有適宜量的(例如達到期望目的的有效量)活性組分的單位劑量。
在制劑的單位劑量中活性化合物的量，按照具體的施用，可以從約0.1mg到1000mg變化或調(diào)整，更優(yōu)選地從約1mg到300mg。
實際應(yīng)用的劑量可以根據(jù)患者的需要以及需處理病情的嚴重性而變化。對具體情況確定適宜的劑量是在本領(lǐng)域的技術(shù)中。一般來說，治療是以小于化合物最適劑量的較小的劑量開始的。此后，以小的增加度增加劑量直到在此情況下達到最佳效果。為了方便，可將總的每日劑量分開并在該天分批給藥。
施用本發(fā)明化合物的其可藥用的鹽的量和頻率可以根據(jù)醫(yī)生所考慮到的因素如年齡，病情和患者形體以及需要治療的癥狀的嚴重性的判斷而加以調(diào)整。典型的推薦劑量規(guī)則是口服給藥從10mg至2000mg/天，優(yōu)選地10至1000mg/天，分成二到四次的劑量以阻止腫瘤生長。當在此劑量范圍中給藥時，化合物是無毒性的。
以下為藥物劑型的實例，它包含有本發(fā)明的化合物。在其藥物組合物方面，本發(fā)明的范圍并不受所提供的實例的限制。
藥物劑型實例實例A片劑
制備方法將第1和2項在適宜的混合器中混合10-15分鐘。將混合物用第3項制粒。如果需要通過粗篩(例如1/4″，0.63cm)磨潮濕的顆粒。干燥潮濕顆粒。如果需要將干燥的顆粒過篩并與第4項混合10-15分鐘。加入第5項并混合1-3分鐘。壓縮混合物至合適的形狀并在適宜的片劑機上稱重。
實例B膠囊劑<
在適宜的摻合器中將第1、2、3項混合10-15分鐘。加入第4項并混合1-3分鐘。將混合物裝填入適宜的包囊操作機上適宜的兩半片硬明膠膠囊中。
當本發(fā)明與以上說明的具體實施方案一起描述時，它的許多變換，修改和變化對本領(lǐng)域普通的技術(shù)人員是顯而易見的。所有這樣的變換，修改和變化仍包含在本發(fā)明的精神與范圍中。
權(quán)利要求
1.選自以下的一種化合物或其可藥用的鹽
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2.權(quán)利要求1的化合物選自以下
(+)-對映體；
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(+)-對映體；
3.權(quán)利要求1的化合物選自以下
(-)-對映體； (-)-對映體；
(-)-對映體(-)-對映體；
4.權(quán)利要求1的化合物選自以下
(+)-對映體； (+)-對映體；
(+)-對映體； (+)-對映體；
(+)-對映體； (+)-對映體；
(+)-對映體； (+)-對映體；
5.一種化合物選自以下
(+)-對映體；
(-)-對映體；
6.權(quán)利要求5的化合物選自以下
(+)-對映體；
7.權(quán)利要求5的化合物具有下式
8.權(quán)利要求5的化合物具有下式
(+)-對映體
9.權(quán)利要求5的化合物具有下式
10.權(quán)利要求1的化合物選自以下
(+)-異構(gòu)體
11.一種藥物組合物，包括有效量的權(quán)利要求1到10中任一化合物和可藥用的載體。
12.權(quán)利要求1到10的任一化合物，用于制造抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的藥物。
13.權(quán)利要求1到10的任一化合物制造用于治療胰腺癌、肺癌、骨髓性白血病、甲狀腺濾泡癌、脊髓發(fā)育不良綜合征、表皮癌、膀胱癌、結(jié)腸癌、乳腺癌或前列腺癌的藥物。
14.權(quán)利要求1到10的任一化合物用于在需要治療的患者中抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶，包括施用有效量的權(quán)利要求1到10的任一化合物。
15.權(quán)利要求1到10的任一化合物用于在需要治療的患者中治療胰腺癌、肺癌、骨髓性白血病、甲狀腺濾泡癌、脊髓發(fā)育不良綜合征、表皮癌、膀胱癌、結(jié)腸癌、乳腺癌或前列腺癌，包括施用有效量的權(quán)利要求1到10的任一化合物。
16.權(quán)利要求1到10的任一化合物用于制造抑制細胞異常生長的藥物。
17.權(quán)利要求1到10的任一化合物用于制造抑制細胞異常生長的藥物，其中被抑制的細胞是一種表達活化的ras致癌基團的腫瘤細胞。
18.權(quán)利要求1到10的任一化合物用于制造抑制細胞異常生長的藥物，其中被抑制的是腫瘤細胞，而其中是Ras蛋白而不是Ras基因作為基因中致癌基因突變的結(jié)果被活化。
19.權(quán)利要求11的化合物用于制造抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的藥物。
20.權(quán)利要求11的化合物用于制造治療胰腺癌、肺癌、骨髓性白血病、甲狀腺濾泡癌、脊髓發(fā)育不良綜合征、表皮癌、膀胱癌、結(jié)腸癌、乳腺癌或前列腺癌的藥物。
全文摘要
公開了新化合物,如式(1.0)、(4.0)、(22.0)、(27.0)、(32.0)和(39.0)。也公開了用新化合物抑制細胞的異常生長,抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶及治療癌癥的方法。
文檔編號A61K31/496GK1209127SQ96180075
公開日1999年2月24日 申請日期1996年12月19日 優(yōu)先權(quán)日1995年12月22日
發(fā)明者R·J·多爾, J·M·克利, F·G·恩喬羅格, A·K·馬拉姆斯, S·W·雷米斯?jié)伤够? A·G·塔維拉斯 申請人:先靈公司