專利名稱：獼猴桃籽油脂質(zhì)體口服液及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于保健品制劑領(lǐng)域，具體涉及一種獼猴桃籽油脂質(zhì)體口服液及其制備方法。
背景技術(shù)：
稱猴桃iActinidia chinensis)又名楊桃、藤梨、仙桃、毛桃等,新西蘭稱基維果(kiwifruit)，是一種藤本植物，是我國(guó)特產(chǎn)珍貴水果之一。隨著獼猴桃加工業(yè)的發(fā)展，水果殘?jiān)吭龆?。獼猴桃殘?jiān)兄饕撬掷w維和種子。這些工廠在加工生產(chǎn)過(guò)程中，產(chǎn)生大量果渣，其中含有大量的獼猴桃種子籽粒。據(jù)黃倬偉等(黃倬偉，易明華.獼猴桃籽提煉優(yōu)質(zhì)食用油的研究[J].糧油食品科技，1992，(4) 12)報(bào)道，每個(gè)獼猴桃野果中的籽粒少則250多粒，多達(dá)800余粒，平均500粒左右。經(jīng)測(cè)定，籽粒中含油率為28. 85%，獼猴桃籽油中不飽和脂肪酸含量高達(dá)90. 37%，其中亞油酸、亞麻
酸含量占74. 83%;動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，獼猴桃籽油具有明顯的降血脂作用，口服安全無(wú)毒。姚茂君(姚茂君，李加興，張永康.獼猴桃籽油的開(kāi)發(fā)利用探討[J].食品與發(fā)酵工業(yè)，2001,27 (12):28 30，]姚茂君，李嘉興，張永康.獼猴桃籽油理化特性及脂肪酸組成[J].無(wú)錫輕工大學(xué)學(xué)報(bào)，2002，2 (3):307 309)、張永康(張永康，蔣劍波，陳莉華.獼猴桃果仁油脂肪酸的測(cè)定及其利用[J]·吉首大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2001，22 (4):37 38，82)等研究了湖南湘西“米良一號(hào)”獼猴桃的種子，發(fā)現(xiàn)含油率為23. 5%，氣相色譜測(cè)定脂肪酸組成，a-亞麻酸含量高達(dá)63. 99%。因此獼猴桃籽油可作為補(bǔ)充不飽和脂肪酸的重要保健油資源加以開(kāi)發(fā)利用。猴桃籽油中含亞麻酸與亞油酸，是目前發(fā)現(xiàn)的除蘇子油外亞麻酸含量最高的天然植物油。亞油酸和亞麻酸是兩種對(duì)人體健康特別重要的必需脂肪酸，只能從外界攝取而不能在人體內(nèi)自行合成。α -亞麻酸是EPA和DHA的前體物質(zhì)，因而獼猴桃籽油具有降低血脂、膽固醇和血壓，預(yù)防心血管疾病，抑制血小板凝集，防止血栓形成，防止癌癥發(fā)生，抗氧化和延緩衰老等多種作用。所以獼猴桃籽油是一種優(yōu)質(zhì)的功能食品、藥品和美容化妝品的原料。但是，獼猴桃籽油中含量高達(dá)90%的不飽和脂肪酸給油脂的保存帶來(lái)了問(wèn)題。不飽和脂肪酸分子含有多個(gè)雙鍵，因而對(duì)氧氣、光線和熱極為敏感，極易氧化變質(zhì)。油脂的氧化不僅使其失去了應(yīng)有的保鍵功能，而且還會(huì)產(chǎn)生一些對(duì)人體有害的物質(zhì)。脂質(zhì)體(liposome)是Bangham在1965年發(fā)現(xiàn)的一種由磷脂構(gòu)成的一種類(lèi)脂小球體。是將藥物包封在脂質(zhì)(磷脂與膽固醇)雙分子層形成的薄膜中制成的微型球狀體(Bangham ad. difusion of univalent ions aeross the lamellae of swollenPhosphlipids [J].Mol. Biol, 1965 13:238 252.)。雙分子層內(nèi)外分別包封脂溶性和水溶性藥物，其理化性質(zhì)和結(jié)構(gòu)類(lèi)似細(xì)胞膜，又稱為人工生物膜。脂質(zhì)體作為一種新穎的功能成分制劑而備受關(guān)注，近年來(lái)，脂質(zhì)體制劑研究與應(yīng)用取得很大發(fā)展。脂質(zhì)體制劑的作用特 點(diǎn)主要有(陸彬.藥物新劑型與新技術(shù)[M].第二版.北京人民衛(wèi)生出版社，2005. 5):
(I)保護(hù)功能成分提高穩(wěn)定性一些不穩(wěn)定的功能成分被脂質(zhì)體包封后，可受到脂質(zhì)體雙層膜的保護(hù)被包裹的功能成分在體內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程中不受酶和免疫系統(tǒng)所破壞。(2)降低功能成分毒性
脂質(zhì)體本身對(duì)人體無(wú)毒，功能成分被包裹后在心、腎中累積量比游離功能成分低，對(duì)心、腎有毒性的功能成分包封脂質(zhì)體后，可明顯降低毒性。(3)緩釋作用
控制功能成分的釋放速率，達(dá)到長(zhǎng)效緩釋。(4)革巴向性
進(jìn)入體內(nèi)后被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬，使功能成分主要在肝、脾、肺和骨髓等組織器官中蓄 積，實(shí)現(xiàn)被動(dòng)靶向給藥。脂質(zhì)體在醫(yī)藥行業(yè)應(yīng)用成熟，但在食品領(lǐng)域尚屬起步階段。脂質(zhì)體作為一個(gè)優(yōu)良的載體，通過(guò)磷脂的包覆，既可提高包埋物質(zhì)的穩(wěn)定性，又使其具有靶同性，可提高功能成分的生物利用率。目前，脂質(zhì)體的制備方法及其例子如下
I.機(jī)械分散法(mechanical dispersion)通常是先將脂質(zhì)溶于有機(jī)溶劑中，減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)使之在玻璃容器的內(nèi)壁形成均勻的脂質(zhì)膜，然后加入水相介質(zhì)通過(guò)振搖將脂質(zhì)分散并形成脂質(zhì)體。例如水飛薊油脂質(zhì)體制備將處方量卵磷脂、膽固醇、水飛薊油溶解于5ml氯仿，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上減壓蒸干有機(jī)溶劑，達(dá)膠態(tài)后，加入適量體積的磷酸鹽緩沖溶液 (PBS)，于35°C水浴恒溫振蕩至完全水化，用O. 45 μ m微孔濾膜過(guò)濾3次，即得。采用此方法制備脂質(zhì)體較為普遍，但采用氯仿等有機(jī)試劑，毒性大，不適合用于食品領(lǐng)域。2.溶劑分散法
溶劑分散法(solvent dispersion)是先將脂質(zhì)溶于有機(jī)溶劑中，再加入到含有被包裹藥物的水相中，在有機(jī)相與水相交界面上磷脂質(zhì)以單分子層(即脂質(zhì)體雙分子層膜的一半)排列。例如茶樹(shù)油脂質(zhì)體的制備稱取處方量的卵磷脂、膽固醇、茶樹(shù)油、VE、去氧膽酸鈉、吐溫-80等，向其中加入適量無(wú)水乙醇，超聲至懸液均勻，得類(lèi)脂混懸液；水合介質(zhì)置于恒溫磁力攪拌器上以保持規(guī)定的溫度和攪拌速度。將類(lèi)脂混懸液慢慢滴入水合介質(zhì)中，得脂質(zhì)體初懸液(其中乙醇的體積分?jǐn)?shù)為10%)，將此初懸液置于水浴式超聲儀中超聲20 min,即得茶樹(shù)油脂質(zhì)體懸液。卵磷脂的質(zhì)量濃度為10 g · L'卵磷脂與膽固醇的質(zhì)量比為5: I、茶樹(shù)油的質(zhì)量濃度為I. O g · L' VE的質(zhì)量濃度為I. O g · L'去氧膽酸鈉的質(zhì)量濃度為O. 5 g 吐溫-80的質(zhì)量濃度為4. O g 水相介質(zhì)是pH值為6. 8的PBS緩沖溶液。采取此方法制備脂質(zhì)體的案例較少，主要是因?yàn)楣に噮?shù)必須控制精確，否則制得的脂質(zhì)體不穩(wěn)定。針對(duì)獼猴桃籽油容易氧化的特點(diǎn)，馮衛(wèi)華等采用噴霧干燥法對(duì)獼猴桃籽油進(jìn)行微膠囊化研究(獼猴桃籽油微膠囊化技術(shù)研究，農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào)，2004，20 (1) 234 236)。姚茂軍等制備了獼猴桃籽油軟膠囊(獼猴桃油軟膠囊的研究，發(fā)酵與食品工業(yè)，29 (12)2003，58 61)。噴霧干燥法仍需較高溫度(進(jìn)風(fēng)口 180°C，出風(fēng)口 80°C)，因此對(duì)獼猴桃籽油有損失。目前尚未有制備獼猴桃籽油脂質(zhì)體的公開(kāi)報(bào)道
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種獼猴桃籽油脂質(zhì)體口服液及其制備方法，用本發(fā)明方法制備得到的獼猴桃籽油脂質(zhì)體口服液，獼猴桃籽油的的穩(wěn)定性高，安全，避免了獼猴桃籽油中的不飽和脂肪酸被氧化，從而達(dá)到方便運(yùn)輸和長(zhǎng)期保藏的目的。本發(fā)明提供的技術(shù)方案是一種獼猴桃籽油脂質(zhì)體口服液的制備方法，該方法包括如下步驟
(1)量取磷酸鹽緩沖液置于恒溫振蕩器中，水浴加熱至55-65°C，并保持恒溫；
(2)以無(wú)水乙醇為溶劑,分別配制濃度為15-25mg/ml的卵磷脂、5 20mg/ml的膽固醇、5^20mg/ml的獼猴桃籽油混合溶液；
(3)將步驟(2)中所述的三種溶液混合均勻后注入到步驟(I)中的磷酸鹽緩沖液中，于恒溫水浴20-40min，除去殘留乙醇，然后進(jìn)行超聲處理20_40min，加蒸餾水定容，密封，滅菌后即得獼猴桃籽油脂質(zhì)體口服溶液。所述的制備方法，優(yōu)選地，步驟(I)中，量取pH6. 8的磷酸鹽緩沖液置于恒溫振蕩器中，水浴加熱至60°C，并在150r/min轉(zhuǎn)速下保持恒溫；步驟(3)中，于60°C恒溫水浴30min，除去殘留乙醇，然后進(jìn)行超聲處理30min (超聲功率80W)，加蒸餾水定容，密封，滅菌后即得獼猴桃籽油脂質(zhì)體口服溶液。所述的制備方法，優(yōu)選地，步驟(I)中，配制卵磷脂溶液濃度為20mg/ml ;步驟(3)中三種溶液混合后，其中的卵磷脂與膽固醇的質(zhì)量比為2:1，卵磷脂與獼猴桃籽油的質(zhì)量比為 4:I。。所述的制備方法，優(yōu)選地，步驟(3)中，60°C恒溫水浴30min，蒸發(fā)揮盡殘留乙醇，然后進(jìn)行超聲處理，30min，超聲功率為80W。本發(fā)明的方法優(yōu)選采用湖南老爹農(nóng)業(yè)科技開(kāi)發(fā)股份有限公司提供獼猴桃籽油，例如產(chǎn)品批號(hào)為20111230。本發(fā)明還提供由上述制備方法制備得到的獼猴桃籽油脂質(zhì)體口服液。本發(fā)明具有以下有益效果
獼猴桃籽油是常用的獼猴桃籽利用的重要組分，由于其所含的亞麻酸的保健作用，提高獼猴桃籽油的穩(wěn)定性，實(shí)現(xiàn)獼猴桃籽油中亞麻酸的靶向輸送，提高其吸收和利用已經(jīng)成為國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。獼猴籽油難溶于水，口服生物利用度低，極大的限制了其臨床療效，由于獼猴桃籽油中的亞麻酸的含高達(dá)60%以上，極其容易被氧化，本發(fā)明結(jié)合脂質(zhì)體的靶向性和緩釋性，將獼猴桃籽油制備成脂質(zhì)體口服溶液，可以提高獼猴桃籽油的的穩(wěn)定性，安全性，避免獼猴桃籽油中的不飽和脂肪酸被氧化，并且可以實(shí)現(xiàn)獼猴桃籽油的靶向運(yùn)輸，達(dá)到提高獼猴桃籽油吸收率的作用。從而達(dá)到方便運(yùn)輸和長(zhǎng)期保藏的目的，推廣了獼猴桃籽油脂質(zhì)體技術(shù)的商業(yè)價(jià)值。本發(fā)明采取較低的溫度，克服了微囊化過(guò)程中噴霧干燥溫度較高的缺點(diǎn)，同時(shí)釋放速度較軟膠囊慢，可進(jìn)一步作為緩釋制劑的原料。
具體實(shí)施例方式下面通過(guò)具體實(shí)施方式
的詳細(xì)描述來(lái)進(jìn)一步闡明本發(fā)明，但并不是對(duì)本發(fā)明的限制，僅僅作示例說(shuō)明。實(shí)施例I
I、獼猴桃籽油脂質(zhì)體包封率的測(cè)定采用透析-紫外分光光度法測(cè)定獼猴桃籽油的含量。移取20ml獼猴桃籽油脂質(zhì)體放入透析袋中，透析17h后，將袋中溶液倒入IOOml容量瓶，選用乙醇為破乳劑，結(jié)合超聲，力口入石油醚提取，將混合溶液進(jìn)行離心(3000r/min, 3min),取IOml上清液于25ml容量瓶中，用石油醚定容，在233nm處測(cè)定其吸光度A1;同法測(cè)定空白脂質(zhì)體吸光度Atl，計(jì)算ΛΑ，由標(biāo)準(zhǔn)曲線求出所包封獼猴桃籽油的含量。包封率％= Δ A* IOOA1
2、配方與工藝優(yōu)選
脂質(zhì)體口服溶液的技術(shù)關(guān)鍵在于脂質(zhì)體的制備。以包封率為指標(biāo)，考察配方中卵磷脂與膽固醇的質(zhì)量比(L:C)、卵磷脂與油的質(zhì)量比(L:0)、水浴時(shí)間(t)、加熱溫度(T)等四個(gè)因素對(duì)包封效果的影響。根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果，選用L9(43)正交表進(jìn)行脂質(zhì)體配方正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)。
表I 正交設(shè)計(jì)因素表
tadiaab
UM
素等LOW >#湯__HV)
11:1iimm
21:121Sft騎 i 4i 4:1 m 鎌
表2正交設(shè)計(jì)表及結(jié)果L (9) 34 ___
分組_L:C(w/w)L:Q(w/w) 7_K浴時(shí)間(min)T(°C )包封率(％)
1—II —II36Γ34
2—I2 —2238 54
3—I3 —3345Γ67
4—2I —23 ~45
5—22 —3I65Γ35
6—23 —I266Γ36
7—3I —325θΓ56
8—32 —I345 57
9—33 —2I55 20 Kl— 40. 18350. 783 _ 49.42352.297 —
Κ2— 68. 72049.820 _ 56.06351.820 —
Κ3— 50.44355. 743 ^ 53.86055.230 —
最優(yōu)水平_2~32~3—
R—28. 537 5.923 ^ 6.6403.410 —
顯著性 ^(ρ<0. 05)_____
通過(guò)直觀分析，可知最佳處方及工藝條件為因此，獼猴桃籽油脂質(zhì)體最佳制備工藝為
卵磷脂與膽固醇的質(zhì)量比(2:1)、卵磷脂與油的質(zhì)量比(4:1)、水浴時(shí)間301^11、加熱溫度
60°C。配方中卵磷脂與膽固醇的比例對(duì)脂質(zhì)體形成的影響最大。實(shí)施例2
將恒溫振蕩器溫度設(shè)置為60°C，預(yù)熱。準(zhǔn)確量取100mlpH6. 8的磷酸鹽緩沖液置于恒溫振蕩器中，水浴加熱至60°C，并在150r/min轉(zhuǎn)速下保持恒溫。以無(wú)水乙醇為溶劑，分別配制卵磷脂(LC)濃度為20mg/ml，膽固醇(CH)濃度為10mg/ml，獼猴桃籽油(KFO)濃度為15mg/ml，純度99. 0%。將各溶液混合均勻后用注射器均勻注入到恒溫振蕩器中的磷酸鹽緩沖液中。60°C恒溫水浴30min，除去殘留乙醇，超聲處理30min (超聲功率80W)，加蒸餾水定容至250ml，密封，輻照滅菌后即得獼猴桃籽油脂質(zhì)體口服溶液。
本發(fā)明的方法優(yōu)選采用湖南老爹農(nóng)業(yè)科技開(kāi)發(fā)股份有限公司提供獼猴桃籽油，本實(shí)施例所用產(chǎn)品批號(hào)為20111230。實(shí)施例3
用乙醇作為溶劑分別配制卵磷脂(LC)濃度為16mg/ml,膽固醇(CH)濃度為12mg/ml,獼猴桃籽油(KFO)濃度為10mg/ml，制備方法同實(shí)施例2。實(shí)施例4
用乙醇作為溶劑分別配制卵磷脂(LC)濃度為20mg/ml，膽固醇(CH)濃度為20mg/ml，獼猴桃籽油(KFO)濃度為5mg/ml，制備方法同實(shí)施例2。實(shí)施例5
用乙醇作為溶劑分別配制卵磷脂(LC)濃度為23mg/ml,膽固醇(CH)濃度為6mg/ml,稱猴桃籽油(KFO)濃度為18mg/ml，制備方法同實(shí)施例2。
權(quán)利要求
1.一種獼猴桃籽油脂質(zhì)體口服液的制備方法，其特征在于該方法包括如下步驟 (O量取磷酸鹽緩沖液置于恒溫振蕩器中，水浴加熱至55-65°C，并保持恒溫； (2)以無(wú)水乙醇為溶劑，配制濃度為15 25mg/ml的卵磷脂溶液，濃度為5 20mg/ml的膽固醇，濃度為5 20mg/ml的獼猴桃籽油混合溶液； (3)將步驟(2)中所述的三種溶液混合均勻后注入到步驟(I)中的磷酸鹽緩沖液中，于恒溫水浴20-40min，除去殘留乙醇，然后進(jìn)行超聲處理20_40min，超聲處理(超聲功率80W)，加蒸餾水定容，密封，滅菌后即得獼猴桃籽油脂質(zhì)體口服溶液。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于步驟(I)中，量取pH6.8的磷酸鹽緩沖液置于恒溫振蕩器中，水浴加熱至60°C，并在150r/min轉(zhuǎn)速下保持恒溫；步驟(3)中，于60°C恒溫水浴30min，除去殘留乙醇，然后進(jìn)行超聲處理30min，超聲功率為80W，加蒸餾水定容，密封，滅菌后即得獼猴桃籽油脂質(zhì)體口服溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于步驟(2)中，配制卵磷脂溶液濃度為20mg/ml。
4.根據(jù)權(quán)利要求I至3任一項(xiàng)所述的制備方法，其特征在于步驟(3)中三種溶液混合后，其中的卵磷脂與膽固醇的質(zhì)量比為2:1，卵磷脂與獼猴桃籽油的質(zhì)量比為4:1。
5.一種獼猴桃籽油脂質(zhì)體口服液，其特征在于其由權(quán)利要求I至4任一項(xiàng)所述的制備方法制備得到。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種獼猴桃籽油脂質(zhì)體口服液及其制備方法，該方法包括如下步驟(1)量取pH6.8的磷酸鹽緩沖液置于恒溫振蕩器中，水浴加熱至60℃，并保持恒溫；(2)以無(wú)水乙醇為溶劑，配制濃度為15~25mg/ml的卵磷脂，5~20mg/ml的膽固醇，5~20mg/ml的獼猴桃籽油混合溶液；(3)將步驟(2)中的混合溶液注入到步驟(1)中的磷酸鹽緩沖液中，60℃恒溫水浴，然后進(jìn)行超聲處理，加蒸餾水定容，密封，滅菌后即得獼猴桃籽油脂質(zhì)體口服溶液。用本發(fā)明方法制得的獼猴桃籽油脂質(zhì)體口服液，獼猴桃籽油的的穩(wěn)定性高，安全，避免了獼猴桃籽油中的不飽和脂肪酸被氧化，從而達(dá)到方便運(yùn)輸和長(zhǎng)期保藏的目的。
文檔編號(hào)A61P35/00GK102641311SQ20121015727
公開(kāi)日2012年8月22日 申請(qǐng)日期2012年5月21日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月21日
發(fā)明者傅冬和, 劉仲華, 張盛, 張勝, 李適, 肖文軍 申請(qǐng)人:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)