專利名稱：色素性視網(wǎng)膜炎的酶治療法以及試劑盒形式的相關(guān)藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及借助酶對(duì)色素性視網(wǎng)膜炎的治療以及可用于此治療的試劑盒形式的藥物組合物。
現(xiàn)有技術(shù)的描述色素性視網(wǎng)膜炎是一種視網(wǎng)膜疾病，呈多種不同的病理表現(xiàn)當(dāng)其影響到視網(wǎng)膜的外周區(qū)域時(shí)，可導(dǎo)致視野受限并且導(dǎo)致越來越難以適應(yīng)黑暗和半黑暗，視網(wǎng)膜的外周區(qū)域容納著大部分的視桿細(xì)胞，而視桿細(xì)胞負(fù)責(zé)在半黑暗條件下引起可能的視覺以及對(duì)旁側(cè)區(qū)域中的運(yùn)動(dòng)的感知；或者當(dāng)視錐細(xì)胞經(jīng)歷改變時(shí)，可導(dǎo)致中心視力的喪失。該病的進(jìn)展速度因人而異。一般規(guī)律是，色素性視網(wǎng)膜炎在青年期出現(xiàn)，但也常常影響兒童并以潛伏方式作用。
引起此缺陷的原因至今尚不清楚，因此，不存在任何針對(duì)患此病病人的治療手段。專家處理時(shí)唯一的確定信息是色素性視網(wǎng)膜炎的遺傳來源，即遵循遺傳學(xué)家所知的機(jī)制，部分是通過遺傳從一代傳給下一代。大部分色素性視網(wǎng)膜炎形式是遺傳性的，迄今為止已經(jīng)確定了三種傳播模式常染色體顯性遺傳、常染色體隱性遺傳和與性別密切相關(guān)(X-染色體連鎖)。
該病的主要癥狀是黃昏和夜間失明，即當(dāng)光照條件差時(shí)視覺困難，以及從光線好的環(huán)境到黑暗環(huán)境時(shí)或反之亦然的適應(yīng)問題。這個(gè)現(xiàn)象(至少在大部分病例中)是由于在疾病早期發(fā)展階段，侵襲集中在視桿細(xì)胞上。其它典型癥狀是對(duì)極強(qiáng)光的反應(yīng)(目眩)，視野的逐漸縮小，其表現(xiàn)形式為感知放在任一側(cè)的物體時(shí)困難，或者過臺(tái)階或其它低障礙物時(shí)絆倒，最終完全失明。
該病的進(jìn)程是極其多變的過程，但總是漸進(jìn)的并最終導(dǎo)致殘疾。在大部分的病例中，前述癥狀開始加重，視野變得越來越小，最終完全關(guān)閉。在那些目眩的人中，其它癥狀傾向于表現(xiàn)不能分辨顏色以及特殊形式的白內(nèi)障。很不幸，在很多病例中，最后的結(jié)果是完全失明。
為了診斷該疾病，通常依賴一些檢查，如眼底檢查、視野檢查、視網(wǎng)膜電流圖、熒光血管造影及視力檢查。
-眼底檢查旨在評(píng)估視網(wǎng)膜的狀況和查找在視網(wǎng)膜表面是否有典型的色素斑點(diǎn)存在，在該疾病中認(rèn)為這些斑點(diǎn)呈典型的“成骨細(xì)胞樣”外觀。盡管表現(xiàn)相同的癥狀，然而一些罕見形式的色素性視網(wǎng)膜炎不以眼底斑點(diǎn)為特征。
-視野檢查可以評(píng)價(jià)多個(gè)視網(wǎng)膜區(qū)域?qū)獯碳さ拿舾行?。這對(duì)客觀記錄患者視覺感知的困難程度是有用的。
-視網(wǎng)膜電流圖(EGR)由記錄視網(wǎng)膜電流活動(dòng)對(duì)特殊光刺激的反應(yīng)組成，由此可以確切評(píng)估兩種不同形式的光感受器(即視錐細(xì)胞和視桿細(xì)胞)的功能。視網(wǎng)膜電流圖是診斷色素性視網(wǎng)膜炎的非常重要的一項(xiàng)檢查，因?yàn)榧词乖诩膊〉淖畛蹼A段，報(bào)告跡線也幾乎總是或者很平坦或完全消失。
-熒光血管造影是通過靜脈注射熒光底物，隨后在不同時(shí)間對(duì)視網(wǎng)膜成像來進(jìn)行。事實(shí)上，熒光底物通過血液循環(huán)到達(dá)視網(wǎng)膜，它給動(dòng)脈、毛細(xì)血管和靜脈標(biāo)上顏色，以使它們及其壁的功能狀態(tài)可被觀察到。
-視力檢查是對(duì)視敏清晰度進(jìn)行評(píng)估，由患者在三米的距離讀取大小不同的字母組成。
盡管在大約上世紀(jì)中期，色素性視網(wǎng)膜炎已經(jīng)得到鑒定和分類，但不論在可能的治療手段方面還是在同樣重要的了解決定和調(diào)控其進(jìn)程的原因方面，幾乎沒有獲得具體的進(jìn)展。目前國際研究最廣泛遵循的幾條線路分別是遺傳學(xué)途徑，即尋找某個(gè)或某些導(dǎo)致該病的基因，從而通過現(xiàn)代基因工程技術(shù)進(jìn)行干涉；移植途徑，其旨在完善技術(shù)，使視網(wǎng)膜組織移植或至少使健康的細(xì)胞移植至患病視網(wǎng)膜成為可能；以及免疫學(xué)途徑，著手于證明一些理論，這些理論假設(shè)該病歸因于免疫系統(tǒng)的某些改變。
本發(fā)明的目的是提供將使色素性視網(wǎng)膜炎得到有效治療的試劑盒形式的藥物組合物。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種治療色素性視網(wǎng)膜炎的方法，此方法將使視敏度逐漸恢復(fù)、視野擴(kuò)大、視像清晰、感知顏色并且最后重新形成正常的視網(wǎng)膜電流圖。
根據(jù)本發(fā)明，通過使用一些特定的酶來實(shí)現(xiàn)了這些目的，這些酶摻入試劑盒形式的藥物組合物，以用于以注射至眼球后組織的方法治療色素性視網(wǎng)膜炎，所有這些如權(quán)利要求1所述。
更具體地，所用的酶是谷胱甘肽過氧化物酶(下文稱為酶A)，氨?；彼岫拿?下文稱為酶B)，葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(下文稱為酶C)，這些酶依據(jù)下文進(jìn)一步詳述的時(shí)間順序和形式給藥。
任選地，治療方法也提供醛糖還原酶(下文稱為酶D)的應(yīng)用，發(fā)現(xiàn)酶D在病人抱怨視覺模糊時(shí)(這種情況發(fā)生在較大部分的病例中)是有用的。
根據(jù)本發(fā)明的治療方法中所用的酶可以以凍干形式在商業(yè)上獲得，并可溶于生理溶液中以使其可用于治療。
每種酶以酶溶液的形式、連續(xù)三天向每只眼睛眼球后注射的方法來給藥，在另外兩個(gè)時(shí)間重復(fù)給藥，每次與上次間隔一個(gè)月時(shí)間(對(duì)于每種酶)。在實(shí)踐中，程序如下-在治療開始時(shí)，連續(xù)三天將酶A的一個(gè)劑量注射到每只眼睛的眼球后組織，在第二和第三個(gè)月重復(fù)此治療；-在第四、第五和第六個(gè)月連續(xù)三天將酶B的一個(gè)劑量注射到每只眼睛的眼球后組織；-在第七、第八和第九個(gè)月連續(xù)三天將酶C的一個(gè)劑量注射到每只眼睛的眼球后組織；-如果需要，然后在接下來的三個(gè)月每個(gè)月連續(xù)三天用酶D繼續(xù)治療，給藥方式與前述完全一樣。
不同酶用于每次注射(用于每只眼睛)的劑量如下
酶A 0.03-0.05U.I.
酶B 5-7U.I.
酶C 7-9U.I.
酶D 7-9U.I.
不同的酶每次注射的優(yōu)選劑量如下酶A 0.04U.I.
酶B 6.67U.I.
酶C 8.00U.I.
酶D 8.00U.I.
這些劑量對(duì)所有的患者保持一致，完全不依賴于類型學(xué)的變化。具體地，這些酶溶液以這樣一種方式配制，使得以上所列的劑量可以包含在0.4ml注射劑中。例如，適用于提供0.4ml注射劑量的含有上述優(yōu)選的酶量的酶溶液如下配制酶A含有10U.I.凍干酶的小瓶，用生理溶液加至100ml。
酶B含有1000U.I.凍干酶的小瓶，用生理溶液加至60ml。
酶C含有2000U.I.凍干酶的小瓶，用生理溶液加至100ml。
酶D含有2000U.I.凍干酶的小瓶，用生理溶液加至100ml。
當(dāng)然，在上述劑量范圍內(nèi)，如果決定改變?nèi)我环N酶的劑量，這些比例應(yīng)該進(jìn)行調(diào)整。
這些酶要按上述的順序給藥，而且注射周期必須不間斷地連續(xù)進(jìn)行。
根據(jù)本發(fā)明的用于治療色素性視網(wǎng)膜炎的試劑盒以適合于給藥的等分部分及相互作用的量包含上述酶a)酶A，在0.4ml生理溶液中含0.03至0.05U.I.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，連續(xù)三天并用于每只眼睛；
b)酶B，從酶A最后一次給藥的下月開始，在0.4ml生理溶液中含5至7U.I.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，用三個(gè)月并用于每只眼睛；c)酶C，從酶B最后一次給藥的下月開始，以0.4ml生理溶液中含7至9U.I.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，用三個(gè)月并用于每只眼睛。
任選地，該試劑盒也可以包含待施用的酶D，從酶C最后一次給藥的下月開始，以0.4ml生理溶液中含5至7U.I.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，用三個(gè)月并用于每只眼睛。
具體地，在每個(gè)試劑盒中，這些酶以凍干形式存在，其含量足以用于至少一個(gè)給藥完整周期，將每種酶分成等分部分，包含足以用于一輪三個(gè)月注射循環(huán)(即十八次注射)或用于一天給藥(即兩次注射)的劑量，而且任選地包含適當(dāng)量的用于組成上述等分部分的生理溶液。具體地，在每個(gè)試劑盒中，不同的酶被分成一個(gè)或多個(gè)等分部分，每個(gè)等分部分以上述優(yōu)選的劑量形式包含0.04U.I.至0.72U.I.的酶A，6.67U.I.至120U.I.的酶B，8U.I.至144U.I.的酶C，和可能地，8U.I.至144U.I.的酶D。也可能存在每種0.4ml至7.2ml生理溶液中的三種或更多種的等分部分。
接受根據(jù)本發(fā)明的治療的患者，其視敏度、視野、顏色感知及視像清晰(清晰度)得到逐步改善。他們的視網(wǎng)膜電流圖一點(diǎn)點(diǎn)好轉(zhuǎn)，最終基本得到恢復(fù)。雖然時(shí)間周期不同，但在所有的患者中，給藥治療都得到了積極結(jié)果。5-8年后的復(fù)查表明，得到的改善是持久的，而且沒有產(chǎn)生任何形式的副作用。
一些實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)證實(shí)了一種假說，即色素性視網(wǎng)膜炎可能起因于改變視網(wǎng)膜代謝的某種酶缺失，這種代謝改變不僅改變了視覺過程，而且促使色素堆積，色素堆積是該疾病的典型特征。
申請(qǐng)者之一在兔子(新西蘭/Fulvo di Borgogna)上進(jìn)行的研究顯示，一些酶的完全抑制引起視網(wǎng)膜電流圖的改變，去極化波減少直至消失，并顯示在眼球后施用谷胱甘肽過氧化物酶(酶A)和氨?；彼岫拿?酶B)后正常跡線的恢復(fù)。其后，通過與沒有患色素性視網(wǎng)膜炎、表面上健康狀況良好的受試者的葡萄糖-6-磷酸脫氫酶和谷胱甘肽過氧化物酶之紅細(xì)胞水平相比較，證明了患有色素性視網(wǎng)膜炎的病人，其葡萄糖-6-磷酸脫氫酶和谷胱甘肽過氧化物酶的紅細(xì)胞水平降低，兩組之間在性別和年齡方面相似。
權(quán)利要求
1.一種用于治療色素性視網(wǎng)膜炎的藥物試劑盒，包含谷胱甘肽過氧化物酶(酶A)，氨酰基脯氨酸二肽酶(酶B)，葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(酶C)，以及任選地，醛糖還原酶(酶D)，以適于給藥的等分部分及相互作用的量存在a)酶A，以0.4ml生理溶液中含0.03至0.05U.I.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，用三個(gè)月并用于每只眼睛；b)酶B，從酶A最后一次給藥的下月開始，以0.4ml生理溶液中含5至7U.L.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，用三個(gè)月并用于每只眼睛；c)酶C，從酶B最后一次給藥的下月開始，以0.4ml生理溶液中含7至9U.I.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，用三個(gè)月并用于每只眼睛；d)酶D，從酶C最后一次給藥的下月開始，以0.4ml生理溶液中含5至7U.I.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，用三個(gè)月并用于每只眼睛。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的試劑盒，其中酶A的濃度是0.4ml生理溶液中含0.04U.I.，酶B的濃度是0.4ml生理溶液中含6.67U.I.，酶C的濃度是0.4ml生理溶液中含8U.I.，任選的酶D的濃度等于0.4ml生理溶液中含8U.I.。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的試劑盒，其中所述試劑盒包含凍干形式的所述酶，其含量足以用于至少一組從a)到c)和任選地d)的給藥，所述酶分裝入等分部分，對(duì)每一種酶而言，等分部分包含足夠組成所述等分部分的酶量。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3的任意一項(xiàng)的試劑盒，其中所述試劑盒包含凍干形式的分裝入一個(gè)或多個(gè)等分部分的所述酶，每個(gè)中含有0.04U.I.至0.72U.I.的酶A，0.67至120U.I.的酶B，8至144U.I.的酶C，以及任選地，8至144U.I.的酶D，并且，任選地，包含每個(gè)為0.4ml至7.2ml生理溶液的三個(gè)或更多個(gè)等分部分。
5.谷胱甘肽過氧化物酶(酶A)、氨?；彼岫拿?酶B)、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(酶C)以及任選地，醛糖還原酶(酶D)的用途，用于制備以注射至眼球后組織的方式治療色素性視網(wǎng)膜炎的試劑盒形式的藥物組合物，所述試劑盒含有等分部分形式的、適于給藥的相互作用的量的所述酶a)酶A，以0.4ml生理溶液中含0.03至0.05U.I.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，用三個(gè)月并用于每只眼睛；b)酶B，從酶A最后一次給藥的下月開始，以0.4ml生理溶液中含5至7U.I.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，用三個(gè)月并用于每只眼睛；c)酶C，從酶B最后一次給藥的下月開始，以0.4ml生理溶液中含7至9U.I.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，用三個(gè)月并用于每只眼睛；d)酶D，從酶C最后一次給藥的下月開始，以0.4ml生理溶液中含5至7U.I.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，用三個(gè)月并用于每只眼睛。
6.根據(jù)權(quán)利要求6的酶的用途，其中酶A的濃度是0.4ml生理溶液中含0.04U.I.，酶B的濃度是0.4ml生理溶液中含6.67U.I.，酶C的濃度是0.4ml生理溶液中含8U.I.，任選的酶D的濃度等于0.4ml生理溶液中含8U.I.。
7.根據(jù)權(quán)利要求5或6的酶的用途，其中所述試劑盒包含凍干形式的所述酶，其量足以用于至少一組從a)到c)和任選地d)的給藥，所述酶分裝入等分部分，對(duì)每一種酶而言，等分部分包含足夠組成所述等分部分的酶量。
8.根據(jù)前述權(quán)利要求的任意一項(xiàng)的酶的用途，其中所述試劑盒包含以凍干形式分裝入一個(gè)或多個(gè)等分部分的所述酶，每個(gè)含有0.04U.I.至0.72U.I.的酶A，0.67至120U.I.的酶B，8至144U.I.的酶C，以及任選地，8至144U.I.的酶D，并且，任選地，包含每個(gè)為0.4ml至7.2ml生理溶液的三個(gè)或更多個(gè)等分部分。
9.一種以注射至眼球后組織的方式實(shí)現(xiàn)如下物質(zhì)給藥治療色素性視網(wǎng)膜炎的方法a)酶A，以0.4ml生理溶液中含0.03至0.05U.I.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，用三個(gè)月并用于每只眼睛；b)酶B，從酶A最后一次給藥的下月開始，以0.4ml生理溶液中含5至7U.I.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，用三個(gè)月并用于每只眼睛；c)酶C，從酶B最后一次給藥的下月開始，以0.4ml生理溶液中含7至9U.I.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，用三個(gè)月并用于每只眼睛；d)任選地，酶D，從酶C最后一次給藥的下月開始，以0.4ml生理溶液中含5至7U.I.的濃度連用三天，以每月一次的間隔，用三個(gè)月并用于每只眼睛。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的方法，其中酶A的濃度是0.4ml生理溶液中含0.04U.I.，酶B的濃度是0.4ml生理溶液中含有6.67U.I.，酶C的濃度是0.4ml生理溶液中含8U.I.，任選的酶D的濃度等于0.4ml生理溶液中含8U.I.。
全文摘要
一種用于治療色素性視網(wǎng)膜炎的試劑盒，包含谷胱甘肽過氧化物酶，氨酰基脯氨酸二肽酶，葡萄糖－6－磷酸脫氫酶，以及任選地醛糖還原酶，其以適合于按預(yù)定時(shí)間順序施用酶的等分部分及相互作用的量存在。
文檔編號(hào)A61K38/48GK1671411SQ02829703
公開日2005年9月21日 申請(qǐng)日期2002年10月1日 優(yōu)先權(quán)日2002年10月1日
發(fā)明者保拉·阿曼納蒂, 羅伯托·焦?fàn)栠_(dá)尼 申請(qǐng)人:保拉·阿曼納蒂, 羅伯托·焦?fàn)栠_(dá)尼