專利名稱：一種醋酸阿肽地爾緩釋微球制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種緩釋微球制劑領(lǐng)域，具體涉及一種含醋酸阿肽地爾緩釋微球制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
阿肽地爾又稱血管活性腸肽，是一種含有觀個氨基酸的多肽，分子式為C147H238N44O42S,分子量為3325. 80，其氨基酸機構(gòu)如下所示His-Ser-Asp-Ala-Val-Phe-Thr-Asp-Asn-Tyr-Thr-Arg-Leu-Arg-Lys-Gln-Met-Ala_Val_Lys-Lys Tyr-Leu-Asn-Ser-Ile-Leu—Asn。阿肽地爾是從小腸粘膜提取的一種直鏈肽，其氨基酸排列為一部分胰高血糖素(glucagon)和催胰液素(secretin)。具有可使血管舒張降低血壓的作用，從肝動脈開始，對內(nèi)臟血管具有較強的作用能力。對腸液的分泌具有很強的促進作用，對胃液的分泌可起抑制作用；對消化道平滑肌的收縮產(chǎn)生抑制作用。已經(jīng)在美國和歐洲國家，在人類和動物的控制式實驗中使用超過20年。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種能有效延長醋酸阿肽地爾在體內(nèi)作用時間的醋酸阿肽地爾緩釋微球制劑，該制劑能減少注射次數(shù)和藥物耐受性，提高病人的適應(yīng)性，方便臨床使用和患者接受。另外，它還消除了普通注射劑多次給藥產(chǎn)生的體內(nèi)藥物濃度峰谷現(xiàn)象，可獲得平穩(wěn)長時間的有效濃度，降低了毒副作用，并且總給藥劑量減少。另外，本發(fā)明還提供了一種醋酸阿肽地爾緩釋微球制劑的制備方法。本發(fā)明制備了一種含醋酸阿肽地爾藥物的注射用的緩釋微球制劑，其特征在于，所述制劑中的醋酸阿肽地爾緩釋微球含占微球重量0.01%-30% (w/w)的醋酸阿肽地爾，占微球重量70% -99. 99%的分子量為5，000-100，000道爾頓的可生物降解且具生物相容性的高分子材料，以及占微球重量0% -10%的藥學(xué)上可接受的其他輔料，所述的緩釋微球大小為1-100 μ m,平均粒徑為5-50 μ m。所述可生物降解且具生物相容性的高分子材料，可選自聚丙交酯(PLA)、聚乙交酯(PGA)、聚丙交酯-乙交酯(PLGA)、聚氰基丙烯酸烷酯、聚已內(nèi)酯(PCL)、聚羥丁酸(PHB)、聚羥戊酸(PVA)、聚癸酸(PDA)、聚酸酐、聚羥基丁酸酯-羥基戊酸酯、聚乳酸-聚乙二醇、聚羥乙酸-聚乙二醇其中的一種或其混合物，優(yōu)選聚丙交酯-乙交酯。所述的丙交酯和乙交酯分子量范圍均在5，000-20，000道爾頓，丙交酯和乙交酯的比例范圍是25 75-75 25。所述的藥學(xué)上可接受的其他輔料包括乳化穩(wěn)定劑及賦形劑，所述乳化穩(wěn)定劑選自聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚甲基丙烯酸鈉、聚丙烯酸鈉、羧甲基纖維素鈉等。乳化穩(wěn)定劑優(yōu)選聚乙烯醇，其用量范圍為0. -5%。賦形劑選自山梨醇、甘露醇、乳糖、蔗糖、甘氨酸中的一種或其混合物，優(yōu)選甘露醇，其用量范圍為0.1%-5%。
另外，本發(fā)明還提供了制備含醋酸醋酸阿肽地爾藥物的方法，第一步，首先將醋酸阿肽地爾溶于明膠水溶液或甘油中，得到藥物溶液，為內(nèi)水相；另將聚丙交酯-乙交酯溶于有機溶劑中，得油相；將油相和內(nèi)水相置于攪拌器內(nèi)，高速乳勻，形成W/0乳液；然后將W/0乳液加入到聚乙烯醇水溶液中，高速乳勻，形成w/0/w復(fù)乳；第二步，將W/0/W復(fù)乳移入聚乙烯醇水溶液中，低速攪拌，離心，收集所得微球，用蒸餾水洗滌多次后，再離心收集，冷凍干燥，即得醋酸阿肽地爾緩釋微球。


以釋藥時間為橫坐標(biāo)，累計釋放度為縱坐標(biāo)，繪制實施例1、2、3制備的醋酸阿肽地爾緩釋微球制劑體外釋藥曲線圖，結(jié)果見說明書附圖1、2、3。
具體實施例方式下面將結(jié)合實施例對本發(fā)明的實施方案進行詳細描述，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員將會理解，下列實施例僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限定本發(fā)明的范圍。實施例1稱取35mg醋酸阿肽地爾溶于明膠水溶液中，得內(nèi)水相；稱取IOOOmg聚丙交酯-乙交酯(聚合比例=40 60，分子量20000)溶于二氯甲烷中，得油相。配制濃度為3%的聚乙烯醇溶液50ml和濃度為0. 3%的聚乙烯醇溶液500ml。先將醋酸阿肽地爾溶液移入溶有聚丙交酯-乙交酯的二氯甲烷溶液中，室溫下置于乳化分散機上高速O5000rpm)乳勻20秒，然后將所得的W/0型乳劑轉(zhuǎn)移至50ml濃度為3 %的聚乙烯醇溶液中，置于乳化分散機上以5000rpm的轉(zhuǎn)速，乳勻1分鐘，得W/0/W型復(fù)乳，移入500ml0. 3 %的聚乙烯醇溶液中，置于機械攪拌器上，以500rpm的轉(zhuǎn)速低速攪拌2. 5小時，離心，收集所得微球，用蒸餾水多次洗滌，然后再離心收集，冷凍干燥即得，所得微球粒徑為10-50 μ m，平均粒徑為30 μ m。精密稱取實施例1制備的載藥醋酸阿肽地爾緩釋微球4. 5mg溶于ImL 二氯甲烷，分次加入4mL和2mL重蒸餾水提取藥物，渦旋萃取lmin，25000rpm離心2min，吸取合并上清液，移取上清液0. 5mL以重蒸餾水定容至10mL，進樣20 μ 1，HPLC測定含量，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算得實施例1制備的載藥醋酸阿肽地爾緩釋微球中藥物含量，據(jù)此計算收率和包封率載藥量分別是78. 5%和68. 8%。實施例2稱取20mg醋酸阿肽地爾溶于蒸餾水中，得內(nèi)水相；稱取SOOmg聚丙交酯-乙交酯(聚合比例=30 70，分子量15000)溶于二氯甲烷中，得油相。配制濃度為5%的聚乙烯醇溶液50ml和濃度為0. 5%的聚乙烯醇溶液500ml。先將醋酸阿肽地爾溶液移入溶有聚丙交酯-乙交酯的二氯甲烷溶液中，室溫下置于乳化分散機上高速(30000rpm)乳勻20秒，然后將所得的W/0型乳劑轉(zhuǎn)移至50ml濃度為5%的聚乙烯醇溶液中，置于乳化分散機上以5000rpm的轉(zhuǎn)速，乳勻1分鐘，得W/0/W型復(fù)乳，移入500ml0. 5%的聚乙烯醇溶液中，置于機械攪拌器上，以500rpm的轉(zhuǎn)速低速攪拌3小時，離心，收集所得微球，用蒸餾水多次洗滌，然后再離心收集，冷凍干燥即得，所得微球粒徑為20-60 μ m，平均粒徑為40 μ m。精密稱取實施例2制備的載藥醋酸阿肽地爾緩釋微球4. 5mg溶于ImL 二氯甲烷，分次加入4mL和2mL重蒸餾水提取藥物，渦旋萃取lmin，15000rpm離心3min，吸取合并上清液，移取上清液0. 5mL以重蒸餾水定容至10mL，進樣20 μ 1，HPLC測定含量，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算得實施例2制備的載藥醋酸阿肽地爾緩釋微球中藥物含量，據(jù)此計算收率和包封率載藥量分別是82. 9%和81. 3%。實施例3稱取IOmg醋酸阿肽地爾溶于蒸餾水中，得內(nèi)水相；稱取600mg聚丙交酯-乙交酯(聚合比例=60 40)溶于二氯甲烷中，得油相。配制濃度為5%的聚乙烯醇溶液50ml和濃度為0. 5%的聚乙烯醇溶液500ml。先將醋酸阿肽地爾溶液移入溶有聚丙交酯-乙交酯的二氯甲烷溶液中，室溫下置于乳化分散機上高速(30000rpm)乳勻30秒，然后將所得的W/O型乳劑轉(zhuǎn)移至50ml濃度為5 %的聚乙烯醇溶液中，置于乳化分散機上以5000rpm的轉(zhuǎn)速，乳勻1分鐘，得W/0/W型復(fù)乳，移入500ml0. 5 %的聚乙烯醇溶液中，置于機械攪拌器上，以500rpm的轉(zhuǎn)速低速攪拌2小時，離心，收集所得微球，用蒸餾水多次洗滌，然后再離心收集，冷凍干燥即得，所得微球粒徑為30-80 μ m,平均粒徑為50 μ m。精密稱取實施例3制備的載藥醋酸阿肽地爾緩釋微球4. 5mg溶于ImL 二氯甲烷，分次加入4mL和2mL重蒸餾水提取藥物，渦旋萃取lmin，15000rpm離心3min，吸取合并上清液，移取上清液0. 5mL以重蒸餾水定容至10mL，進樣20 μ 1，HPLC測定含量，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算得實施例3制備的載藥醋酸阿肽地爾緩釋微球中藥物含量，據(jù)此計算收率和包封率載藥量分別是62. 8%和69. 7%。實施例4分別對對實施例1、2、3制備的醋酸阿肽地爾緩釋微球制劑進行體外釋藥考察，方法如下分別精密稱取若干份實施例1、2、3制備的醋酸阿肽地爾緩釋微球，每份5mg，置于35個IOmL的西林瓶中，每份加入含有0. IM的Na2HPO4和0. IM的NaH2PO4的ρΗ7· 4的磷酸緩沖溶液，置于37°C恒溫水浴中，分別在第0、1、4、8、12、16、20、Μ、28、35天取出，離心，重新分散在二氯甲烷醋酸緩沖液(1 lv/v)，色譜柱為C18 50X2mm，流動相為1 1的含有0. 三氟醋酸和含有三氟醋酸的50%乙腈混合溶液，流速l.Oml/min，在MOnm處檢測，測定微球內(nèi)殘余藥量，按照外標(biāo)法計算累計釋放度，實施例1、2、3制備的醋酸阿肽地爾緩釋微球制劑的體外釋藥測定結(jié)果如表1所示表1實施例1、2、3制備的醋酸阿肽地爾緩釋微球制劑的體外釋藥實驗結(jié)果
樣品累計釋放度(％)實施0天1天4天8天12天16天20天^天28天35天例1026.530.432.841.646.861.971.886.296.4實施0天1天4天8天12天16天20天”天28天35天例2033.837.443.949.258.774.585.192.293.8實施0天1天4天8天12天16天20天24天28天35天例3032.536.442.446.255.169.278.486.294.8 以釋藥時間為橫坐標(biāo)，累計釋放度為縱坐標(biāo)，繪制實施例1、2、3制備的醋酸阿肽地爾緩釋微球制劑體外釋藥曲線，結(jié)果見說明書附圖1、2、3。
權(quán)利要求
1.一種醋酸阿肽地爾緩釋微球制劑，其特征是所述制劑中的醋酸阿肽地爾緩釋微球含占微球重量0. 01% -30% (w/w)的醋酸阿肽地爾，占微球重量70% -99. 99%的分子量為5，000-100，000道爾頓的可生物降解且具生物相容性的高分子材料，以及占微球重量0% -10%的藥學(xué)上可接受的其他輔料，所述的緩釋微球大小為1-100μπι，平均粒徑為5-50 μ m0
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的醋酸阿肽地爾緩釋微球制劑，其特征是所述可生物降解且具生物相容性的高分子材料，可選自聚丙交酯(PLA)、聚乙交酯(PGA)、聚丙交酯-乙交酯(PLGA)、聚氰基丙烯酸烷酯、聚己內(nèi)酯(PCL)、聚羥丁酸(PHB)、聚羥戊酸(PVA)、聚癸酸(PDA)、聚酸酐、聚羥基丁酸酯-羥基戊酸酯、聚乳酸-聚乙二醇、聚羥乙酸-聚乙二醇其中的一種或其混合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的醋酸阿肽地爾緩釋微球制劑，其特征是所述可生物降解且具生物相容性的高分子材料為聚丙交酯-乙交酯，分子量范圍均在5，000-20, 000道爾頓，丙交酯和乙交酯的比例范圍是25 75-75 25。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的醋酸阿肽地爾緩釋微球制劑，其特征是所述的丙交酯和乙交酯的比例優(yōu)選50 50。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的醋酸阿肽地爾緩釋微球制劑，其特征是所述的藥學(xué)上可接受的其他輔料包括甘油、明膠及乳化穩(wěn)定劑及賦形劑，所述乳化穩(wěn)定劑選自聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚甲基丙烯酸鈉、聚丙烯酸鈉、羧甲基纖維素鈉、多糖等。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的醋酸阿肽地爾緩釋微球制劑，其特征是乳化穩(wěn)定劑優(yōu)選聚乙烯醇，其用量范圍為0. -5%。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的醋酸阿肽地爾緩釋微球制劑，其特征是賦形劑選自山梨醇、甘露醇、乳糖、蔗糖、甘氨酸中的一種或其混合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的醋酸阿肽地爾緩釋微球制劑，其特征是賦形劑優(yōu)選甘露醇，其用量范圍為0. 1% -5%。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的醋酸阿肽地爾緩釋微球制劑的制備方法，其特征在于采用復(fù)乳-液中干燥法，分兩步制備微球，其特征是第一步，首先將醋酸阿肽地爾溶于明膠水溶液或甘油中，得到藥物溶液，為內(nèi)水相 ’另將聚丙交酯-乙交酯溶于有機溶劑中，得油相；將油相和內(nèi)水相置于攪拌器內(nèi)，高速乳勻，形成W/0乳液；然后將W/0乳液加入到聚乙烯醇水溶液中，高速乳勻，形成W/0/W復(fù)乳；第二步，將w/0/w復(fù)乳移入聚乙烯醇水溶液中，低速攪拌，離心，收集所得微球，用蒸餾水洗滌多次后，再離心收集，冷凍干燥，即得醋酸阿肽地爾緩釋微球。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的醋酸阿肽地爾緩釋微球制備方法，其特征是所述的有機溶劑包括二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、乙醚、丙酮、二氧六環(huán)或四氫呋喃等，優(yōu)選二氯甲烷。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種醋酸阿肽地爾緩釋微球制劑及其制備方法。該緩釋微球包括以微球重量計，占微球重量0.01％-15％(w/w)的阿肽地爾，占微球重量85％-99.99％的分子量為5,000-300,000道爾頓的可生物降解且具生物相容性的高分子材料，以及占微球重量0％-10％的藥學(xué)上可接受的乳化穩(wěn)定劑及賦形劑等其他輔料。本發(fā)明的緩釋微球平均粒徑為5-100μm，包封率大于92％。該緩釋微球緩釋期長達30天以上，明顯減少用藥次數(shù)，提高了醋酸阿肽地爾的生物利用度，降低了藥物的毒副作用，有利于臨床治療。
文檔編號A61K38/26GK102552169SQ201210037028
公開日2012年7月11日 申請日期2012年2月17日 優(yōu)先權(quán)日2012年2月17日
發(fā)明者姚志勇, 支欽, 李新宇 申請人:深圳市健元醫(yī)藥科技有限公司