專利名稱：用于皮膚應(yīng)用的至少一種維生素e成分和酪氨酸酶抑制劑協(xié)同相互作用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及分子生物學(xué)和生物化學(xué)領(lǐng)域，具體地，與皮膚疾病相關(guān)的生物化學(xué)和分子生物學(xué)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
皮膚色素沉著是抗有害的紫外輻射的重要的保護機制。例如，在疾病或損傷的情況下，人的皮膚可改變顏色，造成更深的皮膚色調(diào)或顏色(色素沉著)。多數(shù)形式的色素沉著由體內(nèi)過量產(chǎn)生的黑色素而引起，這個物質(zhì)是顏色(色素)的原因。在體內(nèi)，色素黑色素的形成發(fā)生在皮膚黑素細胞的黑素體內(nèi)(Mason, H. S.，1949，J Biol Chem, 181, 803-12;Fitzpatrick,T.B.等，1950，Science, 112，223-5)。 這個過程由增色酶，例如酪氨酸酶和酪氨酸酶相關(guān)蛋白1/2 (TRP1/2)調(diào)節(jié)(Chen, & Chavin, W. 1966，Nature, 210，35-7)。具體地，這些酶促進了限制黑色素生物合成中兩步反應(yīng)的速率L-酪氨酸羥基化為3，4-二羥基苯丙氨酸(DOPA)及其后來氧化成 多巴醌 (Korner, A. & Pawelek, J.，1982，Science, 217，1163-5)。因此酪氨酸酶活性的調(diào)節(jié)代表皮膚色素沉著的關(guān)鍵步驟(Kornerand Pawelek, 1982)。此外，由于皮膚色素沉著(黑素生成過程)是黑色素瘤病的標(biāo)志，酪氨酸酶活性的控制可提供治療患有這種類型癌癥的患者的基礎(chǔ)。
例如與色素沉著相關(guān)的皮膚疾病難于治療，尤其在深膚色的個體或其它皮膚相關(guān)疾病中。盡管有很多可用的有效的治療方法，但是有與目前可用的藥物相關(guān)的潛在的顯著的副作用。用于治療皮膚疾病的常用藥物包含對苯二酚、羥基酚類化學(xué)品，它們抑制酶酪氨酸酶，因而減少DOPA向黑色素的轉(zhuǎn)化。在這方面，其它一些可能的作用機制可包含黑素細胞的破壞、黑素體的降解，及DNA和RNA合成的抑制。目前正在研究和開發(fā)其它酚類制劑， 例如N-乙?；?4-胱氨基苯酹(Nacety 1-4-cystaminylphenol) (NCAP)。還使用包括維甲酸、阿達帕林、局部用皮質(zhì)留類、壬二酸、熊果苷、曲酸和甘草提取物的非酚類制劑治療皮膚疾病。
多數(shù)已知的治療皮膚疾病的方法對患者具有嚴重的副作用。因此，本發(fā)明的目的為進一步探索治療皮膚疾病的方法。發(fā)明內(nèi)容
—個方面，本發(fā)明提供了一種治療皮膚疾病或預(yù)防皮膚疾病發(fā)生或改變皮膚色素沉著的方法。所述方法包括以藥學(xué)有效量的組合物對患者給藥，所述組合物包含至少一種維生素E成分和至少一種與所述維生素E成分不同的另外的具有抗酪氨酸酶活性和/或抗黑素生成活性的成分。
另一方面，本發(fā)明提供了一種藥物組合物，包含至少一種維生素E成分和至少一種與所述維生素E成分不同的具有抗酪氨酸酶活性和/或抗黑素生成活性的附加成分。所述至少一種與所述維生素E成分不同的附加成分選自由抗氧化劑、酪氨酸酶抑制劑、多酚、 維生素、抗酪氨酸酶RNA干擾劑、抗酪氨酸酶肽或它們的混合物組成的組中。
再一方面，本發(fā)明提供了一種包含上面限定的藥物組合物的藥膏或乳脂。
另一方面，本發(fā)明提供了一種產(chǎn)品，包含酰化3，4- 二氫-2，5，7，8-四甲基-2-(4，8，12-三甲基-11-三癸烯基)-2Η-1-苯并吡喃-6-醇，或由?；?，4- 二氫-2，5，7，8-四甲基-2-(4, 8，12-三甲基-11-三癸烯基)_2Η_1_苯并吡喃_6_醇組成。


在與非限制的實施例和附圖結(jié)合的同時參考的詳細說明考慮，本發(fā)明更易于理解，其中
圖1說明了顯示生育三烯酚(貝塔Τ3)、Y-生育三烯酚(ΥΤ3)、δ-生育三烯酚(ST3)、曲酸和α熊果 苷對Β16黑素瘤細胞的處理分別在高濃度下抑制Β16黑素瘤細胞活性的實驗結(jié)果。在處理后24小時用MTT細胞活性分析確定在Β16黑素瘤細胞中，Α)分別的α生育三烯酚UT3)和β-生育三烯酚(βΤ3)，B)分別的Y-生育三烯酚UT3) 和δ -生育三烯酚(δ Τ3)，C)分別的曲酸和乳酸鈉和D) α熊果苷的抗增殖作用。
圖2說明在分別用Α) δ -生育二稀酌· ( δ Τ3)和Y _生育二稀酌· ( Y T 3) , B) β _生育三烯酚(βΤ3)、曲酸和α熊果苷處理的Β16黑素瘤細胞中細胞凋亡分子的免疫印跡結(jié)果。注意分別用生育三烯酚、Y-生育三烯酚、S-生育三烯酚、曲酸和α熊果苷對Β16 黑素瘤細胞的處理以隨劑量變化的方式誘導(dǎo)臨界的細胞凋亡分子(裂解的半胱天冬酶3和 PARP)ο
圖3說明了顯示在分別用α -生育酚(α TP)、α -生育三烯酚(α Τ3)、β -生育三烯酚(β Τ3)、δ -生育三烯酚(δ T 3)、Y -生育三烯酚(Y T 3)、乳酸鈉和曲酸處理的Β16 黑素瘤細胞中的酪氨酸酶活性的實驗結(jié)果。Α)在分別用δ-生育三烯酚和Y-生育三烯酚、乳酸鈉、曲酸、α-生育酚(αΤΡ)對Β16黑素瘤細胞的處理后沒有觀察到酪氨酸酶mRNA 的變化。B)分別用α -生育酚(α TP)、α -生育三烯酚(α Τ3)、β -生育三烯酚(β Τ3))、Y-生育三烯酚(Y T 3)和δ -生育三烯酚(δ T 3)處理的Β16黑素瘤細胞中酪氨酸酶蛋白表達的免疫印跡結(jié)果。用20μΜ的ΥΤ3和δ Τ3處理Β16黑素瘤細胞抑制了酪氨酸酶蛋白表達。注意δ T3是最有效的酪氨酸酶蛋白的抑制劑。
圖4說明了顯示在分別用棕櫚富含生育三烯酚的部分(棕櫚TRF)、棕櫚TRF乙酸酯、曲酸和乳酸鈉、Y -生育三烯酚U T 3)、δ -生育三烯酚(δ T 3)、Υ -生育三烯酚乙酸酯(Y Τ3乙酸酯)和δ-生育三烯酚乙酸酯(δ T 3乙酸酯)處理的Β16黑素瘤細胞中的酪氨酸酶活性的免疫印跡結(jié)果。Α)分別用20 μ M的棕櫚TRF和棕櫚TRF乙酸酯處理Β16細胞抑制了酪氨酸酶的蛋白表達。B)分別用20μ M的曲酸和乳酸鈉處理Β16黑素瘤細胞沒有抑制酪氨酸酶的蛋白表達。只有在分別用高很多的濃度的曲酸和乳酸鈉處理時觀察到酪氨酸酶的抑制。C)分別用20 μ M的Y T 3乙酸酯和δΤ3乙酸酯處理Β16黑素瘤細胞抑制了酪氨酸酶蛋白表達。
圖5說明了顯示用各種濃度的曲酸、乳酸鈉、α-熊果苷和Y-生育三烯酚琥珀酸酯(Y Τ3琥珀酸酯)處理的Β16黑素瘤細胞中的酪氨酸酶活性的免疫印跡結(jié)果。Α)用多達100 μ M的曲酸和乳酸鈉分別處理Β16細胞未抑制酪氨酸酶蛋白的表達。B)用多達 60 μ M的熊果苷和Y T 3琥珀酸酯分別處理Β16細胞未抑制酪氨酸酶蛋白的表達。C)只有在高很多的濃度(ImM)處理時觀察到α熊果苷對酪氨酸酶的抑制。
圖6說明了顯示分別用δ-生育三烯酚(δ Τ3)、Y-生育三烯酚U T 3)、乳酸鈉、曲酸、α -生育酚(α TP)和棕櫚富含生育三烯酚的部分(棕櫚TRF)處理超過24小時和 48小時的Β16黑素瘤細胞中的酪氨酸活性的免疫印跡結(jié)果。在48小時的培養(yǎng)周期后，在 Β16細胞中Y Τ3和δ T 3對酪氨酸酶的抑制增強。相反地，在48小時后，乳酸鈉和曲酸的抗酪氨酸酶活性減小。值得注意的是，與Y Τ3和δ T 3相比，20 μ M的棕櫚TRF具有更低的抗酪氨酸酶活性，而a TP對酪氨酸酶的抑制沒有影響。
圖7Α說明了分別用20 μ M的棕櫚富含生育三烯酚的部分(棕櫚TRF)、20 μ M的Y-生育三烯酚(Y -Τ3)和20 μ M的δ -生育三烯酚(δ -Τ3)處理后，在第4天和第15天測量的Β16黑素瘤細胞的隨時間變化的酪氨酸酶活性。柱形圖，3次檢驗測量的平均值；條， 標(biāo)準(zhǔn)方差。
圖7Β說明了分別用20 μ M的Υ -生育三烯酚U Τ3)、20 μ M的δ -生育三烯酚 (δ -Τ3)、20 μ M的a-生育酚(a TP)、3. 5mM的曲酸和4. 5mM的乳酸鈉處理后，在第5天和第9天測量的B16黑素瘤細胞的隨時間變化的酪氨酸酶活性。注意Y T3在第9天顯著地抑制了酪氨酸酶的活性。
圖7C說明了分別用20 μ M的Υ -生育三烯酚U Τ3)、20 μ M的δ -生育三烯酚 (δ -Τ3)、20 μ M的a-生育酚(a TP)、3. 5mM的曲酸和4. 5mM的乳酸鈉處理后，在第5天和第9天測量的B16黑素瘤細胞的隨時間變化的黑色素合成的抑制。注意直到第9天YT3 顯著地抑制了黑色素含量。
圖8A說明了分別用20 μ M的Υ -生育三烯酚U Τ3)、20 μ M的δ -生育三烯酚 (δ -Τ3)、20 μ M的富含生育酚部分92%(Τ92)、3· 5mM的曲酸和4. 5mM的乳酸鈉和ImM熊果苷處理后，在第5天測量的B16黑素瘤細胞的酪氨酸酶活性。
圖8B說明了分別用20 μ M的Υ -生育三烯酚U Τ3)、20 μ M的δ -生育三烯酚 (δ -Τ3)、20 μ M的富含生育酚部分92%(Τ92)、3· 5mM的曲酸和4. 5mM的乳酸鈉和ImM熊果苷處理后，在第5天測量的B16黑素瘤細胞的黑色素含量。
圖9說明了分別用Y -生育三烯酚U T3)、δ -生育三烯酚(δ -Τ3)、α -生育三烯酚(α-Τ3)、富含生育酚部分92%(Τ92)、曲酸和乳酸鈉處理后，Β16黑素瘤細胞中抗色素沉著的效力。繼代培養(yǎng)Β16細胞，用ΥΤ3和δΤ3、α TP、富含生育三烯酚部分92%、曲酸和乳酸鈉處理，然后收獲。給細胞顆粒照相。應(yīng)注意到，用20μΜ的ΥΤ3和δΤ3、Τ92，和 3. 5mM的曲酸處理Β16細胞導(dǎo)致更少的細胞色素沉著。相反地，20 μ M的α ΤΡ、曲酸和乳酸鈉產(chǎn)生具有與對照相當(dāng)?shù)纳爻林降募毎w粒。
圖10說明了分別用α -生育酚(α TP)、Y -生育三烯酚U Τ3)、δ -生育三烯酚 (S-T3)、富含生育酚部分92%(Τ92)和熊果苷處理后，Β16黑素瘤細胞中抗色素沉著的效力。繼代培養(yǎng)Β16細胞，用ΥΤ3和δΤ3、αΤΡ、富含生育三烯酚部分92% (Τ92)和α熊果苷處理，然后收獲。給細胞顆粒照相。注意到，用20μΜ的ΥΤ3和δΤ3、Τ92和ImM的α 熊果苷處理Β16細胞導(dǎo)致更少的細胞色素沉著。相反地，20μΜ的αΤΡ、α熊果苷產(chǎn)生具有與對照相當(dāng)?shù)纳爻林降募毎w粒。
圖11說明了在裸鼠中抗色素沉著效力和腫瘤的縮小，其中將預(yù)處理的Β16黑素瘤細胞異體移植到裸鼠的側(cè)腹。將用20 μ M的Υ -生育三烯酚(Y T 3)預(yù)處理I周的5X IO5 的Β16細胞異體移植到裸鼠的側(cè)腹。然后，以50mg/kg/天的劑量補充YT3兩周。在兩周的處理結(jié)束時拍攝實體瘤的照片。
圖12說明了在裸鼠中抗色素沉著效力和腫瘤的縮小，其中將預(yù)處理的Β16黑素瘤細胞異體移植到裸鼠的側(cè)腹。將分別用20 μ M的δ -生育三烯酚(δ T 3)和棕櫚富含生育三烯酚部分92%(Τ92)預(yù)處理I周的5Χ IO5的Β16細胞移植到裸鼠的側(cè)腹。然后，以50mg/ kg/天的劑量分別補充δ Τ3和Τ92兩周。在兩周的處理結(jié)束時拍攝實體瘤的照片。
圖13說明分別用Y -生育三烯酚(Y Τ3)、δ -生育三烯酚(δ Τ3)和棕櫚富含生育三烯酚部分(棕櫚TRF)處理的裸鼠的腫瘤大小。在實驗的開始和結(jié)束時測量腫瘤大小 。
圖14說明了在人體試驗中檢驗的棕櫚富含生育三烯酚部分(TRF)的降低色素沉著的性質(zhì)。用含2%的棕櫚TRF的Kose Prime乳脂處理受試者I個月的前后，拍攝受試者臉上老人斑。對照受試者未顯示老人斑的改善(n=13)。
圖15A說明了在用棕櫚富含生育三烯酚部分92%(T92)、Y -生育三烯酚(Y T 3)、 δ -生育三烯酚(δ T 3)和Τ92乙酸酯(T92Ac)預(yù)處理，然后暴露于UV 10分鐘(短波和長波UV)的Β16黑素瘤細胞中，UV對Β16黑素瘤細胞的酪氨酸酶活性的影響。柱形圖，3次檢驗測量的平均值；條，標(biāo)準(zhǔn)方差。
圖15Β說明了在用棕櫚富含生育三烯酚部分92%(Τ92)、Y -生育三烯酚(Y T 3)、 δ -生育三烯酚(δ T 3)和Τ92乙酸酯(T92Ac)預(yù)處理，然后暴露于UV 10分鐘(短波和長波UV)的Β16黑素瘤細胞中，UV對黑色素含量的影響。柱形圖，3次檢驗測的平均值；條，標(biāo)準(zhǔn)方差。注意到，ΥΤ3、δ Τ3和Τ92顯著地抑制黑色素的含量。柱形圖，3次檢驗測的平均值；條，標(biāo)準(zhǔn)方差。
圖16Α說明了顯示在不同的時間段內(nèi)Β16黑素瘤細胞活性的實驗結(jié)果。暴露于UV 超過60分鐘誘導(dǎo)Β16細胞的凋亡。
圖16Β說明了在暴露于UV 10分鐘、60分鐘和12小時后在Β16黑素瘤細胞中細胞凋亡分子的免疫印跡結(jié)果。注意到，Β16黑素瘤細胞暴露于UV 12小時誘導(dǎo)臨界的細胞凋亡分子(裂解的半胱天冬酶3和PARP)。
圖16C至E說明了用Y -生育三烯酚(Y Τ3)、δ -生育三烯酚(δ T 3)、棕櫚富含生育三烯酚部分92% (棕櫚TRF)和棕櫚富含生育三烯酚部分乙酸酯(棕櫚TRF乙酸酯)處理的Β16細胞暴露于UV I分鐘、10分鐘、30分鐘和60分鐘后酪氨酸酶蛋白表達的效果。YT 3、δΤ3和棕櫚TRF顯著地抑制了暴露于UV的Β16細胞中的酪氨酸酶蛋白表達。
圖17Α說明了與單獨使用一種制劑相比，用棕櫚富含生育三烯酚部分92% (棕櫚 TRF)和曲酸處理的Β16黑素瘤細胞中酪氨酸酶活性和黑色素含量的協(xié)同效應(yīng)。用20 μ M 的棕櫚富含生育三烯酚部分92%(棕櫚TRF)，及O. 05%的乳酸鈉(4. 5mM)或曲酸(3. 5mM)中的一種處理B16細胞24小時。共處理后對酪氨酸酶活性和黑色素含量的抑制顯著大于單獨用任一種處理的細胞。
圖17B說明了與單獨使用一種制劑相比，顯示用Y-生育三烯酚U T3)，及曲酸或乳酸鈉處理的B16黑素瘤細胞中酪氨酸酶蛋白表達的協(xié)同效應(yīng)的免疫印跡結(jié)果。根據(jù)這個結(jié)果，5μ M的Υ Τ3與ImM的乳酸鈉或曲酸的共處理對酪氨酸酶蛋白抑制的增強。
圖17C說明了與單獨使用一種制劑相比，顯示用δ-生育三烯酚(δ Τ3)，及曲酸或乳酸鈉處理的Β16黑素瘤細胞中酪氨酸酶蛋白表達的協(xié)同效應(yīng)的免疫印跡結(jié)果。根據(jù)這個結(jié)果，5μ M的δ Τ3與ImM的乳酸鈉或曲酸的共處理導(dǎo)致對酪氨酸酶蛋白抑制的增強。
圖18Α至18C說明了顯示了與單獨使用任一個制劑相比，當(dāng)用Y-生育三烯酚 (Y T 3) (10 μ Μ)和α熊果苷(50 μ Μ)(圖18Α)共處理，或用對苯二酚(20 μ Μ)處理(圖 18Β)處理，或用L-谷胱甘肽(10 μ Μ)(圖18C)處理時，Β16黑素瘤細胞中酪氨酸酶蛋白表達的協(xié)同效應(yīng)的免疫印跡結(jié)果。
圖18D說明了顯示與未轉(zhuǎn)染的Β16細胞相比，用mi434-5P microRNA轉(zhuǎn)染并用 Y-生育三烯酚(Y T3)處理的B16黑素瘤細胞中酪氨酸酶蛋白表達的免疫印跡結(jié)果。
圖18E說明了顯示與單獨用任一種制劑相比，當(dāng)用Y-生育三烯酚UT3) (10 μ Μ)和維甲酸(2ηΜ)共處理時，Β16黑素瘤細胞中酪氨酸酶表達的免疫印跡結(jié)果。
具體實施方式
本發(fā)明的第一個方面涉及一種通過以藥學(xué)有效量的組合物對患者 給藥，治療皮膚疾病或預(yù)防皮膚疾病發(fā)生或改變皮膚色素沉著的方法，包所述組合物包含至少一種維生素 E成分和至少一種與維生素E不同具有抗酪氨酸酶活性和/或抗黑素生成活性的附加成分。
已經(jīng)證明包含至少一種維生素成分，如Y -生育三烯酚(Y T 3)、δ -生育三烯酚 (δ T 3)或富含生育三烯酚部分(TRF)的組合物，例如，通過防止酪氨酸酶蛋白的持續(xù)活化抑制了諸如Β16黑素瘤細胞的細胞中持續(xù)的黑色素合成。還已經(jīng)證明本發(fā)明涉及的維生素 E成分，例如Y-生育三烯酚(Y Τ3)或δ-生育三烯酚(δ T 3)，與維生素E不同的具有抗酪氨酸酶活性和/或抗黑素生成活性的附加成分具有協(xié)同效應(yīng)，所述附加成分例如但不限于乳酸鈉、曲酸或維甲酸。這些發(fā)現(xiàn)得到了從這里提及的實驗結(jié)果觀測到的體外與體內(nèi)數(shù)據(jù)的支持。本發(fā)明該方面的普遍原理可在圖17和圖18中證明，圖17和圖18是基于這樣的實施例，其中與只使用一種成分相比，包含至少一種維生素E成分，例如Y-生育三烯酚(Y T 3)、δ -生育三烯酚(δ T 3)，和與維生素E不同的具有抗酪氨酸酶活性和/或抗黑素生成活性的附加成分，例如乳酸鈉、曲酸、α熊果苷、對苯二酚、L-谷胱甘肽或mi434-5P microRNA分子，的組合物呈現(xiàn)出顯著的酪氨酸酶蛋白抑制。
這里使用的術(shù)語“治療”或“處理”旨在涉及提供藥學(xué)有效量的組合物，所述組合物包括至少一種維生素E成分和至少一種與維生素E不同的具有抗酪氨酸酶活性和/或抗黑素生成活性的附加成分，所述組合物能充分起到防止虛弱和/或不健康狀態(tài)的發(fā)展的預(yù)防作用；和/或提供充足量的所述組合物或其藥物給受試者或患者，以減輕或消除疾病狀態(tài)/ 紊亂，和/或疾病狀態(tài)/紊亂的癥狀，和虛弱和/或不健康狀態(tài)。
“預(yù)防皮膚疾病發(fā)生”是指預(yù)防或阻礙皮膚疾病發(fā)生的作用。在目前情況下，給藥此處提到的組合物具有使皮膚疾病不能在患者或動物體內(nèi)發(fā)展的效力。預(yù)防不同于“治療” 在于此處提到的組合物將用于治療在患者或動物體內(nèi)已經(jīng)存在的皮膚疾病，或換句話說， 治療已經(jīng)患皮膚疾病的患者或動物身體。
通常，認為“皮膚疾病”是指任何癥狀、紊亂或疾病，例如癌和與皮膚、皮毛、毛發(fā)、 指甲、口和生殖膜和腺相關(guān)的表面和老化疾病。皮膚病癥可表現(xiàn)為可見的損傷的形式、發(fā)生前損傷、疼痛、接觸敏感、發(fā)炎、炎癥等形式。皮膚病癥包括但不限于皮膚和毛囊皮脂腺單位或角質(zhì)生成過程的疾病。例如，皮膚病癥可為上皮或真皮，或位于表皮、真皮、皮下層的毛囊皮脂腺單位內(nèi)部或周圍，或它們組合的疾病。皮膚病癥的實例包含但不限于痤瘡、禿頭癥、 牛皮癬、皮脂溢、向內(nèi)生毛和須部假性毛囊炎、色素沉著的皮膚、皮膚感染、扁平苔癬、小棘狀苔蘚及脫發(fā)性毛囊炎、口周黑子炎癥、紅斑痤瘡、化膿性汗腺炎、蜂窩組織炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、盤狀紅斑狼瘡等。
一些實施方式中，可用這里說明的組合物預(yù)防或治療的皮膚病癥的類型例如可包括表皮疾病。表皮疾病可例如包括由增加的黑色素引起的皮膚暗沉、皮膚色素沉著過度、皮膚炎癥、皮膚普通痤瘡、傷口愈合、皮膚光老化、皮膚皺紋、吸煙者的黑變病、黑斑病、黑棘皮病、庫興氏病、愛迪生氏病、黑線、汞中毒，僅舉幾例。
“改變皮膚的色素沉著”是指皮膚天然顏色(色素)的變化。可指皮膚的色素沉著水平或量的下降。在一些實施方式中，給藥這里提到的組合物可減少黑色的實際皮膚損傷， 或例如可預(yù)防或阻止皮膚暗區(qū)的擴大。實際的皮膚損傷可為，例如由年齡、過量的太陽暴露或引起皮膚暗區(qū)的疾病或紊亂。這些疾病可包括，例如這里提及的皮膚疾病的任一種。在其它實施方式中，給藥這里提到的組合物可減小察覺到的黑色的皮膚損傷。這意味著皮膚損傷可被個人感知，因此他的或他的皮膚陰影是深色的，其不易定具有實際的皮膚損傷而只是(為了美容)期望減輕皮膚陰影。
如此處所述，為了治療皮膚疾病或防止皮膚疾病發(fā)生或改變皮膚色素沉著的治療，使 用包含至少一種維生素E成分和至少一種與維生素E不同的具有抗酪氨酸酶活性和 /或抗黑素生成活性的附加成分的組合物。維生素E由兩種主要成分組成-生育酚(T)和生育三烯酚(T3)。生育三烯酚(T3)主要發(fā)現(xiàn)于棕櫚油中。與生育酚一起，他們?yōu)樗谢罴毎峁┛寡趸钚缘闹匾獊碓?。這個普通的抗氧化屬性反應(yīng)了生育三烯酚和生育酚的化學(xué)結(jié)構(gòu)的相似性，生育三烯酚和生育酚僅區(qū)別于它們結(jié)構(gòu)的側(cè)鏈(生育三烯酚包含法呢基 (farnesyl)或生育酚包含飽和的植基側(cè)鏈)。來自色原烷醇環(huán)上羥基的普通氫原子起到清除鏈增長過氧化自由基的作用。基于甲基在其色原烷醇環(huán)上的位置，生育酚和生育三烯酚可分成4種同分異構(gòu)形式阿爾法U)、貝塔(β)、伽瑪(Y)和德爾塔(δ)。
存在不同的生育酚的生育三烯酚同型異構(gòu)體(參考通式I和通式II)。生育酚由分別源自尿黑酸(HGA)和植基二磷酸的色原烷醇環(huán)和15碳鏈組成。另一方面，生育三烯酚與生育酚在結(jié)構(gòu)上的區(qū)別在于在碳鏈中存在3個反式雙鍵。通式I和通式II和下面的說明提供了關(guān)于已知的生育酚(T)和生育三烯酚(Τ3)異構(gòu)體的概述。
權(quán)利要求
1.一種治療皮膚疾病或預(yù)防皮膚疾病發(fā)生或改變皮膚色素沉著的方法，包含以藥學(xué)有效量的組合物對患者給藥，所述組合物包括至少一種維生素E成分和至少一種與所述維生素E成分不同的具有抗酪氨酸酶活性和/或抗黑素生成活性的附加成分。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述至少一種與所述維生素E成分不同的附加成分選自由抗氧化劑、酪氨酸酶抑制劑、多酚、維生素、抗酪氨酸酶RNA干擾劑、抗酪氨酸酶肽或它們的混合物組成的組中。
3.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其中，所述至少一種與所述維生素E成分不同的附加成分為皮膚美白劑。
4.如權(quán)利要求1至3的任一項所述的方法，其中，所述至少一種維生素E成分選自生育酚、生育三烯酚、生育單烯酚、?；?、酰化生育三烯酚、?；龁蜗┓雍退鼈兊幕旌衔锝M成的組中。
5.如權(quán)利要求4所述的方法，其中，所述至少一種維生素E成分為至少一種生育酚和至少一種生育三烯酚的混合物，或至少一種?；雍椭辽僖环N?；┓踊旌衔铩?br> 6.如權(quán)利要求4所述的方法，其中，所述?；龁蜗┓訛樯龁蜗┓右宜狨ァ?br> 7.如權(quán)利要求4所述的方法，其中，所述至少一種酰化生育酚、生育三烯酚或生育單烯酚成分為乙?；纳印⑸┓踊蛏龁蜗┓?。
8.如權(quán)利要求4至7的任一項所述的方法，其中，所述生育三烯酚選自由α-生育三烯酚、β -生育三烯酚、Y -生育三烯酚、δ -生育三烯酚和上述生育三烯酚的混合物組成的組中。
9.如權(quán)利要求4至7的任一項所述的方法，其中，所述生育三烯酚選自由α生育酚、 β-生育酚、Y-生育酚、S-生育酚和上述生育酚的混合物組成的組中。
10.如權(quán)利要求4至7的任一項所述的方法，其中，所述生育單烯酚選自由α-生育單烯酚、β-生育單烯酚、Y -生育單烯酚、δ -生育單烯酚和上述生育單烯酚的混合物組成的組中。
11.如權(quán)利要求10所述的方法，其中，所述a-生育單烯酚為3，4-二氫-2，5，7，8-四甲基-2-(4, 8，12-三甲基-11-三癸烯基)-2Η-1-苯并吡喃_6_醇或3，4- 二氫-2，5，7，8-四甲基-2-(4, 8，12-三甲基-12-三癸烯基)-2Η-1-苯并吡喃_6_醇。
12.如權(quán)利要求1至11的任一項所述的方法，其中，所述至少一種維生素E成分為 Y-生育三烯酚，或S-生育三烯酚，或富含生育三烯酚部分(TRF)，或酰化Y-生育三烯酚，或?；?-生育三烯酚，或?；疶RF或它們的混合物。
13.如權(quán)利要求12所述的方法，其中，所述?；痀-生育三烯酚或?；?生育三烯酚或酰化TRF為乙?；腨 -生育三烯酚或乙酰化的δ -生育三烯酚或乙?；腡RF。
14.如權(quán)利要求1至13的任一項所述的方法，其中，所述皮膚疾病為皮膚病癥。
15.如權(quán)利要求14所述的方法，其中，所述皮膚病癥選自由增加的黑色素引起的皮膚暗沉、皮膚色素沉著過度、皮膚炎癥、皮膚普通痤瘡、傷口愈合、皮膚光老化、皮膚皺紋、吸煙者的黑變病、黑斑病、黑棘皮病、庫興氏病、愛迪生氏病、黑線、萊中毒組成的組中。
16.如權(quán)利要求1至15的任一項所述的方法，其中，所述至少一種與所述維生素E 成分不同的附加成分選自由維生素Α、維生素A衍生物、維生素B、維生素B衍生物、維生素C、維生素C衍生物、醌、對苯二酚、乳酸鹽、曲酸、曲酸衍生物、α -羥基酸、熊果苷、羥基乙酸、對苯二酚、谷胱甘肽、L-谷胱甘肽、壬二酸、糖皮質(zhì)激素、桑椹提取物、粗糙帽果提取物、黃瓜提取物、甘草提取物、石榴提取物、熊果葉(熊果)提取物、六亞甲基二乙酰胺、丁酸鈉、二甲亞砜、合成的羥基取代的苯基萘和衍生物；一元酚，例如2，6- 二-叔丁基-4-甲酚、2，6-二-叔丁基-4-乙酚等；和二元酚、例如4，4’-亞甲基雙(2，6-二-叔丁基酚)、 2，2’ -亞甲基雙(4-乙基-6-叔丁基酚)、維甲酸、衣霉素、N-乙酰葡糖胺、透明質(zhì)酸、凝血酸、胎盤提取物、鞣花酸、EDTA、植酸、蘆薈素、二硫辛酸、蛋白酶激活受體(PAR2)和大豆胰島素抑制劑。
17.如權(quán)利要求16所述的方法，其中，所述乳酸鹽選自由乳酸鉀、乳酸鈉、乳酸鎂、乳酸銨和乳酸鈣組成的組中。
18.如權(quán)利要求17所述的方法，其中，所述至少一種與所述維生素E成分不同的附加成分選自由乳酸鈉、對苯二酚、L-谷胱甘肽、曲酸、熊果苷和維甲酸組成的組中。
19.如權(quán)利要求1至18的任一項所述的方法，其中，所述至少一種與所述維生素E成分不同的附加成分為選自由miRNA、siRNA和反義RNA組成的組中的抗酪氨酸酶RNA干擾劑。
20.如權(quán)利要求19所述的方法，其中，所述miRNA為mi434_5PmiRNA。
21.如權(quán)利要求1至20的任一項所述的方法，其中，所述組合物以約Img至約IOOOmg 之間或約IOmg至500mg之間的量給藥。
22.如權(quán)利要求1至20的任一項所述的方法，其中，以獲得患者血液中約1μM至 30 μ M之間或約10μ M至30μ M之間血清水平濃度的量給藥所述組合物。
23.如權(quán)利要求1至22的任一項所述的方法，其中，所述患者為動物。
24.如權(quán)利要求23所述的方法，其中，所述動物為哺乳動物。
25.如權(quán)利要求24所述的方法，其中，所述哺乳動物選自由人、豬、馬、小鼠、大鼠、牛、 狗和貓組成的組中。
26.如權(quán)利要求1至25的任一項所述的方法，其中，所述組合物以軟膠囊、硬膠囊、藥片、凝膠、糖衣丸、緩釋制劑、藥膏、乳脂、潤膚乳脂、潔面乳、眼部保濕棒、可注射制劑、納米顆粒形態(tài)或膠囊形態(tài)給藥。
27.如權(quán)利要求1至25的任一項所述的方法，其中，所述組合物以水溶形態(tài)給藥。
28.如權(quán)利要求1至27的任一項所述的方法，其中，所述組合物以口服或局部給藥。
29.如權(quán)利要求1至28的任一項所述的方法，其中，所述組合物進一步包括藥學(xué)可接受賦形劑。
30.如權(quán)利要求1至29的任一項所述的方法，其中，所述至少一種維生素E成分被包含在富集制劑中，其中，所述富集制劑基于所述富集制劑的總重，包括大于O. 1被％的具體的維生素E成分。
31.如權(quán)利要求30所述的方法，其中，基于所述富集制劑的總重，所述富集制劑包括的所述具體維生素 E 成分的量選自由 O. lwt%>0. 5wt%> lwt%>2wt%>3wt%>4wt%>5wt%> 10wt%> 15wt%、20wt%、25wt%、30wt%、35wt%、40wt%、45wt%、50wt%、55wt%、60wt%、65wt%、70wt%、 75wt%、80wt%、85wt%、90wt%、92wt%、94wt%、96wt%、97wt% 和 98wt% 的總維生素 E 成分組成的組中。
32.如權(quán)利要求1至31的任一項所述的方法，其中，所述組合物進一步包含UV阻擋劑。
33.如權(quán)利要求32所述的方法，其中，所述UV阻擋劑選自由氧化鋅、氧化鈦、氧苯酮、偶氮苯和阿伏苯宗組成的組中。
34.一種藥物組合物，包含至少一種維生素E成分和至少一種與維生素E不同的具有抗酪氨酸酶活性和/或抗黑素生成活性的附加成分，其中，所述至少一種與所述維生素E成分不同的附加成分選自由抗氧化劑、酪氨酸酶抑制劑、多酚、維生素、抗酪氨酸酶RNA干擾劑、 抗酪氨酸酶肽或它們的混合物組成的組中。
35.一種藥膏或乳脂，包括權(quán)利要求34所述的藥物組合物。
36.一種產(chǎn)品，包括或由酰化3，4- 二氫-2，5，7，8-四甲基_2_ (4，8，12-三甲基-11-三癸烯基)-2H-1-苯并吡喃-6-醇組成。
37.如權(quán)利要求36所述的方法，其中，3，4-二氫-2，5，7，8-四甲基-2-(4，8，12-三甲基-11-三癸烯基)-2Η-1-苯并吡喃-6-醇是乙?；摹?br> 全文摘要
本申請涉及通過以藥學(xué)有效量的組合物對患者給藥治療皮膚疾病或預(yù)防皮膚疾病發(fā)生，或改變皮膚色素沉著的方法，所述組合物包含至少一種維生素E成分和至少一種與所述維生素E成分不同的具有抗酪氨酸酶活性和/或抗黑素生成活性的附加成分。本發(fā)明還涉及藥物組合物，所述藥物組合物包含至少一種所述維生素E成分和至少一種與所述維生素E成分不同的具有抗酪氨酸酶活性和/或抗黑素生成活性的附加成分。
文檔編號A61K31/05GK103025328SQ201180024360
公開日2013年4月3日 申請日期2011年3月22日 優(yōu)先權(quán)日2010年4月16日
發(fā)明者葉一霖, 許長華 申請人:達沃斯生命科學(xué)有限公司