專利名稱：新型苯并噻吩藥用化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物化學(xué)和有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域，提供一類新型苯并噻吩化合物。這些化合物可用于治療多種與絕經(jīng)后綜合癥相關(guān)的醫(yī)學(xué)適應(yīng)癥，以及子宮纖維病變、子宮內(nèi)膜異位癥和動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增生。
“絕經(jīng)后綜合癥”一詞用于描述婦女正在進(jìn)行或已完成生理性變態(tài)即眾所周知的絕經(jīng)時(shí)，經(jīng)常困擾她們的多種病理情況。雖然這一詞用于考慮多種病理情況，但絕經(jīng)后綜合癥的三種主要效應(yīng)是長(zhǎng)期醫(yī)學(xué)關(guān)注的出發(fā)點(diǎn)，這三種效應(yīng)即骨質(zhì)疏松癥、心血管效應(yīng)(如高血脂)、雌激素依賴性癌癥(尤其是乳腺癌和子宮癌)。
骨質(zhì)疏松癥描述了一組由不同病因引起的疾病，但其特征均為單位體積骨量的凈減少。這種骨量的減少及所引起的骨折導(dǎo)致骨骼不能對(duì)身體提供足夠的結(jié)構(gòu)支持。
骨質(zhì)疏松癥最常見一種類型與絕經(jīng)相關(guān)。大多數(shù)婦女在月經(jīng)停止后三到六年內(nèi)其骨松質(zhì)腔減少了大約20％至60％的骨量，這種骨量的快速減少一般同骨吸收與形成循環(huán)的增進(jìn)有關(guān)，但吸收循環(huán)占優(yōu)勢(shì)，其結(jié)果就是骨量的凈減少。骨質(zhì)疏松癥是婦女絕經(jīng)后一種常見而嚴(yán)重的疾病。
僅在美國(guó)估計(jì)就有兩千五百萬(wàn)婦女受這種疾病的折磨。骨質(zhì)疏松癥的后果不僅是對(duì)個(gè)體有害，而且由于其病程長(zhǎng)，以及其后遺癥使得病人需要長(zhǎng)期而廣泛的供養(yǎng)(入院治療和家庭護(hù)理)，因而造成大量的經(jīng)濟(jì)損失，尤其在年齡更大的病人中更是如此。而且，雖然一般認(rèn)為骨質(zhì)疏松癥不會(huì)危及生命，但在老年婦女中有20％至30％的死亡率與髖部骨折有關(guān)。這一死亡率中很大一部分直接與絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥有關(guān)。
絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥中骨內(nèi)最易受損的組織是骨小梁，這一組織通常被稱作骨松質(zhì)，主要集中在骨的兩端(靠近骨連接)和脊柱的椎骨中。骨松質(zhì)的特征是內(nèi)部為小的相互聯(lián)接的骨前質(zhì)結(jié)構(gòu)，而更堅(jiān)固濃密的皮層組織組成骨的外層及中軸。小梁組織內(nèi)部聯(lián)接的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)給予外部皮層結(jié)構(gòu)以側(cè)向支持，這對(duì)于整個(gè)結(jié)構(gòu)的生物機(jī)械強(qiáng)度是至關(guān)重要的。絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥主要是骨小梁的凈吸收和凈減少?gòu)亩鴮?dǎo)致骨的衰退和骨折。由于絕經(jīng)后婦女骨小梁的減少，最常見的骨折與那些高度依賴于骨小梁支持的骨相關(guān)就不奇怪了，例如椎骨、重量支承型骨如股骨和前臂骨的頸部。事實(shí)上，髖骨骨折、科勒斯骨折、椎骨粉碎性骨折是絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的標(biāo)志。
當(dāng)今，唯一被廣泛接受用于治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的方法是雌激素替代療法，雖然這種療法一般是成功的，但患者的順應(yīng)性很低，這主要是因?yàn)榇萍に丿煼ń?jīng)常產(chǎn)生一些不必要的副作用。
在絕經(jīng)前，與同年齡的男子相比，多數(shù)婦女較少發(fā)生心血管疾病。然而絕經(jīng)后，婦女心血管疾病的發(fā)病率逐漸增加，趕上男子的發(fā)病率。這種保護(hù)作用的喪失與雌激素的減少有關(guān)，特別是與失去雌激素調(diào)節(jié)血脂的能力有關(guān)。雌激素調(diào)節(jié)血脂功能的本質(zhì)還不十分清楚，但現(xiàn)有證據(jù)表明雌激素能上調(diào)肝臟中低密度脂類(LDL)的受體來清除多余的膽甾醇。另外雌激素對(duì)膽甾醇的生物合成似乎也有一些影響，并還有其它一些對(duì)心血管健康有益的作用。
文獻(xiàn)中已有報(bào)導(dǎo)，絕經(jīng)后婦女在采用雌激素替代療法時(shí)，血脂水平回歸到絕經(jīng)前水平。在這種情況下雌激素似乎是一個(gè)合適的治療手段。但對(duì)許多婦女來說，雌激素替代療法的副作用是不能接受的，這就限制了這種療法的應(yīng)用。在這種情況下，一種理想的藥物應(yīng)當(dāng)既能像雌激素一樣調(diào)節(jié)血脂水平，但又能避免雌激素替代療法的副作用及其帶來的危險(xiǎn)。
第三種與絕經(jīng)后綜合癥相關(guān)的主要病理狀況是雌激素依賴型乳腺癌和稍少見一些的其它器官雌激素依賴型癌癥，尤其是子宮的雌激素依賴型癌癥。雖然這些癌癥的發(fā)生并不一定局限于絕經(jīng)后的婦女，但在老年絕經(jīng)后婦女群體中要普遍得多?，F(xiàn)在，對(duì)這些癌癥的化學(xué)治療主要依靠抗雌激素類化合物，如tamoxifen。雖然在治療這些癌癥時(shí)，這種激動(dòng)劑-拮抗劑混合物具有有益的作用，同時(shí)在生命受到嚴(yán)重威脅時(shí)，雌激素的副作用也是可以忍受的，但它們并不是理想的藥物。例如，由于具有雌激素(激動(dòng)劑)性質(zhì)，它們對(duì)子宮內(nèi)的某些特定癌細(xì)胞群體可能產(chǎn)生刺激作用，因而在某些病例中它們會(huì)起反作用。能更好地治療這些癌癥的藥物應(yīng)當(dāng)是一種抗雌激素的化合物，沒有或可以忽略不計(jì)其雌激素激動(dòng)劑對(duì)繁殖組織的特性。
為回應(yīng)這樣一種明確的需求即一種新的藥劑，它特別能夠減輕絕經(jīng)后綜合癥的癥狀。本發(fā)明提供一類新的苯并噻吩化合物及其藥用組合物，并提供這些化合物的使用方法，用于治療絕經(jīng)后綜合癥及其它下面將要提到的雌激素相關(guān)疾病。
子宮纖維病變(子宮纖維瘤)是一個(gè)古老而至今仍存的臨床難題。它有多種名稱，包括子宮纖維瘤、子宮肥大、子宮肌瘤、子宮肌層肥大、子宮纖維病變和纖維子宮瘤?；菊f來，子宮纖維病變是一種纖維組織不合適地沉積在子宮壁上的病理情況。
這種情況是導(dǎo)致婦女痛經(jīng)和不育的原因之一，其產(chǎn)生的確切原因現(xiàn)在還了解很少，但有證據(jù)表明它是纖維組織對(duì)激素的一種不合適應(yīng)答。這種情況已通過對(duì)家兔進(jìn)行三個(gè)月的每日雌激素給藥誘導(dǎo)產(chǎn)生，豚鼠可通過四個(gè)月的每日給藥誘導(dǎo)產(chǎn)生，而且在大鼠中，雌激素給藥也造成了相似的肥大。
治療子宮纖維病變最常規(guī)的方法是外科手術(shù)，既昂貴有時(shí)又是并發(fā)癥如腹部粘連形成和感染的原因。在有些病人中，最初的外科手術(shù)僅能暫時(shí)治療而纖維又重新生長(zhǎng)。在這些病例中，進(jìn)行子宮切除能有效地終止纖維的生長(zhǎng)，但同時(shí)病人也失去了生育能力。這種疾病還可通過給予促性腺激素釋放激素的拮抗物來治療，但它們的使用又因能引起骨質(zhì)疏松癥而受限，這樣就需要一種治療子宮纖維病變的新方法，本發(fā)明所提供的方法可滿足這一要求子宮內(nèi)膜異位癥是一種嚴(yán)重的痛經(jīng)病，伴隨著劇烈的疼痛和血流入子宮內(nèi)膜基質(zhì)或腹膜腔，經(jīng)常導(dǎo)致不育 這種癥狀產(chǎn)生的原因可能是子宮內(nèi)膜對(duì)正常激素控制不適當(dāng)應(yīng)答和定位于不適當(dāng)組織而導(dǎo)致的異位生長(zhǎng)。子宮內(nèi)膜生長(zhǎng)于不合適位置，似乎激發(fā)了生長(zhǎng)位置組織的類似炎癥應(yīng)答，導(dǎo)致巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)和一系列引起疼痛應(yīng)答的級(jí)聯(lián)事件，這一疾病的精確原因還并不十分清楚。這種疾病的激素療法各不相同，很不精確，且?guī)в写罅坎槐匾牟⒖赡苁怯泻Φ母弊饔谩?br> 治療這種疾病的方法之一是使用低劑量的雌激素，通過雌激素對(duì)中樞促性腺激素的釋放及隨后卵巢雌激素合成的負(fù)反饋?zhàn)饔?，來抑制子宮內(nèi)膜的生長(zhǎng)。但是，這種療法有時(shí)需要持續(xù)給予雌激素來控制癥狀，這樣使用雌激素常常產(chǎn)生不必要的副作用，甚至有導(dǎo)致子宮內(nèi)膜癌癥的危險(xiǎn)。
另一種治療方法包括孕激素的持續(xù)給藥。該療法會(huì)導(dǎo)致經(jīng)閉，并因孕激素抑制卵巢雌激素生成而導(dǎo)致子宮內(nèi)膜生長(zhǎng)的退化。長(zhǎng)期使用孕激素，常常會(huì)帶來令人不愉快的CNS副作用，還常常由于其對(duì)卵巢功能的抑制而導(dǎo)致不育。
第三種治療方法包括弱雄激素的給藥，這種藥物對(duì)控制子宮內(nèi)膜異位癥是有效的，但會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的雄性化后果，還有幾個(gè)這種療法的病例在連續(xù)治療時(shí)導(dǎo)致了輕度的骨質(zhì)減少。因此需要一種治療子宮內(nèi)膜異位癥的新方法。
動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增生在一些疾病如動(dòng)脈粥樣硬化和再狹窄中起重要的作用。經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈腔內(nèi)形成術(shù)(PTCA)后的血管再狹窄已知是一種組織應(yīng)答，其特征是分為早期和晚期，早期發(fā)生在PTCA后幾小時(shí)至數(shù)天，為血栓形成并伴隨著一些血管痙攣；而晚期看來是動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的過量增生和遷移占優(yōu)勢(shì)。在這種疾病中，平滑肌細(xì)胞及巨噬細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)和移居增加明顯造成該病的病理情況。血管動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的過量增生和遷移可能是PTCA、動(dòng)脈粥樣硬化斑切除術(shù)、激光血管形成術(shù)及動(dòng)脈搭橋手術(shù)后冠狀動(dòng)脈再堵塞的主要機(jī)制。見Austin等，《美國(guó)心臟學(xué)會(huì)雜志》(Journal of the American College of Cardiology)第8卷369-375頁(yè)(1985年8月)。
血管再狹窄是用經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈腔內(nèi)形成術(shù)(PTCA)、動(dòng)脈粥樣硬化斑切除術(shù)、激光血管形成術(shù)及動(dòng)脈搭橋手術(shù)疏導(dǎo)堵塞血管后一個(gè)主要的長(zhǎng)期并發(fā)癥。在進(jìn)行PTCA的病人中，大約35％在術(shù)后3-6個(gè)月內(nèi)發(fā)生再堵塞?，F(xiàn)在治療血管再堵塞的策略包括使用移植片固定模(stent)等裝置進(jìn)行機(jī)械疏導(dǎo)，或使用如肝素、低分子量肝素、香豆素、阿司匹林、魚油、抗鈣劑、類固醇及前列環(huán)素等化學(xué)藥物。這些方法不能抑制再堵塞的發(fā)生率，因而對(duì)治療和防止血管再狹窄是無效的。見《經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈血管形成術(shù)后再狹窄的防止尋找“神奇子彈”》(Prevention of Restenosis after Percutaneous Transluminal CoronaryAngioplastyThe Search for a‘Magic bullet’)Hermans等，《美國(guó)心臟雜志》(American Heart Journal)122卷171-187頁(yè)(1991年7月)。
在再狹窄的病理原因中，細(xì)胞的過度增生和遷移是生長(zhǎng)因子影響的結(jié)果。這些生長(zhǎng)因子是由血液和受損動(dòng)脈血管中的細(xì)胞組分產(chǎn)生的，并介導(dǎo)了血管再狹窄中平滑肌細(xì)胞的增生。
能抑制動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增生和/或遷移的抑制劑對(duì)于治療和防止再狹窄是有用的。本發(fā)明提供這些化合物，用作動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增生的抑制劑及再狹窄的抑制劑。
本發(fā)明涉及通式I的化合物及其可藥用的鹽類。
其中R1是H、OH、鹵素、OCO(C1-C6烷基)、OCO(芳基)、OSO2(C4-C6烷基)、OCOO(C1-C6烷基)、OCOO(芳基)、OCONH(C1-C6烷基)或OCON(C1-C6烷基)2；R2是芳基、C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基或4-環(huán)己醇；R3是O(CH2)2或O(CH2)3；R4和R5任選地為CO(CH2)2CH3、CO(CH2)3CH3、C1-C6烷基，或R4和R5及與其相連的氮原子結(jié)合成哌啶、嗎啉、吡咯烷、3-甲基吡咯烷、3，3-二甲基吡咯烷、3，4-二甲基吡咯烷、吖庚因或2-甲基哌啶；R6為＝C＝CH2，＝CH(C1-C5烷基)、＝CH(C2-C5鏈烯基)、＝C＝CH(C1-C5烷基)、＝CH(芳基)、＝C(OH)(C1-C5烷基)、＝C(OH)(C2-C5鏈烯基)、＝C(OH)芳基。
本發(fā)明進(jìn)一步涉及含有通式(I)的化合物的藥用組合物，該組合物可任選地含有雌激素或孕激素。本發(fā)明還涉及這些化合物單獨(dú)使用或者與雌激素或孕激素聯(lián)合使用的方法，用于減輕絕經(jīng)后綜合癥的癥狀，特別是骨質(zhì)疏松癥、心血管相關(guān)的病理狀態(tài)，和緩解雌激素依賴型癌癥的癥狀，在這里“雌激素”一詞包括具有雌激素活性的甾類化合物，如17β-雌二醇、雌酮、共軛的雌激素(共軛雌激素)、雌馬雌激素、17β-乙炔基雌二醇等；而“孕激素”一詞則包括具有促孕活性的化合物，如孕甾酮、異炔諾酮(norethylnodrel)、nongestrel、乙酸孕甾酮、炔諾酮等。
本發(fā)明的化合物同樣適用于抑制婦女的子宮纖維病變和子宮內(nèi)膜異位癥，以及人的動(dòng)脈平滑肌增生，特別是再狹窄。
本發(fā)明的一方面包括通式I的化合物及其可藥用的鹽類。
其中R1是H、OH、鹵素、OCO(C1-C6烷基)、OCO(芳基)、OSO2(C4-C6烷基)、OCOO(C1-C6烷基)、OCOO(芳基)、OCONH(C1-C6烷基)或OCON(C1-C6烷基)2；R2是芳基、C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基或4-環(huán)己醇；R3可以是O(CH2)2或O(CH2)3；R3是O(CH2)2或O(CH2)3；R4和R5任選地為CO(CH2)2CH3、CO(CH2)3CH3、C1-C6烷基，或R4和R5及與其相連的氮原子結(jié)合成哌啶、嗎啉、吡咯烷、3-甲基吡咯烷、3，3-二甲基吡咯烷、3，4-二甲基吡咯烷、吖庚因或2-甲基哌啶；R6為＝C＝CH2、＝CH(C1-C5烷基)、＝CH(C2-C5鏈烯基)、＝C＝CH(C1-C5烷基)、＝CH(芳基)、＝C(OH)(C1-C5烷基)、＝C(OH)(C2-C5鏈烯基)、＝C(OH)芳基。
這里用于描述化合物的概括性的詞代表其通常的含義，如“烷基”指直鏈或支鏈的2-6個(gè)碳原子的脂肪族鏈，包括乙基、丙基、異丙基、丁基、正丁基、戊基、異戊基、己基、異己基等。同樣，“C2-C6鏈烯基”一詞代表2-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烯基，包括丙烯基、乙烯基、異丙烯基、丁烯基、正丁烯基、己烯基、戊烯基等。
“芳基”一詞包括任選地被C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵素、氨基、硝基或羥基取代1-3次的苯基。
苯并噻吩的制備本發(fā)明的化合物是苯并[b]噻吩的衍生物，苯并[b]噻吩根據(jù)美國(guó)化學(xué)學(xué)會(huì)Ring Index命名和編號(hào)如下。
在制備本發(fā)明的化合物的過程中，起始物是通式II的化合物或其鹽類。
其中R7是一個(gè)羥基保護(hù)基團(tuán)；R3、R4和R5的含義同上；或是所述成分的鹽。
雖然通式II化合物的游離堿形式可作為起始物質(zhì)，但其酸鹽形式，特別是鹽酸鹽，通常更方便一些。
通式II的化合物是本領(lǐng)域已知的，基本上按U S.Pat.Nos.4,133,184；4,380,635和4,418,068描述的方法制備，上述專利在此引入作為參考文獻(xiàn)。一般來說，一個(gè)通式III的苯并噻吩前體經(jīng)過已知的過程進(jìn)行制備。
一般的方法是兩個(gè)羥基用已知能在標(biāo)準(zhǔn)Fiedel-Crafts條件下抵抗酰化作用的羥基保護(hù)基團(tuán)(形成通式II的R5保護(hù)基團(tuán))保護(hù)，然后用強(qiáng)還原劑還原。優(yōu)選的羥基保護(hù)基團(tuán)為C1-C4烷基，最優(yōu)選甲基。見上列的美國(guó)專利和J.W.Barton，《(有機(jī)化學(xué)中的保護(hù)基團(tuán)》(Protective Groups inOrganic Chemistry)，J.G.W.McOmie編，Plenum Press，New York，NY，1973，第2章以及T.W.Green，《有機(jī)合成中的保護(hù)基團(tuán)》(ProtectiveGroups in Organic Synthesis)，John Wiley和Sons，New York，NY，1981，第7章。
在制備了所需的保護(hù)型通式III的前體后，將前體與一種通式IV的化合物在標(biāo)準(zhǔn)Friedel-Crafts條件下?；?。
在通式IV中，n、R3、R4、R5同前述，而R為氯基、溴基、碘基或一種活性酯基團(tuán)。通式IV化合物的制備以及優(yōu)選的?；椒ǎ谏狭械拿绹?guó)專利中已公開。當(dāng)R4和R5均為C1-C5烷基時(shí)，優(yōu)選甲基和乙基；當(dāng)R4和R5結(jié)合在一起時(shí)，優(yōu)選1-哌啶基和1-吡咯烷基，最優(yōu)選哌啶基。
?；磻?yīng)后，即制備通式II的化合物后，R7為OH的本發(fā)明的化合物可通過將通式II的化合物或其鹽類加入合適的溶劑，與一種還原劑如氫化鋰鋁(LAH)在惰性氣體(如氮?dú)?中反應(yīng)來制備。
合適的溶劑包括任何能在還原條件下保持惰性的溶劑或溶劑混合物，合適的溶劑包括二乙醚、二噁烷、四氫呋喃(THF)。這些溶劑的無水形式是優(yōu)選的，最優(yōu)選無水THF。
這一步反應(yīng)在能有效完成還原反應(yīng)的溫度下進(jìn)行，17-25℃左右的室溫一般是合適的。
所用的時(shí)間為反應(yīng)所必需的，一般的反應(yīng)時(shí)間為大約1-20小時(shí)，最佳反應(yīng)時(shí)間可用常規(guī)色譜技術(shù)監(jiān)測(cè)反應(yīng)過程來確定。
然后α-碳原子(羧基)可被修飾為R6所表示的基團(tuán)，其中R6為＝C(OH)(C1-C5烷基)、＝C(OH)(C2-C5鏈烯基)、或＝C(OH)(芳基)。將一個(gè)化學(xué)基團(tuán)在0到-85℃的溫度條件下按前法加入到溶有通式II化合物的合適溶劑中，化學(xué)基團(tuán)可為RLi、RMgX或其它碳原子的親核基團(tuán)，其中R為C1-C5烷基、C2-C5鏈烯基或芳基。給予足夠的反應(yīng)時(shí)間(15分鐘到20小時(shí))，使反應(yīng)充分進(jìn)行。加入飽和碳酸氫鈉水溶液，抽提混合物，匯合的提取液經(jīng)清洗、干燥、過濾、濃縮和純化，生成一種通式Ia的化合物。
當(dāng)R6基團(tuán)為＝CH(C1-C5烷基)、＝CH(C2-C5鏈烯基)、或＝CH(芳基)時(shí)，α-羥基用還原劑還原上述Ia化合物得到，還原劑可為三乙基硅，然后加入一種酸(如三氟乙酸)，經(jīng)足夠的反應(yīng)時(shí)間(15分鐘至24小時(shí))后，中止反應(yīng)，中止反應(yīng)可使用乙酸乙酯/飽和碳酸氫鈉水溶液混合物。抽提反應(yīng)混合物，將有機(jī)物質(zhì)清洗、干燥、過濾、濃縮和純化，生成一種通式Ib的化合物。完成這一工作可替代的方法還包括(a)三烷基硅和Et2AlCl2或BF3·Et2O(乙醚合三氟化硼)等路易斯酸反應(yīng)；(b)用鈀碳等催化劑氫解(H2)；另外二氯二甲基硅加上碘化鈉也有效。
當(dāng)R6為通式＝C＝CH(C1-C5烷基)基團(tuán)時(shí)，通式Ia的適當(dāng)化合物在適宜的溶劑中冷卻到10℃至-25℃，然后消除羥基。這一消除可用加入二甲基氨基吡啶(DMAP)等堿，然后加入甲?；锹?，再加入DMAP來完成。另外，所需的鏈烯基還可用羰基化合物與R2+P-CH(C1-C5烷基)等鏻內(nèi)鎓鹽反應(yīng)來制備。也可以使用其它的有機(jī)磷化合物，如Ar2P(O)CHR或(RO)2P(O)CHR(Boutagy等，《化學(xué)評(píng)論》(ChemReviews)74卷87頁(yè)(1974))其它化合物可采用已知方法用下述部分取代R1和R2的羥基來制備，所說的部分具有以下通式-O-CO-(C1-C6烷基)、-O-CO-Ar或-O-SO2(C4-6烷基)，其中Ar為任意取代的苯基。例如，可參見前述U.S.Pat.No.4,358,593。
例如，當(dāng)想得到一個(gè)-O-CO-(C1-C6烷基)或-O-CO-Ar基團(tuán)時(shí)，通式I的二羥基化合物與?；取?、氰化物或疊氮化合物等試劑或合適的酸酐進(jìn)行反應(yīng)，或與酸酐混合。反應(yīng)可在吡啶、二甲基吡啶、蝰啉或異蝰啉等堿性溶劑，或在三乙胺、三丁胺、甲基哌啶等叔胺溶劑中方便地進(jìn)行。這一反應(yīng)同樣可在一種惰性溶劑中進(jìn)行，可使用的惰性溶劑包括乙酸乙脂、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、二噁烷、二甲氧基乙烷、乙腈、丙酮、丁酮等。反應(yīng)中至少需加入一當(dāng)量的酸清除劑，如一種三級(jí)胺。如果需要，還可使用酰化反應(yīng)催化劑，如4-二甲基氨基吡啶或吡咯烷吡啶。見Haslam，等，《四面體》(Tetrahedron)36卷2409-2433頁(yè)(1980)。
提供前面所提到的R1和R2基團(tuán)的酰化反應(yīng)可在-25℃至100℃的合適溫度下進(jìn)行。通常在氮?dú)獾榷栊詺怏w條件下進(jìn)行。而且室溫通常足夠反應(yīng)進(jìn)行。
這種羥基的?；部赏ㄟ^合適的羧酸在惰性有機(jī)溶劑或加熱的情況下進(jìn)行酸催化反應(yīng)來完成，可使用硫酸、多磷酸、甲磺酸等酸催化劑。
前面所述的R1和R2基團(tuán)也可用形成適當(dāng)酸的活性酯來提供，例如由已知的試劑形成的酯，包括二環(huán)己基碳二亞胺、?；滗S、硝基苯酚類、五氯苯酚、N-羥基琥珀酰亞胺和1-羥基苯并三唑形成的酯。見《日本化學(xué)學(xué)會(huì)通報(bào)》(Bull.Chem Soc.Japan)38卷1979頁(yè)(1965)和Chem.Ber.，788頁(yè)和2024頁(yè)(1970)。
上述用于提供-O-CO-(C1-C6烷基)或-O-CO-Ar基團(tuán)的技術(shù)均在前面討論過的溶劑中進(jìn)行，這些技術(shù)在反應(yīng)中并未產(chǎn)生一種酸性產(chǎn)物，因此，不需要在反應(yīng)中使用酸清除劑當(dāng)想得到一種R1和R2為-O-SO2(C4-C6烷基)的通式I化合物時(shí)，通式I中的二羥基化合物與磺酸的一種合適衍生物如磺酰氯、磺酰溴或磺酰胺鹽進(jìn)行反應(yīng)，方法見King和Monoir，《美國(guó)化學(xué)學(xué)會(huì)會(huì)志》(J.Am.Chem.Soc.)97卷2566-2577頁(yè)(1975)所述的方法反應(yīng)。這些二羥基化合物還可與合適的磺酸酐反應(yīng)。這些反應(yīng)可在前面討論的與酰基鹵等反應(yīng)中已解釋的條件下進(jìn)行。
可以制備通式I的化合物使R1和R2帶上不同的生物保護(hù)基團(tuán)，或優(yōu)選使R1和R2都帶上相同的生物保護(hù)基團(tuán)。優(yōu)選的保護(hù)基團(tuán)包括-OCH3、-O-CO-C(CH3)3、-O-CO-C6H5和-O-SO2-(CH2)3-CH3。
雖然通式I的化合物的游離堿形式可以在本發(fā)明的方法中使用，但優(yōu)選的方法是制備和使用一種可藥用的鹽。這樣，本發(fā)明的方法中使用的化合物主要是與多種有機(jī)酸或無機(jī)酸形成的可以藥用的酸加成鹽，包括常用于制藥工業(yè)的生理接受性鹽類。這些鹽也是本發(fā)明的一部分。用于生成這種鹽的典型無機(jī)酸包括鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硝酸、硫酸、磷酸、連二磷酸等。也可使用由有機(jī)酸衍生的鹽類，可使用的有機(jī)酸包括脂肪一元羧酸和二元羧酸、苯的鏈烷酸取代物、羥基鏈烷酸和羥基鏈烷二酸、芳香族酸、脂肪族和芳香族磺酸，這些可藥用的鹽類包括乙酸鹽、苯乙酸鹽、三氟乙酸鹽、丙烯酸鹽、抗壞血酸、苯甲酸鹽、氯代苯甲酸鹽、二硝基苯甲酸鹽、羥基苯甲酸鹽、甲氧基苯甲酸鹽、甲基苯甲酸鹽、鄰乙酰氧基苯甲酸鹽、萘-2-苯甲酸鹽、溴化物、異丁酸鹽、苯基丁酸鹽、β-羥丁酸鹽、丁炔-1，4-二酸鹽，己炔-1，4-二酸鹽、癸酸鹽、辛酸鹽、氯化物、肉桂酸鹽、檸檬酸鹽、甲酸鹽、反丁烯二羧酸鹽、乙醇酸鹽、庚酸鹽、馬尿酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、羥基馬來酸鹽、丙二酸鹽、扁桃酸鹽、甲磺酸鹽、煙酸鹽、異煙酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、對(duì)苯二甲酸鹽、磷酸鹽、磷酸一氫鹽、磷酸二氫鹽、偏磷酸鹽、焦磷酸鹽、丙炔酸鹽、丙酸鹽、苯丙酸鹽、水楊酸鹽、癸二酸鹽、琥珀酸鹽、辛二酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、焦硫酸鹽、亞硫酸鹽、亞硫酸氫鹽、磺酸鹽、苯磺酸鹽、對(duì)溴代苯磺酸鹽、氯代苯磺酸鹽、乙基磺酸鹽、2-羥基乙基磺酸鹽、甲基磺酸鹽、萘-1-磺酸鹽、萘-2-磺酸鹽、對(duì)甲苯基磺酸鹽、二甲基苯磺酸鹽、酒石酸鹽等。優(yōu)選的鹽為鹽酸鹽。
可藥用的酸加成鹽類一般是用通式I的化合物與等摩爾或過量的酸反應(yīng)得到。一般將反應(yīng)物混入一個(gè)互溶性的溶劑如二乙醚或乙酸乙酯中，鹽通常在大約1小時(shí)到十天內(nèi)從溶液中沉淀出來，并能用過濾方法析離或用常規(guī)方法去除溶劑。
可藥用的鹽類一般比衍生它們的化合物溶解性更好，這樣它們更便于配制成液體或乳劑。
下面的實(shí)施例用來進(jìn)一步說明本發(fā)明化合物的制備，但并不表明本發(fā)明可因下面任何實(shí)施例而受到局限。
1H NMR和13C NMR如指出那樣分別在300和75兆周處測(cè)量，1HNMR的化學(xué)位移用δ值來報(bào)告，δ值是相對(duì)于所用NMR溶劑化學(xué)位移的ppm。1H NMR的偶合常數(shù)用Hz來報(bào)告，并指出明顯的峰的多重性。多重峰表示如下s(單峰)，δ(雙峰)，t(三峰)，q(四峰)；m(多峰)，comp(復(fù)雜峰)，br(寬峰)，app(表觀峰)。柱色譜按Still的方法(Still，W.C.；Kahn，M.；Mitra，A.《有機(jī)化學(xué)雜志》(J.Org.Chem.)1978年43卷2923頁(yè))進(jìn)行，除非另外說明用EM Science硅膠(230-400目ASTM)進(jìn)行。徑向色譜在色譜柱上用1、2或4mm色譜板進(jìn)行。所有對(duì)空氣和/或濕度敏感的反應(yīng)均在徹底干燥的玻璃器皿里在氬氣或氮?dú)猸h(huán)境中進(jìn)行。所有濃縮都在一個(gè)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中減壓進(jìn)行。
制備1
室溫下，往raloxifene(1.00g，196mmol)攪拌溶于THF(20ml)的溶液中加入N，N-二甲基氨基吡啶(1.00g，8.2mmol)，然后加入叔丁基二甲基甲硅氯(0.90g，6mmol)。12小時(shí)后，用水稀釋反應(yīng)液，用氯仿抽提，將匯合的有機(jī)抽提物干燥(硫酸納)并濃縮。在乙酸乙酯中將油質(zhì)萃出，過濾得到沉淀物，濾液濃縮后，用快速色譜純化(硅膠，乙酸乙酯)，最后生成1.1g(80％)稠重的黃色油狀的所需產(chǎn)物1H-NMR(300MHZ，CDCl3)δ7.76(d，J＝8.9Hz，2H)，7.68(d，9.0Hz，1H)，7.22-7.29(m，3H)，6.88(dd，J＝8.9，3.1Hz，1H)，6.72(d，J＝9.1Hz，2H)，6.63(d，J＝9.1Hz，2H)，4.10(br，2H)，2.79(br，2H)，2.54(br，4H)，1.62(br，4H)，1.25(br，2H)，1.01(s，9H)，0.93(s，9H)，0.22(s，6H)，0.06(s，6H)，MS(FD)701(M+)；IR(CHCl3)2934，1642，1599，1259cm-1；元素分析理論值/實(shí)驗(yàn)值C(68.43/68.53)，H(7.90/7.92)，N(2.00/2.23).
實(shí)施例1
在-78℃，往制備1的產(chǎn)物(2.04g，2.91mmol)攪拌溶于THF(10ml)的溶液中滴入MeLi(4.16ml，1.4M的二乙醚溶液，5.82mmol)。15分鐘后，用過量的飽和碳酸氫鈉水溶液中止反應(yīng)，乙酸乙酯抽提。匯合的有機(jī)抽提物用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)、過濾，然后濃縮。所得到的物質(zhì)用徑向色譜(硅膠，4mm，2.5∶2.5∶0.1∶0.1的己烷乙酸乙酯∶三乙胺∶MeOH)進(jìn)行純化，最后得到1.70g(81％)灰白色泡沫狀的所需產(chǎn)物。1H-NMR(300MHZ，CDCl3)δ7.31-7.36(m，5H)，7.17(d，J＝2.9Hz，1H)，6.81(d，J＝8.9Hz，4H)，6.84(dd，J＝9.0，2.9Hz，1H)，4.12(br，2H)，2.81(br，2H)，2,59(br，4H)，1.65(s，3H)，1.63(br，4H)，1.45(br，2H)，0.99(s，9H)，0.97(s，9H)，0.21(s，6H)，0.19(s，6H)，MS(FD)718(M+)；IR(CHCl3)2934，1606，1467，1525，cm-1；元素分析(理論值/實(shí)驗(yàn)值) C(68.57/68.93)，H(8.28/8.26)，N(1.95/2.10)。
實(shí)施例2
在0℃，往例1產(chǎn)物(0.50g，0.69mmol)攪拌溶于THF(5ml)的溶液中加入四丁基氟化胺(1.74ml 0.1M的THF溶液，1.74mmol)。15分鐘后，加入飽和碳酸氫鈉水溶液，混合物用乙酸乙酯抽提，匯合的有機(jī)抽提物用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)、過濾，然后濃縮。所得到的物質(zhì)用徑向色譜(硅膠，2mm，2.5∶2.5∶0.1∶0.1的己烷∶乙酸乙酯∶MeOH∶三乙胺)進(jìn)行純化，最后得到定量的白色固體狀所需產(chǎn)物。1H-NMR(300MHZ，CDCl3)δ9.81(s，1H)，9.40(s，1H)，7.53(d，J＝9.2Hz，1H)，7.24(app t，J＝9.0Hz，4H)，7.03(d，J＝2.8Hz，1H)，6.80重疊d，J＝9.1Hz，6.61(dd，J＝8.9，2.9Hz，1H)，5.72(s，1H)，3，98(tm J＝4.0Hz，2H)，2.61(br，2H)，2.41(br，4H)，1.24-1.55(一系列的m，9H)；MS(FD)490(M+)。
實(shí)施例3
在0℃，往例1產(chǎn)物(1.77g，2.46mmol)攪拌溶于二氯甲烷(50ml)溶液中在加入三乙基硅(2.36ml，14.8mmol)，然后加入三氟乙酸(4.72ml)。15分鐘后，將反應(yīng)物小心倒入乙酸乙酯/飽和碳酸氫鈉水溶液混合物中中止反應(yīng)，兩相混合物用乙酸乙酯抽提，用鹽水洗滌匯合的有機(jī)抽提物，干燥(MgSO4)、過濾，然后濃縮。所得到的物質(zhì)用徑向色譜(硅膠，2mM，2.5∶2.5∶0.1∶0.1的正己烷∶乙酸乙酯∶三乙胺∶MeOH)進(jìn)行純化，最后得到1.5g(87％)白色泡沫狀的所需產(chǎn)物。1H-NMR(300MHZ，CDCl3)δ7.7.36(d，J＝9.0Hz，2H)，7.17-7.21(復(fù)雜峰4H)，6.86(d，J＝8.9，2H)，6.80(s，J＝9.0Hz，2H)，6.68(dd，J＝9.0，2.8Hz，1H)，4.57(q，J＝4.0Hz，1H)，4.17(br，2H)，2.84(br，2H)，2.62(br，4H)，1.62-1.74(complex，7H)，1.49(br，2H)，0.99(s，9H)，0.97(s，9H)，0.22(s，6H)，0.20(s，6H)，MS(FD)703(M+)；IR(CHCl3)2935，1605，1468，1265cm-1；元素分析(理論值/實(shí)驗(yàn)值)C(70.13/69.78)，H(8.47/8.62)，N(2.00/2.11).
實(shí)施例4
在0℃，往例3產(chǎn)物(0.50g，0.71mmol)攪拌溶于THF(5ml)的溶液中加入四丁基氟化胺(1.78ml，1.0M THF溶液，1.78mmol)。15分鐘后，加入過量的飽和碳酸氫鈉水溶液中止反應(yīng)，用乙酸乙酯抽提混合物，匯合的有機(jī)抽提物用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)、過濾，然后濃縮。所得到的物質(zhì)用徑向色譜(硅膠，2mm，2.5∶2.5∶0.75∶0.25的己烷∶乙酸乙酯∶MeOH∶三乙胺)進(jìn)行純化，最后得到314mg(93％)白色固體的所需產(chǎn)物。1H-NMR(300MHZ，CDCl3)δ9.71(s，1H)，9.50(s，1H)，7.30(d，J＝9.1Hz，2H)，7.08-7.17(complex，4H)，6.81-6.88(complex，4H)，6.63(dd，J＝9.1，2.8Hz，1H)，4.41(q，J＝4.2Hz，1H)，3.98(t，J＝3.8Hz，2H)，2.60(br，2H)，2.41(br，4H)，1.84(d，J＝4.0Hz，3H)，1.35-1.51(一系列的br m，6H)；MS(FD)474(M+)。
實(shí)施例5
在0℃，往例1產(chǎn)物(1.70g，2.36mmol)攪拌溶于二氯甲烷(20ml)的溶液中加入N，N-二甲基氨基吡啶(461mg，3.78mmol)，然后加入甲磺酰氯(0.27ml，3.55mmol)，0.5小時(shí)后，再加入第二份N，N-二甲基氨基吡啶(461mg，3.78mmol)，將溶液溫?zé)嶂潦覝亍?0小時(shí)后，將反應(yīng)物倒入鹽水，用乙酸乙酯抽提，匯合的有機(jī)抽提物用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)、過濾，然后濃縮。所得的物質(zhì)用徑向色譜(硅膠，2mm，2.5∶2.5∶0.1∶0.1的己烷∶乙酸乙酯∶三乙胺∶MeOH)進(jìn)行純化，最后得到1.56g(94％)白色泡沫狀的所需產(chǎn)物。1H-NMR(300MHZ，CDCl3)δ7.44(d，J＝2.8Hz，1H)，7.40(d，J＝8.8Hz，2H)，7.22(app t，J＝9.0Hz，3H)，6.78-6.86(complex，5H)，5.96(sm，1H)，5.17(s，1H)，4.00(t，J＝4.1Hz，2H)，2.60(tm，J＝4.0Hzz，2H)，2.2.38-2.41(complex，4H)，1.41-1.50(complex，4H)，1.38-1.40(m，2H)，0.98(s，9H)，0.92(s，9H)，0.22(s，6H)，0.18(s，6H)；MS(FD)700(M+)；IR(CHCl3)2934，1605，1466，1265cm-1；元素分析(理論值/實(shí)驗(yàn)值)C(70.34/70.49)，H(8.21/8.14)，N(2.00/2.10).
實(shí)施例6
在0℃，往例5產(chǎn)物(0.42g，0.61mmol)攪拌溶于THF(5ml)的溶液中加入四丁基氟化胺(1.5ml，1.0M的THF溶液，1.51mmol)，15分鐘后，往反應(yīng)物中加入飽和碳酸氫鈉水溶液，用乙酸乙酯抽提，匯合的有機(jī)抽提物用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)、過濾，然后濃縮。所得到的物質(zhì)用徑向色譜(硅膠，2mm，2.5∶2.5∶0.70∶0.30的己烷∶乙酸乙酯∶MeOH∶三乙胺)進(jìn)行純化，最后得到250mg(87％)白色固體的所需產(chǎn)物。1H-NMR(300MHZ，CDCl3)δ9.80(s，2H)，7.36(d，J＝9.2Hz，2H)，7.23-7.30(complex，3H)，7.04(d，J＝9.0Hz，1H)，6.84(d，J＝9.1Hz，2H)，6.74(dd，J＝8.9，2.5Hz，1H)，6.70(d，J＝9.1Hz，2H)，5.96(s，1H)，5.11(s，1H)，4.01(t，J＝3.8Hz，2H)，2.60(t，J＝3.9Hz，2H)，2.40(m，4H)，1.37-1.51(一系列的m，6H)；MS(FD)472(M+)；IR(CHCl3)3530，2934，1605，1465，1264cm-1。
實(shí)施例7
在-78℃，往攪拌著的制備1產(chǎn)物溶液(1.00g，1.42mmol)中加入PhLi(1.6ml 1.8M的溶液，2.84mmol)。15分鐘后，加入飽和碳酸氫鈉水溶液，用乙酸乙酯抽提，匯合的有機(jī)抽提物用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)、過濾，然后濃縮。用徑向色譜(4mm，硅膠，2.5∶2.5∶1∶.005的乙酸乙酯∶己烷∶三乙胺∶MeOH)純化所得到的粗物質(zhì)，最后得到0.81g(73％)白色泡沫狀的所需產(chǎn)物1H-NMR(300MHZ，CDCl3)δ7.11-7.22(complex，10H)，6.93(d，J＝9.1Hz，2H)，6.57-6.78(一系列的m，4H)，4.18(br，2H)，2.90(br，2H)，2.61(br，4H)，1.40-1.80(br，6H)，0.98(s，9H)，0.97(s，9H)，0.19(s，6H)，0.16(s，6H)；MS(FD)781(M+)；元素分析(理論值/實(shí)驗(yàn)值)C(70.81/71.05)，H(7.88/7.94)，N(1.80/1.97)。
實(shí)施例8
在0C，往例7產(chǎn)物(0.50g，0.64mmol)攪拌溶于THF(5ml)的溶液中加入四丁基氟化銨(1.60ml 1.0M的THF溶液，1.60mmol)。15分鐘后，加入飽和碳酸氫鈉水溶液，所得混合物用乙酸乙酯抽提。匯合的有機(jī)抽提物用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)、過濾，然后濃縮。所得到的物質(zhì)用徑向色譜(硅膠，2mm，2.5∶2.5∶0.1∶0.1的己烷∶乙酸乙酯∶MeOH∶三乙胺)進(jìn)行純化，最后得到323mg(91％)白色固體的所需產(chǎn)物。1H-NMR(300MHZ，CDCl3)δ9.35(br，2H)，7.38(d，J＝9.0Hz，1H)，7.00-7.20(complex，7H)，6.86(d，J＝8.9Hz，2H)，6.58(complex，3H)，6.40(s，1H)，6.31(d，J＝8.9Hz，2H)，3.91(t，J＝3.9Hz，2H)，2.60(br，2H)，2.41(br，4H)，1.38-1.51(一系列的m，6H)；MS(FD)552(M+)；元素分析(理論值/實(shí)驗(yàn)值)C(74.02/73.79)，H(6.03/6.26)，N(2.54/2.60)。
試驗(yàn)程序一般準(zhǔn)備程序在用于說明方法的例子中，一個(gè)絕經(jīng)后模型被用來確定不同的處理對(duì)循環(huán)脂的影響。
75日齡的雌性Sprague Dawley大鼠(重量為220-225g)來自CharlesRiver實(shí)驗(yàn)室(Portage，MI)。這些動(dòng)物在Charles River實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行雙側(cè)卵巢切除(OVX)或Sham氏外科手術(shù)，一周后裝船。到達(dá)后，它們按每籠3或4只分組飼養(yǎng)在懸掛的金屬籠中，一周內(nèi)隨意地供應(yīng)食物(含鈣物質(zhì)約0.5％)和水。室溫維持在22.2°±1.7℃，最小相對(duì)濕度為40％，房間的光周期為12小時(shí)光照12小時(shí)黑暗。藥物飼養(yǎng)組織的收集。經(jīng)過一周的適應(yīng)期(即兩周post-ovx)，開始每日給予動(dòng)物待實(shí)驗(yàn)的化合物。除非另外說明，17-α-乙炔雌二醇或試驗(yàn)化合物均以1％羧甲基纖維素懸液或溶于20％的環(huán)糊精的形式口服。對(duì)動(dòng)物每日給藥共四天。藥物飼養(yǎng)后，給動(dòng)物稱重，將動(dòng)物用KetamineXylazine(2∶1，V∶V)混合物麻醉，心臟穿刺法采集血樣，然后將動(dòng)物用CO2窒息法處死，中線切開取出子宮，稱量其濕重。膽甾醇分析。血樣在室溫下放置2小時(shí)成凝塊，3000rpm離心10分鐘收集血清。血清膽甾醇用Boehringer Mannheim Diagnostics高級(jí)膽甾醇分析試驗(yàn)來測(cè)定。簡(jiǎn)單地說是將膽甾醇氧化成膽甾醇-4-烯-3-酮和過氧化氫，過氧化氫與酚和4-氨基非那宗在過氧化氫酶的作用下，產(chǎn)生一種對(duì)位-醌亞胺染料，可在500nm處用分光光度計(jì)讀出，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線可計(jì)算膽甾醇的濃度，整個(gè)試驗(yàn)可用一個(gè)Biomek自動(dòng)工作站自動(dòng)進(jìn)行。子宮嗜曙紅細(xì)胞過氧化氫酶(EPO)試驗(yàn)。酶分析前將子宮保存在4℃，然后在50倍體積含0.005％Triton X-100的50mM Tris緩沖液(pH 8.0)中勻漿。加入0.01％的過氧化氫和10mM的鄰苯二胺(終濃度)，在450nm處測(cè)一分鐘內(nèi)光吸收的增加值，子宮中存在嗜曙紅細(xì)胞表明化合物具有雌激素活性。15秒間隔的最大反應(yīng)速率用反應(yīng)曲線開始的線性部分來確定。藥品來源17-α-乙炔雌二醇購(gòu)自Sigma Chemical Co.，St.Louis，MO。
通式I化合物對(duì)血膽甾醇的影響和激動(dòng)劑/非激動(dòng)劑活性的測(cè)定下面表I的數(shù)據(jù)表示卵巢切除大鼠、用17-α-乙炔雌二醇處理(EE2，雌激素的口服形式)的大鼠及用本發(fā)明的化合物處理的大鼠相比較的結(jié)果。雖然當(dāng)口服濃度為0.1mg/Kg/日時(shí)，EE2可引起血膽甾醇的降低，但它對(duì)子宮也產(chǎn)生了刺激作用，因而EE2處理大鼠的子宮重量比卵巢切除大鼠的子宮重量要大得多，這種子宮對(duì)雌激素的應(yīng)答在本領(lǐng)域是公認(rèn)的。
對(duì)照卵巢切除大鼠，本發(fā)明的化合物不僅一般都能降低血膽甾醇，而且就大多數(shù)試驗(yàn)過的通式化合物來說，子宮的重量?jī)H有少量增加甚至略微減小。與本領(lǐng)域已知的其它雌激素化合物相比，既具有降低血清膽甾醇的優(yōu)點(diǎn)又不對(duì)子宮重量產(chǎn)生有害的影響，這樣的化合物是非常少見和理想的。
正如下面的數(shù)據(jù)所表示的，雌激素性質(zhì)還可通過嗜曙紅細(xì)胞在子宮內(nèi)浸潤(rùn)的有害應(yīng)答來評(píng)估。本發(fā)明的化合物沒有引起卵巢切除大鼠子宮基質(zhì)層中觀察到的嗜曙紅細(xì)胞數(shù)目的任何增加。而雌二醇卻同預(yù)期的一樣，引起了嗜曙紅細(xì)胞浸潤(rùn)的大量增加。
下表I的數(shù)據(jù)反映每種處理的應(yīng)答大鼠。
★化合物A是通式I的一個(gè)化合物，其中R1和R2為羥基，n＝2，R3為-O(CH2)2，R4和R5組成哌啶，R6為＝CH-苯基除了已經(jīng)證明的本發(fā)明的化合物的益處之外(特別在與雌二醇比較時(shí))，上述數(shù)據(jù)還清楚地證明了通式I的化合物不是雌激素模擬物，同時(shí)各種處理中都沒有觀察到有害的毒性作用(存活)。骨質(zhì)疏松癥試驗(yàn)程序在完成一般準(zhǔn)備程序后，對(duì)大鼠每日進(jìn)行處理共35天(每個(gè)處理組有6只大鼠)，在第36天用CO2窒息法將大鼠處死。35天的時(shí)間已足夠使骨密度的減少達(dá)到最大值，測(cè)量按這里所述的方法進(jìn)行。在處死大鼠時(shí)取出子宮，剔除外面的組織，將里面的液體排出，測(cè)量其濕重，用以證明與卵巢切除相關(guān)的雌激素缺乏。作為對(duì)卵巢切除的應(yīng)答，子宮的重量通常減少大約75％。然后將子宮置于10％的中性緩沖的福爾馬林中用于隨后的組織學(xué)分析。
取出大鼠的右股骨，用一個(gè)影像分析程序(NIH影像)對(duì)遠(yuǎn)端進(jìn)行X-射線數(shù)字成像和分析。這些動(dòng)物脛骨的近側(cè)面也用定量計(jì)算的X-射線斷層術(shù)進(jìn)行掃描。
與上面的程序一樣，本發(fā)明化合物和乙炔基雌二醇溶于20％的羥丙基β-環(huán)糊精經(jīng)口給藥于試驗(yàn)動(dòng)物。
概述起來，與完整的用載劑進(jìn)行處理的動(dòng)物相比，試驗(yàn)動(dòng)物的卵巢切除造成股骨密度明顯減少。口服乙炔基雌二醇(EE2)可防止這種減少，但一直存在對(duì)卵巢刺激的危險(xiǎn)。
本發(fā)明的化合物以一種普遍性的劑量依賴方式阻止骨量的減少，因此本發(fā)明的化合物對(duì)于治療絕經(jīng)后綜合癥特別是骨質(zhì)疏松癥是有效的。MCF-7增殖試驗(yàn)MCF-7乳腺癌細(xì)胞(ATCC HTB22)維持在補(bǔ)加有10％牛胎血清(FBS)(v/v)、L-谷氨酸(2mM)、丙酮酸鈉(1mM)、HEPES{(N-[2-羥乙基]哌嗪-N′-[2-乙磺酸]10mM}、非必需氨基酸和牛胰島素(1μg/ml)的MEM(最基本培養(yǎng)基，無酚紅，Sigma，St.Louis，MO)(維持培養(yǎng)基)中。在開始試驗(yàn)前10天，將MCF-7細(xì)胞轉(zhuǎn)移到試驗(yàn)培養(yǎng)基中。試驗(yàn)培養(yǎng)基與維持培養(yǎng)基的差別是用10％葡聚糖包被活性碳解析的牛胎血清(DCC-FBS)替代FBS來消除內(nèi)含的甾醇類物質(zhì)。用細(xì)胞解離培養(yǎng)基(補(bǔ)加有10mM的HEPES和2mMEDTA、不含Ca++/Mg++的HBSS(不含酚紅))將MCF-7從維持培養(yǎng)瓶中移出，用試驗(yàn)培養(yǎng)基洗滌兩次，并調(diào)整至80000細(xì)胞/毫升，在平底的微培養(yǎng)孔(Costar 3596)中加入大約100μl(8000個(gè)細(xì)胞)，在37℃5％CO2的濕潤(rùn)培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時(shí)，使細(xì)胞在轉(zhuǎn)移后粘附和平衡。用試驗(yàn)培養(yǎng)基制備藥物的稀釋梯度并以DMSO作稀釋對(duì)照，取50μl轉(zhuǎn)入一式三份的培養(yǎng)物中，再加入50μl試驗(yàn)培養(yǎng)基，使總體積達(dá)到200μl，繼續(xù)在37C 5％CO2的濕潤(rùn)培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48小時(shí)，用氚化的胸腺嘧啶脈沖計(jì)1μCi/孔標(biāo)記4小時(shí)。將培養(yǎng)物在-70℃冷凍24小時(shí)中止培養(yǎng)，然后融化，用Skatron半自動(dòng)細(xì)胞收集儀收集微培養(yǎng)物，樣品用Wallac BetaPlace計(jì)數(shù)器記錄其液閃。DMBA-誘導(dǎo)的乳腺癌抑制在購(gòu)自Harlan Industries，Indianapolis，Indiana的雌性Sprague-Dawley大鼠中誘導(dǎo)產(chǎn)生雌激素依賴型乳腺腫瘤。約55齡日的大鼠被一次性喂入20mg 7，12-二甲基苯并[a]蒽(DMBA)，在DMBA給藥約6周后，每周對(duì)乳腺進(jìn)行觸檢，觀察腫瘤是否出現(xiàn)。一旦一個(gè)或多個(gè)腫瘤出現(xiàn)，用卡尺測(cè)量每個(gè)腫瘤的最大和最小直徑，記錄測(cè)量數(shù)據(jù)，然后將這個(gè)動(dòng)物選用于試驗(yàn)。盡量將不同大小的腫瘤均勻地分配在處理組和對(duì)照組中使平均大小的腫瘤在各試驗(yàn)組中等量分布。每次試驗(yàn)對(duì)照組和試驗(yàn)組含有5至9只動(dòng)物。
通式I的化合物既可在2％的阿拉伯膠中腹膜注射給藥，又可經(jīng)口給藥。經(jīng)口給藥的化合物既可溶解也可懸浮在0.2ml的玉米油中。每次試驗(yàn)，包括阿拉伯膠和玉米油對(duì)照試驗(yàn)，都每天每只動(dòng)物給藥一次。在最初的腫瘤測(cè)量和動(dòng)物選用后，用前面所提到的方法每星期對(duì)腫瘤進(jìn)行測(cè)量。對(duì)動(dòng)物的處理和測(cè)量持續(xù)3至5周，然后測(cè)出腫瘤的最后區(qū)域。對(duì)每一個(gè)化合物處理的大鼠的和對(duì)照處理的大鼠，確定平均腫瘤區(qū)域的變化。子宮纖維病變?cè)囼?yàn)程序試驗(yàn)1
在3-20名患有子宮纖維病變的婦女中，用本發(fā)明的一個(gè)化合物進(jìn)行給藥，化合物劑量為0.1-1000mg/天，給藥期為3個(gè)月。
在給藥期及中止給藥后三個(gè)月內(nèi)，觀察藥物對(duì)這些婦女的子宮纖維病變的影響。試驗(yàn)2除給藥期為6個(gè)月外，步驟與試驗(yàn)1相同。試驗(yàn)3除給藥期為1年外，步驟與試驗(yàn)1相同。試驗(yàn)4A.在豚鼠中誘導(dǎo)纖維瘤通過長(zhǎng)期雌激素刺激在性成熟的雌性豚鼠中誘導(dǎo)子宮纖維瘤。給動(dòng)物每星期3-5次注射雌二醇共2-4個(gè)月或直到腫瘤形成。處理包括采用本發(fā)明的化合物或載劑進(jìn)行每日給藥共3-16周，然后處死動(dòng)物，取出子宮分析腫瘤的消退。B.在裸鼠中移植人的子宮纖維病變組織將人的子宮纖維瘤組織移植到性成熟的閹割的雌性裸鼠腹膜腔或子宮肌層中，給予外源雌激素來誘導(dǎo)移植組織的生長(zhǎng)。在某些情況下，收集的腫瘤細(xì)胞在移植前進(jìn)行體外培養(yǎng)。處理包括用本發(fā)明的化合物或載劑進(jìn)行灌胃，每日一次共3-16周，取出移植物，測(cè)量其生長(zhǎng)或消退。在處死動(dòng)物時(shí)，收集子宮評(píng)價(jià)器官的狀態(tài)。試驗(yàn)5A.收集人子宮纖維瘤的組織，在體外按原代未轉(zhuǎn)化的培養(yǎng)物進(jìn)行維持。手術(shù)樣品需通過一個(gè)無菌的網(wǎng)孔或篩孔，或從周圍組織中挑出制成單細(xì)胞懸液。細(xì)胞維持在含10％血清和抗生素的培養(yǎng)基中。確定細(xì)胞在有或無雌激素時(shí)的生長(zhǎng)率。分析細(xì)胞產(chǎn)生補(bǔ)體C3成分的能力和對(duì)生長(zhǎng)因子與生長(zhǎng)激素的應(yīng)答。在用孕激素、GnRH、本發(fā)明的一種化合物和載劑處理后評(píng)價(jià)體外培養(yǎng)物的增殖應(yīng)答。每星期通過評(píng)價(jià)甾醇類激素受體的水平來確定重要的細(xì)胞特征在體外是否保持。共使用5-25個(gè)病人的組織。
在上述試驗(yàn)中至少一個(gè)試驗(yàn)里表現(xiàn)出活性就表明本發(fā)明的化合物在治療子宮纖維病變方面是有前途的。子宮內(nèi)膜異位試驗(yàn)步驟在試驗(yàn)1和試驗(yàn)2中，本發(fā)明的化合物在給藥14天和21天后對(duì)移植子宮內(nèi)膜組織生長(zhǎng)的影響能夠被檢驗(yàn)。試驗(yàn)112-30只成年CD株雌性大鼠用作試驗(yàn)動(dòng)物，它們被分為數(shù)量相等的三個(gè)組，所有動(dòng)物的動(dòng)情周期受到監(jiān)測(cè)。在動(dòng)情前期對(duì)每只雌鼠進(jìn)行手術(shù)，將每組雌鼠的左側(cè)子宮角取出，切成小塊，將這些小塊松馳地縫于靠近腸系膜血流的多個(gè)位點(diǎn)上，同時(shí)將第二組雌鼠的卵巢切除。
從手術(shù)后第二天開始，給第一組和第二組的動(dòng)物腹膜腔注射水共14天，而給第三組的動(dòng)物按1.0mg/公斤體重腹膜腔注射本發(fā)明的化合物同樣長(zhǎng)的時(shí)間。經(jīng)過14天的處理，處死每只雌鼠，取出子宮內(nèi)膜移植物、腎上腺、殘留的子宮和可取得的卵巢，準(zhǔn)備用于組織學(xué)檢查。對(duì)卵巢和腎上腺進(jìn)行稱重試驗(yàn)212-30只成年CD株雌性大鼠用作試驗(yàn)動(dòng)物，它們被分為相同的二個(gè)組，所有動(dòng)物的動(dòng)情周期受到監(jiān)測(cè)。在動(dòng)情前期對(duì)每只雌鼠進(jìn)行手術(shù)，將每組雌鼠的左側(cè)子宮角取出，切成小塊，將這些小塊松馳地縫于靠近腸系膜血流的多個(gè)位點(diǎn)上。
手術(shù)大約50天后，給第一組動(dòng)物腹膜腔注射水共21天，而給第二組的動(dòng)物按1.0mg/公斤體重腹膜腔注射本發(fā)明的化合物同樣長(zhǎng)的時(shí)間。經(jīng)過21天的處理，處死每只雌鼠，取出子宮內(nèi)膜移植物和腎上腺并稱重，測(cè)量移植物作為生長(zhǎng)的標(biāo)志。監(jiān)測(cè)動(dòng)物的動(dòng)情周期。試驗(yàn)3A.子宮內(nèi)膜異位癥的手術(shù)誘導(dǎo)用自體子宮內(nèi)膜組織在大鼠和/或兔中誘導(dǎo)子宮內(nèi)膜異位癥。對(duì)繁殖力成熟的雌性動(dòng)物作雙側(cè)卵巢切除，并外源給予雌激素來提供一個(gè)特定而恒定的激素水平。將50-150只動(dòng)物的自體子宮內(nèi)膜組織移植到腹膜內(nèi)，給予雌激素誘導(dǎo)移植組織的生長(zhǎng)。處理包括每日用灌胃的方法給予本發(fā)明的化合物共3-16周。取出移植物，測(cè)量其生長(zhǎng)或消退。在處死動(dòng)物時(shí)，收集完整的子宮角來評(píng)價(jià)子宮內(nèi)膜的狀態(tài)。B.在裸鼠中移植人的子宮內(nèi)膜組織將人子宮病灶的組織移植到性成熟的閹割的雌性裸鼠腹膜中。給予外源雌激素誘導(dǎo)移植組織的生長(zhǎng)。在某些情況下，收集的子宮內(nèi)膜細(xì)胞在移植前進(jìn)行體外培養(yǎng)。處理包括用本發(fā)明的化合物進(jìn)行灌胃，每日一次，共3-16周。取出移植物，測(cè)量其生長(zhǎng)或消退。在處死動(dòng)物時(shí)，收集子宮來評(píng)價(jià)完整子宮內(nèi)膜的狀態(tài)。試驗(yàn)4A.收集取自人子宮內(nèi)膜病灶的組織，在體外按原代未轉(zhuǎn)化培養(yǎng)物進(jìn)行維持。手術(shù)樣品需通過一個(gè)無菌的網(wǎng)孔或篩孔，或從周圍組織中挑出制成單細(xì)胞懸液。細(xì)胞維持在含10％血清和抗生素的培養(yǎng)基中。確定細(xì)胞在有或無雌激素時(shí)的生長(zhǎng)率，分析細(xì)胞產(chǎn)生補(bǔ)體C3成分的能力和對(duì)生長(zhǎng)因子與生長(zhǎng)激素的應(yīng)答。在用孕激素、GnRH、本發(fā)明的一種化合物和載劑處理后評(píng)價(jià)體外培養(yǎng)物的增殖應(yīng)答。每星期通過評(píng)價(jià)甾醇類激素受體的水平來確定重要的細(xì)胞特征在體外是否保持。共使用5-25個(gè)病人的組織。
在上述任何試驗(yàn)中具有活性就表明本發(fā)明的化合物對(duì)治療子宮內(nèi)膜異位癥是有用的。抑制動(dòng)脈平滑細(xì)胞增生/再狹窄試驗(yàn)程序本發(fā)明的化合物能抑制動(dòng)脈平滑細(xì)胞的增生，這可以用培養(yǎng)的取自兔動(dòng)脈的平滑細(xì)胞來證明。增生用測(cè)量DNA合成來確定。細(xì)胞用Ross描述的移出方法獲得，方法見Ross，《細(xì)胞生物學(xué)雜志》(J.of CellBio.)50卷172頁(yè)(1971)。將細(xì)胞鋪于96孔微培養(yǎng)板5天，培養(yǎng)物開始匯合，生長(zhǎng)停滯，然后將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有0.5-2％低血小板血漿、2mML-谷氨酸、100U/ml青霉素、100mg/ml鏈霉素、1mC/ml3H-胸腺嘧啶、20ng/ml血小板衍生的生長(zhǎng)因子及各種濃度的本發(fā)明的化合物的Dulbecco’s改良Eagle’s培養(yǎng)基(DMEM)中?；衔锏馁A存液用二甲基亞砜制備，然后用上述試驗(yàn)培養(yǎng)基稀釋到合適的濃度(0.01-30mM)。細(xì)胞在37℃、5％CO2/95％空氣的條件下培養(yǎng)24小時(shí)。24小時(shí)后，將細(xì)胞在甲醇中固定。然后按Bonin等人描述的方法用閃爍計(jì)數(shù)確定DNA中3H-胸腺嘧啶的摻入。Bonin等，Exp.Cell Res.181475-482(1989)。
本發(fā)明的化合物對(duì)動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增生的抑制，還可以進(jìn)一步用其對(duì)對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞的影響來證明。將取自兔動(dòng)脈的平滑肌細(xì)胞接種在12孔組織培養(yǎng)板上。培養(yǎng)基為補(bǔ)加有10％牛胎血清、2mM L-谷氨酸、100U/ml青霉素、100mg/ml鏈霉素的DMEM培養(yǎng)基。24小時(shí)后，細(xì)胞貼附，用含10％牛胎血清、2mM L-谷氨酸、100U/ml青霉素、100mg/ml鏈霉素和所需濃度化合物的DMEM取代原來的培養(yǎng)基，讓細(xì)胞生長(zhǎng)4天。用胰蛋白酶處理。每一培養(yǎng)物中細(xì)胞的數(shù)量用一個(gè)ZM-Coulter計(jì)數(shù)器確定。
在上述試驗(yàn)中具有活性表明本發(fā)明的化會(huì)物在治療再狹窄中有潛力。
本發(fā)明還提供一種治療婦女絕經(jīng)后綜合癥的方法。該方法包括前面所說的使用通式I化合物的方法，并進(jìn)一步包括給予婦女有效劑量的雌激素或孕激素。這些療法對(duì)治療骨質(zhì)疏松癥和降低血膽甾醇特別有效，因?yàn)椴∪丝梢垣@得每種藥劑帶來的益處，而本發(fā)明的化合物又能抑制雌激素和孕激素的不必要副作用。在下面任何絕經(jīng)后綜合癥的試驗(yàn)中聯(lián)合治療有作用，就表明這些治療對(duì)緩解婦女絕經(jīng)后綜合癥是有用的。
雌激素和孕激素的多種形式都可由商業(yè)途徑獲得。雌激素類藥劑包括乙炔雌激素(0.01-0.03mg/天)、美雌醇(0.05-0.15mg/天)和共軛雌激素類激素，如共軛雌激素(Wyeth-Ayerst；0.3-2.5mg/天)。孕激素類藥劑包括甲基孕甾酮，如Provera(Upjohn，2.5-10mg/天)、異炔諾酮(1.0-10.0mg/天)和炔諾酮(0.5-2.0mg/天)；優(yōu)選的雌激素類化合物藥物是共軛雌激素，而異炔諾酮和炔諾酮是優(yōu)選的孕激素類藥物。
每種雌激素類藥物和孕激素類藥物的給藥方法與本領(lǐng)域中已知的方法一致。對(duì)本發(fā)明的大多數(shù)方法來說，通式I的化合物連續(xù)給藥，每天1-3次。但在治療子宮內(nèi)膜異位癥時(shí)特別有效的是周期給藥，或在疾病引起疼痛時(shí)及時(shí)給藥。在再狹窄的病例中，藥物治療應(yīng)限于治療程序如血管形成術(shù)后的短時(shí)間內(nèi)(1-6個(gè)月)。
在這里，“有效劑量”一詞是指能夠緩解這里描述的多種病理情況的本發(fā)明化合物的量。當(dāng)然，根據(jù)本發(fā)明的化合物給藥的特定劑量應(yīng)由病例的特殊情況來確定，這些情況包括所給的化合物、給藥途徑、病人情況、需治療的病情。一般每日劑量可為無毒劑量水平，包括大約5mg-600mg/天的本發(fā)明的化合物。優(yōu)選的劑量范圍是大約15mg-80mg/天。
本發(fā)明的化合物可經(jīng)多種途徑給藥，包括口、直腸、皮內(nèi)、皮下、靜脈、肌肉和鼻腔。優(yōu)選這些藥物在給藥前配制。選用何種藥物應(yīng)由主治醫(yī)師決定。這樣本發(fā)明的另一個(gè)方面是一個(gè)藥用組合物，包括有效劑量的一個(gè)通式I的化合物或其可藥用的鹽類，任選地含有有效劑量的雌激素或孕激素，以及可藥用的載劑、稀釋劑或賦形劑。
在這樣的配方中，總的活性成分占配方重量的0.1％-99.9％?！翱伤幱谩币辉~表示載劑、稀釋劑、賦形劑及鹽類必須與配方中其它成分匹配，而且對(duì)接受者無害。
本發(fā)明的配方能按本領(lǐng)域已知的步驟用眾所周知的易獲得的成分進(jìn)行配制。例如通式I的化合物，與或不與雌激素或孕激素化合物一起，能同常用的賦形劑、稀釋劑或載劑一起配制，制成片劑、膠囊、懸液、粉劑等。適于這種配方的賦形劑、稀釋劑和載劑的實(shí)例包括如下填料和擴(kuò)增劑，如淀粉、蔗糖、甘露醇、硅的衍生物；粘合劑，如羧甲基纖維素及其它纖維素衍生物、藻酸鹽、明膠和聚乙烯吡咯烷酮；保濕劑，如甘油；分散劑，如碳酸鈣、碳酸氫鈉；阻溶劑，如石蠟；吸收促進(jìn)劑，如季銨化合物；表面活性劑，如十六烷醇、甘油單硬脂酸酯；吸收載劑，如陶土和皂土；以及潤(rùn)滑劑，如滑石、硬脂酸鈣和鎂及固體聚乙二醇。
這些化合物還可以配制成甘香劑或便于口服的溶液，或配制成便于非腸道給藥(如肌肉內(nèi)、皮下或靜脈給藥的溶液。而且這些化合物非常適合配制成持續(xù)釋放的藥劑形式。還可以這樣組合配制使其活性成分只在或優(yōu)選在特定的生理位置釋放，并可能是一段時(shí)間之后釋放。藥物的外衣、被膜或保護(hù)性基質(zhì)能用聚合物或蠟等制成。
通式I的化合物，單獨(dú)或者與本發(fā)明的藥劑組合一般都以方便的配方進(jìn)行給藥，下面所舉的配方僅為進(jìn)行說明，并不是為了限制本發(fā)明的范圍。
配方在下面的配方中，“活性成分”表示通式I的一種化合物或其鹽或溶劑化物配方1明膠膠囊硬明膠膠囊用如下方法制備成分 量(mg/膠囊)活性成分 0.1-1000淀粉，NF0-650淀粉可流動(dòng)粉末 0-650硅氧烷流體350厘沲 0-15上面的配方可根據(jù)所提供的合理變化而改變。
一種片劑配方用下面成分制備配方2片劑成分 量(mg/片)活性成分 2.5-1000纖維素微晶 200-650二氧化硅霧化 10-650硬脂酸 5-15將各成分混合壓制成片劑或，每片含2.5-1000mg活性成分的片劑制備如下配方3片劑成分 量(mg/片)活性成分 25-1000淀粉45纖維素微晶 35聚乙烯吡咯烷酮(10％的水溶液)4羧甲基纖維素鈉 4.5硬脂酸鎂0.5滑石1活性成分、淀粉、纖維素過美國(guó)篩號(hào)45目的篩并充分混合，將聚乙烯吡咯烷酮溶液與得到的粉末混合并過美國(guó)篩號(hào)14目的篩。產(chǎn)生的顆粒在50℃-60℃干燥并過美國(guó)篩號(hào)18目的篩。羧甲基淀粉鈉、硬脂酸鎂和滑石先過美國(guó)篩號(hào)60目的篩，然后加入到顆粒中，混勻后在壓片機(jī)上制成片劑。
含0.1-1000mg藥劑的5ml懸液制備如下配方4懸液成分量(mg/5ml)活性成分0.1-1000mg羧甲基纖維素鈉50mg糖漿 1.25mg苯甲酸溶液0.10mL香劑 q.v.色劑 q.v.加純水至 5ml藥劑先過美國(guó)篩號(hào)45目的篩，然后與羧甲基纖維素鈉和糖漿混合，形成調(diào)勻的糊狀物。用少許水稀釋苯甲酸溶液、香劑和色劑，并加入糊狀物，攪拌，然后加足量的水調(diào)至所需體積。含有下述成分的氣溶膠溶液制備如下配方5氣溶膠成分 量(重量百分?jǐn)?shù))活性成分0.25乙醇 25.75推進(jìn)劑22(氯二氟甲烷) 70.00將活性成分與乙醇混合，然后加入部分推進(jìn)劑22，冷卻到30℃，轉(zhuǎn)入一個(gè)填充裝置中，將所需數(shù)量注入一個(gè)不銹鋼容器，用剩下的推進(jìn)劑稀釋，然后在容器上安裝閥門。栓劑制備如下配方6栓劑成分 量mg/栓劑活性成分250飽和脂肪酸甘油酯 2000活性成分過美國(guó)篩號(hào)60目的篩，并懸于預(yù)先用最低必需溫度熔化的飽和脂肪酸甘油酯中，混合物注入一個(gè)2克容量的栓劑模中，冷卻。一種靜脈注射液配方制備如下配方7靜脈注射液成分量活性成分 50mg等滲鹽水 2000ml含上述成分的溶液，可以大約每分鐘1ml的速度對(duì)病人進(jìn)行靜脈給藥。配方8組合膠囊I成分量(mg/膠囊)活性成分 50共軛雌激素 1微晶纖維素pH10150淀粉1500 117.50硅油 2吐溫80 0.50亞微觀硅石 0.25配方9組合膠囊II成分量(mg/膠囊)活性成分 50異炔諾酮 5微晶纖維素pH10182.50淀粉1500 90硅油 2吐溫800.50配方10組合片劑成分 量(mg/膠囊)活性成分 50共軛雌激素1玉米淀粉NF50聚維酮K29-32 6微晶纖維素pH101 41.50微晶纖維素pH102 136.50交聯(lián)聚維酮XL102.50硬脂酸鎂 0.50亞微觀硅石0.50
權(quán)利要求
1.通式I的化合物及其可藥用的鹽類，
其中R1為H、OH、鹵素、OCO(C1-C6烷基)、OCO(芳基)、OSO2(C4-C6烷基)、OCOO(C1-C6烷基)、OCOO(芳基)、OCONH(C1-C6烷基)或OCON(C1-C6烷基)2；R2為芳基、C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基或4-環(huán)己醇；R3為O(CH2)2或O(CH2)3；R4和R5任選地為CO(CH2)2CH3、CO(CH2)3CH3、C1-C6烷基，或R4和R5及與其相連的氮原子結(jié)合成哌啶、嗎啉、吡咯烷、3-甲基吡咯烷、3，3-二甲基吡咯烷、3，4-二甲基吡咯烷、吖庚因或2-甲基哌啶；R6為＝C＝CH2、＝CH(C1-C5烷基)、＝CH(C2-C5鏈烯基)、＝C＝CH(C1-C5烷基)、＝CH(芳基)、＝C(OH)(C1-C5烷基)、＝C(OH)(C2-C5鏈烯基)、＝C(OH)芳基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R3為-O(CH2)2。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中R4與R5組成哌啶子基。
4.權(quán)利要求3的化合物，其中R1為-OH，R2為4-羥基苯基。
5.權(quán)利要求4的化合物，其中R6為＝C(OH)甲基、＝C＝CH2、＝C (OH)苯基、＝CH苯基或＝CH(C2H5)。
6.一種藥用組合物，該組合物含有權(quán)利要求1的化合物或其可藥用的鹽類，任選地含有有效劑量的雌激素或孕激素，以及與之組合的藥學(xué)上可接受的載劑、稀釋劑或賦形劑。
7.一種緩解婦女絕經(jīng)后綜合癥的方法，包括給予需要這種治療的婦女有效劑量的權(quán)利要求1的化合物或其可藥用的鹽類。
8.權(quán)利要求7的方法，其中絕經(jīng)后綜合癥的病理情況是骨質(zhì)疏松癥。
9.權(quán)利要求7的方法，其中絕經(jīng)后綜合癥的病理情況與一種心血管疾病有關(guān)。
10.權(quán)利要求9的方法，其中心血管疾病是高血脂。
11.權(quán)利要求7的方法，其中絕經(jīng)后綜合癥的病理情況是雌激素依賴型癌癥。
12.一種抑制子宮纖維病變的方法，包括給予需要這種治療的婦女有效劑量的權(quán)利要求1的化合物或其可藥用的鹽類。
13.一種抑制子宮內(nèi)膜異位的方法，包括給予需要這種治療的婦女有效劑量的權(quán)利要求1的化合物或其可藥用的鹽類。
14.一種抑制平滑肌細(xì)胞增生的方法，包括給予需要這種治療的人有效劑量的權(quán)利要求1的化合物或其可藥用的鹽類。
15.一種抑制再狹窄的方法，包括給予需要這種治療的人有效劑量的權(quán)利要求1的化合物或其可藥用的鹽類
16.一種緩解絕經(jīng)后綜合癥的方法，包括權(quán)利要求7的方法，并進(jìn)一步包括給予所提到的婦女有效劑量的雌激素。
17.一種緩解絕經(jīng)后綜合癥的方法，包括權(quán)利要求7的方法，并進(jìn)一步包括給予所提到的婦女有效劑量的孕激素。
全文摘要
本發(fā)明提供通式(Ⅰ)的化合物及其可藥用的鹽類,其中R
文檔編號(hào)A61K31/38GK1178464SQ96192485
公開日1998年4月8日 申請(qǐng)日期1996年3月7日 優(yōu)先權(quán)日1996年3月7日
發(fā)明者H·U·布賴恩特, J·A·道奇 申請(qǐng)人:伊萊利利公司