專(zhuān)利名稱(chēng)：膠原基眼角膜支架材料的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種多糖及膠原的復(fù)合材料及其制備方法。此材料有一定的透光性，外觀成薄膜狀。用于眼科眼角膜移植前的角膜細(xì)胞培養(yǎng)支架。屬于醫(yī)用生物材料領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
目前世界上超過(guò)1000萬(wàn)人的眼盲是由角膜病引起，為導(dǎo)致眼盲的第二大原因，僅次于白內(nèi)障。其中80%可以通過(guò)角膜移植手術(shù)脫盲。然而，傳統(tǒng)的角膜移植手術(shù)有其兩大弊端，一是角膜供體的來(lái)源困難，二是手術(shù)成功率低。有鑒于此，開(kāi)發(fā)一種角膜移植術(shù)前針對(duì)病人特有眼角膜細(xì)胞生存繁殖的支架材料變的尤為重要。又由于天然眼角膜的結(jié)構(gòu)中基質(zhì)層90%為膠原，故本公司采用了利用多糖 與膠原進(jìn)行結(jié)構(gòu)重建的方法制備此類(lèi)復(fù)合支架材料。此方法制得的材料，均勻、透光、有一定的抗壓性，防水，主要組成成分接近天然角膜組織，具有良好的生物相容性。能為角膜移植受體的角膜細(xì)胞培養(yǎng)提供良好的支架。

發(fā)明內(nèi)容
本材料選用了多糖與膠原進(jìn)行結(jié)構(gòu)重建的方法制成。能夠滿(mǎn)足角膜細(xì)胞培養(yǎng)達(dá)到角膜重建的要求。主要操作步驟如下I、膠原溶液的制備市售I型膠原、II型膠原、III型膠原之一或多種，溶于
O.01mol/L O. 5mol/L的鹽酸，攪拌均勻，制得濃度為O. 1% 15. 0% (w/w)的溶液。2、復(fù)合組分制備市售殼聚糖鹽酸鹽、羧化殼聚糖、糖胺聚糖、蛋白聚糖、殼聚糖乳酸鹽、殼聚糖季胺鹽、殼聚糖硫酸脂、類(lèi)透明質(zhì)酸殼聚糖、海藻酸鈉、透明質(zhì)酸、羧甲基纖維素鈉、羥乙基纖維鈉或羥丙基纖維素鈉中的一種或兩種多糖與膠原溶液中的膠原按質(zhì)量比為(I 10) (10 I)的比例攪拌混合均勻。3、堿溶液市售氫氧化鈉，溶液配制，使其濃度為O. 01mol/L 5. OmoI/L04、膠原基眼角膜支架材料的制備復(fù)合組分在溫度為(1°C 40°C )的環(huán)境下混合攪拌，O. 5h 24h后，堿溶液調(diào)pH值，使最終pH值為出 8)。最后將所得溶液進(jìn)行鋪板交聯(lián)成膜。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例I、取市售殼聚糖鹽酸鹽I. 0g，緩慢倒進(jìn)IOOml濃度為5. O %的膠原溶液中，邊攪拌邊倒入。其中膠原溶液為I型膠原和III型膠原的混合膠原溶于0. 2mol/L鹽酸。攪拌均勻后，攪拌I小時(shí)，環(huán)境溫度23°C。用l.Omol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至7。將所得復(fù)合材料鋪板交聯(lián)成膜。多糖與膠原的質(zhì)量比為1:5;實(shí)施例2、取市售海藻酸鈉I. 3g，緩慢倒進(jìn)IOOml濃度為13. O %的膠原溶液中，邊攪拌邊倒入。其中膠原溶液為I型膠原和II型膠原的混合膠原溶于3. Omol/L鹽酸。攪拌均勻后，攪拌7小時(shí)，環(huán)境溫度23°C。用5. Omol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至6。將所得復(fù)合材料鋪板交聯(lián)成膜。多糖與膠原的質(zhì)量比為I : 10。實(shí)施例3、取市售羧化殼聚糖I. 5g，緩慢倒進(jìn)IOOml濃度為I. O %的膠原溶液中，邊攪拌邊倒入。其中膠原溶液為I型膠原和III型膠原的混合膠原溶于O. 2mol/L鹽酸。攪拌均勻攪拌12小時(shí)，環(huán)境溫度38°C。用I. Omol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至7。將所得復(fù)合材料鋪板交聯(lián)成膜。多糖與膠原的質(zhì)量比為3 2。實(shí)施例4、 取市售殼聚糖乳酸鹽5. 0g，緩慢倒進(jìn)IOOml濃度為5. O %的膠原溶液中，邊攪拌邊倒入。其中膠原溶液為I型膠原和II型膠原及III型膠原的混合膠原溶于0. 2mol/L鹽酸。攪拌均勻后，攪拌8小時(shí)，環(huán)境溫度2°C。用3. 0mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至6. 8。將所 得復(fù)合材料鋪板交聯(lián)成膜。多糖與膠原的質(zhì)量比為I : I。實(shí)施例5、取市售殼聚糖季胺鹽10. 0g，緩慢倒進(jìn)IOOml濃度為10. O %的膠原溶液中，邊攪拌邊倒入。其中膠原溶液為II型膠原和III型膠原的混合膠原溶于0. 2mol/L鹽酸。攪拌均勻后，攪拌2小時(shí)，環(huán)境溫度10°C。用0. 5mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至7. 3。將所得復(fù)合材料鋪板交聯(lián)成膜。多糖與膠原的質(zhì)量比為I : I。實(shí)施例6、取市售殼聚糖硫酸脂2. 0g，緩慢倒進(jìn)IOOml濃度為0. 5%的膠原溶液中，邊攪拌邊倒入。膠原溶液為I型膠原溶于0. 2mol/L鹽酸，攪拌均勻后，攪拌0. 5小時(shí)，環(huán)境溫度15°C。用2.5mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至7。將所得復(fù)合材料鋪板交聯(lián)成膜。多糖與膠原的質(zhì)量比為4 I。實(shí)施例7、取市售類(lèi)透明質(zhì)酸殼聚糖3. Og,緩慢倒進(jìn)IOOml濃度為2. 0%的膠原溶液中，邊攪拌邊倒入。其中膠原溶液為I型膠原和III型膠原的混合膠原溶于0. 2mol/L鹽酸，攪拌均勻后，攪拌5小時(shí)，環(huán)境溫度18°C。用2. 8mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至6. 5。將所得復(fù)合材料鋪板交聯(lián)成膜。多糖與膠原的質(zhì)量比為3 2。實(shí)施例8、取市售羧甲基纖維素鈉8. 0g，緩慢倒進(jìn)IOOml濃度為2. O %的膠原溶液中，邊攪拌邊倒入。其中膠原溶液為II型膠原和III型膠原的混合膠原溶于0. 2mol/L鹽酸，攪拌均勻后，攪拌10小時(shí)，環(huán)境溫度1°C。用4. Omol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至8。將所得復(fù)合材料鋪板交聯(lián)成膜。多糖與膠原的質(zhì)量比為4 I。實(shí)施例9、取市售殼聚糖鹽酸鹽I. 5g和羧甲基纖維素鈉I. 5g，分別緩慢倒進(jìn)IOOml濃度為I. 5%的膠原溶液中，邊攪拌邊倒入。其中膠原溶液為I型膠原溶于I. 0mol/L鹽酸，攪拌均勻后，攪拌18小時(shí)，環(huán)境溫度25°C。用2. 0mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至8。將所得復(fù)合材料鋪板交聯(lián)成膜。多糖與膠原的質(zhì)量比為2 I。實(shí)施例10、
取市售透明質(zhì)酸3. Og,緩慢倒進(jìn)IOOml濃度為2. O %的膠原溶液中，邊攪拌邊倒入。其中膠原溶液為II型膠原和III型膠原混合膠原溶于O. 2mol/L鹽酸，攪拌均勻后，攪拌16小時(shí)，環(huán)境溫度25°C。用2. Omol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH值使最終pH值至7. 8。將所得復(fù)合材料鋪板交聯(lián)成膜。多糖與膠原的質(zhì)量比為3 2。實(shí)施例11、取市售羥乙基纖維鈉4. 0g，緩慢倒進(jìn)IOOml濃度為2. O %的膠原溶液中，邊攪拌邊倒入。其中膠原溶液為II型膠原溶于O. 2mol/L鹽酸，攪拌均勻后，攪拌4小時(shí)，環(huán)境溫度15°C。用2. Omol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至6. 3。將所得復(fù)合材料鋪板交聯(lián)成膜。多糖與膠原的質(zhì)量比為2 I。實(shí)施例12、取市售羥丙基纖維鈉4. 2g，緩慢倒進(jìn)IOOml濃度為I. 8%的膠原溶液中，邊攪拌邊 倒入。其中膠原溶液為III型膠原溶于0. 2mol/L鹽酸，攪拌均勻后，攪拌4小時(shí)，環(huán)境溫度8°C。0.8mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至8。將所得復(fù)合材料鋪板交聯(lián)成膜。多糖與膠原的質(zhì)量比為7 3。實(shí)施例13、取市售殼聚糖鹽酸鹽2. 5g和羥丙基纖維鈉2. 0g，分別緩慢倒進(jìn)IOOml濃度為
I.5%的膠原溶液中，邊攪拌邊倒入。其中膠原溶液為I型膠原溶于I. 0mol/L鹽酸。攪拌均勻后，攪拌8小時(shí)，環(huán)境溫度35°C。用3.8mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至6。將所得復(fù)合材料鋪板交聯(lián)成膜。多糖與膠原的質(zhì)量比為3 I。實(shí)施例14、取市售殼糖胺聚糖10. 5g，緩慢倒進(jìn)IOOml濃度為I. 5 %的膠原溶液中，邊攪拌邊倒入。其中膠原溶液為I型膠原溶于I. Omol/L鹽酸。攪拌均勻，攪拌12小時(shí)環(huán)境溫度30°C。用1.8mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)PH值至6。將所得復(fù)合材料鋪板交聯(lián)成膜。多糖與膠原的質(zhì)量比為7 I。實(shí)施例15、取市售殼蛋白聚糖3. 0g，緩慢倒進(jìn)IOOml濃度為4. 5%的膠原溶液中，邊攪拌邊倒入。膠原溶液為I型膠原溶于I. 0mol/L鹽酸。攪拌均勻后，攪拌24小時(shí)，環(huán)境溫度23°C。用0.8mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至7。將所得復(fù)合材料鋪板交聯(lián)成膜。多糖與膠原的質(zhì)量比為2 3。實(shí)施例16、取市售殼聚糖鹽酸鹽I. 2g和海藻酸鈉I. 5g，分別緩慢倒進(jìn)IOOml濃度為I. 5%的膠原溶液中，邊攪拌邊倒入。其中膠原溶液為I型膠原溶于I. Omol/L鹽酸。攪拌均勻后攪拌20小時(shí)，環(huán)境溫度23°C。用2. 0mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至7. 5。將所得復(fù)合材料鋪板交聯(lián)成膜。多糖與膠原的質(zhì)量比為9 5。實(shí)施例17、取市售海藻酸鈉0. 5g和羥丙基纖維鈉2. Og,分別緩慢倒進(jìn)IOOml濃度為I. 5%的膠原溶液中，邊攪拌邊倒入。其中膠原溶液為I型膠原溶于I. 0mol/L鹽酸。攪拌均勻后，攪拌8小時(shí)，環(huán)境溫度5°C。用2.8mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至6。將所得復(fù)合材料鋪板交聯(lián)成膜。多糖與膠原的質(zhì)量比為5 3。
實(shí)施例18、取市售殼聚糖鹽酸鹽I. 5g和羧甲基纖維素鈉I. 5g，分別緩慢倒進(jìn)IOOml濃度為
I.5%的膠原溶液中，邊攪拌邊倒入。其中膠原溶液為I型膠原溶于O. 5mol/L鹽酸，攪拌均勻后，攪拌18小時(shí)，環(huán)境溫度25°C。用2. Omol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至8。將所得復(fù)合材料鋪板交聯(lián)成膜。多糖與膠原的質(zhì)量比為2 I。實(shí)施例19、取市售殼聚糖鹽酸鹽8. Og,緩慢倒進(jìn)IOOml濃度為10. 0%的膠原溶液中，邊攪拌邊倒入。其中膠原溶液為I型膠原溶于O. 01mol/L鹽酸。攪拌均勻后，攪拌20小時(shí)，環(huán)境 溫度23°C。用2. Omol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至7. 5。將所得復(fù)合材料鋪板交聯(lián)成膜。多糖與膠原的質(zhì)量比為4 5。
權(quán)利要求
1.一種由多糖與膠原的復(fù)合支架材料，是多糖和膠原溶液混合進(jìn)行結(jié)構(gòu)重建而形成的復(fù)合材料，并在包裝前進(jìn)行交聯(lián)成膜。其特征包括下列步驟 (1)、市售I型膠原、II型膠原、III型膠原之一或多種，溶于O.Olmol/L O. 5mol/L的鹽酸，攪拌均勻，制得濃度為O. I % 15. 0% (w/w)的溶液。
(2)、市售殼聚糖鹽酸鹽、羧化殼聚糖、糖胺聚糖、蛋白聚糖、殼聚糖乳酸鹽、殼聚糖季胺鹽、殼聚糖硫酸脂、類(lèi)透明質(zhì)酸殼聚糖、海藻酸鈉、透明質(zhì)酸、羧甲基纖維素鈉、羥乙基纖維鈉或羥丙基纖維素鈉其中的一種或兩種多糖與膠原溶液中的膠原按質(zhì)量比為(I 10) (10 I)的比例攪拌混合，形成復(fù)合組分。
(3)、復(fù)合組分在溫度為(1°C 40°C)的環(huán)境下混合攪拌，O.5h 24h后，堿溶液調(diào)pH值，使最終pH值為出 8)。最后將所得溶液進(jìn)行鋪板交聯(lián)成膜。
全文摘要
本發(fā)明描述了一種可用于臨床角膜重建的支架材料及其制備方法。屬于醫(yī)用生物材料領(lǐng)域。主要解決目前臨床中角膜供體的來(lái)源困難及手術(shù)成功率低的問(wèn)題，通過(guò)為角膜受體提供角膜細(xì)胞生長(zhǎng)基質(zhì)來(lái)實(shí)現(xiàn)角膜重建的目的。通過(guò)此方法制備所得的材料是多糖、膠原溶液在一定環(huán)境溫度下，通過(guò)調(diào)節(jié)pH值到一定范圍內(nèi)，然后交聯(lián)成膜的方法制得，為穩(wěn)定的、均勻的、透光的、有一定的防水及抗壓性的、具有良好生物相容性的材料。有助于角膜移植受體的角膜重建。
文檔編號(hào)A61L27/26GK102908666SQ201210382499
公開(kāi)日2013年2月6日 申請(qǐng)日期2012年10月11日 優(yōu)先權(quán)日2012年10月11日
發(fā)明者張春紅, 王宗龍, 萬(wàn)力 申請(qǐng)人:天津市賽瑞生物技術(shù)有限公司