專利名稱：：24－高－26,27－六氟－膽鈣化甾醇的制作方法其中A為具有立體化學(xué)構(gòu)型E或Z的碳雙鍵，即分別為下式構(gòu)型R為羥基且R1為氫或＝CH2，或R為氫或氟且R1為＝CH2。式I化合物促使某些皮膚細胞系和癌細胞系分化并抑制其增生。因此，式I化合物可用作治療過度增生性皮膚病(如牛皮癬)的藥劑。式I化合物也可用作治療腫瘤疾病(如白血病)的藥劑。這里所用的術(shù)語“低級烷基”指含1-4個碳原子的直鏈或支鏈烷基，例如甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，叔丁基等。術(shù)語“芳基-低級烷基”為對甲苯基，芐基，苯乙基，苯丙基等。術(shù)語“芳基”是指從芳香烴衍生出來的基團，其可以是未取代的或被一個或多個低級烷基取代。芳基的實例為苯基和對甲基苯基。術(shù)語“鹵素”指鹵素原子，即溴，氯，氟或碘。本發(fā)明涉及含有一種式I化合物或兩種或多種式I化合物的混合物的組合物。本發(fā)明也涉及通過以一種式I化合物或兩種或多種式I化合物的混合物給藥來治療上述疾病的方法。本發(fā)明也涉及制備式I化合物及式X，XI，XII和V中間體的方法。在式I化合物的優(yōu)選的實施例中，R為羥基且R1為＝CH2。在式I的另一化合物中，R1為氫。最優(yōu)選的式I化合物為1，25-二羥基-22E，24Z-二烯-24-高-26，27-六氟膽鈣化甾醇；1，25-二羥基-22E，24E-二烯-24-高-26，27-六氟膽鈣化甾醇；1，25-二羥基-22E，24Z-二烯-24-高-19-去甲26，27-六氟膽鈣化甾醇；1，25-二羥基-22E，24E-二烯-24-高-19-去甲26，27-六氟膽鈣化甾醇；1α-氟-25-羥基-22E-24Z-二烯-24-高-26，27-六氟膽鈣化甾醇；和1α-氟-25-羥基-22E-24E-二烯-24-高-26，27-六氟膽鈣化甾醇。參考下面結(jié)構(gòu)式流程圖I-III和實施例，按下述方法通過從相應(yīng)的受保護的化合物中除去式-Si(R4，R4，R6)保護基來制備式I的化合物。結(jié)構(gòu)式流程圖I其中R1和A如上所述，R4和R6獨立地為低級烷基，R5獨立地為低級烷基，芳基或芳基-低級烷基。在上面結(jié)構(gòu)式流程圖I中，式II的化合物通過與相應(yīng)的式III化合物反應(yīng)轉(zhuǎn)變成式IVa、IVb、或IVc的化合物其中Ph為苯基，R1，R4，R5和R6的定義如上所述，R7為氫，氟或其中R4，R5和R6如上所述。該反應(yīng)于-60℃--90℃，優(yōu)選-78℃，在極性非質(zhì)子有機溶劑(如無水乙醚或更優(yōu)選無水四氫呋喃)中，在強堿(如烷基鋰象丁基鋰)的存在下進行。式III化合物是已知的或可按已知方法制備。通過在極性有機熔劑(如醚，或更優(yōu)選四氫呋喃)中與氟鹽(如氟化四丁基銨)反應(yīng)除去式IVa、IVb或IVc化合物的保護基，得到相應(yīng)的式Ia、Ib或Ic化合物。上述的式II的中間體可按下述方法并具體參考下面的結(jié)構(gòu)式流程圖II來制備。結(jié)構(gòu)式流程圖II其中R4、R5和R6如上所述。在上面流程式II中，當(dāng)制備其中A為的式I化合物時，使式V化合物在有機溶劑(如乙酸乙酯、乙烷和乙醇的混合物)中與氫和林德拉催化劑反應(yīng)，還原成相應(yīng)的式VI化合物。在上面結(jié)構(gòu)式流程圖II中，當(dāng)制備其中A為的式I化合物時，在非質(zhì)子有機溶劑(如無水醚或更優(yōu)選無水四氫呋喃)中，優(yōu)選在堿金屬烷氧化物(如甲醇鈉)存在下，在回流溫度(對四氫呋喃約為80℃)下使式V化合物與還原劑(如氫化鋰鋁)反應(yīng)約2.5小時部分氫化，冷卻至約0℃，用常規(guī)方法處理，得到相應(yīng)的式VI化合物。通過在室溫下在非質(zhì)子溶劑(如無水四氫呋喃或更優(yōu)選無水二氯甲烷)中用氧化劑如氯化鉻酸2，2′-二吡啶鎓或重鉻酸吡啶鎓處理將所得的式IV化合物氧化成式VII化合物。使式VII化合物在非質(zhì)子有機溶劑(如無水四氫呋喃或更優(yōu)選無水二氯甲烷)中與(三烷基甲硅烷)咪唑(如(三甲基甲硅烷基)咪唑)反應(yīng)，轉(zhuǎn)變成式II化合物。用常規(guī)方法(如萃取后再用色譜處理)處理式II化合物。參考下面結(jié)構(gòu)式流程圖III按如下所述制備式V的化合物。結(jié)構(gòu)式流程圖III在上面結(jié)構(gòu)式流程圖III中，使已知化合物式VIII的化合物(Wovkulich，P.M.等人，Proceedingsofthe6thWorkshopofVitaminD，1985，755-764頁)，在非質(zhì)子溶劑(如無水四氫呋喃或更優(yōu)選無水二氯甲烷)中，在氬氣氛下，與氧化劑(如氯化鉻酸2，2′-二吡啶鎓或氯化鉻酸吡啶鎓)作用，轉(zhuǎn)變成式IX化合物。使式IX的化合物在非質(zhì)子溶劑(如無水四氫呋喃或無水二氯甲烷)中與維悌希試劑(如溴化(3-三甲基-甲硅烷基-2-丙炔基)-三苯基磷)和堿(如丁基鋰)反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為式X的化合物。反應(yīng)于-78℃下進行。式X化合物通過與硝酸銀在醇溶劑(如乙醇)中反應(yīng)轉(zhuǎn)變?yōu)槭絏I化合物。式XI化合物通過與氟代丙酮(如六氟丙酮)反應(yīng)，轉(zhuǎn)變成式XII化合物。反應(yīng)于-78℃下進行。式XII的化合物通過在有機溶劑(如乙腈和四氫呋喃的混合物)中與二甲硅烷基化試劑(disilylatingreageat)(如氫氟酸)反應(yīng)，轉(zhuǎn)化成式V的化合物。可以口服方式將上述式I化合物向需要這種治療的溫血動物給藥以治療腫瘤疾病如白血病。更具體地說，可以每天0.05-50μg的劑量將上述式I化合物向成年人口服給藥以治療腫瘤疾病如白血病?？梢钥诜绞綄⑸鲜鍪絀化合物向需要這種治療的溫血動物給藥以治療過度增生性皮膚病如牛皮癬，基底細胞癌，角蛋白疾病和角化病。更具體地說，可以每天大約0.5-50μg的劑量口服方式將上述式I化合物向成人給藥以治療過度增生性皮膚病如牛皮癬，基底細胞癌，角蛋白疾病和角化病。這些化合物可以每天大約0.05-50μg，優(yōu)選0.5-50μg的劑量口服給藥用來治療痤瘡?？蓪⑸鲜鍪絀的化合物向需要這種治療的溫血動物局部給藥來治療過度增生的皮膚病如牛皮癬，基底細胞癌，角蛋白疾病和角化病，更具體地說，可以每天每克局部應(yīng)用制劑大約為0.5-大約50μg的劑量將上述式I化合物局部給藥以治療過度增生性皮膚病如牛皮癬，基底細胞癌，角蛋白疾病和角化病。下面的試驗方法可證明式I化合物具有治療腫瘤疾病的藥物活性。HL-60細胞分化通過還原氮藍四唑(NBT)測量它們的氧化突變電位來測定HL-60細胞分化的誘導(dǎo)在添加有10％胎牛血清(FCS)，2mML-谷氨酰胺，1mM丙酮酸鈉，1％非必需氨基酸，50U/ml青霉素和50μg/ml鏈霉素的RPMI1640培養(yǎng)基中培養(yǎng)HL-60細胞。把HL-60細胞(在90μlRPMI補充培養(yǎng)基中的30,000細胞)接種到平底微升孔中。接種后，立即將10μl在RPMI補充培養(yǎng)基中稀釋的下表I所列試驗化合物加到各孔中，使最終濃度在10-11和10-6M之間(自10-3M的乙醇儲備液開始并于-20℃避光貯存)。3天后，用多道吸量管從孔中除去培養(yǎng)基，并用100μlNBT溶液(含200nM肉豆蔻酸佛波醇酯乙酸鹽的1mg/ml磷酸鹽緩沖液)置換。于37℃再培養(yǎng)1小時后，除去NBT溶液，加入100μl10％十二烷基硫酸鈉的0.01NHCl溶液。用自動平板讀數(shù)器于540nm以光度計法定量測定還原的NBT量。計算3個孔的平均值。S.E.M在5和10％之間。在用100-1000nm鈣化三醇進行的相同實驗中將值表示成最大分化的百分數(shù)。用圖譜法確定達到最大值的50％的濃度(nM)，在表I中以ED50給出。表I</tables>從上面結(jié)果可以看出式I化合物促使HL-60細胞分化，并因此阻止這些癌細胞生長。因此，式I化合物可用于治療腫瘤和白血病。通過下面的試驗可證明式I化合物具有用作治療過度增生性皮膚病的藥物的活性。角質(zhì)化細胞增生的抑制使用HaCaT細胞系-未死的人細胞系HaCaT(起初從N.E.Fusening，德國癌癥研究中心，Heidelberg，德國獲得)。在試驗化合物存在下培養(yǎng)6天后測量按指數(shù)增長的培養(yǎng)基中3H-胸苷結(jié)合數(shù)。細胞培養(yǎng)在含有4.5g葡萄糖和哈姆F12營養(yǎng)物，3∶1(體積/體積)的混合物的Dulbecco改性的Eagle培養(yǎng)基中培養(yǎng)HaCaT。該混合物中補充有10％FCS，2mML-谷氨酰胺，50UI/ml青霉素，50μg/ml鏈霉素，10ng/mlEGF，400ng/ml氫化可的松，8.5ng/ml霍亂毒素和5ng/ml胰島素。將細胞保持在含5％CO2和95％空氣的潮濕氣氛中并每隔3-4天換一次氣。3H-胸苷攝入的抑制將HaCaT細胞(在180μl的具有添加物的混合物中有250個細胞)接種到96孔培養(yǎng)板中，并于37℃用5％CO2和95％空氣保溫接種后立即將用20μl含有1％乙醇的具有添加物的混合物稀釋的下表II列出的試驗化合物加到孔中，使終濃度在10-9到10-6M之間(從1mM的乙醇中的儲備液開始，于-20℃避光保存)。6天后，向孔中加入1μCi/孔的濃度的3H-胸苷(5Ci/mmol)。脈沖標記細胞最后6小時的生長期。然后于37℃在劇烈攪動下讓細胞受胰蛋白酶作用10分鐘，并用細胞收集器把細胞收集到96-孔過濾板上。于40℃真空干燥20-30分鐘后，加入20μl閃爍體，計算結(jié)合到過濾板上的放射活性。把該值表示成對照(無試驗化合物的樣品)的百分數(shù)。用圖譜法確定達到對照值的50％的濃度，并將該值表達為表II中的IC50(抑制濃度)。表II從上面結(jié)果可以看出式I化合物抑制角質(zhì)化細胞的增生。因此，式I化合物可用于治療過度增生性皮膚病如牛皮癬。鼠的鈣耐受性試驗體內(nèi)鈣平衡的大輻度改變強烈地影響鼠體重增長。每天給鼠(體重25-30g)皮下注射化合物，連續(xù)4天。僅在5天療程之前和之后記錄體重。在這個療程中引起體重零增長的劑量為“最高耐受劑量”(HTD)。結(jié)果示于表III中表III從上面結(jié)果可以看出，式I化合物顯示出與1，25-二羥基膽鈣化甾醇近似相同的HTD值。下面實施例進一步描述本發(fā)明，但絲毫不限定本發(fā)明。包含本發(fā)明式I化合物的口服劑型可與可藥用載體物質(zhì)一起包含在膠囊，片劑等之內(nèi)?？砂谀z囊之內(nèi)的可藥用載體的實例如下粘合劑如黃蓍膠，阿拉伯膠，玉米淀粉，或明膠；賦形劑如磷酸二鈣；崩解劑如玉米淀粉；馬鈴薯淀粉，藻酸等；潤滑劑如硬脂酸鎂，甜味劑如蔗糖，乳糖或糖精；調(diào)味劑如薄荷，冬青油或櫻桃油。其它各種物質(zhì)可作為涂層或用來改變劑型的物理形式。例如，片劑可涂有紫膠，糖或兩者。糖漿或酏劑可含有活性化合物，作為甜味劑的蔗糖，作為防腐劑的對羥苯甲酸甲酯和對羥苯甲酸丙酯，顏料和調(diào)味劑(如櫻桃或橙子調(diào)味料)。含本發(fā)明的式I化合物的可局部應(yīng)用的劑型包括含有具有油狀的、可吸收的、水溶性的和乳化型基料(如黃凡士林、羊毛脂、聚乙二醇等)的配方的軟膏和乳膏。洗劑為液體制劑，包括從簡單的溶液到含細分散物質(zhì)的各種水制劑或醇水制劑。洗劑可含懸浮劑或分散劑，例如，纖維素衍生物(如乙基纖維素，甲基纖維素等)；把活性成分包裹在由水、醇、甘油等組成的賦形劑中的明膠或樹膠。凝膠是通過使活性成分的溶液或懸浮液在載體賦形劑中凝結(jié)而形成的半固體制劑。把含水或不含水的賦形劑用凝膠劑(如羧基聚亞甲基)將其凝結(jié)，用堿(如氫氧化鈉和胺如聚乙烯可可胺)將其中和到適當(dāng)?shù)哪z稠度。這里所用的術(shù)語“局部應(yīng)用的”指包含摻合在適當(dāng)藥物載體中，且在受感染部位使用的以施加局部作用的活性成分的用途。因此，可局部應(yīng)用的組合物包括與皮膚直接接觸的外部應(yīng)用的那些化合物藥物形式。局部應(yīng)用劑型包括凝膠劑，乳膏，洗劑，軟膏，粉末劑，氣霧劑及通過將式I化合物與已知的局部應(yīng)用的藥物載體物質(zhì)混合得到的可將藥物應(yīng)用于皮膚的其它常用劑型。除了用于皮膚外，本發(fā)明的局部應(yīng)用的組合物也可用于治療粘膜炎癥，其中這樣的膜易于接近局部用藥。例如局部應(yīng)用組合物可用于嘴或結(jié)腸下部的粘膜內(nèi)層。實施例1[1R-[1α(S*)，3aβ，4α，7aα]]-4-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]-氧基]八氫-β，7α-二甲基-1H-茚-1-乙醛在氬氣氛和攪拌下，向5.37g(25mmol)氯鉻酸吡啶鎓的50ml無水二氯甲烷的懸浮液中滴加溶于15ml無水二氯甲烷中的3.26g(10mmol)[1R-[1α(S*)，3aβ，4α，7aα]]-4-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]-氧基]八氫-β，7α-二甲基-1H-茚-1-乙醇。攪拌該反應(yīng)混合物1小時，然后用120ml乙醚稀釋，在100gFlorosil柱上純化，得到3.04g(94％)的標題化合物。1H-NMR(CDCL3)δ0.02(s，6H，2CH3)，0.88(s，9H，3CH3)，1.09(d，3H，J＝7Hz，CH3)，4.02(寬的多重峰，1H，CH)9.58(d，1H，J＝3Hz，CH)。實施例2[1R-[1α(1R*，2E)，3aβ，4α，7aα]]-(1，1-二甲基乙基)二甲基-[[8氫-7a-甲基-1-[1-甲基-5-(三甲基甲硅烷基)-2-戊烯-4-炔基]-1H-茚-4-基]氧基]硅烷在-78℃、攪拌下，向1g(2.2mmol)溴化(3-三甲基甲硅烷基-2-丙炔基)-三苯基-鏻在20ml無水四氫呋喃中的懸浮液中加入1.4ml(2.2mmol)1.6M正丁基鋰的己烷溶液。加完后，加熱混合物至40℃，攪拌0.5小時，混合物變成紅色溶液。然后把溶液冷卻到-78℃，加入溶于6ml無水四氫呋喃中的478mg(1.47mmol)[1R-[1αS*]，3aβ，4α，7aα]]-4-[[(1，1-二甲基乙基)]二甲基甲硅烷基]氧基]8氫-β，7a-二甲基-1H-茚-1-乙醛，然后于室溫下攪拌1小時，加水使反應(yīng)停止。用乙酸乙酯萃取完全。用水和鹽水洗滌合并的萃取液，并在硫酸鈉上干燥，蒸干。用乙烷研制殘余物，用乙烷通過急驟式色譜純化可溶性部分，得到396mg(64％)標題化合物。用己烷通過制備性的HPLC純化分析樣品，并在乙醇中結(jié)晶，熔點81-83℃。25D+80.5℃(c0.2)CHCL3)；UVλ(己烷)肩峰227nm(ε17,000，max236-237nm(ε21,800)，肩峰295nm(ε16,000)；1H-NMR(CDCL3)δ0.01(s，6H，3CH3)，0.19(s，9H，3CH3)，0.89(s，9H，3CH3)，0.93(s，3H，CH3)，1.02(d，3H，J＝6.7Hz，CH3)，1.80(m，1H，CH2的CH)，1.91(dm，1H，J偕＝12.5Hz，CH2的CH)，2.11(m，1H，CH)，3.99(m，1H，CH)，5.42(d，1H，J反位15.9Hz，CH)，6.06(dd，1H，J連位＝8.8Hz，J反位＝15.9CH)。用X-射線分析證實該化合物的結(jié)構(gòu)。分析C25H46OSi2的計算值C，71.70，H11.07實測值C，71.23，H11.04。實施例3[1R-[1α(1R*，2E)，3aβ，4α，7aα]]-(1，1-二甲基乙基)二甲基[[8氫-7α-甲基-1-[1-甲基-2-戊烯-4-炔基]-1H-茚-4-基]-氧基]硅烷在室溫攪拌下，向1.5g(3.58mmol)[1R[1α(1R*，2E)，3aβ，4α，7aα]]-(1，1-二甲基乙基)二甲基-[[8氫-7α-甲基-1-[1-甲基-5-(三甲基甲硅烷基)-2-戊烯-4-炔基]-1H-茚-4-基]氧基]硅烷在9ml無水四氫呋喃和60ml乙醇中的懸浮液中滴加3.65g(21.4mmol)硝酸銀在72ml3∶1乙醇-水中的溶液。生成黃白色沉淀，攪拌所形成的混合物1小時。隨后加入60ml水中的4.19g(64.4mmol)氰化鉀，此時沉淀溶解。0.5小時后，薄層色譜顯示反應(yīng)進行完全。用500ml水和鹽水(1∶1)稀釋混合物，用乙酸乙酯徹底萃取。用水和鹽水洗滌合并的萃取液，在硫酸鈉上干燥，蒸干。用乙烷通過急驟式色譜純化粗產(chǎn)物，再用乙烷通過使用YMC柱(50mm×50cm)的制備HPLC純化，得到1.26g(100％)標題化合物。1H-NMR(CDCL3)δ0.001(s，6H，2CH3)，0.89(s，9H，3CH3)，0.94(s，3H，3CH3)，1.02(d，3H，J＝7Hz，CH3)，2.13(m，1H，CH)，2.75(d，1H，J＝2.5Hz，CH)，3.99(寬單重峰，1H，CH)，5.25(dd，1H，J連位＝2.5Hz，J反位＝16Hz，CH)，6.09(dd，1H，J連位＝8Hz，J反位＝16Hz，CH)。實施例4[1R-[1α(1R*，2E)，3aβ，4α，7aα]]-7-[4-[[(1，1-二甲基乙基)-二甲基-甲硅烷基]氧基]八氫-7a-甲基-1H-茚-1-基]-1，1，1-三氟-2-(三氟甲基)-5-辛烯-3-炔-2-醇向-78℃攪拌下的0.91g(2.63mmol)[1R-(1α(1R*，2E)，3aβ，4α，7aα]]-(1，1-二甲基乙基)-二甲基-[八氫-7a-甲基-1-(1-甲基-2-戊稀-4-炔基]-1H-茚-4-基]氧基]硅烷在15ml無水四氫呋喃中的懸浮液中加入1.65ml1.6M正丁基鋰的己烷溶液。攪拌混合物0.5小時，此時用分散管用2分鐘時間引入氣態(tài)六氟丙酮，再攪拌反應(yīng)混合物1.5小時，此時薄層色譜顯示反應(yīng)已進行完全。用400ml水稀釋反應(yīng)混合物，用己烷徹底萃取。用水和鹽水洗滌合并的萃取液在硫酸鈉上干燥，蒸干。用己烷-乙酸乙酯(19∶1)通過急驟式色譜純化粗產(chǎn)物，得到1.27g(95％)標題化合物。1H-NMR(CDCL3)δ0.00(s，6H，2CH3)，0.88(s，9H，3CH3)，1.03(d，3H，CH3)，2.18(m，1H，CH)，4.00(寬的單重峰，1H，CH)，5.42(d，1H，J反位＝16Hz，CH)，6.26(dd，1H，J連位＝9Hz，J反位＝16Hz，CH)。實施例5[1R-(1α(1R*，2E)，3aβ，4α，7aα]]-八氫-7a-甲基-1-[7，7，7-三氟-6-羥基-1-甲基-6-(三氟甲基)-2-庚烯-4-炔基]-1H-茚-4-醇在室溫和攪拌下，向1.648g(3.21mmol)[1R-[1α(1R*，2E)，3aβ，4α，7aα]]-7-[4-[(1，1-二甲基乙基)-二甲基甲硅烷基]-氧基]八氫-7a-甲基-1H-茚-1-基]-1，1，1-三氟-2-(三氟甲基)-5-辛烯-3-炔-2-醇在30ml乙腈和24ml無水四氫呋喃的溶液中加入30ml49％氫氟酸，攪拌所得的反應(yīng)混合物3小時。然后用400ml水稀釋，用乙酸乙酯徹底萃取。用2N碳酸氫鉀和水，最后用鹽水洗滌，合并的萃取液在硫酸鈉上干燥，蒸干。用己烷-乙酸乙酯(2∶1)通過急驟式色譜純化粗產(chǎn)品，從乙醚-石油醚(2∶25)中結(jié)晶，得到標題化合物1.087g(85％)，熔點108-109℃。25D+47℃(c0.2CHCL3)；UVλ(EtOH)最大峰224nm(ε20，060)，肩峰230-231nm(ε18,600)；1H-NMR(CDCL3)δ0.96(s，3H，CH3)，1.05(d，3H，J＝6.41Hz，CH3)，1.96(寬峰，1H，J偕＝13Hz，CH2的CH)，2.19(m，1H，CH)，4.10(寬單重峰，1H，CH)，5.44(d，1H，J反位＝16Hz，CH)，6.25(dd，1H，J連位＝8.9Hz，J反式＝16Hz，CH)。分析C19H24F6O2的計算值C57.28H6.07；測定值C57.29H6.19。實施例6[1R-[1α(1R*，2E，4E)，3aβ，4α，7aα]]-八氫-7a-甲基-1-[7，7，7-三氟-6-羥基-1-甲基-6-(三氟-甲基)-2，4-庚二烯基]1H-茚-4-醇向裝有滴液漏斗，冷凝器和氬氣導(dǎo)入管的100ml三頸燒瓶中加入懸浮在1.5ml無水四氫呋喃中的143mg(3.75mmol)氫化鋁鋰。在冰浴中冷卻燒瓶，隨著攪拌先小心地加入203mg(3.75mmol)固體甲醇鈉，然后滴加300mg(0.753mmol)[1R-[1α(1R*，2E，4E)，3aβ，4α，7aα]]-八氫-7a-甲基-1-[7，7，7-三氟-6-羥基-1-甲基-6-(三氟-甲基)-2-庚烯-4-炔基]1H-茚-4-醇在6ml無水四氫呋喃中的溶液。加完后除去冰浴，于80℃回流加熱反應(yīng)混合物2.5小時。然后在冰浴中冷卻，用1ml水和1ml2N氫氧化鈉使反應(yīng)停止，加20ml乙醚，攪拌0.5小時，加2.2gMgSO4，攪拌0.5小時，過濾，用乙醚洗滌過濾器，將濾液蒸干。用己烷-乙酸乙酯(4∶1)通過制備性的HPLC純化粗產(chǎn)物，用二氯甲烷-己烷混合物重結(jié)晶后，得到251mg(83.2％)標題化合物結(jié)晶，熔點146-148℃。UVλmax(EtOH)228-229mm(ε32，100)，1H-NMR(CDCL3)δ0.907(s，3H，CH3)，1.05(d，3H，J＝6.5Hz，CH3)，1.69(m，1H，CH)，1.98(寬峰，1H，J偕＝13Hz，CH2的CH)，2.17(m，1H，CH)，4.09(寬的單重峰，1H，CH)，5.59(d，1H，J反位＝15.4Hz，CH)，5.79(dd，1H，J連位＝8.6Hz，J反位＝15.3，Hz，CH)，6.05(dd，1H，J連位＝10.5Hz，J反位＝15.3Hz，CH)，6.68(dd，1H，J連位＝10.6Hz，J反位＝15.3Hz，CH)。分析C19H26F6O2的計算值C56.99，H6.55；測定值C56.64，H6.41實施例7[1R-[1α(1R*，2E，4E)，3aβ，7aα]]-八氫-7a-甲基-1-[7，7，7-三氟-6-羥基-1-甲基-6-(三氟甲基)-2，4-庚二烯基]-4H-茚-4-酮攪拌下向300mg(0.75mmol)[1R-[1α(1R*，2E，4E)-3aβ，4α，7aα]]-八氫-7α-甲基-1-[7，7，7-三氟-6-羥基-1-甲基-6-(三氟甲基)-2，4-庚二烯]-4H-茚-4-醇在15ml無水二氯甲烷的溶液中加入1.465g(3.9mmol)重鉻酸吡啶鎓，于室溫下攪拌3.5小時。加25ml乙醚并攪拌15分鐘后，通過硅藻土填料層過濾混合物，用3×25ml乙酸乙酯洗滌填料層用2N碳酸氫鉀，水和鹽水洗滌合并的濾液，在硫酸鈉上干燥，蒸干。用己烷-乙酸乙酯(3∶1)通過急驟式色譜純化粗產(chǎn)品，得到267mg(89.5％)標題化合物。1H-NMR(CDCL3)δ0.66(s，3H，CH3)，1.08(d，3H，J＝6.5Hz，CH3)，2.46(dd，1H，J＝8和11Hz，CH)，5.58(d，1H，J反位＝15Hz，CH)，5.57(dd，1H，J連位＝8.5Hz，J反位=15Hz，CH)，6.04(dd，1H，J連位＝10.5Hz，J反位＝15Hz，CH)，6.68(dd，1H，J連位＝10.5Hz，J反位＝15Hz，CH).實施例8[1R-[1α(1R*，2E，4E)-3aβ，7aα]]-8氫-7a-甲基-1-[7，7，7-三氟-1-甲基-6-(三氟甲基)-6-[(三甲基甲硅烷基)氧基]-2.4-庚二烯]-4H-茚-4-酮攪拌下向267mg(0.67mmol)[1R[1α(1R*，2E，4E)，3aβ，7aα]]-八氫-7a-甲基-1-[7，7，7-三氟-6-羥基-1-甲基-6-(三氟甲基)-2，4-庚二烯]-4H-茚-4-酮在10ml無水二氯甲烷中的溶液中加入0.885ml(6.03mmol)1-(三甲基-甲硅烷基)咪唑，于室溫下攪拌過夜。然后加入水使反應(yīng)停止，用乙酸乙酯萃取。用水和鹽水洗滌合并的萃取液，在硫酸鈉上干燥，蒸干。用己烷-乙酸乙酯(5∶1)通過急驟式色譜純化粗產(chǎn)物，得到307mg(97.3％)標題化合物。1H-NMR(CDCL3)δ0.02(s，9H，3CH3)，0.66(s，3H，3CH3)，1.10(d，3H，J＝6.5Hz，CH3)，2.45(dd，1H，J＝8和11Hz，CH2的CH)，5.55(dd，1H，J反位＝15Hz，CH)，5.73(dd，1H，J連位＝8.5Hz，J反位＝15Hz，CH)，6.01(dd，1H，J連位＝10Hz，J反位＝15Hz，CH)，6.51(dd，1H，J連位＝10Hz，J反位＝15Hz，CH)。實施例91，25-二羥基-22E，24E-二烯-26，27-六氟-24-高-膽鈣化甾醇在-78℃攪拌下向0.608g(1.04mmol)[3S-(1Z，3α，5β]]-[2-[3，5-雙[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]-2-亞甲基-亞環(huán)己基]乙基]二苯基氧化磷在10ml無水四氫呋喃的溶液中加入0.652ml(1.04mmol)1.6M正丁基鋰的己烷溶液。溶液變紅，在加入在8ml無水四氫呋喃中的307mg(0.652mmol)[1R[1α(1R*，2E，4E)，3aβ，7aα]]八氫-7a-甲基-1-[7，7，7-三氟-1-甲基-6-(三氟甲基)-6-[(三甲基甲硅烷基)氧基]-2，4-庚二烯基]-4H-茚-4-酮的全部過程中顏色不變。于-78℃攪拌反應(yīng)混合物0.5小時，然后用水使反應(yīng)停止。用4×50ml乙酸乙酯萃取。用水和鹽水洗滌合并的萃取液，在硫酸鈉上干燥，蒸干。用己烷-乙酸乙酯(10∶1)通過急驟式色譜純化粗產(chǎn)物，得到337mg三甲硅烷基化的中間體。在室溫攪拌及氬氣氣氛下向337mg三甲硅烷基化中間體在8ml無水四氫呋喃中的溶液中分批加入3ml(3mmol)1M四丁基氟化銨的四氫呋喃溶液。反應(yīng)混合物攪拌過夜，然后用水稀釋，用乙酸乙酯萃取。用水和鹽水洗滌合并的萃取液，在硫酸鈉上干燥并蒸干。用己烷-乙酸乙酯(1∶3)的急驟式色譜和己烷-乙酸乙酯(1∶4)的制備性的HPLC純化粗產(chǎn)物，得到235mg(67.4％)白色泡沫狀的標題化合物，[α]25D+64.5℃(c0.2，EtOH)；UVλmax(EtOH)229nm(ε40,500)262-263nm(ε17,600)；1H-NMR(CDCL3)δ0.57(s，3H，CH3)，1.08(d，3H，J＝6.5Hz，CH3)，2.18(m，1H，CH)，2.32，2.60(ABX的AB，2H，J連位＝6.5and3Hz，J偕＝13Hz，CH2)，2.83(寬的雙峰，1H，J偕＝12.5Hz，CH2的CH)，4.23(寬的多重峰，1H，CH)，4.44(寬的多重峰，1H，CH)，5.00，5.23(2s，2H，CH2)，5.60(d，1H，J反位＝15.5Hz，CH)，5.82(dd，1H，J連位＝9Hz，J反位＝15Hz，CH)，6.01，6.36(AB，2H，J連位＝11Hz，CHCH)，6.05(dd，1H，J連位＝10.5Hz，J反位＝15Hz，CH)，6.69(dd，1H，J連位＝10.5Hz，J反位＝15.5Hz，CH).分析C28H36F6O3的計算值C6291，H6.79；測定值C61.83，H7.02實施例10[1R-[1α(1R*，2E，4Z)，3aβ，7aα]]-八氫-7a-甲基-1-[7，7，7-三氟-6-羥基-1-甲基-6-(三氟甲基)-2，4-庚二烯基]-1H-茚-4-醇在1個大氣壓和室溫下把392mg(0.98mmol)[1R-[1α(1R*，2E)，3aβ，4α，7aα]]-八氫-7α-甲基-1-[7，7，7-三氟-6-羥基-1-甲基-6-(三氟甲基)-2-庚烯-4-炔基]-1H-茚-4-醇]，5ml乙酸乙酯，12.5ml己烷，0.35ml無水乙醇，0.017ml和63mg林德拉催化劑(CaCO3上承載5％的Pd)的混合物氫化2小時。通過硅藻土填料層過濾反應(yīng)混合物，用己烷洗滌填料層。用稀酸，鹽水，2N碳酸氫鉀和水洗滌合并的濾液，在硫酸鈉上干燥，蒸干。用己烷重結(jié)晶粗產(chǎn)物。用己烷-乙酸乙酯(3∶1)通過制備性的HPLC分離純化。第一步得到的產(chǎn)物和母液，最終得到220mg(56％)標題化合物，熔點140-141℃；UVλmax(EtOH)231-232nm(ε30,600)；1H-NMR(CDCl3)δ0.97(s，3H，CH3)，1.05(d，3H，J＝6.7Hz，CH3)，1.98(寬峰，1H，J偕＝13Hz，CH2的CH)，2.21，(m，1H，CH)，4.08(寬的單峰，1H，CH)，5.25(d，1H，J順位＝11.5Hz，CH)，5.75(dd，1H，J連位＝8.8Hz，J反位＝15Hz，CH)，6.43(t，1H，J連位和J順位＝11.5Hz，CH)，6.71(dd，1H，J連位＝11.5Hz，J反位＝15Hz，CH)。分析C19H26F6O2的計算值C56.99，H6.55；測定值C57.03，H6.69實施例11[1R[1α(1R*，2E，4E)，3aβ，7aα]]-八氫-7a-甲基-1-[7，7，7-三氟-6-羥基-1-甲基-6-(三氟甲基)-2，4-庚二烯基]-4H-茚-4-酮在室溫和攪拌下向202mg(0.52mmol)[1R-[1α(1R*，2E，4Z)，3aβ，4α，7aα]]-八氫-7a-甲基-1-[7，7，7-三氟-6-羥基-1-甲基-2，4-庚二烯基]-1H-茚-4-醇在10ml無水二氯甲烷中的溶液中加入886mg(2.36mmol)重鉻酸吡啶鎓，攪拌0.5小時。然后加入25ml乙醚，攪拌15分鐘，通過硅藻土填料層過濾。用3×25ml乙酸乙酯洗滌填料層。用2N碳酸氫鉀，水和鹽水洗滌合并的濾液，在硫酸鈉上干燥，蒸干。用二氯甲烷-乙酸乙酯(20∶1)通過急驟式色譜純化粗產(chǎn)物，得到196mg(96％)標題化合物。1H-NMR(CDCL3)δ0.67(s，3H，CH3)，1.10(d，1H，J＝6.5Hz，CH3)，2.45(dd，1H，J＝8和11Hz，CH)，5.26(d，1H，J順位＝11.5Hz，CH)，5.76(dd，1H，J連位＝8.5Hz，J反位＝15Hz，CH)，6.43(t，1H，J連位和J順位＝11.5Hz，CH)，6.73(dd，1H，J連位＝11.5Hz，J反位＝15Hz，CH)。實施例12[1R[1α(1R*，2E，4Z)，3aβ，7aα]]-八氫-7a-甲基-1-[7，7，7-三氟-1-甲基-6-(三氟甲基)-6-[(三甲基甲硅烷基)氧基]-2，4-庚二烯基]-4H-茚-4-酮在氬氣氣氛和攪拌下向196mg(0.49mmol)[1R-[1α(1R*，2E，4Z)，3aβ，7aα]]-八氫-7a-甲基-1-[7，7，7-三氟-6-羥基-1-甲基-6-(三氟甲基)-2，4-庚二烯基]-4H-茚-4-酮在10ml無水二氯甲烷中的溶液中加入0.67ml(4.42mmol)1-(三甲基甲硅烷基)-咪唑，然后于室溫下將所得的反應(yīng)混合物攪拌過夜。然后用乙酸乙酯稀釋，用水和鹽水洗滌，在硫酸鈉上干燥，蒸干。用己烷-乙酸乙酯(5∶1)通過急驟式色譜純化粗產(chǎn)物，得到229mg(99％)標題化合物。實施例131，25-二羥基-22E，24Z-二烯-26，27-六氟-24-高-膽鈣化甾醇在-78℃和攪拌下，向467mg(0.80mmol)[3S(1Z，3α，5β)]-[2-[3，5-雙[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]-氧基]-2-亞甲基-亞環(huán)己基]乙基]二苯基氧化磷在10ml無水四氫呋喃中的溶液中加入0.5ml(0.80mmol)1.6M正丁基鋰的己烷溶液。溶液變紅，在加入溶于8ml無水四氫呋喃中的229mg(0.486mmol)[1R[1α(1R*，2E，4Z)，3aβ，7aα]]-八氫-7a-甲基-1-[7，7，7-三氟-1-甲基-6-(三氟甲基)-6-[(三甲基甲硅烷基)氧基]-24-庚二烯基]-4H-茚-4-酮的整個過程中顏色不變。于-78℃攪拌反應(yīng)混合物1.5小時，用水使反應(yīng)停止。用乙酸乙酯徹底萃取。用水和鹽水洗滌合并的萃取液，在硫酸鈉上干燥，蒸干。用己烷-乙酸乙酯(10∶1)通過急驟式色譜純化粗殘留物，得到310mg三甲硅烷基化的中間體。在室溫攪拌及氬氣氛下向310mg三甲硅烷基化中間體溶于8ml無水四氫呋喃中的溶液中分批加入4.5ml1M氟化四丁基銨的四氫呋喃溶液。攪拌反應(yīng)混合物48小時，然后用水稀釋，用乙酸乙酯徹底萃取。用水和鹽水洗滌合并的萃取液，在硫酸鈉上干燥，蒸干。先通過使用己烷-乙酸乙酯(1∶3)的急驟式色譜和使用己烷-乙酸-乙酯(1∶4)的制備性的HPLC，再通過使用己烷-乙酸乙酯(1∶4)的制備性的HPLC純化粗產(chǎn)物，得到206mg(79.2％)白色泡沫狀的標題化合物。25D+17.5℃(c0.2，EtOH)；UVλ(EtOH)max232-233nm(ε38，700)，肩峰265nm(ε17,200)；1H-NMR(CDCl3)δ0.57(s，3H，CH3)，1.07(d，3H，J＝6.5Hz，CH3)，2.22(m，1H，CH)，2.32，2.60(ABX的AB，2H，J連位＝6.5和3.5Hz，J偕＝13Hz，CH2)，2.84(dd，1H，J連位＝4Hz，J偕＝12.5Hz，CH2的CH)，4.23(寬的多重峰，1H，CH)，4.43(寬的多重峰，1H，CH)，5.00，5.33(2s，2H，CH2)5.25(d，1H，J連位＝12Hz，CH)，5.76(dd，1H，J連位＝8.5Hz，J反位＝15Hz，CH)，6.02，6.38(AB，2H，J連位＝11.3Hz，CHCH)，6.43(t，1H，J連位和J反位＝12Hz，CH)，6.71(dd，1H，J連位＝12Hz，J反位＝15Hz，CH)。分析C28H36F6O3的計算值C62.91，H6.79；測定值C61.73，H6.74實施例14口服劑型軟膠囊1.把BHT和BHA懸浮在Myglyol-812中，加熱至大約50℃，攪拌直到溶解。2.把化合物A溶于步驟1的溶液中。3.把步驟2得到的溶液裝入軟明膠帽中。所有步驟都在氮氣氛下避光進行。實施例15口服劑型軟膠囊1.把α-生育酚懸浮在Mygloyol-812中，加熱至大約50℃，攪拌直到溶解。2.把化合物A溶于步驟1的溶液中。3.把步驟2得到的溶液裝入軟明膠帽中。以上各步都在氮氣氛下避光進行。實施例16局部應(yīng)用的劑型乳膏1.攪拌化合物A直到溶解。2.加熱十六烷醇、十八烷醇、司班60、礦物油、Arlacel165、吐溫60和BHA的混合物至大約70-75℃，形成油狀溶液。3.把步驟1的溶液加到步驟2的溶液中，同時混合均勻。4.把水、山梨醇溶液、乙二胺四乙酸二鈉、山梨酸和山梨酸鉀的混合物加熱到70-75℃。5.把步驟3的溶液加到步驟4的溶液中，同時用高速混合器乳化。6.把步驟5乳液到室溫冷卻，直到乳液凝固。實施例17局部應(yīng)用劑型凝膠1.把BHA溶于乙醇和水的混合物中。2.把化合物A溶于步驟1的溶液中。3.把羥丙基纖維素分散在步驟2的溶液中。實施例18局部應(yīng)用劑型溶液1.把化合物A溶于乙醇中。2.把BHA加到步驟1的溶液中并溶解。3.把丙二醇和辛酸/癸酸甘油三酯加到步驟2的溶液中并混合直至溶液變清。權(quán)利要求其中A為具有立體化學(xué)構(gòu)型E或Z的碳雙鍵，即分別為式R為羥基且R1為氫或＝CH2，或R為氫或氟且R1為＝CH2。2.權(quán)利要求1的化合物，其中A為3.權(quán)利要求2的化合物，其中R為羥基。4.權(quán)利要求2的化合物，其中R為氟。5.權(quán)利要求2的化合物，其中R1為＝CH2。6.權(quán)利要求3的化合物，其中R1為氫。7.權(quán)利要求3的化合物為1，25-二羥基-22E，24E-二烯-26，27-六氟-24-高-膽鈣化甾醇。8.權(quán)利要求6的化合物為1，25-二羥基-22E-24E-二烯-19-去甲-26，27-六氟-24-高-膽鈣化甾醇。9.權(quán)利要求4的化合物為1α-氟-25-羥基-22E，24E-二烯-26，27-六氟-24-高-膽鈣化甾醇。10.權(quán)利要求1的化合物，其中A為11.權(quán)利要求10的化合物，其中R為羥基。12.權(quán)利要求10的化合物，其中R為氟。13.權(quán)利要求10的化合物，其中R1為＝CH2。14.權(quán)利要求11的化合物，其中R1為氫。15.權(quán)利要求11的化合物為1，25-二羥基-22E，24Z-二烯-26，27-六氟-24-高-膽鈣化甾醇。16.權(quán)利要求14的化合物為1，25-二羥基-22E-24Z-二烯-19-去甲-26，27-六氟-24-高-膽鈣化甾醇。17.權(quán)利要求12的化合物為1α-氟-25-羥基-22E，24Z-二烯-26，27-六氟-24-高-膽鈣化甾醇。18.一種式V或式X或式XI或式XII的化合物。19.一種藥物組合物，特別用于誘導(dǎo)某些皮膚細胞系和癌細胞系的分化和抑制其增生，特別用于治療過度增生性皮膚病，如牛皮癬，和腫瘤如白血病，其包括(a)有效量的權(quán)利要求1中的式I的化合物，和(b)惰性載體。20.權(quán)利要求1-17的化合物，用作誘導(dǎo)某些皮膚細胞系和癌細胞系分化并抑制其增生的藥物，特別是用作治療過度增生性皮膚病如牛皮癬，和用作治療腫瘤如白血病的藥物。21.權(quán)利要求1-17的化合物在生產(chǎn)誘導(dǎo)某些皮膚細胞系和癌細胞系分化并抑制其增生，特別是在生產(chǎn)治療過度增生性皮膚病如牛皮癬和治療腫瘤和白血病的藥物中的用途。22.這里所具體闡述的新化合物，中間體，制劑、工藝和方法。全文摘要本發(fā)明涉及式(Ⅰ)化合物,其中A為具有立體化學(xué)構(gòu)型E或Z的碳雙鍵,即分別為式(a)和式(b),R為羥基且R文檔編號A61K31/59GK1201452SQ96198019公開日1998年12月9日申請日期1996年10月23日優(yōu)先權(quán)日1995年10月31日發(fā)明者J·A·亞庫比利,M·R·尤斯克克威斯申請人:弗·哈夫曼-拉羅切有限公司